基于网络药理学与分子对接的欧前胡素治疗宫颈癌的作用机制

目的探讨欧前胡素治疗宫颈癌的活性成分和作用机制。方法通过使用网络药理学筛选欧前胡素药用成分和疾病宫颈癌靶点并进行相关的分子对接技术验证。中草药系统药理平台查找欧前胡素的有效成分和作用靶点,采用OMIM和Gen⁃eCards数据库,对宫颈癌相关的目标基因进行交叉筛选,Cytoscape软件分析宫颈癌和欧前胡素的共同靶点,String数据库分析并建构PPI网络分析,Rstudo 4.0软件分析并绘图,DAVID生物信息数据库统计,GO富集、KEGG富集分析。分子对接使用AutoDock分析。结果PPI网络结果显示TERT、ESR1、PTGS2、PGR、PPARG、CA9、ESR2、AR、CASP9、ALPL、CLK1可能为欧前胡素和宫颈癌的核心靶点。GO富集得到26个生物过程,KEGG富集得到6条主要通路,包括Chemical cancer recep⁃tor activation、Estrogen、Breast cancer、VEGF、Prolactin等信号通路。分子对接结果显示LYS-243、ARG-240和GLU-272等化合物能与宫颈癌的核心靶点有良好的结合力。结论欧前胡素可能通过与ESR1、PGR、PTGS2、ESR2、CASP9等结合,在VEGE、雌激素、孕激素等信号通路发挥抗治疗宫颈癌的作用。

欧前胡素调节ERK/MAPK信号通路对肺结核大鼠炎症反应的影响

目的 探讨欧前胡素(Imp)调节细胞外调节蛋白激酶(ERK)/有丝分裂原激活蛋白激酶(MAPK)信号通路对肺结核大鼠炎症反应的影响。方法 64只大鼠随机分为对照组12只及造模组52只,造模组大鼠通过尾部注射结核杆菌方法建立肺结核大鼠模型,之后随机分为模型组、Imp低(Imp-L,25 mg/kg)、中(Imp-M,50 mg/kg)、高剂量(Imp-H,100 mg/kg)组、Imp-H+ERK特异性激活剂(EGF,100 mg/kg Imp+25 mg/kg EGF)组。干预结束后,主动脉采血,ELISA检测各组大鼠血清中白细胞介素-6(IL-6)、γ干扰素(IFN-γ)、环氧化酶-2(COX-2)水平;分离肺组织,HE、Tunel分别检测大鼠肺组织病理学变化及细胞凋亡情况;统计肺组织中结核杆菌菌落数;Western blot检测p-ERK1/2/ERK1/2、p38 MAPK表达水平。结果 与对照组相比,模型组肺组织严重病变,IL-6、IFN-γ、COX-2、细胞凋亡率、结核杆菌菌落数、p-ERK1/2/ERK1/2、p38 MAPK表达均显著增加(P<0.05);与模型组相比,Imp-L组、Imp-M组、Imp-H组病理损伤得到缓解,IL-6、IFN-γ、COX-2、细胞凋亡率、结核杆菌菌落数、p-ERK1/2/ERK1/2、p38 MAPK表达显著降低,以Imp-H组变化最为显著(P<0.05);与Imp-H组相比,Imp-H+EGF组病理损伤进一步加重,IL-6、IFN-γ、COX-2、细胞凋亡率、结核杆菌菌落数、p-ERK1/2/ERK1/2、p38 MAPK表达显著增加(P<0.05)。结论 Imp可降低肺结核炎症反应,与抑制ERK/MAPK信号通路的激活有关。

