维生素B_2的定量方法-高效液相色谱法同时测定核黄素和核黄素-5'-磷酸钠的分析研究

建立高效液相色谱法同时测定核黄素与核黄素磷钠的方法。以5 mmol/L庚烷磺酸钠溶液(A相,用甲酸调至p H=3.0)和甲醇(B相)为流动相,以梯度洗脱,在优化实验条件下,2种物质在5~1000μg/L(R^2>0.999)线性良好,方法检出限(S/N=3)在15~24μg/L之间。该方法精密度良好,结果准确,可同时检测检测核黄素和核黄素磷酸盐的含量,定量维生素B_2,提供另一种定量婴幼儿食品维生素B_2的方法。

利用核黄素粗品制备核黄素5'-磷酸钠

探索利用核黄素粗品制备核黄素5'-磷酸钠的可行性。在吡啶和乙腈的混合溶剂中,使核黄素粗品与其4倍摩尔量的三氯氧磷35℃左右下反应2h,然后水解反应混合物,再用NaOH溶液中和,能够以68.5%以上的收率得到核黄素磷酸钠,产品质量符合美国FCC(7)要求。通过单因素试验,初步优化了核黄素5'-磷酸钠粗品磷酸化反应的条件,即:n(POCl3)/n(VB2)=4.6,n(POCl3)/n(H2O)=1.65,反应时间2h,反应温度35±1℃。在优化的磷酸化反应条件下,利用核黄素粗品制备核黄素5'-磷酸钠的收率平均可达73.5%以上,能够有效降低核黄素5'-磷酸钠的生产成本。研究结果表明,利用核黄素粗品制备核黄素5'-磷酸钠无论在经济上还是在技术上均是可行的。

诺平糖浆口服液中核黄素-5-磷酸钠的稳定性研究

建立了复方制剂诺平糖浆口服液中核黄素 5 磷酸钠的反相离子对高效液相色谱分析方法,并对复方制剂中核黄素 5 磷酸钠的稳定性进行了研究。核黄素 5 磷酸钠在8.0～320μg/mL范围内呈良好的线性,RSD为1.2%(n=6),检出限为5ng,平均加样回收率为96.9±1.78%(n=9)。方法准确、灵敏、操作简单、重现性好,降解产物对测定无干扰,可对复方制剂中核黄素 5 磷酸钠的降解产物进行有效监控。

离子对反相高效液相色谱法考察糖浆口服液中核黄素-5-磷酸钠稳定性

建立了离子对反相高效液相色谱分析方法考察复方制剂诺平糖浆口服液的稳定性。以核黄素-5-磷酸钠为指标组分,采用 Hypersil C_(18)色谱柱,流动相为:0.01mol/L K_2HPO_4(含50mmol/L PIC-B_7):乙腈(90:10),检测波长为254um,流速:1.0mL/min。结果表明,核黄素-5-磷酸钠在8.0～320μg/mL范围内呈良好的线性,降解产物不干扰测定;方法准确、灵敏、操作简单、重现性好,可对复方制剂中核黄素-5-磷酸钠的降解产物进行有效监控。

核黄素5’-(二氢磷酸酯)单钠盐合成工艺研究

目的:制备核黄素5’-(二氢磷酸酯)单钠盐二水合物。方法:以VB2、三氯氧磷为起始原料,用γ-丁内酯代替吡啶,利用正交试验优化反应条件,制得核黄素5’-(二氢磷酸酯)单钠盐二水合物。结果:总收率72.9%。结论:该合成工艺路线环境污染小,操作简便,易于工业化生产。

