膀胱肿瘤抗原、尿核基质蛋白22、细胞角蛋白-19对膀胱癌的诊断价值分析

目的分析膀胱肿瘤抗原(BTA)、尿核基质蛋白22(NMP22)、细胞角蛋白-19(CK-19)对膀胱癌的诊断价值。方法选取53例膀胱癌患者作为膀胱癌组,49例泌尿系良性疾病患者作为对照组。比较两组患者CK-19、NMP22及BTA水平,分析三者水平与膀胱癌患者临床特征的关系,分析CK-19、NMP22及BTA单独及联合检测对膀胱癌的诊断价值。结果膀胱癌组患者尿液NMP22、BTA及血清CK-19水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。肿瘤分期为Ⅲ~Ⅳ期的膀胱癌患者尿液NMP22、BTA及血清CK-19水平均明显高于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P﹤0.01)。CK-19、NMP22及BTA联合检测诊断膀胱癌的灵敏度和特异度分别为0.805和0.869,曲线下面积(AUC)为0.854(95%CI:0.774~0.934),均高于CK-19、NMP22及BTA单独检测。结论膀胱癌患者CK-19、NMP22及BTA水平显著升高,三者水平升高与肿瘤分期相关,密切监测三者水平变化可为临床诊断膀胱癌提供依据。

尿核基质蛋白22和非典型细胞参数在膀胱癌诊断中的临床价值

目的探讨尿核基质蛋白22(NMP22)和尿有形成分分析仪非典型细胞(Atyp.C)参数联合检测诊断膀胱癌的价值。方法选取2021年10月—2022年9月上海市静安区市北医院行NMP22检测和尿有形成分分析的患者3288例,其中膀胱癌患者97例(膀胱癌组,均为男性)、其他泌尿系统疾病患者3191例[总对照组,其中男1212例、女1979例];将1212例男性泌尿系统疾病患者作为男性对照组。采用受试者工作特征(ROC)曲线评价各项指标诊断膀胱癌的效能。结果膀胱癌组NMP22阳性率和Atyp.C荧光强度显著高于男性对照组和总对照组(P<0.001)。ROC曲线分析结果显示,以男性对照组为参考,NMP22、Atyp.C荧光强度单项检测和联合检测诊断膀胱癌的曲线下面积(AUC)分别为0.794、0.757、0.867。以总对照组为参考,NMP22、Atyp.C荧光强度单项检测和联合检测诊断膀胱癌的AUC分别为0.787、0.752、0.861。结论在膀胱癌的诊断中,NMP22具有较高的敏感性,Atyp.C参数具有较高的特异性,联合检测可显著提高诊断效能。

四羧基酞菁钴Ⅲ/Fe_3O_4/金胶共固定修饰免疫传感器检测尿样中核基质蛋白22

同时固定四羧基酞菁钻（Ⅲ）（CoPc）和HRP标记核基质蛋白22抗体（HRP-Ab-NMP22）于自组装在金电极表面的Fe3O4／Au胶上，构建了一种快速测定膀胱肿瘤患者尿液中NMP22抗原（NMP22）含量的安培免疫传感器。CoPc可被用作电檄表面HRP的电子传递媒介体。当该传感器在含NMP22尿样的溶液中温育后，NMP22与HRP-Ab-NMP22免疫结合导致HRP的活性中心与CoPc之间的电子传递部分阻碍，使HRP对H202电催化还原电流Io，降低。△Io与NMP22浓度在1．2～200μg／L呈线性关系；检出限为0．5μg／L。该传感器对NMP22响应灵敏，较ELISA法提高了检测速度，有望用于膀胱肿瘤的体外诊断。