欧前胡素对高脂型蛋氨酸-胆碱缺乏饲粮诱导的非酒精性脂肪性肝病小鼠血清生化指标和肝脏的影响

本试验旨在研究欧前胡素(IMP)对高脂型蛋氨酸-胆碱缺乏饲粮(MCD-HFD)引起的小鼠非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的影响。将50只9周龄雄性C57BL/6小鼠随机分为5组,每组10只。MCS-LFD组(对照组)饲喂蛋氨酸-胆碱充分低脂饲粮(MCS-LFD),MCD-HFD组(模型组)、MCD-HFD+IMP25组、MCD-HFD+IMP50组和MCD-HFD+IMP100组小鼠饲喂MCD-HFD,连续喂养8周。各组均在喂养4周后对小鼠进行灌胃处理,连续4周。MCD-HFD+IMP25组、MCD-HFD+IMP50组和MCD-HFD+IMP100组小鼠分别灌胃25、50和100 mg/(kg·d)IMP,MCS-LFD组和MCD-HFD组小鼠灌胃等量生理盐水。饲喂8周后处死,取血清检测天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)活性和甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量;通过苏木精-伊红(HE)染色以及Masson染色检测肝脏组织脂肪变性和纤维化;称量肝脏湿重,计算肝脏指数;通过Western blot法检测肝脏中肉碱棕榈酰基转移酶1A(CPT1A)的蛋白表达量。结果显示:1)与MCS-LFD组相比,MCD-HFD组小鼠体重和增重显著降低(P<0.05),肝脏湿重显著增加(P<0.05),肝脏指数极显著升高(P<0.01),血清中AST、ALT活性和TG、TC含量均极显著升高(P<0.01),肝脏中CPT1A的蛋白表达量极显著降低(P<0.01)。2)切片结果显示,与MCS-LFD组相比,MCD-HFD组小鼠肝细胞排列紊乱,发生气球样变性,出现大量脂肪性空泡,且肝细胞周围纤维化。3)与MCD-HFD组相比,MCD-HFD+IMP50组小鼠的体重和增重显著升高(P<0.05),肝脏湿重显著降低(P<0.05),肝脏指数极显著降低(P<0.01),血清AST和ALT活性极显著下降(P<0.01),TG和TC含量显著下降(P<0.05),肝脏中CPT1A的蛋白表达量显著升高(P<0.05)。4)与MCD-HFD组相比,MCD-HFD+IMP100组小鼠体重无显著变化(P>0.05),肝脏湿重和肝脏指数均极显著降低(P<0.01),血清AST、ALT活性和TG、TC含量均极显著下降(P<0.01)。5)与MCD-HFD组相比,IMP处理能够减少肝脏中空泡数量,改善肝细胞气球样变性和纤维化程度,且呈剂量依赖性。由此可见,IMP能够缓解MCD-HFD诱导的NAFLD小鼠的肝脏损伤,改善体内脂肪代谢,缓解脂质沉积,对肝脏具有保护作用。

共载欧前胡素和5-氟尿嘧啶乳膏处方的优化及体外透皮特性研究

目的:基于AHP-CRITIC法赋权的D-最优混料设计优化欧前胡素和5-氟尿嘧啶共载乳膏的制备处方,并考察共载乳膏的体外透皮特性。方法:在预试验的基础上,以稳定性、外观性状及延展性为考察指标。以AHP-CRITIC混合加权法确定各指标的权重并计算综合得分作为评价指标。采用D-最优混料设计法优化欧前胡素和5-氟尿嘧啶共载乳膏基质处方,并进行验证。采用改良Franz扩散池法探究共载乳膏体外透皮特性。结果:按照AHP-CRITIC混合加权法得到稳定性、外观性状及延展性3个指标的权重分别为0.6457、0.2132及0.1411。确定最优处方制备方法并通过验证。体外透皮结果显示,共载乳膏中欧前胡素24 h累积透过量52.95μg,累积透过百分比14.69%,稳态速率为2.48μg·(cm^(2)·h)^(-1),5-氟尿嘧啶24 h累积透过量为261.24μg,累积透过百分比61.35%,稳态速率为11.94μg·(cm^(2)·h)^(-1)。结论:欧前胡素和5-氟尿嘧啶共载乳膏剂具有膏体均匀,稠度适宜及易涂布等特性,具有良好的体外释放和透皮性能,是一种优良的皮肤科外用制剂。

欧前胡素衍生物对COPD肺泡Ⅱ型细胞活性及耐药蛋白的影响

目的探究欧前胡素衍生物(IMP-1)对慢性阻塞性肺疾病(COPD)肺泡Ⅱ(ATⅡ)型细胞活性及耐药蛋白的影响。方法ATⅡ型细胞分为空白组(常规培养基进行培养的生长良好的ATⅡ型细胞)、香烟烟雾提取物(CSE)组(加入2%CSE诱导培养)、IMP-1组(采用10μmol/L的IMP-1干预经CSE诱导的ATⅡ型细胞)。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定ATⅡ型细胞24 h、48 h、72 h增殖率,Hoechst 33342染色法检测ATⅡ型细胞凋亡率,流式细胞分析仪分析各周期细胞占比,软琼脂克隆形成实验检测ATⅡ型细胞克隆数量,Western blot法检测多耐药基因1(MDR1)及多药耐药相关蛋白1(MRP1)蛋白表达水平。结果与空白组比较,CSE组细胞凋亡率、ATⅡ型细胞周期G0/G_(1)期占比升高,在24 h、48 h、72 h细胞的增殖率和S、G_(2)/M期占比降低(P<0.05);与CSE组比较,IMP-1组细胞增殖率和S、G_(2)/M期占比及细胞克隆数量升高,ATⅡ型细胞周期G0/G_(1)期占比和MDR1、MRP1蛋白降低(P<0.05)。结论IMP-1可能通过下调CSE诱导的ATⅡ型细胞的MDR1、MRP1蛋白表达,从而抑制细胞的异常活化,增加其凋亡。

