槟榔碱对H_(2)O_(2)诱导SH-SY5Y神经细胞氧化应激损伤的保护作用及机制研究

本研究通过建立过氧化氢(H_(2)O_(2))诱导的SH-SY5Y神经细胞氧化应激模型,旨在探究槟榔碱对氧化应激诱导神经细胞损伤的保护作用及其作用机制。采用CCK-8法检测细胞活力,采用分光光度法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放、丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性,采用流式细胞术检测细胞凋亡、线粒体膜电位,采用Western blot技术检测Nrf2、HO-1、Keap1、Bcl-2、Bax、Caspase-3的表达。结果表明:槟榔碱干预均能有效降低细胞凋亡并显著上调线粒体膜电位;在提高SOD、CAT水平的同时降低MDA水平;140μmol/L槟榔碱处理能够显著上调Nrf2、HO-1、Bcl-2蛋白的表达(P<0.001,P<0.0001),并下调Keap1、Bax、Caspase-3蛋白的表达(P<0.001,P<0.0001)。表明槟榔碱能够有效改善H_(2)O_(2)诱导的氧化应激损伤,其作用机制与激活Nrf2/HO-1信号通路、提升细胞抗氧化活力、调控Bcl-2/Bax/Caspase-3信号通路和抑制细胞凋亡有关。

槟榔碱对人胃黏膜上皮细胞的毒性作用研究

本文旨在探讨槟榔碱对人胃黏膜上皮细胞GES-1的毒性作用。用不同浓度(60、90、120、150μg/mL)的槟榔碱处理GES-1细胞,并检测GES-1细胞活力、活性氧水平(Reactive Oxygen Species,ROS)和线粒体膜电位(Mitochondrial Membrane Potential,MMP),测定GES-1细胞还原型谷胱甘肽(Glutathione,GSH)水平、超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)活力、乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase,LDH)活力、三磷酸腺苷(ATP)酶活力。测定肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α,TNF-α)、白介素-6(Interleukin 6,IL-6)、血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)、转化生长因子-β(Transforming Growth Factor-β,TGF-β)水平。结果表明,与空白对照组相比,槟榔碱刺激后GES-1细胞形态发生改变,细胞活力最低降低至24%,活性氧水平最高升至12.5倍,线粒体膜电位最低下降至10.4%。在150μg/mL槟榔碱刺激下,总ATP酶以及Na^(+)K^(+)-ATP酶活力分别下降至42.31%和39.84%,GSH和SOD分别下降了40.23%和34.1%,LDH上升了30.46%,TNF-α、IL-6、VEGF、TGF-β水平分别上升了4.67%、10.2%、23.14%和22.83%。结果表明槟榔碱能够产生氧化应激并诱发炎症因子,对GES-1细胞造成毒性损伤。

三七总皂苷通过激活Nrf2/GCLC信号通路抑制槟榔碱诱导的HaCaT细胞氧化应激而缓解口腔黏膜下纤维化

目的:探讨三七总皂苷(PNS)在槟榔碱(ANE)诱导的口腔黏膜下纤维化中的抗纤维化作用,并分析PNS对核因子E2相关因子2(Nrf2)∕谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)信号通路的影响。方法:采用CCK-8法评估不同浓度的PNS和ANE对人永生化角质形成细胞系HaCaT活力的影响,根据CCK-8结果选择75 mg/L的ANE及25、50和100 mg/L的PNS作为后续实验浓度;细胞设为空白对照组、模型组和PNS低、中、高剂量(25、50和100 mg/L)组,采用Western blot和RT-qPCR法检测各组细胞中I型胶原(COL-I)、上皮钙黏素(E-cadherin)、Nrf2、GCLC和谷胱甘肽还原酶(GR)的蛋白及mRNA表达情况;采用免疫荧光法检测Nrf2入核情况;采用生化试剂盒检测各组细胞中谷胱甘肽(GSH)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)和丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)活性;采用DCFH-DA荧光探针检测细胞内活性氧(ROS)含量。结果:与空白对照组相比,模型组细胞中COL-I蛋白及mRNA表达上调,E-cadherin、Nrf2、GCLC、核Nrf2和GR的蛋白及mRNA表达下调,细胞中NADPH、MDA和ROS含量升高,GSH含量和SOD活性明显减弱;与模型组相比,PNS 50和100 mg/L组细胞中COL-I蛋白及mRNA表达下调,E-cadherin、Nrf2、GCLC、核Nrf2和GR的蛋白及mRNA表达上调,细胞中NADPH、MDA和ROS含量下降,GSH含量和SOD活性明显增强(P<0.05,P<0.01)。结论:PNS具有抗HaCaT细胞纤维化作用,其作用机制可能与激活Nrf2/GCLC信号通路,进而抗氧化应激改善口腔黏膜下纤维化有关。

