基于适配体-杂交链式反应比色检测生鲜牛乳中四环素类抗生素

)以特异性识别四环素类抗生素(TCs)的广谱型适配体为识别元件,结合杂交链式反应(HCR)信号放大策略,提出了一种TCs多残留比色检测方法,并优化了检测条件和进行了方法学考察。取40 nmol·L^(-1)生物素化检测探针(bio-DP)溶液加入到包被有亲和素的酶标板中,室温孵育后加入牛血清白蛋白(BSA)溶液,封闭反应1 h。加入生鲜牛乳样品稀释液,室温孵育20 min,如果样品中含有TCs,TCs与bio-DP的适配体序列结合,其发夹结构被打开。加入200 nmol·L^(-1)生物素化发夹DNA1(bio-H1)溶液和200 nmol·L^(-1)生物素化发夹DNA2(bio-H2)溶液,室温下进行HCR 40 min,从而形成具有多个重复单元的双链DNA(dsDNA)纳米线。加入辣根过氧化物酶(HRP)标记链霉亲和素(SA-HRP),室温孵育标记dsDNA。加入显色剂[含3,3′,5,5′-四甲基联苯胺(TMB)],HRP催化TMB生成蓝色物质,显色5~8 min后终止反应,在酶标仪中于450 nm测量上述体系的吸光度。结果显示,bio-DP对四环素、土霉素、金霉素和多西环素具有高特异性,和卡那霉素、庆大霉素、氨苄青霉素、泰乐菌素、磺胺嘧啶和恩诺沙星等抗生素无交叉反应。四环素、土霉素、金霉素和多西环素的质量浓度总和在0.8~100μg·L^(-1)内与对应的吸光度总和呈线性关系,检出限(3s/k)为0.18μg·L^(-1)。对生鲜牛乳样品进行加标回收试验,TCs回收率为86.4%~106%,测定值的相对标准偏差(n=3)为2.5%~7.1%。方法应用于生鲜牛乳样品的分析,检测结果与国家标准方法GB 31658.6-2021差异不显著(P>0.05),检出的TCs总量也均未超标(GB 31650-2019)。与文献报道的其他方法相比,上述方法兼具简单、快速、检出限低、准确度高等优点,适用于食品中四环素类抗生素多残留的快速检测。

MOFs衍生的Fe-N-C纳米酶用于对苯二酚的比色检测

【目的】建立一种方便的检测对苯二酚(hydroquinone,HQ)的方法。【方法】采用化学掺杂法合成Fe-ZIF-8前驱体,对前驱体热解处理,得到Fe-N-C纳米酶粉末;通过活性对比、自由基捕获和动力学实验,系统探究Fe-N-C的类酶活性;依据HQ具有还原性强、可将3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)显色体系还原为无色状态的特性,构建比色法检测HQ的传感平台。【结果】Fe-N-C表现出优异的过氧化物酶样活性,可以快速将显色底物TMB催化氧化为蓝色;Fe-N_(x)是Fe-N-C主要的活性位点,羟基自由基(•OH)、超氧自由基(O_(2)^(•−))和单线态氧(^(1)O_(2))是起主要作用的活性氧;Fe-N-C纳米酶对TMB的亲和力优于天然辣根过氧化物酶,该方法检测HQ的线性范围为0~33μmol/L,检测限为0.356μmol/L,同时具有良好的抗干扰能力。【结论】构建一种用于环境分析的金属有机骨架化合物(metal organic framework,MOFs)衍生物纳米酶,可实现HQ的简单和灵敏检测。

