单抗药物还原毛细管电泳法方法学验证研究

目的对还原十二烷基硫酸钠毛细管电泳法(reduced capillary electrophoresis-sodium dodecyl sulfate,rCE-SDS)用于单抗药物的纯度检测进行方法学验证,为业界此类质量控制方法的方法学验证提供参考。方法按照2020版《中华人民共和国药典》通则<3127>的方法检测样品,对该方法的专属性、线性、准确度、精密度、范围、定量限、耐用性进行验证。结果本方法专属性较好;线性拟合结果良好(均R^(2)>0.99)。各分析用样品主峰的准确性结果满足98%~102%,总杂质和非糖基化重链(non-glycosylated heavy chain,NGHC)的准确性结果均满足70%~130%;重复性和中间精密度的RSD均≤15%;主峰的范围为≥92.4%,总杂质范围为0.36%~7.6%,NGHC的范围为0.12%~3.8%;总杂质和NGHC的定量限分别为0.36%和0.12%。结论本方法验证各项指标均符合预设可接受标准,且该研究可以为此类方法学验证的科学性和合理性设计提供参考。

单抗药物非还原毛细管电泳法方法学验证研究

目的 对单抗药物的非还原十二烷基硫酸钠毛细管电泳法(nrCE-SDS)进行方法学验证,为业界相应质控方法的方法学验证提供参考。方法 按照2020版《中华人民共和国药典》三部通则3127单抗分子大小变异体测定法检测。2名实验员分别进行3 d实验,每天采用相同的检测方法分析受试样品,并进行全面的方法学验证。结果 该方法专属性良好,各分析用样品主峰的准确性为98%~102%,总片段和特定杂质的准确性为70%~130%;重复性和中间精密度的RSD≤15%;主峰≥89.9%,总片段范围为0.66%~10.10%,特定杂质的范围为0.36%~4.80%;本方法的定量限为0.33%。结论 对方法的准确性、精密度、线性、范围、定量限和专属性进行了全面的验证研究,为相应方法学验证的科学性和合理性设计提供了参考。

全柱成像等电聚焦毛细管电泳法对双特异性Fc融合蛋白的电荷异质性分析

建立全柱成像等电聚焦毛细管电泳(WCID-CIEF)分析双特异性Fc融合蛋白电荷异质性方法。方法 通过非还原毛细管电泳法观察酶处理前后峰型的变化,初步确认了该Fc融合蛋白电荷异质性唾液酸相关;结合唾液酸酶酶切和方法优化手段,建立了此融合蛋白的WCID-CIEF分析平台;通过液相质谱法(LC-MS)鉴定了唾液酸相关N-糖构型;通过液相荧光法(LC-FLR)测定了唾液酸的含量。结果 经唾液酸酶酶切和方法优化后,此方法在2.5~7.5 mgmL-1浓度范围内线性良好,R2=0.998,回收率在96.3%~104.6%之间,准确性、专属性和耐用性均满足要求。结论 结合酶处理和方法优化手段,WCID-CIEF可较好地分析融合蛋白的电荷异质性,提供了一种简单、有效的融合蛋白质控手段,并可应用于产品放行及稳定性监测。

中药菟丝子的高效毛细管电泳法鉴别

提取菟丝子种子植物蛋白用高效毛细管电泳法进行生药鉴定。实验表明，同属不同种菟丝子的碱溶性或酸溶性蛋白在成分和含量上均存在显著差异。根据其种子植物蛋白的电泳谱图，可有效地鉴别菟丝子的来源。运用此法对１３个生药样品进行了鉴定。

毛细管电泳法测定青菜中敌百虫的残留量

建立了一种测定青菜中有机磷农药敌百虫的方法,样品以二氯甲烷提取,活性炭脱叶绿素,毛细管电泳法检测,最低检出限为2×10-6mol L,敌百虫浓度在5×10-5～2×10-6mol L之间,呈现良好的线性关系,r=0.9914,样品加标回收率为90%～102%。

高效毛细管电泳法同时测定红花中腺苷、芦丁和槲皮素的含量

目的 用高效毛细管电泳法对红花中的有效成分腺苷、槲皮素和芦丁同时进行含量测定。方法 采用熔融石英毛细管柱 (66 5cm× 5 0 μmID ,有效长度 5 8cm)作为分离通道 ;以 5 0mmol·L- 1 硼砂其中含 18%甲醇的溶液 (pH9 7)为运行缓冲液 ;运行电压 :2 4kV ;毛细管柱温 :2 0℃ ;检测波长 :2 10nm。结果 以利福平为内标 ,腺苷、芦丁和槲皮素分别在 10～ 160mg·L- 1 ,10 0～ 2 0 0 0mg·L- 1 和 10 0～ 160 0mg·L- 1 线性关系良好 (r>0 998) ;平均回收率分别为98 5 %～ 10 0 5 % ,96 9%～ 99 5 %和 99 1%～ 99 5 % ;RSD分别为 6 5 % ,5 2 %和 5 6% (n =5 )。结论 此法操作简便快速 ,回收率及重现性好 ,可作为红花质量控制的方法。