槟榔愈伤中槟榔碱的提取方法

为了建立一种简便、快速并且样品用量少的测定槟榔愈伤中槟榔碱含量的方法,以槟榔(Areca catechu)愈伤为研究对象,采用超声波提取方法,选取料液比、提取时间、提取温度、提取次数4个因素,在单因素实验的基础上,进行L9(34)正交实验,根据单因素实验和正交实验的结果进行验证实验,研究了槟榔愈伤中槟榔碱的提取体系。结果表明:料液比1∶9、提取时间30 min、提取温度75℃、提取次数4次是最佳的槟榔碱提取体系。

低剂量槟榔碱增强小鼠生理性记忆并改善记忆障碍

目的探索槟榔碱对小鼠生理性记忆及MK-801诱导后记忆障碍的影响。方法将24只小鼠随机均分成对照组、低剂量槟榔碱组和高剂量槟榔碱组,采用新颖物体识别测试(NOR)和物体位置识别测试(OLR)的辨别指数(DI)分析槟榔碱对小鼠生理性记忆的影响。另将32只小鼠随机均分成正常组、MK-801组、MK-801联合低剂量槟榔碱饮用组(L-ARE治疗组)、MK-801联合高剂量槟榔碱饮用组(H-ARE治疗组),采用NOR、OLR的DI分析槟榔碱对MK-801所致小鼠记忆障碍的影响。结果与对照组比较,低剂量槟榔碱组小鼠NOR、OLR的DI显著升高(P<0.05);但高剂量槟榔碱组与对照组比较,差异无显著性(P>0.05)。与正常组比较,MK-801组NOR、OLR的DI降低(P<0.05);与MK-801组比较,L-ARE治疗组小鼠DI显著升高(P<0.05),H-ARE治疗组小鼠的DI亦有升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论低剂量槟榔碱能够增强小鼠生理性记忆并且改善记忆障碍。

槟榔碱黏膜下注射法构建SD大鼠口腔黏膜下纤维化模型

目的:通过黏膜下注射槟榔碱溶液构建SD大鼠口腔黏膜下纤维化(OSF)模型。方法:将20只SD大鼠随机分为实验组和对照组。实验组大鼠采用口腔颊黏膜下注射槟榔碱溶液进行造模,对照组大鼠则注射生理盐水。处理10周后,观察大鼠口腔黏膜颜色及体质量变化,测量被动开口度;苏木素-伊红(HE)染色、Masson染色观察黏膜组织病理学变化;免疫组化染色和实时荧光定量PCR检测黏膜组织内平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、血小板-内皮细胞黏附分子(PECAM-1/CD31)蛋白及基因表达水平。结果:实验组大鼠颊黏膜出现白色病变,张口度减小(P<0.001);大鼠颊黏膜上皮萎缩,固有层胶原纤维沉积;大鼠黏膜组织内α-SMA蛋白和基因表达显著增加(P<0.001),CD31蛋白和基因表达显著减少(P<0.001)。结论:槟榔碱黏膜下注射法可构建出具有OSF典型症状、病理变化符合OSF的大鼠模型。

