低pH毛细管区带电泳法分离寡核苷酸和硫代反义寡核苷酸

在低pH条件下采用毛细管区带电泳法对寡核苷酸（PO-ODNs）及具有药用价值的硫代反义寡核苷酸（PS-ODNs）药物“癌泰得”系列样品（18～20mers）进行分离，并系统考察优化了缓冲溶液的pH、缓冲溶液的种类及浓度、添加剂的种类及浓度、电压、温度等因素对样品单碱基分离的影响。其中缓冲溶液的pH对分离起决定性的作用，而添加剂尿素的加入显著提高了PS-ODNs样品的分离度。结果表明，采用末涂层弹性石英毛细管（50μm，总长49．0cm，有效长度40．7cm），以50mmol／L磷酸二氢钠-磷酸（pH2．24）-7 mol／L尿素为缓冲溶液，压力进样（2kPa×10s），负极进样，正极检测，在分离电压-20kV、柱温25℃、检测波长260nm条件下，可实现寡核岢酸及硫代反义寡核苷酸混合样品的单碱基分离。PO—ODNs的18～19mers及19～20mers样品的平均分离度分别为4．68，3．20；PS—ODNs的18～19mers及19～20mers样品的平均分离度分别为1．23及0．81．该法操作简单，重现性好，可为反义寡核苷酸药物的分析提供借鉴．

四种单核苷酸的毛细管区带电泳分离分析

报道了４种单核苷酸（ｃＡＭＰ、ｃＧＭＰ、ＡＭＰ、ＧＭＰ）的毛细管区带电泳分离及含量测定方法．方法的线性范围：ｃＡＭＰ为２－７５０ｍｇ·Ｌ－１，ｃＧＭＰ为２－６５０ｍｇ·Ｌ－１，ＡＭＰ为２－２５０ｍｇ·Ｌ－１，ＧＭＰ为２－３００ｍｇ·Ｌ－１；当浓度为１００ｍｇ·Ｌ－１，其δ（相对标准偏差）为２３０％（ｃＡＭＰ）、２．５０％（ｃＧＭＰ）、０．６８％（ＡＭＰ）和２．２７％（ＧＭＰ）．

九州虫草5′-核苷酸的毛细管区带电泳分析

用超声波对九州虫草4个样品进行预处理,添加较高浓度的标准溶液,采用毛细管电泳法检测电泳图谱中各峰峰高、峰面积的变化,测定了各样品中的5′-核苷酸组分及含量。结果表明,在九州虫草的各部分中均可检测到高含量的鸟苷酸,其中以菌丝体的含量最高(0.90 mg/g),其他核苷酸只在菌丝体中检测到,分别为5-′UMP 0.46 mg/g,5-′GMP 0.90 mg/g,5-I′MP 0.98 mg/g,5-′XMP 1.19 mg/g。该方法快速简便,重现性好,能有效地测定样品中核苷酸类成分。

同时测定核苷酸口服液中二磷酸核苷的毛细管区带电泳法

建立了一种毛细管区带电泳法 ,用于同时测定5种核苷酸———鸟苷二磷酸 (GDP)、尿苷二磷酸(UDP)、腺苷二磷酸 (ADP)、胞苷二磷酸 (CDP)、次黄嘌呤核苷酸 (IDP) ;研究了缓冲液的pH值及磷酸盐的浓度对分离5种核苷酸的影响 ,5种核苷酸在75mmol/L三羟甲基氨基甲烷 (Tris) -50mmol/L磷酸二氢钠(NaH2PO4)、pH为8.00的缓冲液中可以基线分离 ;另外还研究了加入阳离子表面活性剂十六烷基三甲基溴化胺(CTAB)以及CTAB的浓度和进样时间对分离5种核苷酸的影响 ;该法成功地应用于测定核苷酸口服液中ADP、CDP、GDP。

呈味核苷酸的高效毛细管区带电泳分离

报道了包括5’-肌苷酸(IMP)、5’-鸟苷酸(GMP)和腺苷酸(AMP)3种呈味核苷酸在内的5种5’-核苷酸的毛细管区带电泳分离,讨论了pH、缓冲溶液浓度及分离电压对分离的影响。在高pH(9.5)的20mmol碳酸钠-碳酸氢钠缓冲溶液中,5种主要呈味核苷酸及其近似物在10min内实现了基线分离。