分子烙印固相萃取-毛细管电泳法分析大米中神经性毒剂降解产物

采用自制分子烙印聚合物固相萃取柱来分离净化实际样品大米中的神经性毒剂降解产物，并用毛细管电泳法进行检测，方法简便，准确、灵敏度高。在０．２～５．０μｇ／ｇ浓度范围内，大米样品中５种神经性毒剂降解产物的标准回归曲线线性关系良好，检出限为０．０５ μｇ／ｇ，方法的ＲＳＤ小于６．２０％。

毛细管电泳法测定双氢青蒿素的含量

使用自行设计的毛细管电泳柱端安培检测系统,在乙醇为有机添加剂的条件测定了双氢青蒿素。研 究了工作电极、缓冲溶液浓度及其pH、有机溶剂的选择及其含量、检测电位和分离高压对测定的影响。结果 表明:选用Ag工作电极,检测电位为-0.6V,在20mmol/L硼砂,pH为9的运行介质的优化条件下,双氢青蒿 素在4min左右出峰,在1～200mg/L范围内,峰高与浓度呈良好的线性关系,检出限为0.05mg/L。

十大功劳属部分植物茎中生物碱的高效毛细管电泳法测定

目的 :对十大功劳属植物中 3种生物碱的含量进行测定 ,为其内在质量的评价提供科学依据。方法 :运用毛细管区带电泳 (CZE)模式 ,以马钱子碱为内标化合物 ,测定了小檗碱、巴马亭和药根碱的含量。背景缓冲溶液为0 1mol·L-1磷酸缓冲液 (pH 7 0 )与甲醇 ( 2∶1)的混合体系。线性范围 :盐酸小檗碱为 4 9～ 4 98 6μg·mL-1(γ =0 9990 ) ;盐酸巴马亭为 5 0～ 5 0 4 9μg·mL-1(γ =0 9996) ;盐酸药根碱为 5 1～ 5 0 5 8μg·mL-1(γ =0 9984 )。回收率 :盐酸小檗碱为 96 0 0 %～ 10 1 66% ;盐酸巴马亭为 10 0 15 %～ 10 2 97% ;盐酸药根碱为 96 68%～ 10 2 4 4%。结果 :不同品种、不同产地、不同采集时间的植物中的生物碱含量均有较大差别。结论 :高效毛细管电泳法是中草药质量控制的一种简便、快速、有效的方法。十大功劳属多种植物生物碱含量较高 。

高效毛细管电泳法同时测定减肥类功能食品中7种违禁成分

建立了同时测定减肥类功能食品中违禁成分芬氟拉明、伪麻黄碱、去甲伪麻黄碱、安非拉酮、两布曲明、两地那非和十的宁的高效毛细管电泳分析方法。以20mmol／L硼砂10mmol／LSDS-5％乙腈溶液（pH9．0）为运行缓冲液，在25℃，17kV条件下测定，检测波长为195nm。各待测物线性范围上限均为100mg／L，线性相关系数均大于0．998，相对标准偏差为4．5％～7．9％（n=7）；平均加标回收率为79．6％～112．0％；检出限（S／N3）为0．16～0．65mg／L。本方法简便快速、灵敏准确、分析成本低，已成功应用于功能食品中上述减肥类违禁添加成分的测定。

高效毛细管电泳法测定石榴皮中鞣花酸的含量

目的:建立以高效毛细管电泳法测定石榴皮提取物中鞣花酸含量的方法.方法:毛细管柱为未涂层毛细管,缓冲液为30mmol/L氨基丁三醇-30mmol/L磷酸二氢钾(20:9),分离电压为20kV,检测波长为254nm,柱温为25℃,进样条件为25mbar、5.0s.结果:鞣花酸检测浓度在0.0 398～0.3 184mg/ml范围内与峰面积积分值线性关系良好(r=0.9 993);平均加样回收率为97.42%(RSD=1.84%).结论:本方法准确、可靠,可用于石榴皮药材的质量控制.