干扰素α-2b喷雾剂联合核黄素磷酸钠注射液治疗儿童手足口病的效果观察

目的 分析干扰素α-2b喷雾剂联合核黄素磷酸钠注射液治疗儿童手足口病(HFMD)的效果。方法 选取我院2019年1月至2022年1月收治的HFMD患儿68例,根据入院顺序随机分为对照组和观察组各34例。对照组予以干扰素a-2b喷雾剂治疗,观察组在对照组基础上予以核黄素磷酸钠注射液肌注治疗,比较两组治疗一周后临床疗效,比较两组症状体征消失时间、免疫球蛋白G(IgG)、免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)水平及血清炎性因子C-反应蛋白(CRP)、淀粉样蛋白(SAA)水平。结果 观察组总有效率为91.2%,显著高于对照组的67.6%,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组皮疹消退和炎性红晕变淡时间、退热时间、口腔疱疹愈合时间及住院时长显著短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组血浆IgG、IgA、IgM水平较对照组上升更为显著,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,观察组血清CRP及SAA水平较对照组下降更为显著,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 干扰素α-2b喷雾剂联合核黄素磷酸钠注射液治疗儿童HFMD能增加患儿机体免疫功能,改善患儿临床疗效及症状体征、有效改善患儿机体炎性反应,值得在临床推广。

核黄素磷酸钠联合布拉氏酵母菌对小儿轮状病毒肠炎症状改善及IL-2的影响

目的探究核黄素磷酸钠联合布拉氏酵母菌对小儿轮状病毒肠炎(RVE)症状改善及白细胞介素-2(IL-2)的影响。方法选取2016年1月—2018年6月本院收治的84例RVE患儿作为研究对象,随机分为对照组和观察组两组,每组各42例。对照组在常规治疗基础上口服布拉氏酵母菌,观察组在对照组基础上联合核黄素磷酸钠治疗,对比两组临床疗效、症状和体征改善时间及治疗前后炎性因子(IL-2、IL-10)及T淋巴细胞亚群(CD4^+、CD8^+)水平,并观察两组的用药安全性。结果观察组治疗总有效率高于对照组、主要症状及体征改善时间短于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组治疗前IL-2、IL-10、CD4^+、CD8^+水平对比,差异无统计学意义(P>0.05);与对照组相比,观察组治疗后IL-2、CD4^+水平更高,IL-10、CD8^+水平更低,差异有统计学意义(P<0.05)。两组治疗期间均未见明显不良反应。结论小儿轮状病毒肠儿给予布拉氏酵母菌联合核黄素磷酸钠治疗效果显著,安全性好,可有效改善患儿症状,其可能与调节机体IL-2水平升及免疫功能有关。

改良5'-核苷酸酶-碱性磷酸酶双染色法观察成牙本质细胞层毛细淋巴管

目的:对5'-核苷酸酶-碱性磷酸酶(5'-nucleotidase-alkaline phosphatase,5'-Nase-ALPase)双染色法进行改良,并用其染色观察牙髓成牙本质细胞层是否存在毛细淋巴管。方法:选用牙根发育完成的健康恒前磨牙共44个。首先取15个牙,分为3组,分别用单纯冰冻法、先冰冻后固定法、先固定后冰冻法处理牙髓,选取适用于本研究的标本制备方法。然后取8个牙的牙髓切片对5'-Nase-ALPase双染色法从ALPase反应底物量和反应时间上进行改良。最后取21个牙,其中12例牙髓的切片用改良双染色法染色,9例分3组作对照染色,在光镜下观察成牙本质细胞层中的毛细淋巴管。结果:用改良5'-Nase-ALPase双染色法发现在被染为淡蓝色的成牙本质细胞层中有呈褐色或浅黄色的毛细淋巴管。结论:在牙根发育完成的健康恒前磨牙成牙本质细胞层中有毛细淋巴管。