槟榔碱对SD大鼠肠道微生物与神经递质的影响

为了解槟榔碱对SD大鼠肠道微生物与神经递质的影响,连续28 d用含500、100、0(CK)mg·kg^(-1)氢溴酸槟榔碱的0.9%NaCl溶液分别灌胃SD大鼠,然后检测分析SD大鼠结肠内容物中肠道微生物、粪便中短链脂肪酸的含量、脑皮质与血清中神经递质的含量等。结果发现,槟榔碱促使SD大鼠肠道内乳酸杆菌属、双歧杆菌属等的相对丰度提高,肠道内乙酸、丙酸等的含量增加,促进脑皮质中兴奋性神经递质DA和5‐HT等含量增加、降低了抑制性神经递质GABA的含量,表明槟榔碱可以通过微生物-肠-脑调节SD大鼠的生理、行为,使SD大鼠出现好动、食欲下降、体质量降低等现象。

长链非编码RNA MALAT1对槟榔碱诱导的颊黏膜成纤维细胞活化能力影响的研究

目的:本研究旨在明确长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA) MALAT1对槟榔碱诱导的颊黏膜成纤维细胞(buccal mucosal fibroblasts, BMFs)活化能力影响的作用,为寻找新的口腔黏膜下纤维化(oral submucous fibrosis, OSF)治疗途径提供理论基础。方法:体外培养BMFs,采用不同浓度槟榔碱刺激BMFs,在细胞水平上构建OSF疾病模型。采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)法检测细胞活力;Transwell法和胶原凝胶收缩法检测BMFs活化;实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time PCR, qRT-PCR)检测BMFs中平滑肌肌动蛋白-α(α-smooth muscle actin, α-SMA)和lncRNA MALAT1的表达情况;siRNA-MALAT1瞬时转染到BMFs中,评估槟榔碱刺激下BMFs迁移和收缩能力的变化。结果:10μg/mL槟榔碱是体外构建OSF疾病模型的最佳浓度,此时细胞内α-SMA和lncRNA MALAT1表达升高。Transwell实验和胶原凝胶收缩实验提示敲低lncRNA MALAT能抑制槟榔碱诱导的BMFs收缩和迁移。结论:lncRNA MALAT1对槟榔碱诱导的BMFs激活,细胞收缩和迁移有重要作用。

槟榔碱通过断裂转导蛋白样增强子4对裸鼠骨肉瘤细胞自噬和凋亡的影响实验研究

目的:探究槟榔碱通过断裂转导蛋白样增强子4(TLE4)对大鼠骨肉瘤细胞自噬和凋亡的影响。方法:选取SPF级裸鼠建立骨肉瘤移植瘤模型。将建模成功的60只裸鼠随机分为模型组,槟榔碱低、中、高剂量组(分别腹腔注射10、20、50 mg/kg槟榔碱),TLE4抑制剂组(腹腔注射3 mg/kg TAK-242)和顺铂组(腹腔注射2 mg/kg顺铂),每组10只,隔日注射1次,连续注射14 d。将未建模的10只裸鼠作为对照组。对照组和模型组每天注射同体积0.9%氯化钠溶液。观察移植瘤体积,取瘤体进行称重。实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测骨肉瘤组织TLE4 mRNA表达,免疫组织化学染色检测病理学变化和TLE4蛋白表达。Western blot检测重组人自噬效应蛋白(Beclin-1)、微管相关蛋白1轻链3Ⅰ(LC3Ⅰ)、微管相关蛋白1轻链3Ⅱ(LC3Ⅱ)、家蚕隔离体蛋白1(p62)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达。结果:与模型组比较,槟榔碱低、中、高剂量组以及TLE4抑制剂组和顺铂组TLE4、移植瘤体积和重量、Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、Bcl-2降低,Bax、Caspase-3、LC3Ⅰ升高(均P<0.05)。与槟榔碱低剂量组比较,槟榔碱中、高剂量组以及TLE4抑制剂组和顺铂组TLE4、移植瘤体积和重量、Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、LC3Ⅱ、Bcl-2降低,Bax、Caspase-3、P62、LC3Ⅰ升高(均P<0.05)。与槟榔碱中剂量组比较,槟榔碱高剂量组和TLE4抑制剂组TLE4、移植瘤体积和重量、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Bcl-2降低,Bax、P62、LC3Ⅰ升高(均P<0.05)。与槟榔碱高剂量组比较,TLE4抑制剂组和顺铂组Beclin-1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、LC3Ⅱ升高,P62、LC3Ⅰ、Bax、Caspase-3降低(均P<0.05)。TLE4抑制剂组和顺铂组以上指标比较差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:槟榔碱可能通过抑制TLE4表达影响骨肉瘤细胞自噬和凋亡,从而抑制骨肉瘤的生长。