基于Fe_(3)O_(4)磁分子印迹纳米粒子比色检测蔬菜中6-苄氨基腺嘌呤残留

[目的]实现蔬菜中6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)残留的快速、灵敏、可视化检测。[方法]基于Fe_(3)O_(4)磁分子印迹纳米粒子(Fe_(3)O_(4)MMIP NPs)的类过氧化物酶活性和特异识别性,构建了一种简单、快速、高选择性检测6-BA的比色方法,并用于蔬菜中6-BA残留检测。[结果]在pH 4.0、H 2O 2浓度0.02 mol/L、TMB浓度0.02 mol/L和反应时间5 min时,Fe_(3)O_(4)MMIP NPs表现出最佳的类过氧化物酶催化活性。6-BA在1~300 ng/mL质量浓度范围内与空白和样品吸光度值的差值呈良好的线性关系,检测限为0.697 ng/mL。该方法被成功应用于蔬菜(黄瓜、西红柿、黄豆芽、绿豆芽)中6-BA残留检测,回收率为83.47%~106.76%,相对标准差为0.37%~5.66%。此外,4℃下,Fe_(3)O_(4)MMIP NPs贮存60 d后仍能保持良好的催化活性。[结论]基于Fe_(3)O_(4)MMIP NPs检测6-BA的比色方法具有简便、快速、经济等优势,能够用于蔬菜中6-BA残留检测,具备一定的可靠性和实用性。

中国科研人员创新比色检测方法用于水环境安全检测

中国科学院长春应用化学研究所电分析化学国家重点实验室有序膜课题组提出基于新型显色试剂的水质生物毒性比色检测方法,可在水环境安全检测上发挥重要作用。课题组成员、副研究员余登斌介绍,快速、简便、灵敏的水质生物毒性检测方法的开发,对于保障人们用水安全和身体健康具有重要意义。国内外现有技术一般采用斑马鱼、发光细菌、产电细菌等生物检测水质毒性,但是这些技术普遍存在操作繁琐、价格昂贵、检测结果肉眼不可见等问题,导致相关检测产品难以普及。

基于Cu类过氧化氢酶活性的增强应用于比色检测肌酸酐

肌酸酐的浓度通常被用作评估肾功能的重要指标,准确检测肌酸酐对于早期诊断和治疗肾病具有重要意义。本文利用肌酸酐明显促进Cu^(2+)类过氧化氢酶催化3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)显色增强,从而建立对肌酸酐的定量检测方法。通过优化反应体系中Cu^(2+)浓度、反应时间、H_(2)O_(2)浓度、TMB浓度、pH,得到最优检测条件。肌酸酐浓度在0~4.8×10^(-4)mol/L时,其与吸光度值具有良好的线性关系A_(655)=0.004 45c_(Cr)+0.159 95(R^(2)=0.999 58),最低检测限为13.4μmol/L。因此该检测肌酸酐方法具有操作简单、灵敏性高的特点和良好的选择性的优点。

室温驱动腐植酸钠基碳纳米簇用于荧光比色检测银离子和温度传感

基于氢键结合自组装策略,以富含羟基的高生物相容性煤源腐植酸钠大分子和抗坏血酸为原料,通过绿色经济的室温方法构建了一种低毒水溶性青色荧光碳纳米簇(HAN-CNCs).研究发现,在p H=5.0条件下,Ag^(+)可与HAN-CNCs表面的C=N/C=O基团配位结合,从而诱导HAN-CNCs发生荧光静态猝灭,实现对Ag^(+)较宽线性范围(5.0~300μmol/L)和较低检出限(27.5 nmol/L)的特异灵敏检测.进一步观察发现,Ag^(+)与HAN-CNCs相互作用后,HAN-CNCs在日光灯下由淡黄色变为灰蓝色,在紫外灯下由青色荧光变为蓝紫色,基于此,将HAN-CNCs制作成便携式纸基传感器,通过手机分析测试条颜色的G/B值,实现了Ag^(+)的视觉比色荧光检测.此外,HAN-CNCs在20~85℃范围内表现出优异的可逆热响应性能,有望作为一种温度传感器.荧光显微镜成像测试发现,HAN-CNCs在选择性检测活细胞中的Ag^(+)时表现出低生物毒性和优异的细胞渗透性,表明该传感系统可应用于评估人体潜在风险和健康安全.