核基质蛋白22定量分析及尿液细胞学检查评估膀胱癌复发的价值研究

目的评估核基质蛋白22(NMP22)定量分析与尿液细胞学检查对膀胱癌复发的诊断价值。方法选取2008—2012年在海南医学院附属医院住院的浅表性膀胱癌患者144例。在膀胱镜检查之前患者均在3 d内连续每天提供3份用于尿液细胞学检查的尿液样本以及1份用于NMP22定量分析的尿液样本。以病理组织活检作为金标准,对NMP22定量分析与尿液细胞学检查对膀胱癌复发诊断价值的灵敏度和特异度进行评估。结果 144例患者中,52例(36.1%)诊断为复发性膀胱移行细胞癌。52例膀胱癌复发患者中,41例NMP22定量分析结果为阳性,23例尿液细胞学检查为阳性。NMP22定量分析诊断膀胱癌复发的灵敏度为78.8%(41/52),特异度为69.6%(64/92),阳性预测值为59.4%(41/69),阴性预测值为85.3%(64/75);尿液细胞学检查诊断膀胱癌复发的灵敏度为44.2%(23/52),特异度为83.7%(77/92),阳性预测值为60.5%(23/38),阴性预测值为72.6%(77/106)。两种方法诊断膀胱癌复发的灵敏度和特异度比较,差异有统计学意义(χ2=6.58、5.40,P=0.01、0.02);而两种方法诊断膀胱癌复发的阳性预测值和阴性预测值比较,差异无统计学意义(χ2=3.13、0.50,P=0.08、0.48)。NMP22定量分析与尿液细胞学检查在不同分期、分级、风险分层中的灵敏度比较,差异有统计学意义(P<0.05)。NMP22定量分析联合尿液细胞学检查、NMP22定量分析联合膀胱镜检查、尿液细胞学检查联合膀胱镜检查诊断膀胱癌复发的灵敏度分别为88.5%(46/52)、98.1%(51/52)及94.2%(49/52)。结论 NMP22定量分析法可用于浅表性膀胱癌复发的检测,尤其是在低度以及中度风险的人群,但本方法也因其相对较低的特异度在使用方面受到限制。

荧光原位杂交和核基质蛋白22联合检测在膀胱癌诊断中的应用

目的:探讨荧光原位杂交和核基质蛋白22对膀胱尿路上皮癌诊断的价值,寻找一种敏感特异的无创性方法诊断膀胱癌。方法:对68例膀胱癌疑似患者的尿液标本同时进行荧光原位杂交、核基质蛋白22、尿脱落细胞学检测,同时,将3种方法结果与组织病理学诊断结果比较,评估它们对膀胱癌的临床诊断价值。结果:FISH、NMP22、尿脱落细胞学的敏感性分别为81.4%、86.0%、39.5%,特异性分别为84.0%、72.0%、96.0%,FISH联合NMP22检测的敏感性为79.1%、特异性为92.0%。结论:FISH-NMP22联合检测有较高的敏感性和特异性,其敏感性远高于细胞学检测,而特异性与细胞学检测相差甚小,联合检测较单一指标的检测对膀胱癌具有更高的诊断价值。

人食管癌相关核基质蛋白的初步研究

目的从核基质蛋白中探寻人食管癌肿瘤标志物。方法用高盐抽提法制备核基质 ,免疫动物获取抗血清 ,Western Blot检测特异性。结果食管癌细胞中出现一条阳性条带 ,其代表的蛋白约为 12 6 0 0 0 u,除食管癌原发的贲门癌外 ,这一阳性条带均未在正常食管和所检测的其它几种肿瘤细胞中出现。结论食管癌细胞核基质中存在 1个或 1组表观分子量为12 6 0 0 0 u的相关多肽 ,可能与食管癌的发生发展有关 。

尿核基质蛋白在膀胱癌中的临床意义

目的：探讨尿核基质蛋白22（NMP22）测定在膀胱癌诊断中的临床应用价值。方法：应用免疫酶标记法（ELISA）检测28例初发性膀胱癌，10例复发性膀胱癌和20例对照组尿中NMP22水平。初发性膀胱癌组中有10例患者在术后5～7d再次检测其尿NMP22。结果：初发性膀胱癌组尿NMP22的中位数为27．1149IU／mL，复发性膀胱癌组为13．001IU／mL均明显高于对照组1．6574IU／mL（P〈0．001）；初发性膀胱癌患者尿NMP22随肿瘤病理分级的递增而升高。lO例初发性膀胱癌患者术后复测尿NMP22，结果较术前明显下降。结论：尿NMP22作为膀胱癌的肿瘤标记物具有较高的特异性和敏感性，并可在一定程度上反映肿瘤的恶性程度和预后。

胃癌组织中核基质蛋白的变化

目的:研究胃癌组织核基质蛋白的改变。方法:应用SDS-PAGE技术及Genetools定量分析软件,对22例胃癌组织及正常组织的核基质蛋白进行了研究。结果:胃癌组织与正常组织比较,Mr为30 000、28 000的核基质蛋白表达量明显减少(P<0.05);不同分化类型及不同临床分期胃癌组织间比较,此两种核基质蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论:胃癌组织中核基质蛋白的改变可能在肿瘤的早期已经发生,是胃癌发生的早期分子事件。

