星点设计-响应面法优化毛连菜总有机酸提取工艺

目的:优选毛连菜总有机酸提取工艺。方法:在单因素试验基础上,以液料比、提取时间及乙醇体积分数为自变量,以有机酸提取率为因变量,采用星点设计-响应面法优化毛连菜总有机酸提取工艺。结果:毛连菜总有机酸的最佳提取工艺为:液料比29∶1(mL·g^(-1))、乙醇体积分数67%、提取时间43 min。验证试验测得总有机酸提取率为(1.65±0.02)%,(n=3,RSD=0.92%),与模型预测值结果接近。结论:优化建立的提取工艺简单,工艺参数可靠,提取效果良好,为毛连菜总有机酸的后续研究奠定基础。

响应面法优化日本毛连菜总黄酮的提取工艺

目的优化日本毛连菜总黄酮超声提取工艺。方法以料液比、超声功率、超声时间、乙醇体积分数为单因素变量,总黄酮含量为评价指标,采用响应面法优化总黄酮的提取工艺。结果最佳提取工艺为:料液比1︰35(g/mL)、超声功率300 W、超声时间42 min、乙醇体积分数61%。结论所得模型具有较好的预测性,为今后日本毛连菜的研究提供依据。

兴安毛连菜抗炎活性部位筛选及作用机制研究

目的筛选兴安毛连菜抗炎作用的活性部位,初步探讨其作用机制。方法制备兴安毛连菜醇提物石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水不同极性部位提取物;利用脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞建立体外炎症模型;利用噻唑蓝(MTT)法检测不同极性提取部位对细胞增殖活性的影响,确定安全给药范围;Griess法和酶联免疫吸附测定法(ELISA)分别检测细胞上清液中一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)的含量。结果兴安毛连菜醇提物各极性提取部位药液浓度为100、50、25μg/ml时,对细胞无明显毒性;与模型组比较,兴安毛连菜醇提物乙酸乙酯部位(高、中、低剂量组)均能使炎症因子NO、TNF-α、IL-6、IL-1β的分泌量显著降低(P<0.01),并呈现剂量依赖性;石油醚部位组、正丁醇部位组、水部位组未见明显抑制NO、TNF-α、IL-6、IL-1β的分泌。结论兴安毛连菜醇提物抗炎作用活性部位主要集中在乙酸乙酯部位,其作用机制是通过抑制NO、TNF-α、IL-6、IL-1β的分泌。

毛连菜不同生长部位的活性成分含量比较

目的 考察毛连菜不同生长部位主要活动成分的分布情况,为毛连菜的后续研究提供参考。方法 采用高效液相色谱(HPLC)梯度洗脱-多波长切换法,以乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱,流速为0.8 mL·min^(-1);同时测定毛连菜中绿原酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C和木犀草苷等5种活性成分的含量,比较各成分在不同部位分布情况。结果 5种活性成分在不同生长部位含量有明显差异,花序中含量最高,叶中含量其次,根、茎中含量相对较低。不同批次毛连菜活性成分在不同部位变化趋势有一定差异,但整体变化趋势基本一致。结论 毛连菜不同生长部位有效成分含量存在明显差异。

武当山区民间药材毛连菜不同生长部位总酚酸含量比较研究

目的:比较毛连菜不同生长部位酚酸类成分富集情况,为毛连菜后续研究提供参考。方法:采用福林酚比色法,以没食子酸为对照品,在732 nm波长处测定毛连菜不同生长部位总酚酸含量。结果:毛连菜植株不同生长部位总酚酸分布有一定差异,花序中含量最高,各部位含量由高到低依次为:花序>叶>茎>根,含量分别为3.8415%、2.6092%、1.3445%、0.9632%。结论:毛连菜植株不同生长部位酚酸类成分分布存在明显差异,因此可根据总酚酸含量的差异,选择采收部位。