基于部分碳化NH_(2)-MIL-101(Fe)的水中四环素类抗生素比色检测方法研究

四环素类抗生素(Tetracyclines,TCs)在生产中的滥用会导致其在环境中的残留,极大提高了人体感染疾病的风险,并且目前仍缺乏快速、有效的检测手段。基于TCs在水中易与Fe^(2+)、Fe^(3+)产生强烈络合的特性,本文制备了一种部分碳化NH_(2)-MIL-101(Fe)用于水中TCs快速检测的比色检测方法。经惰性气氛煅烧法对NH_(2)-MIL-101(Fe)进行改性,制备了两种改性材料,并对两种改性材料和前体的表面形貌及化学结构进行了表征。对比了NH_(2)-MIL-101(Fe)和350、450℃下煅烧的改性材料与土霉素间的络合效果,实验结果表明,3种材料均可与土霉素络合,350℃煅烧得到的部分碳化材料具有最佳催化效果,并显示出良好的稳定性和分散性。在优化的检测条件下(催化剂投加量12μg·mL^(-1)、H_(2)O_(2)浓度6 mmol·L^(-1)、TMB浓度5 mmol·L^(-1)、pH=5.5、反应时间40 min),oxTMB在652 nm处的吸光度值与土霉素浓度之间呈现线性关系,线性范围为0.08~50μmol·L^(-1)(R^(2)=0.9822)。本文设计的比色方法可实现实际水体中TCs含量的灵敏、特异性检测,为完善水体安全监管体系提供了一定的理论与技术支撑。

Fe_(3)O_(4)@COOH纳米酶比色检测食用纯植物油的过氧化值

利用Fe_(3)O_(4)@COOH纳米酶的类过氧化物酶催化活性,建立比色法检测食用植物油过氧化值(peroxide value,POV)的方法。在0~0.3 g/100 g的POV范围内,5种食用纯植物油(玉米油、花生油、葵花籽油、菜籽油、大豆油)的POV与其吸光度呈现良好的线性关系。该方法能准确检测出3种不同方式(紫外灯照射、烘箱加热、自然放置)氧化处理的食用纯植物油的POV。应用所建立的比色法和国家标准方法,测定5种食用纯植物油(25个样品)的POV,两种方法测定的POV差值均小于0.05,相对标准偏差分别为6.13%、5.84%、6.82%、3.62%、5.75%,表明所构建的比色法对食用纯植物油POV测定具有良好的实用性。本研究为检测食用纯植物油的POV提供了一种快速便捷的方法。

基于CRISPR/Cas12a系统的比色检测方法探究

基于Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats/Cas12a(CRISPR/Cas12a)系统的特征基因识别检测技术,已经可以实现DNA的普适性检测。同时,基于CRISPR/Cas12a系统的反式酶切活性,可以降解(有目标DNA)或者不降解(无目标DNA)检测体系中添加的指示探针,设计一对通用的DNA纳米金探针进行裸眼可视化DNA比色检测。整个检测过程与结果读出不依赖于实时定量荧光PCR仪、恒温培养箱等大型仪器,整个流程可以在1小时之内完成。

基于酶抑制法的农药残留快速比色检测

基于有机磷与氨基甲酸酯类农药对乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)的抑制作用,以吲哚酚乙酸酯为酶促水解反应的显色底物,制备了一种抛弃型农药残留快速检测酶片;通过优化试验,用物理吸附法将AChE固定到尼龙膜Hybond N+膜上,经真空冷冻干燥后,酶活回收率可达27.3%;该酶片显色结果为蓝绿色,通过比较显色强度的变化,酶片对农药标样氧乐果、毒死蜱、甲萘威与抗蚜威的检出限分别为1、0.05、1.5与0.8μg/mL,均达到食品中的最大残留限量标准;将研制的酶片用于葡萄汁与小白菜样品的检测结果证实,该酶片具有灵敏度高、准确度高、重现性好等优点,可用于农产品中有机磷与氨基甲酸酯类农药残留的快速定性筛检。