HPLC测定13种白芷中欧前胡素和异欧前胡素的含量

目的 建立一种控制白芷药材质量的方法。方法 采用HPLC法 ,甲醇 -水 (70∶30 )为流动相 ,检测波长 2 5 4nm。结果 欧前胡素在 0 .974～ 3.896 μg范围内线性关系良好 ;异欧前胡素在 0 .36 0～ 2 .6 4 0 μg范围内线性关系良好。精密度及加样回收率良好。结论 该方法准确、迅速、重复性好 。

不同提取方法对白芷中香豆素成分欧前胡素、异欧前胡素的影响及镇痛作用的比较研究

目的比较不同提取方法对白芷中香豆素成分欧前胡素、异欧前胡素及镇痛作用的影响。方法将白芷药材分别用不同方法提取;以欧前胡素、异欧前胡素的含量以及镇痛作用效果为综合指标,综合比较研究。结果对白芷中香豆素成分欧前胡素、异欧前胡素及镇痛作用产生影响的顺序依次为:乙酸乙酯提取>70%乙醇回流提取>95%乙醇回流提取>80%乙醇渗漉法提取>80%乙醇超声提取。结论 5种提取工艺对白芷中香豆素成分欧前胡素、异欧前胡素及镇痛作用产生的影响是不同的,其中以乙酸乙酯提取对欧前胡素、异欧前胡素及镇痛作用的影响最大。

高效液相色谱法同时测定藿香正气水中甘草酸、欧前胡素、异欧前胡素、厚朴酚、和厚朴酚的含量

目的:建立高效液相色谱法测定藿香正气水中甘草酸、欧前胡素、异欧前胡素、厚朴酚、和厚朴酚的含量。方法:采用C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),以0.05%甲酸水溶液(A)-乙腈(B)为流动相,梯度洗脱(10 min,40%B;25 min,45%B;30 min,50%B;60 min,55%B),流速1.0 mL·min^(-1),检测波长254 nm。结果:甘草酸、欧前胡素、异欧前胡素、厚朴酚、和厚朴酚进样量分别在0.094～0.470,0.041～0.205,0.018～0.090,0.235～1.175,0.311～1.555μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r≥0.9998);平均同收率(n=6)分别为98.3%,99.6%,98.6%,98.0%,99.6%。结论:方法准确、灵敏,专属性强,为藿香正气水提供了多指标含量测定的质量控制方法。

光谱法研究欧前胡素及同分异构体与牛血清白蛋白的相互作用

采用紫外光谱法、荧光光谱法和同步荧光光谱法研究了欧前胡素及其同分异构体异欧前胡素与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用。荧光光谱表明,欧前胡素和异欧前胡素对BSA的内源荧光均有显著的猝灭作用,且猝灭机制主要为静态猝灭和非辐射能量转移。308K下欧前胡素和异欧前胡素与BSA的结合常数K分别为1.48×104、1.04×104L·mol-1,结合位点数n分别为0.915、0.742。由热力学数据确定其作用力主要为氢键和范德华力。同步荧光光谱表明,欧前胡素和异欧前胡素与BSA的结合位点更靠近BSA中的色氨酸,引起色氨酸残基附近的疏水性环境减弱,从而使得BSA的构象发生改变。研究表明,香豆素母核上3-甲基-2-丁烯氧基的位置对它们的结合有重要影响,欧前胡素与BSA的作用强于异欧前胡素。

