根皮素对5-羟甲基糠醛的消减机理以及在广式月饼中的应用

多酚化合物可有效降低5-羟甲基糠醛(5-hydroxymethylfurfural,HMF)的含量,并产生新的物质。为探究多酚消减HMF的机理,研究其在月饼加工中的应用,该研究采用液相色谱法对比10种多酚对HMF的消减效果;分别在模拟体系、焦糖化反应体系和广式月饼中研究消减率最高的根皮素(phloretin,Phl)对HMF和3-脱氧奥苏糖(3-deoxyglucosone,3-DG)的消减作用,进而采用液相色谱/质谱联用法探究根皮素消减HMF的机理;评价了根皮素的添加量对月饼感官特性和色度的影响。结果表明,10 mmol/L根皮素在模拟体系中对HMF消减率达39.73%,其在葡萄糖反应体系中对HMF和3-DG的消减率分别为57.78%和37.33%;在月饼中添加0.6%的根皮素时,饼皮中HMF和3-DG消减率分别为57.84%和6.34%,且对月饼感官特性无显著影响。进一步结果表明,根皮素可与HMF形成分子质量为656 amu的加合物(HMF-Di-Phl)。可见,根皮素可通过直接捕获生成的HMF和抑制3-DG的形成而消减体系中的HMF。研究为提升焙烤食品安全提供了参考。

根皮素对免疫性肝炎小鼠的保护作用及机制

目的观察根皮素(Phloretin,PHL)对自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)小鼠的保护作用及调控机制。方法SPF级Balb/C小鼠32只,随机分为对照(Control)组、刀豆蛋白A(concanavalin A,ConA)模型组、PHL低剂量组和PHL高剂量组。造模处理24 h后提取小鼠血清及肝脏组织,ELISA法检测血清转氨酶及炎症因子;HE染色观察肝脏组织病理学变化;TUNEL染色检测肝细胞凋亡;qRT-PCR检测转录表达水平;免疫组化和Western-blot检测肝组织炎症因子、自噬与凋亡蛋白及TRAF6-JNK通路信号蛋白表达水平。结果与正常对照组相比,AIH小鼠血清转氨酶及炎症因子表达显著升高(P<0.001),病理学见肝组织结构被广泛破坏,肝细胞大面积坏死及炎性细胞浸润。与ConA组相比,PHL组血清转氨酶及炎症因子水平下降(P<0.05),肝细胞结构完整,肝细胞坏死面积减少(P<0.05)。此外,与ConA组相比,PHL显著下调肝组织促凋亡蛋白及自噬蛋白的表达(P<0.05),下调TRAF6-JNK信号通路激活(P<0.05)。结论PHL可能通过减轻AIH小鼠肝细胞自噬和肝细胞凋亡,缓解AIH小鼠高炎症负荷,发挥对AIH小鼠的保护作用,可能是通过TRAF6-JNK信号通路发挥作用。

根皮素对热应激肉鸡腿肌肉品质和抗氧化性能的影响

目的:探讨饲料中添加根皮素对热应激环境下肉鸡腿肌肉品质及其抗氧化性能的影响。方法:选取160只体质量相近的22日龄AA肉鸡,随机分为NT、HT、LT和PT等4组,每组4个重复,每个重复10只。其中,NT为对照组,饲养温度为(23.0±0.61)℃,相对湿度为50.8%±5.41%;HT、LT、PT为热应激组,饲养温度为(30.5±0.69)℃,相对湿度为89.7%±6.70%,NT和HT饲喂基础日粮,LT、PT分别饲喂在基础日粮中添加100、200 mg/kg根皮素的日粮。在肉鸡42日龄时每个重复随机挑选3只肉鸡,屠宰后进行腿肌肉品质及抗氧化性能的测定。结果:与HT相比,NT肉鸡腿肌亮度、滴水损失、失水率、蒸煮损失、MDA水平均显著下降(P<0.05),CAT、GSH、GSH-Px、T-AOC水平均显著上升(P<0.05)。与HT相比,PT肉鸡腿肌亮度、肌滴水损失、失水率、蒸煮损失、MDA水平均显著下降(P<0.05),CAT、GSH、GSH-Px、T-AOC水平均显著上升(P<0.05)。与HT相比,LT的T-AOC水平显著上升(P<0.05)。结论:饲料中添加根皮素可有效改善热应激对肉鸡腿肌肉品质及抗氧化性能的影响,且以添加200 mg/kg效果较好。