基于G-四联体的纳米探针比色检测铅离子

基于纳米探针和G-四联体建立了简便快速检测铅离子的方法.纳米探针采用金纳米粒子自组装修饰富G寡核苷酸制得,在铅离子存在下,纳米探针上的富G寡核苷酸形成G-四联体,导致纳米探针凝聚变色.在优化条件下,比色检测铅离子的线性范围为48～480 nmol/L,检出限为20 nmol/L;大多数金属离子无明显干扰,而有明显干扰的汞离子可采用与之特异结合的寡核苷酸有效消除.将该法成功用于环境水样中铅离子的检测,重现性(RSD<3.0%)与回收率(98.4%～101.5%)良好.

基于银/铂纳米模拟酶表面修饰的铜离子比色检测方法研究

通过对银/铂纳米簇(Ag/Pt NCs)的表面修饰调控其催化活性,建立了一种高灵敏的比色法检测Cu^(2+)。巯基丙酸能够抑制Ag/Pt NCs的催化活性,而巯基丙酸与Cu^(2+)作用后,将导致上述抑制作用减弱。基于上述原理,通过测量Ag/Pt NCs催化TMB-H_2O_2反应产生的显色信号,可以实现Cu^(2+)的比色检测。本方法检测Cu^(2+)的线性范围为10~100 nmol/L,检出限(3σ)为5.0 nmol/L。将本方法应用于实际水样中Cu^(2+)的检测,结果表明,本方法具有操作简单、成本低、灵敏度高、特异性好等优点。

磺化杯[6]芳烃修饰的金纳米粒的合成及其对多环芳烃的比色检测

通过偶联修饰的方法合成了水溶性磺化杯[6]芳烃修饰的金纳米粒,并研了其对多环芳烃的比色检测.结果表明,磺化杯[6]芳烃修饰的金纳米粒对蒽具有良好的识别选择性.该比色探针对蒽的检测限可达到2×10-6mol/L.这种比色传感器能够实现现场原位检测.

基于偶氮水杨醛酰腙的氰根比色检测探针的合成及性能

设计合成了一种基于酚羟基和氨基的酰腙类探针分子,利用紫外-可见吸收光谱和核磁滴定考察了其对F-,Cl-,Br-,I-,CH3COO-,H2PO4-,HSO4-,ClO4-,CN-,SCN-,SO24-和NO3-等阴离子的识别作用.结果表明,当加入CN-离子时主体溶液颜色由无色变为黄色,而加入其它离子时主体溶液颜色不变,说明该探针在DMSO/H2O(体积比5∶5)体系中能选择性裸眼比色检测CN-.核磁滴定及质谱数据表明,该探针与CN-以1∶1化学计量比结合,该过程通过亲核加成方式完成.

采用纳米金和双链探针比色检测单碱基突变

将链置换的高度特异性与纳米金凝聚变色的光学特性相结合,设计了一种新型的单碱基突变比色检测方法。本方法直接采用纳米金作为比色报告基团,以两个末端均带有巯基的双链DNA为特异捕获探针,利用互补序列和单碱基突变序列对双链探针置换能力的差异,实现了对单碱基突变的检测。本检测方法直观、快速、简便、成本低,pmol级的样品无需仪器就可以观察到颜色的变化。