槟榔碱对口腔黏膜下纤维化NF-κB、TGF-β_(1)信号通路的影响研究

目的探讨槟榔碱对口腔黏膜下纤维化(OSF)核因子-κB(NF-κB)、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))信号通路的影响。方法选取10份上颚正常口腔黏膜样本,随机分为观察组和对照组,各5份。均经细胞培养后,观察组第6代口腔黏膜成纤维细胞(OMFb)内加入40μg/ml浓度的槟榔碱溶液,对照组加入含10%胎牛血清的DMEM培养液。比较两组样本中NF-κB、TGF-β_(1)mRNA表达、蛋白含量及12、24、48 h后细胞增殖情况。结果观察组样本NF-κB、TGF-β_(1)mRNA表达分别为(2.04±0.31)、(1.54±0.22),显著高于对照组的(1.47±0.23)、(1.17±0.18),差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组样本NF-κB、TGF-β_(1)蛋白含量分别为(123.56±3.56)、(90.14±4.15)kDa,均显著高于对照组的(77.45±2.14)、(54.11±2.18)kDa,差异具有统计学意义(P<0.05)。观察组样本24、48 h后细胞增殖数量分别为(320.82±48.59)×10^(9)、(380.45±37.85)×10^(9),显著低于对照组的(600.76±45.37)×10^(9)、(1200.98±100.95)×10^(9),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论高浓度槟榔碱可能通过上调NF-κB及TGF-β_(1)通路促进口腔黏膜下纤维性变,对后续的临床研究具有重要意义。

槟榔碱通过促进巨噬细胞分泌含miR-155-5p外泌体诱导人口腔成纤维细胞的活化

目的探讨槟榔碱(ARE)通过调控巨噬细胞外泌体内miR-155-5p水平诱导人口腔黏膜成纤维细胞向成纤维表型转化的作用机制。方法以人单核细胞系(THP-1)与人口腔黏膜成纤维细胞系(HOMF)为研究对象。实验设为空白对照组、阴性对照组、ARE刺激组、ARE刺激后THP-1培养上清刺激组(CS)、ARE刺激后THP-1外泌体刺激组(EXO)、ARE刺激后THP-1无外泌体上清刺激组(NES)、miR-155-5p过表达组(miR-155-5p mimics)、ARE刺激后EXO处理对照组(NC+EXO-ARE)和miR-155-5p抑制联合ARE刺激后EXO处理(miR-155-5p inhibitor EXO-ARE)组。以流式细胞术检测THP-1细胞极化情况。Transwell细胞迁移实验检测HOMF细胞迁移能力。DCFH-DA检测细胞氧化应激水平。qRT-PCR检测细胞α-SMA、I型胶原和SOCS1的mRNA转录水平。免疫印迹实验检测细胞α-SMA、I型胶原与SOCS1蛋白表达。结果流式检测显示,相较于对照组,ARE组THP-1细胞由M0趋向M1极化。ARE对THP-1和HOMF细胞的刺激结果显示,相较于对照组,CS组与EXO组HOMF细胞迁移能力增强;细胞内氧化应激水平上调;细胞内miR-155-5p水平升高;细胞内α-SMA、I型胶原mRNA转录增多(1.90±0.08 vs 3.17±0.08;3.19±0.05 vs 5.65±0.01,P<0.05),SOCS1的m RNA转录减少(1.08±0.06 vs 0.34±0.02,P<0.05);α-SMA、I型胶原蛋白表达上调,SOCS1蛋白表达下调。miR-155-5p操纵实验显示,与阴性对照组相比,miR-155-5p mimics组HOMF细胞迁移能力增强,细胞内α-SMA和I型胶原蛋白表达上调;而与NC+EXO-ARE组相比,miR-155-5p inhibitor组HOMF细胞迁移能力减弱,细胞内α-SMA和I型胶原mRNA转录减少(5.84±0.08 vs 2.00±0.98;7.32±0.51 vs 2.33±0.43,P<0.05);α-SMA、I型胶原蛋白表达下调。结论ARE可上调THP-1胞内miR-155-5p并经外泌体途径转导和抑制HOMF胞内SOCS1蛋白表达,促进HOMF细胞的纤维化表型转化。