根皮素通过抑制FAK改善肾小管间质纤维化

目的探究根皮素能否通过抑制黏着斑激酶(FAK)改善肾小管间质纤维化。方法肾小管上皮细胞NRK-52E经TGF-β1(10 ng/mL)诱导建立肾纤维化细胞模型,并构建单侧输尿管梗阻(UUO)肾间质纤维化小鼠模型。通过免疫荧光及Western blot法检测细胞及小鼠肾脏组织中α-SMA、FN的蛋白表达水平,明确根皮素体内外抗肾纤维化作用;检测实验小鼠血清中肌酐(Cr)和尿素氮(BUN)水平,分析根皮素的肾保护作用;以苏木精-伊红(HE)染色和Masson染色观察根皮素对UUO小鼠肾脏病理学改变和胶原纤维沉积的影响;Western blot检测TGF-β1诱导的NRK-52E细胞和UUO小鼠肾组织中FAK、p-FAK的蛋白表达水平;通过分子对接预测根皮素与FAK蛋白的潜在结合模式和结合能力;使用FAK抑制剂PND-1186,探究根皮素改善肾间质纤维化的作用机制。结果根皮素可逆转TGF-β1所致的肾小管上皮细胞及UUO小鼠肾组织中α-SMA、FN的蛋白表达水平升高,且显著降低UUO小鼠血清中Cr、BUN水平,改善UUO小鼠肾小管扩张、炎性细胞浸润及间质胶原沉积;根皮素可以显著抑制UUO小鼠肾组织中FAK、p-FAK蛋白的表达水平,分子对接提示根皮素与FAK蛋白之间具有良好相互作用。根皮素与PND-1186均可改善TGF-β1诱导的NRK-52E细胞纤维化。结论根皮素通过抑制FAK信号通路在体内外发挥抗肾间质纤维化作用。

根皮素调节CCL2-CCR2信号轴对肺癌细胞恶性进展的影响

目的:探讨根皮素调节CC趋化因子配体2(CCL2)-CC趋化因子受体2(CCR2)信号轴对肺癌细胞恶性进展的影响。方法:将A549细胞分为对照组(未进行任何处理的A549细胞)、低剂量根皮素组(500μmoL/L根皮素处理A549细胞)、中剂量根皮素组(750μmoL/L根皮素处理A549细胞)、高剂量根皮素组(1000μmoL/L根皮素处理A549细胞)、高剂量根皮素+GW0742组(1000μmoL/L根皮素与1.0μmoL/L CCL2-CCR2信号通路激活剂GW0742处理A549细胞)。CCK-8法和流式细胞术分别检测A549细胞增殖及凋亡;Transwell法检测细胞迁移和侵袭;Western blot测定CCL2-CCR2信号轴相关蛋白表达。结果:低、中、高剂量根皮素组细胞OD450值、迁移及侵袭数量、CCL2、CCR2蛋白表达均低于对照组(P<0.05),细胞凋亡率高于对照组(P<0.05),且呈剂量依赖性。高剂量根皮素+GW0742组细胞OD450值、迁移及侵袭数量、CCL2、CCR2蛋白表达均高于高剂量根皮素组(P<0.05),细胞凋亡率低于对照组(P<0.05)。结论:根皮素可能通过调节CCL2-CCR2信号轴介导的免疫反应进而抑制肺癌细胞的恶性进展。

根皮素缩氨基硫脲合成及其抑制酪氨酸酶活性作用

以根皮素为母体合成了根皮素缩氨基硫脲,采用UV,IR,1 H NMR,13 C NMR及MS等手段对产物进行结构表征。以L-多巴为底物研究了根皮素及根皮素缩氨基硫脲对酪氨酸酶的抑制作用。结果表明,相比于根皮素,根皮素缩氨基硫脲对酪氨酸酶表现出更强的抑制作用,其IC50值为57.81±1.46μM。酶学动力学研究表明,二者对酪氨酸酶的抑制作用均表现为混合型可逆抑制作用。