非标记金纳米粒子快速比色检测L-半胱氨酸的研究

建立了一种基于非标记金纳米粒子快速比色检测L-半胱氨酸的方法。采用废弃葡萄皮的提取物制备金纳米粒子,并对其表观形貌、稳定性和催化特性进行表征。再利用所制备的金纳米粒子比色检测不同浓度的L-半胱氨酸,并构建工作曲线。结果表明,葡萄皮提取物所制备金纳米粒子粒径均匀,且具有良好的稳定性和催化活性;在0. 01~1μmol/L和5~100μmol/L范围内半胱氨酸浓度与吸光度比值(A539/A863)具有较为明显的线性关系,检出限为0.837μg/L(S/N)。该类型金纳米粒子比色检测体系对半胱氨酸具有良好的选择性和灵敏度。

硫普罗宁修饰纳米金对铜的比色检测研究

以纳米金粒子为载体,将硫普罗宁修饰至其表面形成硫普罗宁修饰的纳米金溶液(MPG-Au NPs),实现对铜离子的比色检测。系统研究了p H和时间等因素对比色检测的影响,考察了该比色传感器检测铜的灵敏度与线性范围,探究了环境中常见离子对体系的干扰。结果表明,在p H5.0时,响应时间为30 min时,纳米粒子MPG-Au NPs对Cu2+的检出限0.97μmol·L-1,K+,Na+,Sr2+,Cs+,Hg2+,Co2+,Ni2+等离子的存在对Cu2+的比色检测无影响。

纳米金反团聚的水中汞离子比色检测

以纳米金胶体作为检测工具,可以建立一种简单、快捷、灵敏度高的水中汞离子检测方法.其做法是:使用柠檬酸钠为还原剂合成酒红色的纳米金胶体,加入4’4联吡啶(Dpy)将纳米金颗粒聚集在一起,纳米金胶体的颜色会变化为蓝黑色.若水中没有汞离子,纳米金颗粒会保持团聚状态,颜色不变;若水中含有汞离子,则纳米金颗粒会发生反团聚现象,再次分散于水中,混合溶液的颜色变回酒红色.通过观察混合溶液的颜色变化,来判断水中是否含有汞离子,实现水中汞离子的检测.同时对不同浓度汞离子样品的紫外-可见吸收光谱进行分析,可以看出吸光度比值(A520/A640)与汞离子浓度之间呈现良好的线性度,并计算得到本方法的水中汞离子检测极限为54nmol/L(3δ).通过汞离子样品与其他多个离子样品的对比实验,证明本测试方法对汞离子的高选择性.本方法可用于水中汞离子的快速实时检测.

基于氯化血红素-无花果蛋白酶复合物比色检测抗坏血酸的研究

目的 利用氯化血红素-无花果蛋白酶复合物(hemin-ficin)模拟过氧化物酶活性构建抗坏血酸快速比色检测体系。方法 通过单因素实验优化H_(2)O_(2)浓度、hemin-ficin浓度和孵育时间3个因素对hemin-ficin复合物比色检测体系的影响,利用正交实验设计优化获得最佳检测条件。同时对体系的灵敏度、抗干扰性和稳定性进行评估。结果 hemin-ficin复合物催化体系的最优条件为H_(2)O_(2)浓度:0.025 mol/L、hemin-ficin浓度2.0 mmol/L和孵育时间10s。抗坏血酸浓度在0.005~0.500mmol/L范围时,吸光度差值与抗坏血酸浓度的工作曲线具有良好的线性关系(r^(2)=0.9912),检出限为0.067μmol/L,实际样品加标回收率为97.45%~102.11%,相对标准偏差低于2.45%。结论 基于hemin-ficin复合物模拟酶活性所建立的抗坏血酸比色检测体系,具有极高的灵敏度、良好的抗干扰性和稳定性,该研究成果将为抗坏血酸等食品成分的分析检测提供一条新的思路。

银纳米的制备及其对L-谷氨酸的比色检测

本文利用三羟甲基氨基甲烷做还原剂和保护剂,通过调节三羟甲基氨基甲烷和Na OH的配比,改变反应温度,成功制备了稳定的银纳米粒子。所制备的银纳米粒径范围为5-40 nm,可以成功地用于比色检测L-谷氨酸。