Pb胁迫下氮素形态对日本毛连菜生物量、叶绿素含量及抗氧化酶活性的影响

为揭示Pb胁迫下氮素形态及施氮量对日本毛连菜生长及生理生化特性的影响,采用盆栽试验方法,针对不同浓度Pb胁迫下铵态氮和硝态氮及其施氮量对日本毛连菜生物量、叶绿素含量和抗氧化酶活性的影响进行研究。结果表明,在Pb胁迫下,日本毛连菜的生物量随施氮量的增加总体呈先上升后下降的趋势。在低浓度Pb胁迫下,施用铵态氮肥时,日本毛连菜叶绿素含量和CAT活性随施氮量的增加呈先升后降的趋势,SOD活性逐渐增加,POD活性呈先降后升的趋势,施用硝态氮肥时,植株叶绿素含量和SOD活性的变化趋势为先升后降,POD和CAT的活性呈逐渐下降的趋势;在高浓度Pb胁迫下,施用铵态氮肥时,日本毛连菜叶绿素含量、POD活性随施氮量的增加呈先升高后降低的趋势,而SOD、CAT活性则呈先降低后升高的趋势,施用硝态氮肥时,CAT活性随施氮量的增加呈先上升后下降的趋势,其他指标则无明显的变化趋势。无论在何种Pb浓度胁迫下,适量的铵态氮肥更有利于日本毛连菜的生长,不仅能提高叶片叶绿素含量,还能增加其抗氧化酶活性,这对于增加日本毛连菜的生物量,提高其修复铅污染土壤的能力具有实际意义。

氮肥形态及用量对日本毛连菜吸收Pb调节作用的研究

为探明不同Pb浓度胁迫下,不同氮肥形态及施用量对中药材日本毛连菜吸收Pb能力、土壤中各形态Pb含量及土壤pH的影响,本文开展了2种浓度Pb胁迫下2种氮肥形态不同施用量对日本毛连菜吸收Pb调节的盆栽试验研究。结果表明:低浓度Pb胁迫时,日本毛连菜中Pb含量随铵态氮施用量增加呈上升趋势,随硝态氮施用量增加呈先上升后下降趋势;高浓度Pb胁迫时,日本毛连菜中Pb含量随2种形态氮肥施用量增加呈先上升后下降趋势;当硝态氮肥施用量≥200 mg·kg-1时可有效减少日本毛连菜中Pb含量。不同浓度Pb胁迫时,施用铵态氮肥土壤中交换态Pb随氮施用量增加呈逐渐升高趋势,施用硝态氮肥则表现随氮施用量增加而降低趋势,而施用铵态氮肥土壤中交换态Pb明显高于施用硝态氮肥。相同Pb浓度胁迫下施用铵态氮肥时土壤pH值随氮施用量增加逐渐下降,施用硝态氮肥时土壤pH呈总体上升趋势;而在同一施氮水平和同一浓度Pb胁迫下,施用铵态氮肥土壤pH值均低于施用硝态氮肥。因此,为安全种植日本毛连菜,建议适当增加硝态氮肥施用量,以有效减少日本毛连菜各器官中Pb含量、稳定土壤pH值和减少壤中交换态Pb含量。

氮肥形态对日本毛连菜生长及Pb累积特性的影响

通过盆栽试验研究Pb胁迫浓度为2 000 mg/kg时,不同形态氮肥对日本毛连菜生长及Pb累积特性的影响。结果表明:在Pb胁迫下,施用适量的氮肥可促进日本毛连菜的生长和累积Pb的能力,而施用过量氮肥则对日本毛连菜的生长和Pb累积均有一定抑制作用。铵态氮处理下Pb在日本毛连菜各器官的分配顺序为:根>叶>茎;与硝态氮肥处理相比,铵态氮肥更有利于Pb向日本毛连菜叶部转移。因此,在Pb污染土壤中施加适量铵态氮肥(≤100 mg/kg),既能提高日本毛连菜生物量,又能提高日本毛连菜对Pb的累积量,这对Pb污染土壤的植物修复具有一定价值。

HPLC法同时测定毛连菜中咖啡酸和木犀草苷含量

目的:建立高效液相色谱法(HPLC)同时测定毛连菜中咖啡酸和木犀草苷含量的方法。方法:采用Waters Sun Fire C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm 5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱,检测波长323 nm,流速1.0 ml·min^(-1),进样量10μl,柱温30℃。结果:咖啡酸和木犀草苷的色谱峰可较好地分离,咖啡酸浓度在1.014～40.560μg·ml^(-1)(r=0.999 5)、木犀草苷浓度在2.006～80.240μg·ml^(-1)(r=1000 0)范围内与峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为92.84%,92.62%,RSD分别为2.0%,1.93%(n=6)。结论:该方法准确性、重复性、专属性较好,可用于毛连菜的质量控制。