根皮素蛋氨酸希夫碱的合成及其性质研究

本研究旨在提高根皮素的溶解性和抗氧化活性。以根皮素为母体,在其结构上引入水溶性较好的蛋氨酸,合成了一种新型的根皮素衍生物——根皮素蛋氨酸希夫碱。采用UV、红外、1H NMR及MS对其结构进行了表征,并对根皮素及其衍生物的溶解性、抗氧化活性和稳定性进行了探讨。实验结果表明,与母体根皮素相比,根皮素衍生物的水溶性提高了约20倍,其抗氧化活性及在不同pH介质中的稳定性均优于根皮素。急性毒性实验的结果为小鼠LD50>5000 mg,属实际无毒。因此,在根皮素结构上引入蛋氨酸基团既提高其抗氧化性、溶解性和稳定性,又保证其安全性,为拓宽根皮素在食品和药品中的广泛应用提供新的途径。

槲皮素、根皮素、水飞蓟宾清除自由基和抑制脂质过氧化活性研究

目的研究中草药中的黄酮类活性成分槲皮素、根皮素、水飞蓟宾的清除自由基和抑制脂质过氧化活性。方法采用清除DPPH自由基、清除ABTS自由基和抑制体外肝脏线粒体脂质过氧化试验的方法,检测槲皮素、根皮素、水飞蓟宾的清除自由基和抑制脂质过氧化活性。结果在清除DPPH自由基、清除ABTS自由基和抑制体外肝脏线粒体脂质过氧化试验中,槲皮素的体系终浓度IC50分别为4μmol/L、3.64μmol/L、6.67μmol/L。根皮素的体系终浓度IC50分别为10μmol/L、4.54μmol/L、12.50μmol/L。水飞蓟宾的体系终浓度IC50分别为125μmol/L、7.10μmol/L、104.16μmol/L。结论研究表明槲皮素、根皮素、水飞蓟宾具有明显的清除DPPH自由基、清除ABTS自由基和抑制脂质过氧化活性,而且活性由强到弱依次为槲皮素、根皮素、水飞蓟宾。

根皮素诱导肝癌BEL-7402细胞凋亡

目的研究根皮素诱导肝癌细胞系BEL-7402细胞凋亡。方法MTT法测定BEL-7402细胞毒性,荧光显微镜观察细胞形态学的变化,流式细胞仪分析细胞周期和线粒体膜电位的变化。发色底物法检测Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9活性变化。结果根皮素对BEL-7402细胞IC50在89.23μg/mL。BEL-7402细胞生长曲线表明,根皮素浓度增高,生长率明显下降。细胞凋亡可在40-160μg/mL根皮素处理后24h出现。凋亡细胞主要表现为核染色质固缩,荧光染色增强。根皮素阻断细胞于G1期,线粒体膜电位降低。Caspase-3、Caspase-6和Caspase-9被激活,呈时间依赖性改变。根皮素处理BEL-7402细胞12hCaspase-9活性最高,而Caspase-6活性在18h达峰值,Caspase-3活性峰值时间在24h后。结论根皮素可以诱导BEL-7402细胞发生凋亡,途径可能是通过线粒体旁路。

苹果树枝和叶中根皮苷及根皮素含量变化研究

研究一年中生长旺盛期间苹果树枝、叶中根皮苷和根皮素的含量动态变化规律,为苹果树枝和叶的合理利用提供依据。采用RP-HPLC方法测定根皮苷、根皮素含量变化。苹果树枝和叶中都有根皮苷存在,随着生长发育呈现出不同的变化特点,叶中根皮苷在9、10月含量最高,平均含量为16.31 mg/g。树枝中根皮苷含量在6月时最高,平均含量为11.93 mg/g。仅苹果叶中含有根皮素,5月份含量最高为2.541 mg/g。树枝中未检出。苹果枝和叶可作为提取根皮苷和根皮素的资源加以利用。

根皮素对人γδT细胞杀伤胃癌SGC-7901细胞的影响及机制探讨

目的：探讨根皮素对人γδT细胞杀伤胃癌SGC-7901细胞的影响及其机制。方法：IPP法扩增人外周血γδT细胞,不同浓度的根皮素作用于γδT细胞及胃癌SGC-7901细胞48小时后,MTT法检测γδT细胞及SGC-7901细胞的生长曲线,FCM检测γδT细胞PFP及GraB的表达;LDH释放法检测γδT细胞对SGC-7901细胞的杀伤活性;Western blot检测γδT细胞中Wnt3a的表达情况。结果：IPP作用10天后,γδT细胞比例由3.12%增加到79.6%。与对照组比较,浓度2.3518.75μg/ml的根皮素作用后γδT细胞的增殖率显著提高（P〈0.05）,75μg/ml根皮素对SGC-7901细胞生长抑制率显著提高（P〈0.05）,且2.3575μg/ml根皮素作用后的γδT细胞对SGC-7901细胞的杀伤活性明显增强（P〈0.05）,γδT细胞中PFP、GraB及Wnt3a的表达较对照组显著增加（P〈0.05）。结论：根皮素能够增强γδT细胞对SGC-7901细胞的杀伤作用,其机制可能与根皮素促进γδT细胞的增殖,提高γδT细胞PFP、GraB表达及活化Wnt信号通路有关。