HPLC测定不同产地白芷饮片中欧前胡素和异欧前胡素的含量

[目的]采用HPLC法测定不同产地白芷饮片中欧前胡素和异欧前胡素的含量。[方法]色谱柱:XB-C18分析柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相:乙腈-水,梯度洗脱,流速为1.0mL.min-1。[结果]欧前胡素在0.0552～0.276μg范围内线性关系良好,平均加样回收率为99.5%,RSD为1.3%;异欧前胡素在0.048～0.24μg范围内线性关系良好,平均加样回收率为98.6%,RSD为1.7%。不同产地的白芷饮片中欧前胡素含量在0.046%～0.145%之间,异欧前胡素在0.038%～0.087%之间,两者之和在0.084%～0.232%之间。安徽产最低,浙江杭州产最高。[结论]不同产地白芷饮片中欧前胡素和异欧前胡素的含量存在差异。含量测定方法准确、快速、重复性好,适用于白芷及其制剂的质量控制。

高效液相色谱法测定不同产地白芷中欧前胡素和异欧前胡素含量

目的采用高效液相色谱法（HPLC）同时测定不同产地白芷中欧前胡素和异欧前胡素的含量,为更好的评价不同产地白芷的质量提供依据。方法色谱柱：L ichrospher-C18（250×4.6 mm,5μm）,柱温：30℃,流动相：甲醇-水,梯度洗脱,流速为1.0 mL·min^-1。结果欧前胡素、异欧前胡素进样量分别在0.54-5.40μg、0.244-2.44μg范围内,呈现良好的线性关系。欧前胡素平均回收率99.020%,相对标准偏差（RSD）3.318%;异欧前胡素平均回收率97.528%,RSD 2.904%。欧前胡素平均含量为1.465 mg·g^-1;异欧前胡素平均含量为0.575 mg·g^-1。结论该测定方法简单,快速,重现性好,可作为该药材质量的控制方法。

中药白芷中欧前胡素、异欧前胡素体外经皮渗透特性的串联质谱研究

欧前胡素和异欧前胡素属于6,7-呋喃香豆素类化合物,是中药白芷的主要药效成分。为了考察二者的经皮渗透特性,采用改进型的Franz扩散池,以大鼠离体皮肤作为渗透屏障,以高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS/MS)法测定白芷提取液的经皮渗透液中欧前胡素和异欧前胡素的含量,据此来考察白芷提取液中欧前胡素和异欧前胡素的经皮渗透特性。实验结果表明,欧前胡素和异欧前胡素在48h内,单位面积的累积渗透量分别为116.11μg/cm^2和140.84μg/cm^2,累积渗透百分率分别为37.75%和71.86%。欧前胡素的稳态渗透速率为26.5μg/h·cm^2,其体外经皮渗透符合Higuchi方程。本研究阐明了欧前胡素的体外经皮渗透机制,可为白芷作为外用经皮给药制剂的发展提供实验依据和理论基础。

元胡止痛片中欧前胡素和异欧前胡素含量的HPLC测定

目的:采用 HPLC 法测定元胡止痛片中欧前胡素和异欧前胡素的含量。方法:采用 C_(18)柱(4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-水(70∶30),流速0.8 mL·min^(-1),检测波长254nm。结果:欧前胡素的线性范围为0.15～0.75μg(r=0.9999),平均回收率为99.8%,RSD 为2.0%;异欧前胡素的线性范围为0.10～0.50μg(r=0.9999),平均回收率为98.1%,RSD 为2.4%。结论:本法操作简便,结果准确可靠,重复性好。

欧前胡素、异欧前胡素对人表皮黑素细胞生物活性及迁移的影响

目的探讨欧前胡素、异欧前胡素对黑素细胞生物活性及迁移的影响。方法体外培养人表皮黑素细胞。检测不同浓度的欧前胡素、异欧前胡素对黑素细胞增殖活性、酪氨酸酶活性、黑素合成的影响以及对黑素细胞迁移的影响。结果欧前胡素和异欧前胡素均能促进黑素细胞的增殖和上调酪氨酸酶活性。欧前胡素未显示出对黑素合成的促进作用,而异欧前胡素在20μg/m L浓度时显著促进黑素合成。欧前胡素未发现促进黑素细胞迁移的作用,而异欧前胡素组在20μg/m L浓度和50μg/m L浓度时显著促进黑素细胞的迁移。结论欧前胡素能促进黑素细胞的增殖,上调酪氨酸酶活性。异欧前胡素在正向调节黑素细胞生物活性三方面均有显著作用,并且能显著促进黑素细胞迁移。