毛连菜不同采收期中绿原酸、异绿原酸A和木犀草苷的变化规律

目的:检测不同采收期毛连菜植物中绿原酸、木犀草苷和异绿原酸A的含量,研究不同采收期毛连菜中3种化合物的动态变化规律,为该植物的开发利用提供参考。方法:采用高效液相色谱法(HPLC),以乙腈-0.1%磷酸溶液梯度洗脱,同时测定不同采收期毛连菜中绿原酸、木犀草苷和异绿原酸A的含量。结果:3种成分的变化趋势有一定差异,绿原酸、木犀草苷在幼苗期含量最高,成熟期降到最低,花果期再升高;异绿原酸A从幼苗期开始升高至起苔期达峰值,然后又开始下降,花果期再次升高。结论:不同采集期毛连菜中3种化合物富集规律不同,使用全草可在植株5~6月份起苔以前采集。

日本毛连菜降血糖及免疫增强作用活性筛选

目的:筛选日本毛连菜的具有降血糖作用以及免疫增强作用的有效部位。方法:采用四氧嘧啶致糖尿病小鼠模型,日本毛连菜不同提取物连续灌胃21天,用葡萄糖氧化酶法测定小鼠血糖值。采用CCK-8法检测日本毛连菜不同提取物对正常大鼠体外脾脏淋巴细胞的增殖作用。结果:与模型组比较,日本毛连菜提取物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ能显著降低糖尿病小鼠血糖值(P<0.05),其中提取物Ⅰ组小鼠血糖值降至(11.91±1.92)mmol/L,与阳性药组无显著性差异(P>0.05);提取物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ能刺激脾脏淋巴细胞增殖,其中提取物Ⅲ能显著促进刀豆蛋白A(Con A)诱导的淋巴细胞增殖(P<0.05)。结论:提取物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ具有显著降血糖作用;提取物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ具有免疫增强作用。

毛连菜属植物的研究进展

毛连菜(Picris L.)为菊科一年、二年或多年生草本植物,主要分布于欧洲、亚洲和北非地区,我国分布有5种。毛连菜的化学成分主要包括黄酮类、有机酸类、萜类、多糖等,具有清热解毒、消肿止痛等功效,在民间用于治疗乳腺炎、腮腺炎、肝炎等疾病。现代研究发现,其具有降血糖、血脂以及抗炎、抗氧化等多种药理活性。其他特性还包括具有铅、锌、镉等重金属离子超富集能力,可用于重金属污染土壤的恢复和环境保护。

日本毛连菜水洗部位降血糖、调节血脂作用研究

目的:探讨日本毛连菜水洗部位降血糖及调节血脂药理作用。方法:采用肾上腺素致小鼠生理性高血糖,以及四氧嘧啶致小鼠糖尿病等模型,观察日本毛连菜水洗部位对模型动物血糖、血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白(LDL-C)、高密度脂蛋白(HDL-C)的影响;采用比色法分析水洗部位的化学成分。结果:与模型组比较,日本毛连菜水洗部位低剂量显著降低四氧嘧啶致糖尿病小鼠血糖值(P<0.05),高剂量显著降低肾上腺素致糖尿病小鼠血糖值(P<0.05),给药组小鼠三酰甘油、低密度脂蛋白含量显著下降(P<0.05),高密度脂蛋白含量显著升高(P<0.05);水洗脱部位含多糖4 097 mg/100 g生药材,含黄酮913 mg/100 g生药材。结论:日本毛连菜水洗部位对糖尿病小鼠具有显著降血糖作用,同时可以调节糖尿病小鼠血脂水平。

日本毛连菜花粉及果实微形态特征的研究

利用光学显微镜和扫描电镜观察日本毛连菜的花粉及果实微形态结构。结果表明:花粉粒外壁刺状纹饰基部粗大,刺状突起呈环形排列或数个密集成群;网眼小且深,大小、形状相近;萌发孔3个,具大型瘤状突起,瘤状突起为脑纹状纹饰。果实有5～10余条高起的纵肋和5条较深的纵沟,纵沟贯穿果实两端。外果皮细胞狭长形、先端呈游离的指状突起,游离部分层叠环绕果实排列。果实石蜡切片,外果皮为一列波状弯曲的表皮细胞;中果皮由多列细胞组成,细胞壁极厚;内果皮为一列椭圆形细胞;种皮为两列狭长形薄壁细胞;子叶内含大量糊粉粒;无胚乳。结果反映了日本毛连菜花粉及果实微形态特征明显,可将其作为鉴别日本毛连菜的依据。