丁酸钠与5-氮杂-2'-脱氧胞苷协同诱导U266细胞p16基因重新表达

目的探讨脱乙酰化酶抑制剂丁酸钠(SB)与去甲基化制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)联合处理经骨髓瘤细胞系U266诱导高甲基化失活的p16基因重新表达的可能性及其对细胞生长的影响。方法用不同浓度药物处理U266细胞后测定细胞生长曲线;流式细胞术分析细胞周期;RT-PCR和Westernblotting检测p16基因mRNA及其蛋白的表达水平。结果单用5-Aza-CdR或SB均抑制细胞生长,联合用药对细胞的抑制作用明显增强;单用5-Aza-CdR或SB对细胞G1期无影响,SB与5-Aza-CdR联合作用发生显著的G1期阻滞;单用0.1μmol/L5-Aza-CdR即可诱导U266细胞p16基因重新表达,随着5-Aza-CdR浓度的增高,p16表达增加,单用SB只能诱导p16基因的弱表达,联合用药明显增强p16基因表达。结论脱乙酰化酶抑制剂SB与去甲基化制剂5-Aza-CdR协同可显著诱导人骨髓瘤细胞U266因高甲基化失活的p16基因重新表达,细胞生长受抑,并使细胞阻滞在G期。

TBA、ALP、5'-NT、AFU、ADA、CHE、γ-GT、PA水平变化在肝脏疾病患者中的检测价值

分析8项生化指标在肝脏疾病患者中的检测价值。方法 抽取2023年9月-2024年6月我院肝脏疾病患者、健康体检正常者各30例,分析分析检验结果。结果 TBA、ALP、5'-NT、AFU、ADA、γ-GT水平对比,观察组高于对照组,PA、CHE对比,低于对照组(P<0.05),观察5'-NT、TBA、ADA、AFU、ALP、γ-GT指标发现,急性肝炎患者以上指标明显增高,而慢性肝炎主要表现为γ-GT、TBA增高,肝硬化要表现为ADA、TBA、γ-GT、AFU、ALP水平增高,肝硬化患者主要表现为TBA、5'-NT、ADA、γ-GT、AFU增高,PA、CHE水平出现下降。结论 在肝脏疾病患者病情诊断中,可以对TBA、ALP、5'-NT、AFU、ADA、CHE、γ-GT、PA水平进行检测,从而提升患者病情诊断准确性。

新型苦味屏蔽剂5’-腺苷单磷酸钠的合成

以次黄嘌呤为原料,经氯代、缩合、氨解、磷酸化、中和五步反应制备新型苦味屏蔽剂5’-腺苷单磷酸钠,总收率达37.0%。

高效液相色谱分析法测定磷酸-5'-吡哆醛质量分数

建立了磷酸-5＇-吡哆醛的高效液相色谱定量检测方法。实验采用C18反相色谱柱（5μm,250 mm×4.6mm）;流动相为乙腈-水,二者体积比为（10-30）∶（70-90）;流速为1.0 m L/min;柱温为30℃;检测波长为388 nm;进样量为10.0μL（将测定主成分质量分数的进样样品用水溶解并稀释成0.2 g/L）。实验结果表明,磷酸-5＇-吡哆醛的线性方程为y=7 575.6x＋4 801.8,r=0.999 95,检出限为0.2 g/L。

毛细管电泳法测定增味剂中的5′-肌苷酸二钠和5′-鸟苷酸二钠的含量

建立了同时测定5′-肌苷酸二钠和5′-鸟苷酸二钠的毛细管电泳法,研究了缓冲溶液种类、浓度、pH、电压等对测定的影响,对测定条件进行了优化。在波长250nm,分离电压15kV,5mmol·L-1磷酸二氢钠-5mmol·L-1硼酸-5%乙醇缓冲溶液(pH=10·3)中,增味剂中的5′-肌苷酸二钠和5′-鸟苷酸二钠在5min内得到了较好的分离,浓度与峰面积之间具有良好的线性关系。