毛细管区带电泳法测定板蓝根注射液中四种核苷的含量

采用毛细管区带电泳法测定了板蓝根注射液中胞苷、腺苷、鸟苷和尿苷的含量。电泳条件:采用未涂层石英毛细管(32 5cm×50μmi d ,有效长度23 5cm),以60mmol/L硼砂溶液 10%(体积分数)异丙醇 20%(体积分数)乙腈为运行缓冲液,在25℃下以20kV恒压电泳分离,压力进样(1kPa×10s),检测波长254nm。对电泳条件各因素进行了讨论,如缓冲液的种类、浓度和pH值,有机改性剂的种类和浓度,分离电压和毛细管温度等。样品经0 45μm微孔滤膜过滤后直接进样;采用外标法峰面积定量。上述4种核苷回归曲线的相关系数均在0 9991以上,线性范围12 5～250mg/L,检出限分别为6 2(胞苷)、4 6(腺苷)、6 7(鸟苷)、9 0(尿苷)mg/L。4种核苷的三水平加样回收率为95 1%～102 3%,相对标准偏差(RSD)为0 3%～4 9%。方法简便快速,重现性和准确度令人满意,可作为控制板蓝根注射液中核苷类成分含量的有效方法。

冬虫夏草中核苷类成分的毛细管区带电泳定量分析研究

目的:建立冬虫夏草中核苷类成分(腺苷、鸟苷、尿苷和次黄嘌呤核苷)的毛细管电泳定量分析方法,研究青海产天然冬虫夏草和人工发酵虫草菌粉的核苷类成分差异。方法:采用0.025mol·L-1硼砂缓冲液,pH9.5,工作电压为20kV,毛细管温度25℃,波长检测260nm,对4种核苷定量分析。结果:用毛细管区带电泳法定量分析冬虫夏草及人工发酵虫草菌粉中的腺苷、尿苷、鸟苷和次黄嘌呤核苷,平均加样回收率分别为98.9%,95.1%,97.8%和98.8%,RSD分别为0.4%,1.7%,1.3%和5.0%。在天然冬虫夏草中未检测到腺苷,而在人工发酵虫草菌粉中未检测到次黄嘌呤。结论:本研究方法可满意地用于腺苷、尿苷、鸟苷和次黄嘌呤核苷的定量分析。青海产地道药材冬虫夏草核苷类成分组成与人工发酵虫草菌粉有明显差异。

毛细管区带电泳法测定几个不同种的淫羊藿中绿原酸的含量

目的建立淫羊藿中绿原酸舍量的毛细管区带电泳（CZE）测定方法，比较不同种的淫羊藿中绿原酸含量。方法采用熔融石英毛细管柱（50μm×95cm，有效长度86．8cm）作为分离通道；以20mmol·L^-1硼砂（pH=9．12）为运行缓冲液；运行电压30kV；毛细管柱温20℃；检测波长：327nm；进样压力：5kPa，5s、外标法测定舍量。结果淫羊藿中绿原酸成分峰得到完全分离，测定精密度得到明显改善；绿原酸的线性范围为3．28—42．64mg·L^-1，r=0．9995；方法的加样回收率为100．36％，RSD为2．15％。结论本方法简便、准确，重复性好。

毛细管区带电泳法测定四物汤及其配伍组方中川芎嗪和阿魏酸的含量

建立了毛细管区带电泳测定中药复方四物汤及其配伍组方中有效成分川芎嗪和阿魏酸含量的分析方法,并对配伍规律进行了初步的探索。采用50mmol/L硼酸钠溶液(pH9 00)为缓冲溶液,在电压20kV、检测波长212nm和内标为对羟基苯甲酸(p HBA)的条件下,四物汤及其配伍组方中川芎嗪和阿魏酸在24min内获得良好的分离。定量分析表明,川芎嗪和阿魏酸的相对峰面积Y(即待测组分与内标的峰面积之比Ai/As)和各自的质量浓度X(mg/L)之间呈良好的线性关系,相关系数分别为0 9997和0 9967。上述两种组分的平均回收率依次为98 2%和100 1%。此外,还讨论了缓冲溶液的浓度、pH值、电压对有效成分迁移的影响。方法简单、灵敏、快速。