毛连菜的核型报道

对毛连菜（ＰｉｃｒｉｓｈｉｅｒａｃｉｌｉｄｅｓＬ．ｓｓｐ．ｊａｐｏｎｉｃａＫｒｙｌｖ）进行了核型分析。结果表明，其染色体数目为２ｎ＝１０：核型公式为２ｘ＝１０＝２ｍ＋２ｍ＋６ｓｔ，核型属于“３Ｃ”。

兴安毛连菜染色体的核型分析

目的:研究分析兴安毛连菜Picris davurica染色体的核型.方法:采用常规制片方法,并结合显微摄影.结果:兴安毛连菜体细胞染色体数目2 n=10;核型公式K(2 n)=10=2 m+8 sm,染色体相对长度组成为2 n=10=2 L+2 M2+4 M1+2 S,属于'3 A'型.全组染色体总长是12.51μm,长臂总长8.36μm,核型不对称系数为66.83%.染色体总体积11.71μm3.结论:兴安毛连菜染色体的数目及形态清晰,可为进一步的深入研究打下基础.

高效液相色谱法同时测定毛连菜中绿原酸和异绿原酸A及木犀草苷含量

目的建立同时测定毛连菜植物中绿原酸、异绿原酸A和木犀草苷含量的高效液相色谱法。方法采用Waters Atlantis T3色谱柱(4.6 mm×150 mm,3μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液,梯度洗脱;检测波长348 nm;柱温30℃;流速0.8 mL·min^-1;进样量10μL。结果绿原酸进样浓度在9.313~596.000μg·mL^-1、异绿原酸A进样浓度在6.552~419.333μg·mL^-1、木犀草苷进样浓度在1.242~79.467μg·mL^-1范围内与对应的峰面积呈良好的线性关系;平均加样回收率分别为100.28%(RSD=1.26%,n=6)、99.95%(RSD=1.54%,n=6)、100.29%(RSD=1.44%,n=6)。结论该方法操作简单,准确性、重复性好,可以作为毛连菜药材质量控制方法。

高效液相色谱法同时测定毛连菜中绿原酸和咖啡酸的含量

目的建立高效液相色谱法同时测定毛连菜植物中绿原酸和咖啡酸的含量。方法采用Waters Atlantis T3色谱柱,流动相为乙腈-0.05%磷酸溶液,梯度洗脱,检测波长为323 nm,柱温为30℃,流速为1.0 mL·min^-1,进样量为10μL。结果绿原酸在6.925~221.60μg·m L^-1、咖啡酸在0.69~22.12μg·mL^-1内与对应的峰面积呈良好的线性关系(R2=0.9999、0.9998);平均加样回收率分别是97.9%(RSD=1.3%,n=6)、96.8%(RSD=1.1%,n=6)。结论本法操作简单,准确性、重复性好,可以作为毛连菜药材的质量控制方法。

日本毛连菜中多糖的含量测定

目的建立药用植物日本毛连菜中多糖的含量测定方法。方法采用水提醇沉法从日本毛连菜中提取得到毛连菜粗多糖,脱色,用苯酚-硫酸法测定日本毛连菜中多糖含量。结果在3.03-15.10μg/ml范围内具有良好的线性关系,本法平均回收率为(97.55±2.26)%,RSD为2.3%。测定日本毛连菜提取物中总多糖含量以葡萄糖计平均为(5.80±0.06)%。结论该方法简便、准确、可靠,可以用于日本毛连菜中多糖的含量测定。

日本毛连菜总黄酮的提取工艺研究

目的对日本毛连菜总黄酮提取工艺进行研究。方法通过单因素实验和正交实验对其提取工艺进行研究。结果日本毛连菜总黄酮的最佳提取工艺为:提取温度70℃,用20倍量,体积分数为40%乙醇温浸提取2次,提取时间为2.5h。结论该工艺简便、稳定、准确,可用于日本毛连菜总黄酮的提取。