5,3′,5′-三磺酸基-2,3,4,4′-四羟基脱氧安息香三钠盐的合成、晶体结构及性质研究

合成了水溶性很好的5,3′,5′-三磺酸基-2,3,4,4′-四羟基脱氧安息香三钠盐(TTDB),采用IR、UV、1HNMR和元素分析对其结构进行了表征,并利用X射线单晶衍射仪测定了该化合物的晶体结构.使用荧光光谱法检测了化合物对羟基自由基的清除作用.用循环伏安法探讨了化合物的电化学性质.实验结果表明,5,3′,5′-三磺酸基-2,3,4,4′-四羟基脱氧安息香三钠盐[C14H17Na3O18S3]属于单斜晶系,空间群C2/c,a=1·4223(4)nm,b=2·4327(8)nm,c=1·3596(4)nm,α=90°,β=113·044(5)°,γ=90°,Z=8,V=4·329(2)nm3,Dc=1·925Mg/m3,F(000)=2568,Mr=627·43,R1=0·0950,wR2=0·2648.TTDB的抗羟基自由基的氧化作用优于其相应的脱氧安息香THDB,前者清除羟基自由基的半数有效浓度(EC50)为47·3μmol/L,而后者的EC50则为53·1μmol/L.电化学研究结果表明,THDB和TTDB的氧化还原过程有所差异,前者负扫时在-1·016和-1·228V处出现两个还原峰,正扫时在0·219V处出现一个氧化峰,但后者负扫时仅在-0·999V出现一个还原峰,正扫时在0·193V出现一个氧化峰.

2＇-脱氧胞苷-5＇-磷酸羟基加合物的分子结构与电子结构

使用密度泛函理论(DFT)的B3LYP/DZP++研究了羟基自由基与2′-脱氧胞苷-5′-磷酸(dCMP)的胞嘧啶环加成产物的分子结构与电子结构.结果表明,dCMP胞嘧啶环中各C原子上的单羟基加合物的相对稳定性顺序为C5>C6垌C4≥C2.加合物的稳定性、自旋密度、静电势以及dCMP的电子密度、静电势、电荷分布分析表明,dCMP遭遇多个羟基自由基攻击时,第一个羟基自由基加在dCMP的C5上,而C6则成为第二个羟基自由基的进攻目标.反应中一旦形成了C2-位单羟基加合物,则极有可能在DNA复制过程中引起致命的基因突变,也可能诱发DNA-DNA以及DNA-蛋白质的链间交联,引起更复杂的损伤.相反,C5、C6-位上单羟基加合物的形成对DNA的稳定性不构成直接威胁.

主成分回归校正法-紫外分光光度法同时测定鲜味剂中5′-肌苷酸二钠和5′-鸟苷酸二钠

提出了一种用紫外分光光度法同时测定5’-肌苷酸二钠（IMP）和5＇-鸟苷酸二钠（GMP）的方法，在pH6．80的B-R缓冲溶液中对尼泊金乙、丙酯钠两组分混合溶液进行光度测定，所得的重叠波谱数据用经典最小二乘法（CLS）、主成分回归法（PCR）和偏最小二乘法（PLS）等化学计量学方法进行处理，结果表明：PCR的预报误差最低。用标准加入方法作回收试验，测得IMP的回收率在97．1％～114．9%之间，GMP的回收率在98．3％～103．6％之间。

2′-脱氧腺苷-5′-磷酸与羟基自由基反应所形成的自由基(英文)

运用可靠的B3LYP/DZP++方法研究了2′-脱氧腺苷-5′-单磷酸(dAMP)与羟基自由基(HO)的反应中所产生的20余种自由基.结果表明,反应的初始产物包括HO加成到dAMP碱基C8、C4位上所形成的羟基加合物自由基,以及dAMP碱基环上氨基的脱氢自由基.而且,反应最初形成的C4位羟基加合物自由基具有脱水产生dAMP碱基环上氨基脱氢自由基的热力学趋势,脱水形成的两种氨基脱氢自由基都是强氧化剂.尽管HO·加成到dAMP碱基C2位上所形成的加成产物比C4位的加成产物更稳定,但dAMP与HO·的氧原子间较强的静电排斥作用却使得HO·难以靠近C2原子,导致C2位的羟基加成产物难以形成.上述结论不但与有关实验结果一致,而且还对一些实验现象作出了合理的解释.