毛细管区带电泳法测定复方甘草片中的甘草酸、甘草次酸、吗啡和苯甲酸钠

在紫外检测波长为 2 2 8nm、电压为 14kV、背景电解质为 5 0mmol/L硼砂溶液、内标为氢氯噻嗪的条件下 ,用毛细管区带电泳法对复方甘草片中的甘草酸、甘草次酸、吗啡和苯甲酸钠进行了定量分析。结果甘草酸、甘草次酸、吗啡和苯甲酸钠的相对峰面积 (组分与内标的峰面积之比 )与各自的质量浓度之间呈良好的线性关系 ,上述 4种组分的平均回收率分别为 98 2 % ,97 3% ,97 1%和 97 5 %。方法简便、快速、准确。

毛细管区带电泳法测定人工种植粗毛淫羊藿中绿原酸的含量

目的:建立粗毛淫羊藿中绿原酸含量的 CZE 测定方法,比较不同地区人工种植粗毛淫羊藿中绿原酸含量。方法:采用熔融石英毛细管柱(50μm×95cm,有效长度86.8cm)作为分离通道;以20mmol·L^(-1)硼砂(pH=9.12)为运行缓冲液;运行电压30kV;毛细管柱温20℃;检测波长:327nm;精密量取样品溶液,外标法测定含量。结果:粗毛淫羊藿中绿原酸成分得到完全分离,测定精密度得到明显改善;绿原酸的线性范围为3.28～42.64μg·mL^(-1),r=0.9995;方法的加样回收率为98.6%,RSD 为2.0%。结论:本方法简便、准确,重复性好。

毛细管区带电泳法测定冬虫夏草及鹿茸制品中核苷和碱基成分

应用毛细管区带电泳法测定分别以冬虫夏草菌丝体粉和鹿茸血为主要原料制品中的多种核苷和碱基成分。对实验条件进行了优化,结果表明,以20mmol/L硼砂-15mmol/Lβ-环糊精为缓冲溶液(pH=9.4),分离电压22kV,检测波长254nm,电动进样为10kV、5s时,在10min内同时分离测定了虫草素、腺嘌呤、鸟嘌呤、尿嘧啶、腺苷、次黄嘌呤、尿苷、鸟苷和肌苷。各组分在0.2～200μg/mL范围内呈线性关系,检出限的范围是0.07～1.67μg/mL。5个批次的冬虫夏草菌丝粉保健品中腺嘌呤、尿嘧啶、腺苷、鸟苷、尿苷5组分的定量结果分别在0.15～0.19mg/g、0.72～0.92mg/g、1.44～1.59mg/g、1.51～2.32mg/g和1.77～2.56mg/g范围内,加标回收率的范围是82.83%～109.21%;2个批次的鹿茸血保健品中次黄嘌呤、尿苷的定量结果在36.55～49.97μg/mL和86.08～108.97μg/mL范围内,加标回收率的范围分别是89.68%～96.79%和99.05%～102.81%。

高效毛细管电泳法测定酱油中5′-单磷酸核苷酸

建立高效毛细管电泳同时分离测定酱油中两种核苷酸鸟嘌呤-5′-单磷酸(GMP)和次黄嘌呤-5′-单磷酸(IMP)的方法。电泳条件:以50μm×60.2cm(有效长度50cm)未涂敷石英毛细管为分离柱,30mmol/L硼砂+30mmol/L碳酸钠+60mmol/L羟丙基-β-环糊精为分离缓冲溶液,50mmol/L醋酸溶液为样品介质,检测波长为254nm。GMP及IMP的校正峰面积与质量浓度在5～100mg/L范围内具有良好线性关系,线性相关系数分别为0.9998和0.9997,检出限均为2mg/L,定量限均为5mg/L。用该法测定了9种酱油,并与文献报道的高效液相色谱法的结果进行比较,结果满意。

毛细管区带电泳法测定四物汤及其配伍组方中丹皮酚、苯甲酸和没食子酸的含量

目的:采用毛细管区带电泳法对四物汤及其配伍组方中酚酸类成分——丹皮酚、苯甲酸和没食子酸同时进行含量测定。方法:采用熔融石英毛细管柱(75 μm×49.2 cm,有效柱长39.0 cm)作为分离通道;用30 mmol·L^(-1)硼砂缓冲溶液(体积分数5%甲醇,pH 9.4)为运行缓冲液;运行电压20 kV、检测波长212 nm、毛细管柱温25℃。结果:丹皮酚、苯甲酸和没食子酸分别在3.680—230.0μg·mL^(-1)、1.126-112.6μg·mL^(-1)和3.000—187.5μg·mL^(-1)浓度范围内线性关系良好(r>0.997);回收率在98.6%-102.3%之间;重复性实验中丹皮酚、苯甲酸和没食子酸峰面积的相对标准偏差(RSD)分别为3.99%,4.05%,5.21%(n=6)。结论:测定方法简单、灵敏、快速,回收率和重现性好。

