氧化白藜芦醇处理对黄皮果实贮藏特性和采后品质的影响

黄皮[Clausena lansium(Lour.)Skeels]属于芸香科,原产于我国华南地区,内含大量生物活性物质,有利于人体健康。然而,黄皮果实因其果皮较薄、果肉较软,易受到机械损伤或发生果实腐烂、果皮褐变、贮藏特性丧失等症状,最终降低了果实采后商品价值及食用价值。因此,有必要开发一种安全、环境友好的采后保鲜技术,以提升黄皮果实贮藏特性及其采后品质,从而延长果实保鲜期。氧化白藜芦醇(OXY)是一种天然活性产物,具有抗褐变、抗氧化、抗菌、抗炎、抗病毒等功效。有研究表明,OXY在药用保健领域研究较多而在食品保鲜中研究较少。目前尚无关于外源OXY处理提高黄皮果实贮藏特性与采后品质的研究报道。因此,为探究外源OXY处理对黄皮果实采后保鲜效应的影响,以鸡心黄皮果实为试材,分别采用0.2 g/L OXY溶液与蒸馏水(CK)浸泡处理黄皮果实30 min,随后取出果实晾干并装袋(每袋装50颗果实),置于相对湿度为85%、温度为(25±1)℃的条件下贮藏10 d,每2 d取样观察,测定黄皮果实的贮藏特性与采后品质相关指标的变化。结果表明:与CK相比,OXY处理能减缓采后黄皮果实的果皮细胞膜透性、褐变度和褐变指数的上升趋势,维持较高水平的果实商品率与较低水平的果实失重率。另外,OXY处理能维持采后黄皮果实较高的果皮L^(*)值、色调角h值和较高的果皮总酚含量,而降低果皮过氧化物酶和多酚氧化酶等酚酶活性。此外,OXY处理也可维持采后黄皮果实较高的果肉可溶性固形物、维生素C、可滴定酸、蔗糖与可溶性总糖含量。因此,外源OXY处理能有效提高黄皮果实的采后贮藏特性,稳定果实果皮的外观品质与果肉营养品质,进而延长黄皮果实的采后保鲜期。

氧化白藜芦醇抗诺卡菌活性及作用机制

目的探究氧化白藜芦醇(oxyresveratrol,OXY)的抗诺卡菌活性,明确其抗菌效果,同时初步探索其抑制诺卡菌的机制,为筛选新型抗诺卡菌药物提供更多理论基础。方法借鉴纸片扩散法对临床收集的12株诺卡菌进行OXY抗菌活性筛选;通过测定OXY对诺卡菌的MIC值和MBC值,明确其抗诺卡菌活性;通过测定A620的方法,评价OXY对诺卡菌的生长的影响;采用光学显微镜、扫描电子显微镜和透射电子显微镜观察的方法,明确OXY对诺卡菌形态结构变化的影响;最后通过检测培养液上清中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)和钾离子的含量探索OXY对诺卡菌细胞壁和细胞膜完整性的影响。结果通过借鉴纸片扩散法的筛选发现25和50 mg/mL OXY都能较好地抑制12株诺卡菌的生长,12.5 mg/mL OXY能一定程度上抑制诺卡菌的生长;OXY对12株诺卡菌的MIC值和MBC值分别为0.2和0.4mg/mL;A620的结果表明0.5×MIC OXY和1×MIC OXY都能显著抑制诺卡菌的生长;OXY作用使圣乔治教堂诺卡菌形态发生显著改变,细菌皱缩、变圆、细胞壁变粗糙,细胞发生破裂;OXY还能破坏诺卡菌细胞壁和细胞膜的完整性,上清液中AKP和钾离子含量随着OXY作用浓度的升高而升高。结论OXY具有较好抗诺卡菌活性,其MIC值和MBC值分别为0.2和0.4 mg/mL,OXY可能是通过破坏诺卡菌细胞壁和细胞膜的完整性发挥抗菌作用。