4,4′-二苯基-2,2′-双噻唑-5,5′-二磺酸二钠的合成

以二硫代乙二酰胺、ω一溴代苯乙酮为起始原料,合成了4,4′-二苯基-2,2′-双噻唑.m.p.216.9℃-217.1℃,收率57.5%.IR,νmax(cm-1):3111(Ar-H),3060(Ph-H),1597,1558,1541,1508,1474,1443(苯环骨架,噻唑环骨架振动),939,742,692(苯环单取代).后经磺化,中和生成4,4′-二苯基-2,2′-双噻唑-5,5′-二磺酸二钠.m.p.>300℃,收率44%.IR,νmax(cm-1):1236,1184,1126,1047(R-SO3-).1H NMR,δ(ppm):7.63,7.56,7.51(苯H).

5-aza-dC和丁酸钠对人胃癌细胞株MKN28细胞周期、凋亡以及抑癌基因表达的影响

背景:表遗传修饰的主要方式DNA甲基化和组蛋白乙酰化是胃癌发生机制研究中的热点内容。目的:探讨表遗传学调控对人胃癌细胞株MKN28细胞周期、凋亡以及抑癌基因Runx3、p21^(WAF1)表达的影响。方法:培养人胃癌细胞株MKN28,并分为5-氮-2'-脱氧胞苷(5-aza-dC)组、丁酸钠组、5-aza-dC+丁酸钠组和对照组。以Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞周期和凋亡,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测Runx3、p21^(WAF1)mRNA表达,以甲基化特异性PCR(MSP)检测Runx3基因启动子区甲基化状态。结果:与对照组相比,5-aza-dC对细胞周期无明显影响,丁酸钠可使细胞周期阻滞于G0/G1期(P<0.05);5-aza-dC组和丁酸钠组细胞凋亡率均显著增高(8.3%±1.3%、20.8%±2.4%对2.0%±0.5%,P<0.05)。5-aza-dC可诱导Runx3 mRNA重新表达(P<0.05),但对p21^(WAF1)mRNA表达无影响。丁酸钠可增强p21^(WAF1)mRNA表达(P<0.05),但不能诱导Runx3 mRNA表达。联合5-aza-dC和丁酸钠可显著诱导细胞凋亡和增强抑癌基因Runx3、p21^(WAF1)mRNA表达(P<0.05)。5-aza-dC干预后,Runx3基因启动子区呈去甲基化状态。结论:去甲基化制剂5-aza-dC或组蛋白去乙酰化酶抑制剂丁酸钠通过重新表达Runx3或增强p21^(WAF1)表达而诱导胃癌MKN28细胞凋亡,从而发挥抗肿瘤的作用。

4-甲基-5-甲酰基噻唑的合成工艺研究

研究了头孢托仑匹酯关键中间体4-甲基-5-噻唑甲醛(1)的合成新工艺。以乙酰乙酸甲酯(2)为起始原料,首先进行α-溴代反应、与硫脲缩合反应,制得2-氨基-4-甲基-5-噻唑甲酸甲酯(3),收率高达96%;其次用廉价的次亚磷酸钠(1.5当量)替代次亚磷酸,进行氨基重氮化还原反应,制得4-甲基-5-噻唑甲酸甲酯(4),收率为75%;最后用硼氢化钾/氯化锂体系(1.5当量)在回流的无水乙醇中进行酯还原反应,所得粗产物不经分离提纯,直接用次氯酸钠(2.0当量)氧化得到目标化合物,收率为62%,反应总收率在44%以上。该过程条件温和,操作简便,后处理简单,具有工业化应用前景。