荧光原位杂交联合核基质蛋白22检测在诊断膀胱癌中应用

目的探讨荧光原位杂交(FISH)联合核基质蛋白22(NMP22)检测在诊断膀胱癌中应用价值。方法选取2014年1月—2016年1月因血尿就诊的100例患者作为研究对象,均行FISH、NMP22、尿脱落细胞学检查,以临床病理检查作为"金标准",分析各种检查方式诊断膀胱癌的结果。结果 FISH、NMP22和FISH联合NMP22诊断敏感性高于尿脱落细胞学检查(P<0.05);FISH联合NMP22和尿脱落细胞学检查的特异性高于NMP22检查(P<0.05);FISH、NMP22、FISH联合NMP22诊断膀胱癌恶性程度G1、G2、G3级的敏感性均高于尿脱落细胞学检查(P<0.05)。结论 FISH联合NMP22诊断能提高膀胱癌的敏感性和特异性,利于临床早期诊断膀胱癌。

白杨素和它的四乙基二磷酸酯对人宫颈癌Hela细胞增殖和核基质蛋白影响的研究

探讨白杨素和它的四乙基二磷酸酯对人宫颈癌细胞的增殖、分化和核基质蛋白的影响。用终浓度为10μmol/L的白杨素(chrysin,CR)和四乙基白杨素二磷酸酯(tetraethyl bis-phosphoric ester of chrysin,CP)分别处理人人宫颈癌Hela细胞,记录细胞生长数目,进行增殖分化型细胞染色,测定软琼脂集落形成率,应用SDS-PAGE技术分析细胞核基质蛋白成分的变化。CR/CP能明显抑制Hela细胞的增殖,处理组与对照组之间差异有显著性(P<0.05);处理组与对照组比较增殖型细胞减少,分化型细胞数增加,双层软琼脂中细胞集落形成受到明显抑制,对照组集落普遍比药物组集落大,且单个集落中细胞数目多(P<0.05);通过Quantity One软件分析,实验组(CR组与CP组)与对照组(C组)比较,相对分子质量70 0006、8 000、13 000为增加的条带,14 000、17 000、18 000为增强的条带,58 000、43 000是减弱的条带。两实验组相比,以CP组变化显著。CR和CP对Hela细胞具有增殖抑制和诱导分化作用。同时还可以诱导Hela细胞核基质蛋白成分改变,这可能对肿瘤细胞基因表达调控、分化及凋亡起重要作用。

尿核基质蛋白22和细胞角蛋白20mRNA联合监测在膀胱肿瘤复发中的意义

目的通过检测尿核基质蛋白22(NMP22)和细胞角蛋白20(CK20)mRNA的表达,探讨联合检测NMP22和CK20mRNA在膀胱肿瘤复发中的临床价值。方法分别采用酶联免疫吸附实验(ELISA)和巢式RT-PCR法检测NMP22和CK20mRNA在46例膀胱肿瘤复发患者(复发组)、66例未复发患者(未复发组)及40例健康志愿者(健康对照组)尿中的表达。结果健康对照组尿中NMP22和CK20mRNA表达均为阴性,复发组尿中NMP22和CK20mRNA的阳性表达率[78.3%(36/46)、80.4%(37/46))]与未复发组[6.1%(4/62)、6.1%(4/62)]及健康对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);未复发组与健康对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。随肿瘤病理学分级、临床分期的增高,尿NMP22阳性表达率明显上升(P<0.05)。随肿瘤数目的增多,CK20mRNA的阳性表达率明显升高(P<0.05)。检测膀胱肿瘤复发NMP22的敏感度和特异度分别为78.3%、93.9%,CK20mRNA的敏感度和特异度分别为80.4%、93.9%,联合检测二者的敏感度和特异度分别为95.7%、92.4%,联合检测与单一检测相比敏感度差异有统计学意义(P<0.05),特异度差异无统计学意义(P>0.05)。结论 CK20mRNA阳性提示复发可能为多发,尿中NMP22和CK20mRNA联合检测明显提高了临床监测膀胱肿瘤复发的敏感度和特异度。