槟榔碱细胞毒性及其作用机制研究进展

槟榔是重要的中药材之一,生物碱是其主要活性物质,其中槟榔碱含量最高。槟榔碱因具有抗菌、促消化、抗血栓等药理作用而广泛运用,其生物安全性也备受关注。体内外研究表明,槟榔碱能造成多种细胞损害,主要是导致细胞形态的破坏,生存率的降低,生理功能异常,甚至细胞凋亡。其毒性机制的研究包括活性氧水平升高、细胞自噬作用等多个方面。本文对槟榔碱对上皮细胞、内皮细胞、成纤维细胞、神经细胞、脂肪细胞、生殖细胞六种靶细胞的毒性作用及可能机制进行综述,以期为槟榔碱生物安全性研究和更为有效的临床应用提供参考。

基于弱键化学探究姜黄素-槟榔碱分子互作的“减毒存效”

目的基于中医临床常用配伍药对,观察姜黄素与槟榔碱分子间相互作用以及聚集体的形成,探究中药配伍过程中的“减毒存效”机制,为临床安全使用槟榔的复方制剂提供参考。方法应用UV-vis、IR、1H-NMR、PXRD、ITC与电导滴定技术,解析聚集体的形成过程并对其结构表征。通过小鼠急性毒性实验、HepG2细胞模型,观察聚集体形成前后的毒效作用变化。结果槟榔碱与姜黄素能够在水溶液中,通过弱键作用力以1:1比例聚集形成聚集体。该聚集体能够显著缓和大剂量氢溴酸槟榔碱的刺激作用,同时能够保持姜黄素原有的抗HepG2增殖的活性。结论本实验从中医药配伍理论和中医临床用药经验实践出发,为中药配伍“减毒存效”研究提供了新的思路。

槟榔碱对口腔黏膜上皮细胞自噬和凋亡的影响

目的 探讨不同浓度槟榔碱对人口腔角质形成细胞(HOKs)的增殖情况,以及不同时间槟榔碱对HOKs自噬和凋亡的影响。方法 利用不同浓度的槟榔碱(0、7.5、15、30、60及120μg/ml)处理细胞24 h,MTT检测HOKs细胞的活力。以15μg/ml槟榔碱刺激HOKs为模型,在不同的作用时间点,通过Western blot检测凋亡蛋白Caspase-3、cleaved Caspase-3与自噬相关蛋白LC3、P62的表达情况,并采用流式细胞术检测细胞凋亡率的变化。结果 MTT检测结果显示槟榔碱能够抑制HOKs细胞活力并且抑制作用随着浓度的增加而增加(P <0.05)。用15μg/ml槟榔碱刺激HOKs后,Western blot结果显示LC3、Caspase-3和cleaved Caspase-3的表达水平随槟榔碱诱导时间延长而增加(P<0.05),而P62的表达水平随槟榔碱诱导时间延长而减少(P<0.05)。流式细胞仪检测结果也证明槟榔碱诱导时间延长,细胞凋亡率增加(P<0.05)。结论 槟榔碱可以抑制HOKs增殖,诱导细胞自噬和凋亡增加。

槟榔碱抗动脉粥样硬化分子机制的研究

目的 研究槟榔碱抗高血脂诱发大鼠动脉粥样硬化作用的分子机制。方法 采用高血脂诱发大鼠动脉粥样硬化模型 ,通过检测血液及血管组织中重要的动脉粥样硬化相关因子的表达 ,分析槟榔碱抗动脉粥样硬化的分子机制。结果 槟榔碱可促进NO释放 ,提高eNOS蛋白和mRNA的表达 ,降低血浆IL 8水平 ,抑制粘附分子ICAM 1及趋化因子IL 8的受体CXCR 2和MCP 1mRNA的过度表达。结论 槟榔碱上述作用特点可能与其抗动脉粥样硬化作用相关。