根皮素抑制肝癌细胞恶性表型的研究

目的:探讨根皮素对肝癌BEL-7402细胞株运动、侵袭、粘附、克隆形成率的影响。方法:MTT法和Costar Transwell检测根皮素抑制BEL-7402细胞的增殖、运动、侵袭、粘附、克隆形成率。结果:根皮素能抑制BEL-7402细胞的增殖、侵袭、运动、粘附及克隆形成能力,并呈现出剂量依赖性。结论:根皮素能抑制BEL-7402细胞的恶性表型。

根皮素与两种β-环糊精衍生物的包合作用及性质

采用相溶解度法定量研究甲基-β-环糊精(methyl-β-cyclodextrin,Me-β-CD)及羟丙基-β-环糊精((2-hydroxy)propyl-β-cyclodextrin,HP-β-CD)与根皮素的包合作用,通过冷冻-干燥法成功制备了水溶性良好的包合物。并利用红外光谱、粉末X射线衍射、扫描电子显微镜研究分析根皮素及其包合物的结构。此外,通过测定还原能力及1,1-二苯基-2-三硝基苯肼自由基清除能力,检测根皮素及其包合物的抗氧化能力,并探究其对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活力的影响。结果表明:成功制备了根皮素与Me-β-CD、HP-β-CD物质的量比1∶1的包合物,包合作用显著提升了根皮素在水中的溶解度及抗氧化能力,有助于其加工成为水基化保健食品剂型。此外,根皮素及其包合物对酪氨酸酶均有良好的抑制效果,可作为天然、高效、环保的食品保鲜剂。

藏药俄色叶中根皮苷、根皮素含量分析

目的:建立测定藏药俄色叶中根皮苷、根皮素含量分析的方法。方法:根皮苷含量采用紫外-可见分光光度法进行测定,以甲醇为提取溶剂。根皮素含量采用HPLC进行含量测定,以40%乙醇为提取溶剂,以乙腈和0.04%磷酸溶液为流动相,梯度洗脱,流速为1 mL·min-1;检测波长为286 nm;柱温为30℃。结果:根皮苷与药材提取液的最大吸收波长一致。在此色谱条件下,根皮素色谱峰与其他色谱峰达到基线分离,平均回收率为102.6%,RSD=2.61%。19批俄色叶中根皮苷平均质量分数为22.11%,根皮素平均质量分数为0.51%。结论:该研究建立的方法能快速准确地测定俄色叶中根皮苷、根皮素的含量,可作为该药质量评价的参考依据,为俄色叶的开发利用提供理论基础。

根皮素对小鼠T淋巴细胞体外活化、周期、Ca^(2+)离子内流以及凋亡的影响

目的:研究根皮素(Ph)对小鼠T淋巴细胞中期活化、细胞周期、Ca2+离子内流以及凋亡的影响,探讨将其发展为免疫干预药物的可能性。方法:双色荧光抗体染色结合流式细胞术(FCM)分析Ph对多克隆刺激剂(ConA)刺激下的小鼠T淋巴细胞CD25表达的影响;PI染色法检测Ph对T淋巴细胞周期的影响;Fluo-4/AM染色结合FCM分析Ph对T淋巴细胞Ca2+离子内流的影响;calcein/Co2+技术检测Ph对T淋巴细胞线粒体通透性转换(MPT)的影响,并用DIOC6(3)染色检测其对线粒体膜电势(MMP)的影响。结果:Ph(40,60,80μmol/L)对ConA刺激的T淋巴细胞CD25表达有显著的抑制作用(P<0.01);Ph能抑制T淋巴细胞Ca2+离子内流(P<0.01);细胞周期分析显示,Ph能将T淋巴细胞抑制在S期;且Ph能够诱导和加速MPT,并导致MMP的显著下降。结论:Ph对小鼠T淋巴细胞活化和Ca2+内流具有显著的抑制作用,并能将细胞抑制在S期,能通过线粒体途径诱导T淋巴细胞凋亡,可望发展成为一种新的免疫抑制药物。