毛细管区带电泳法测定山茱萸及六味地黄丸中没食子酸含量

目的用毛细管区带电泳法分离测定中药材山茱萸及中成药六味地黄丸中没食子酸的含量。方法定量采用内标法 ,选取肉桂酸为内标。所用毛细管规格为 60cm(有效长度 4 5cm)× 75 μm,检测波长 2 71nm ,电压 2 0kV ,背景电解质为 2 0mmol/L硼砂。结果线性范围为 1 5 6～ 3 1 2mg/L ,相关系数r =0 9993 (n =7) ,RSD分别为 2 9%和 2 1 % (n =5 ) ,加样回收率为 97 4 %～ 98 6%和 99 3 %～ 1 0 2 4 % ,没食子酸含量分别为 0 2 2 5 %和 0 0 5 5 %。

毛细管区带电泳法测定中草药中的有机酸

阿魏酸、绿原酸、咖啡酸是三种结构相似的酚酸类化合物,本研究建立了毛细管区带电泳法测定中草药中的阿魏酸、绿原酸、咖啡酸的分析方法,以pH=8.7的150 mmol/L硼酸为缓冲溶液,在0.5 psi进样8 s,分离电压23 kV,检测波长320 nm,温度25℃的条件下进行测定。阿魏酸、绿原酸、咖啡酸的浓度在0.01-0.2 mg/mL范围内与峰面积呈良好的线性关系,线性相关系数分别为0.999,0.997和0.999,其检出限分别为0.2μg/mL、0.4μg/mL和0.2μg/mL（信噪比为3∶1）。该方法用于金银花、蒲公英、蜂胶、感冒止咳颗粒等药物中阿魏酸、绿原酸、咖啡酸含量的测定,其样品平均回收率在96.0%~100.4%之间,取得了满意的结果。

毛细管区带电泳法测定茶叶中咖啡因、茶氨酸、表儿茶素和表没食子儿茶素没食子酸酯

目的:建立毛细管区带电泳法测定茶叶中咖啡因、茶氨酸、(-)表儿茶素(EC)和(-)表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)含量的分析方法。方法:以含有20mmol/L硼砂和磷酸盐(pH9.5)为电泳介质,在电压25kV、柱温25℃条件下分离和210nm波长处检测。结果:在8min内可将4种待测组分全部分离且各组分的质量浓度与峰面积呈良好的线性关系,相关系数r为0.9944～0.9995,检测限为0.001～0.01μg/mL,各组分的加标回收率为89.98%～102.7%,相对标准偏差小于9.11%。结论:本实验建立的方法直接用于茶叶中咖啡因、茶氨酸、EC和EGCG的测定,结果满意。

毛细管凝胶电泳分离和检测低聚核苷酸和脱氧核糖核酸的合成产物

本文将毛细管凝胶电泳方法用于低聚核苷酸及DNA合成产物的分离检测，并探讨了低聚核苷酸的淌度与其碱基数的关系以及迁移时间和相对迁移时间的重现性。

毛细管电泳分离啤酒废酵母中4种5'-核苷酸

研究了毛细管区带电泳法同时测定啤酒酵母RNA的4种5'-核苷酸降解产物的适宜条件。应用57 cm熔融石英毛细管柱、25 kV分离电压、5 s进样,在260 nm检测波长下,以0.008 mol/L Na2HPO4溶液(pH9.79)作运行缓冲溶液,5 min内可实现对AMP、CMP、GMP、UMP的基线分离及定量测定。4种5'-核苷酸的检出范围分别为2 mg/L～180 mg/L、2 mg/L～180 mg/L2、mg/L～200 mg/L、4 mg/L～200mg/L,回收率超过97%。方法重现性高,定量实验的相对标准偏差(RSD)为0.57%～1.09%,保留时间的相对标准偏差为0.18%～0.29%。