伪狂犬病病毒Ea株诱导牛肾细胞凋亡及核基质蛋白的变化

目的 研究伪狂犬病病毒(PrV)是否具有诱导组织培养细胞发生细胞凋亡的功能及探讨凋亡细胞核 基质蛋白表达的变化。 方法 利用锥虫蓝(台盼蓝)染色绘制PrV在不同细胞上的增殖曲线;荧光染色观察凋亡 细胞核的形态特征;琼脂糖凝胶电泳分析细胞染色体DNA的片段化;高分辨率双向电泳分析细胞凋亡前后核基质 蛋白的表达差异。 结果 膜通透性的DNA特异性结合染料Hoechst33342染色显示,PrV感染后36h,牛肾 (MDBK)细胞核染色质开始固缩、凝聚,细胞核碎裂;DNA提取及琼脂糖凝胶电泳分析表明,细胞染色体DNA发生 片段化,形成“DNA梯状”条带(DNAladder);尽管PrV可以诱导MDBK细胞发生细胞凋亡,但不能诱导IBRS 2,BHK 21及PK 15细胞发生凋亡。MDBK细胞发生凋亡前后核基质蛋白的表达发生改变,存在表达上调、下调、诱导表达 及表达遏制等情况。 结论 PrV诱导细胞发生细胞凋亡是其致细胞死亡的形式之一,间接反映了PrV与宿主细 胞间复杂的相互作用。细胞凋亡前后核基质蛋白表达存在的差异说明PrV致MDBK细胞发生凋亡是自身基因产 物或诱导或抑制宿主细胞基因表达的结果。

前列腺癌与良性前列腺增生细胞株差异核基质蛋白的鉴定

目的:鉴定人前列腺癌雄激素依赖性细胞株LNCaP、前列腺癌雄激素非依赖性细胞株PC-3与良性前列腺增生细胞株BPH-1之间差异表达的核基质蛋白(nuclear matrix proteins,NMPs)。方法:常规制备各细胞株NMPs,应用双向凝胶电泳对其进行分离;对差异表达的蛋白质点行MALDI-TOF-MS/MS质谱分析,数据库搜索并鉴定。结果:成功获得了分辨率高、重复性好的不同细胞株NMPs双向凝胶电泳图谱;初步鉴定出包含酶、调节蛋白、RNA结合蛋白及各种因子在内的12个差异表达的蛋白质,在癌细胞株中3个NMPs表达上调,9个下调。结论:人前列腺癌细胞与良性前列腺增生细胞之间NMPs表达存在明显差异;初步筛选出12个差异NMPs,其表达水平及功能与疾病的联系需进一步研究。

尿核基质蛋白22诊断膀胱癌的临床评价

目的 :分析比较尿核基质蛋白 2 2 (NMP2 2 )检测与尿脱落细胞学检查诊断膀胱移行细胞癌的临床价值。方法 :对 12 6例临床怀疑膀胱癌的病人 ,在膀胱镜检查前留取新鲜自排尿 ,分别进行NMP2 2检测和脱落细胞学检查 ,比较 2种方法的敏感性、特异性和阳性预测值。结果 :12 6例中病理证实膀胱移行细胞癌 35例 ,其他疾病 91例。NMP2 2诊断膀胱癌敏感性 82 .9% ,与细胞学 (2 5 .7% )比较 ,差别有极显著性意义 (P <0 .0 1)。即使对浅表性膀胱癌 ,NMP2 2的敏感性也达到 77.8% ,明显优于细胞学的 11.3% (P <0 .0 1)。 2种方法诊断特异性分别为 79.1%和 10 0 .0 %。阳性预测值分别为 6 0 .4 %和 10 0 .0 %。结论 :NMP2 2检测是一种简单、敏感的早期诊断膀胱癌的方法。

检测尿核基质蛋白22筛查膀胱移行细胞癌的临床研究

目的探讨检测尿核基质蛋白22（NMP22）在膀胱癌筛查中的应用价值。方法对96例怀疑膀胱癌者进行尿NMP22与尿细胞学检查，比较两者诊断膀胱癌的敏感度和特异度。结果96例患者中病理证实膀胱移行细胞癌55例。非膀胱癌41例。尿NMP22的敏感度为80．0％、特异度为87．8％；尿细胞学检查的敏感度为41．8％、特异度为97．6％。NMP22在膀胱癌筛查中的敏感度优于尿细胞学检查（P〈0．05）。结论尿NMP22检测在膀胱癌筛查中优于尿细胞学检查，可以作为膀胱癌的临床筛查手段。