根皮素异烟酰基腙的合成、表征及抗氧化活性研究

本文旨在提高根皮素的生物活性,以其作为母体通过与异烟肼结合引入C=NNH活性基团,合成了一种新型酰腙类化合物。采用UV,IR,1H NMR,13C NMR及元素分析等手段对产物进行结构表征,并测定了根皮素及其异烟酰基腙的还原能力,清除DPPH自由基及清除ABTS自由基能力。结果表明根皮素异烟酰基腙的抗氧化活性显著优于根皮素。

根皮素乙酰阿魏酸酯的合成及抗氧化活性研究

以阿魏酸和根皮素为原料,合成了三种根皮素乙酰阿魏酸酯,采用IR、1H NMR、13C NMR和HPLC-MS对其结构进行表征。并测定根皮素及其酯的还原能力、清除DPPH自由基及.OH自由基能力,结果表明根皮素乙酰阿魏酸酯的抗氧化活性显著优于根皮素。

紫变青霉生物转化根皮苷制备根皮素的研究

为了开发一种生物转化根皮苷生成根皮素的工艺,首先从苹果皮富集培养物中分离筛选微生物菌株,进而优化产酶培养基主要组成、pH和转化条件,提高根皮素的转化得率.结果从富集培养物中筛选到一株紫变青霉(Penicillium purpurescens)QL-9204菌株,经产酶培养制备的粗酶液能转化根皮苷为根皮素;在产酶培养基组成为蔗糖2g/L,(NH4)2SO46g/L,NaCl 5g/L,KH2PO45g/L,MgSO41g/L,MnSO41g/L,pH=6时,QL-9204菌株经种子扩培后接种产酶培养基,于30℃,200r/min条件下培养5d,滤除菌体的粗酶液中加入80mg/L的根皮苷,于30℃,250r/min转化14h后,根皮素的转化得率可达90.3%.利用紫变青霉菌QL-9204发酵制备的粗酶液转化根皮苷制备根皮素,具有方法简单、转化得率高和成本低的优势,有潜在的工业化应用价值.

植物雌激素白藜芦醇和根皮素对家兔离体主动脉收缩反应的影响(英文)

目的探讨植物雌激素白藜芦醇和根皮素对离体主动脉血管收缩的舒张作用特点是否同雌激素以及有关的作用机制。方法将家兔离体主动脉平滑肌条置于灌流肌槽中,记录其等长张力变化。结果白藜芦醇和根皮素可明显抑制离体血管对去甲肾上腺素(NE)、KCl和CaCl2的浓度依赖性收缩反应,使其量效曲线明显右移, pD2′值分别为2.89,3.34, 3.37和3.23, 3.52, 3.77;对KCl预收缩血管条具有浓度依赖性的舒张效应。去除血管内皮、Nω-L-硝基精氨酸(L-NNA)或亚甲蓝对白藜芦醇舒张血管作用具有明显的抑制作用,但对根皮素诱发的血管舒张无明显影响。吲哚美辛和普萘洛尔温育后,对二者的舒血管作用均无明显影响。在无钙Krebs液(含0.01 mmol·L-1EGTA)中,白藜芦醇和根皮素可抑制NE诱发的由肌细胞内钙释放引起的Ⅰ相收缩,但不影响CaCl2诱发的由肌细胞外钙内流引起的Ⅱ相收缩。结论白藜芦醇和根皮素对离体主动脉血管的舒张作用可能与其抑制钙离子内流及细胞内钙释放有关;另外白藜芦醇的舒张作用部分与内皮细胞有关,但根皮素的舒血管作用与内皮细胞无关。

阿魏酸、根皮素和水溶性VE的抗氧化协同效应及其配方优化

采用等效面分析法对抗氧化剂配方阿魏酸、根皮素和水溶性VE清除DPPH自由基能力、还原Fe3+能力及清除ABTS+.能力进行协同性分析,结果表明:随配方中各成分含量不同则呈现出协同、拮抗和相加效应;以归一值(OD值)作为整体效应评价指标并采用响应面优化法(RSM法)进行配方优化,优化模型显示,综合效应最优配方为:阿魏酸34.9%、根皮素35.1%、水溶性VE 30%。