毛细管电泳法定量分析贝母中几种生物碱

目的 建立毛细管电泳法 (CE)测定贝母中浙贝乙素、西贝素、西贝苷等生物碱的含量测定方法。方法 以毛细管区带电泳模式 ,用内标法分析了 9种贝母药材中上述生物碱的含量。结果 3种生物碱分离完全 ,并有较好的回收率和重现性。结论 本法快速、简便、高效 。

榧子蛋白高效毛细管电泳法鉴别

对国产榧属植物种子进行蛋白电泳鉴别。采用高效毛细管电泳法对榧属植物种子蛋白进行分析。榧属植物种子蛋白高效毛细管电泳谱图有明显的种间差异。高效毛细管电泳可作为中药榧子的鉴别方法。

高效毛细管电泳法测定唐古特大黄多糖中单糖的组成

目的测定唐古特大黄多糖中单糖的组成及其物质的量之比。方法将大黄多糖样品用2 mol.L-1的硫酸溶液降解成单糖后,用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮衍生化成单糖,应用毛细管区带电泳法测定各单糖。熔融石英毛细管柱(50μm×70 cm,有效长度60 cm);二极管阵列检测器;运行缓冲液为硼砂水溶液(浓度为150 mmol.L-1、pH值为10.8);分离电压10 kV;柱温25℃;0.5 Pa压力下进样,进样时间5 s。结果唐古特大黄多糖由木糖、阿拉伯糖、葡萄糖、鼠李糖、半乳糖、甘露糖、葡糖醛酸、半乳糖醛酸等8种单糖组成,其物质的量之比为1.00∶23.27∶15.93∶2.95∶1.34∶49.07∶2.62∶4.31。结论该方法具有简单、快速、分离效率高等特点,可用于唐古特大黄多糖中单糖组成的测定。

高效毛细管电泳法测定红景天中没食子酸的含量

藏药红景天有高原人参之称,具有滋补强壮、耐缺氧、抗疲劳、抗辐射、抗病毒、抗癌及适应原样作用,不但有类似人参、刺五加的滋补强壮作用,而且在某些方面更优于这两种药物[1].已报道的红景天主要成分为红景天苷及其苷元酪醇、没食子酸及其苷类、山柰酚及其苷类、草质素及其苷类[2],没食子酸具有较强的抗菌、抗病毒和抗肿瘤作用[3].目前,HPLC法[4]和TLCS法[5]测定中药中没食子酸的含量已有报道,但红景天中没食子酸的含量测定尚未见报道.本实验用高效毛细管电泳法(HPCE法)测定了红景天中没食子酸的含量,该法快速、灵敏,结果准确、可靠.可用于红景天药材及其制剂中没食子酸的含量分析.

高效毛细管电泳法测定香丹注射液中丹参素和原儿茶醛的含量

目的 测定香丹注射液中丹参素和原儿茶醛的含量。方法 以苯甲酸为内标 ,用高效毛细管电泳法 (HPCE)测定了香丹注射液中丹参素和原儿茶醛的含量。电泳分离条件 :未涂层毛细管 2 7cm× 75 μm ,运行缓冲液 2 0mmol/L硼砂 3mmol/Lβ CD(pH 9.0 ) ,高压进样 5s ,操作电压 6kV(+ )→ (- ) ,柱上检测 2 0 9nm ,柱温2 5℃。结果 丹参素的线性范围为 4.0 6 48.72 μg/ml,相关系数为 0 .9994;原儿茶醛的线性范围为 3.5 943.0 8μg/ml,相关系数为 0 .9978。结论 HPCE可以用于香丹注射液的定量分析。

高效毛细管电泳法测定姜黄中姜黄素类化合物

用高效毛细管电泳法测定姜黄中姜黄素类化合物的含量 ;姜黄素类化合物毛细管电泳谱图的峰面积和浓度具有良好的线性关系 ;方法的精密度RSD为1.12 %～2.47 % (n=5) ,平均回收率为97.5 %～98.1%。

高效毛细管电泳法用于不同居群大青叶药材的鉴别

以高效毛细管电泳法对不同居群大青叶药材的理化特征差异进行研究 ,结果表明异地栽培的不同居群大青叶药材酸性提取部位的化学成分及含量有显著差别 ,依据电泳图谱中特征峰的迁移时间和峰面积 ,能有效地鉴别不同居群大青叶药材。

高效毛细管电泳法分离测定黄芩复方制剂中的黄芩甙

建立了清开灵口服液和双黄连口服液中黄芩甙定量分析的高效毛细管电泳方法。选择毛细管区带电泳分离模式 ,以 4 0 m mol/ L硼砂缓冲液 ( p H9.0 )为电泳介质 ,未涂层石英毛细管 ( 50 μm i.d.× 39.5cm,有效分离长度 34 .8cm )为分离通道 ,对硝基苯甲酸为内标 ,压力进样 ( 68.95k Pa× s) ,17k V恒压电泳 ( 2 5℃ ) ,于 2 85nm下分离分析两种黄芩复方制剂中的黄芩甙。实验结果表明 ,黄芩甙可在 15min内与其它成分得到很好的分离 ,在 10～ 64 0 mg/ L范围内定量分析。加样回收率分别为 :清开灵口服液 ( 10 0 .31± 1.98) % ,双黄连口服液( 10 0 .60± 2 .36) %。方法简便、快速、准确 ,重现性好 。