姜黄素诱导人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡过程中核基质蛋白表达的变化

应用选择性抽提、整装透射电镜观察和双向聚丙烯酰胺凝胶电泳与质谱鉴定技术研究细胞凋亡诱导物姜黄素处理前后人成骨肉瘤MG-63细胞核基质-中间纤维系统的构型变化.及其核基质蛋白表达的差异。经姜黄素处理后.MG-63细胞的核基质和中间纤维比对照组明显稀疏,且分布更加不均匀,并分别与核纤层连系,形成趋于断裂但相对还较为完整的网状结构:双向凝胶电泳分析显示在姜黄素诱导MG-63细胞凋亡前后存在27个差异表达的核基质蛋白,经质谱鉴定了其中的21个蛋白.在凋亡的MG-63细胞中表达上调的蛋白鉴定为:DNA聚合酶zeta等7种蛋白:表达下调的蛋白质为:Prohibitin等14种蛋白。其中首次在核基质中发现的蛋白质有17个。因此,在MG-63细胞凋亡过程中不仅其核基质-中间纤维系统构型产生了典型的的凋亡特征性变化.而且伴有核基质蛋白表达的差异。由此证实了与肿瘤细胞凋亡诱导相关特异核基质蛋白的存在及其对肿瘤细胞凋亡诱导的调控作用.从而对揭示核基质构型及其蛋白组成与细胞凋亡的关系和阐明细胞凋亡过程中的基因表达调控机理.均具有重要意义。

尿液核基质蛋白22测定诊断尿路移行细胞癌

背景与目的:目前尿路移行细胞肿瘤缺乏有效的无创监测方法。近年来发现的核基质蛋白22(nuclearmatrixprotein22,NMP22)能有效地诊断膀胱移行细胞癌。本研究探讨NMP22作为一个新的尿液中的肿瘤标志物在尿路移行细胞癌筛选诊断中的意义及其影响因素。方法:采用酶联免疫吸附试验NMP22试剂盒,对包括29例尿路移行细胞癌在内的87例泌尿系疾病患者尿液进行的NMP22测定。有尿路感染的患者排除在外。结果:以>10u/ml为阳性判断标准,NMP22对尿路移行细胞癌的敏感性和特异性分别为86.2%和94.3%(以泌尿系良性疾病作对照),远优于尿细胞学检查(86.2%vs42.3%,P<0.001)。引起假阳性的主要因素有尿路感染、泌尿系其他恶性肿瘤、肠道膀胱和肾结石等。结论:尿NMP22是一个较好的肿瘤标志物,可以替代尿液细胞学检查成为尿路移行细胞癌诊断的良好指标。

尿样中核基质蛋白22的免疫电化学生物传感器研制

将(4,4',4'',4''')四羧基酞菁钴(CoTcPc)和HRP标记核基质蛋白22抗体(HRP-Ab-NMP22)一起固定在Au电极表面,构建了一种快速测定膀胱肿瘤患者尿液中NMP22抗原含量的安培免疫传感器(HRP-Ab-NMP22/Fe3O4/CoPc CME).实验表明:该传感器对NMP22抗原具有良好的电化学响应,HRP对H2O2电催化氧化电流I0降低,ΔI 0与NMP22浓度在1.0～150ng·mL-1成线性关系,检测限则为0.5ng·mL-1.该传感器基于一次性竞争性免疫反应,较Elisa法提高了检测速度,有望用于膀胱肿瘤的迅速诊断。

视黄酸诱导人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞分化过程中核基质蛋白组成的变化

在鉴定视黄酸(retinoic acid,RA)诱导人神经母细胞瘤SK-N-SH细胞分化的基础上,应用免疫细胞化学、选择性抽提和蛋白质组学分析技术,对SK-N-SH细胞诱导分化过程中核基质蛋白组成变化进行了系统研究.实验结果显示,经1μmol/L RA处理后SK-N-SH细胞呈极性状,伸出较长的轴突样突起,胞体逐渐变小变圆.免疫细胞化学结果显示,处理后神经细胞特异表达的蛋白synaptophysin、NSE、MAP2的表达量都较对照组有明显增强.双向凝胶电泳分析显示,在RA诱导SK-N-SH细胞分化前后存在52个差异表达的核基质蛋白,经质谱分析,鉴定了其中的41个蛋白.蛋白印迹杂交进一步确证了诱导分化差异表达核基质蛋白中nucleophosmin和prohibitin等的表达变化.研究结果表明,1μmol/LRA对SK-N-SH细胞具有显著的诱导分化作用,在SK-N-SH细胞分化过程中,其核基质蛋白组成发生了明显变化.这些变化对于揭示人神经母细胞瘤细胞癌变与逆转机制和肿瘤细胞增殖与分化调控机理均有十分重要的意义,从而为研究神经系统正常发育过程及神经系统疾病的发病机理提供科学依据.