槟榔碱改善2型糖尿病大鼠糖、脂代谢紊乱

目的研究槟榔碱(arecoline)对2型糖尿病大鼠糖、脂代谢的影响及其降糖机制。方法采用高果糖高脂饲料喂养建立2型糖尿病大鼠模型。实验大鼠随机分7组:普通饲料对照组(control),高果糖高脂饲料模型组(HF),高果糖高脂饲料+不同剂量槟榔碱组(1、5、10、20、50mg·kg-1)。观察槟榔碱对糖尿病大鼠血糖、血脂、肝功能及肝脏组织学的影响,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测槟榔碱对糖异生酶磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)、葡萄糖-6-磷酸酶(G6Pase)和翼螺旋转录因子O1(FoxO1)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ辅激活因子1α(PGC-1α)的mRNA表达的影响。结果与高果糖高脂模型组相比,槟榔碱以剂量依赖的方式降低2型糖尿病大鼠空腹血糖及甘油三脂水平,但是10、20、50mg·kg-1剂量组具有明显肝脏毒性;5mg·kg-1的槟榔碱明显降低糖异生酶PEPCK和G6Pase,转录因子FoxO1及其辅助因子PGC-1α的mRNA的表达。结论低剂量槟榔碱能够改善2型糖尿病大鼠糖脂代谢紊乱,降糖机制为抑制肝脏过度糖异生。

槟榔中槟榔碱和槟榔次碱的毛细管电泳分析

建立了槟榔中槟榔碱和槟榔次碱的毛细管电泳分析方法。考察了电解质溶液pH值变化对分离的影响，在选定实验条件下，槟榔碱和槟榔次碱得到了很好的分离，整个分析过程在10min内完成，其中槟榔碱和槟榔次碱的迁移时间相对标准偏差在0．4％－0．7％之间，峰面积的相对标准偏差在3.4％－3.8％之间。用于实际样品测定，结果满意。

不同品种槟榔果实性状及其槟榔碱含量的比较研究

通过性状比较和差异显著性检验,从形态学与生物化学两个水平研究了海南5个常见槟榔栽培种之间果实性状变化及其槟榔碱含量的变化。结果表明:(1)海南槟榔5个品种间果实性状都不同,其中以品种A、B、D的果实品质达到国家药典规定的一级标准,品种C、E达到二级标准;(2)品种E的叶面积、产量(座果数×单果重)最大,通过差异显著性检验,表明植株的产量与叶面积呈正相关;(3)5个品种中以品种B的槟榔碱含量最大(0.4451％),其次为品种E、C、D、A。其中品种A与B、A与E、B与D、B与E之间差异显著;(4)长、短蒂花品种之间槟榔碱含量差异不显著;(5)槟榔碱含量与其果实性状之间无显著相关性;(6)槟榔碱含量与营养成分间无显著相关性。

高效阳离子交换色谱法测定槟榔中槟榔碱的含量

目的:建立槟榔中槟榔碱的含量测定方法。方法:以高效阳离子交换色谱-紫外检测器分离测定槟榔碱,并考察提取过程中的关键步骤及整个方法学。结果:重复性试验RSD=2.3％(n=6),加样回收率为98.6％(RSD=5.0％,n=6)。结论:本法快速、简便、专属性强、灵敏度高,可应用于控制槟榔及其成方制剂中的槟榔碱含量。

超临界CO_2流体萃取槟榔中的槟榔碱

为了优化超临界CO2萃取槟榔碱的工艺参数,通过三元二次通用旋转组合设计实施试验,考察了萃取温度、萃取压力和萃取时间因素对槟榔碱萃取量的影响。试验结果表明:超临界萃取的温度对槟榔碱萃取量有极显著的影响,萃取时间和压力的影响较小。同时确定了槟榔碱萃取的最佳工艺参数为萃取温度72℃,压力57MPa,时间26min。在此条件下,槟榔碱的萃取量为6143.71μg/g,达到理论最大萃取量的95.3%,所得萃取物中槟榔碱的百分含量为(25.85±0.41)%。