相溶解度法测定羟丙基-β-环糊精与欧前胡素和异欧前胡素的超分子包合常数

目的:利用相溶解度曲线法研究不同浓度的羟丙基-β-环糊精(HP-β-CD)与欧前胡素和异欧前胡素的超分子相互作用。方法:配制一系列浓度的HP-β-CD溶液,加入过量的欧前胡素或异欧前胡素,绘制相溶解度图。结果:相溶解度曲线为线性关系,包合模型为AL型。说明欧前胡素和异欧前胡素均与HP-β-CD以1∶1包合,其包合常数分别为214.4、587.2 L/mol。结论:HP-β-CD与欧前胡素和异欧前胡素形成的超分子化合物均有较好的增溶作用,且对异欧前胡素的增溶作用优于欧前胡素。

高效液相色谱法测定白芷中欧前胡素和异欧前胡素含量

目的采用高效液相色谱（HPLC）法测定并比较不同产地白芷饮片中欧前胡素和异欧前胡素的含量。方法色谱柱：Diamonsil C18色谱柱（150 mm×4.6 mm,5μm）,流动相∶乙腈-水（65∶35）,检测波长247 nm,流速1.0mL/min。结果欧前胡素在5~50 mg/L范围内线性关系良好,平均加样回收率为99.8%,RSD为1.22%;异欧前胡素在3~30 mg/L范围内线性关系良好,平均加样回收率为101.2%,RSD为1.45%。不同产地的白芷饮片中欧前胡素含量为0.056%~0.143%,异欧前胡素含量为0.031%~0.072%,两者之和为0.087%~0.214%。结论不同产地白芷饮片中欧前胡素和异欧前胡素的含量存在差异。含量测定方法准确、快速、重复性好,适用于白芷的质量控制。

HPLC测定头风痛胶囊中欧前胡素和异欧前胡素的含量

目的:建立高效液相色谱法同时测定头风痛胶囊中欧前胡素和异欧前胡素含量。方法:色谱柱为 Eeonosphere C_(18)柱(5μm,4.6 mm×250 mm);流动相为甲醇-水(50:50);流速:1 mL·min^(-1);柱温:室温;检测波长:248 nm;进样量:10 μL。结果:头风痛胶囊中欧前胡素和异欧前胡素进样量分别在0.04～0.4μg和0.04～0.45μg范围内与峰面积呈线性关系;平均回收率分别为98.8%和97.1%;RSD 分别为1.3%和2.0%。结论:该方法简便、准确,可作为头风痛胶囊中欧前胡素、异欧前胡素的含量测定方法。

HPLC测定痛可停胶囊中欧前胡素和异欧前胡素含量

目的 :建立高效液相色谱法测定痛可停胶囊 (白芷、地龙等 )中欧前胡素和异欧前胡素的含量的方法。方法 :ODSC18色谱柱。乙腈 水 (6 0∶4 0 )为流动相 ;流速 :1mL·min-1;柱温 :4 0℃ ;检测波长 2 4 5nm。结果 :本法可测定欧前胡素和异欧前胡素的含量。其分别在 6 5 μg～ 32 5 μg和 5 0 μg～ 2 5 0 μg范围内与峰面积成线性关系。平均回收率分别为 98.3%和98.7% ;RSD分别为 1.73%和 1.6 5 % ,结论 :该方法简便、准确 ,可作为痛可停胶囊的含量测定方法。

欧前胡素与异欧前胡素的药理学研究进展

欧前胡素（imperatorin）和异欧前胡素（isoimpemtorin）属于6,7-呋喃香豆素类,广泛分布于植物界,尤其伞形科常用中药如白芷、独活、前胡、羌活、北沙参等含量丰富,而且是其主要药理效应成分。香豆素类化合物具有较高的应用价值和较多的生物学活性，到目前为止国内外的专家学者一直重视它的开发和利用。本文就近年来有关欧前胡素与异欧前胡素的研究进行整理和分析，着重阐述其药效学和药动学特性。

毛细管电泳法测定通窍鼻炎片中欧前胡素和异欧前胡素的含量

目的：建立毛细管电泳法同时测定通窍鼻炎片中欧前胡素和异欧前胡素含量的方法。方法：采用未涂层弹性融硅石英毛细管柱55 cm×75μm ID,有效长度47 cm;以20 mmol/L NaH2PO4＋100 mmol/L SDS＋80%甲酰胺溶液（pH7.12）为运行缓冲液;分离电压15 kV;重力进样5s（高度15 cm）;检测波长254 nm。结果：以盐酸小檗碱为内标,欧前胡素、异欧前胡素的线性范围分别为8.0～40.0μg/ml（r=0.9987）、4.0～20.0μg/ml（r=0.9990）,平均回收率分别为101.0%、101.8%。结论：该法简便、快速、准确可靠,可用于通窍鼻炎片的质量控制研究。