氧化白藜芦醇通过核因子E2相关因子2信号通路缓解心肌缺血再灌注损伤

目的探讨氧化白藜芦醇(Oxy)在缺氧/复氧(H/R)诱导的心肌损伤中的保护作用。方法小鼠心肌HL-1细胞培养于DMEM高糖完全培养基作为Ctrl组;通过缺氧6 h/复氧2 h刺激HL-1细胞,建立心肌细胞H/R损伤模型,作为H/R组;Ctrl组细胞在20μM Oxy的DMEM高糖完全培养基预孵育2 h,后进行H/R刺激,作为H/R+Oxy组。通过细胞计数试剂盒-8检测细胞活力;采用蛋白免疫印迹技术检测B淋巴细胞瘤2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、核因子E2相关因子2(Nrf-2)蛋白表达水平;使用终端尿苷核苷酸末端标记法和烟酸己可碱染色法评估各组细胞凋亡情况;使用实时荧光定量PCR技术分析Nrf-2、血红素加氧酶1(Ho-1)、醌氧化还原酶1(Nqo-1)mRNA表达水平;采用超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)试剂盒,利用酶标仪检测各组细胞内SOD和MDA水平。结果与Ctrl组比较,H/R组细胞活力降低、Bax蛋白升高、Bcl-2蛋白降低、Bax/Bcl-2升高、细胞凋亡数量升高、细胞内SOD水平降低、MDA水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与H/R组比较,H/R+Oxy组细胞活力升高,Bax蛋白降低、Bcl-2蛋白升高、Bax/Bcl-2降低、细胞凋亡数量降低、细胞内SOD水平升高、MDA水平降低、Nrf-2蛋白升高、Nrf-2、Ho-1、Nqo-1 mRNA表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论Oxy可抑制H/R诱导的心肌细胞损伤,可能通过激活Nrf-2信号通路发挥抗氧化作用。

桑枝中氧化白藜芦醇的分离与鉴定

氧化白藜芦醇具有抑制酪氨酸酶活性的作用。为了从桑枝中有效提取这一生物活性物质,采用乙醇提取法获得桑枝粗提液,通过硅胶柱、葡聚糖柱柱层析法分离制备桑枝氧化白藜芦醇样品。运用核磁共振、HPLC-MS等方法鉴定样品的化学结构和分子质量,证实制备样品为氧化白藜芦醇,通过高效液相色谱检测其质量分数大于99%。研究结果为从桑枝中分离提取氧化白藜芦醇提供了一种简便有效的方法。

氧化白藜芦醇对鲜切马铃薯褐变的抑制作用

为探索氧化白藜芦醇对鲜切马铃薯贮藏过程中氧化褐变及抗氧化系统的影响,试验采用质量分数0.005%,0.010%和0.020%氧化白藜芦醇溶液清洗鲜切加工后的马铃薯切片,以水清洗为负对照,以间苯二酚和VC的复配溶液清洗处理为正对照,观察评价贮藏期间切面色差、整体感官品质(OVQ)、褐变程度,以及氧化抗氧化系统的多酚氧化酶(PPO)、络氨酸酶(TYE)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(CAT)活性和变化。结果表明,氧化白藜芦醇清洗处理能较好地保持鲜切马铃薯切片的色泽(较高的L*值和ΔE*值及较低的a*值)和OVQ,维持贮藏后期的Ho值,抑制贮藏期内马铃薯切面褐变现象的产生,延长贮藏期。同时,可一定程度地降低PPO和TYE活性,增强CAT和SOD活性。结果表明,氧化白藜芦醇的清洗效果好,其对鲜切马铃薯切片在贮藏期内的品质有一定的保持作用。

桑中氧化白藜芦醇的研究进展

对近年来氧化白藜芦醇的研究进展进行总结。认为氧化白藜芦醇目前来源主要有天然植物提取、化学合成和生物转化3种途径,能快速被机体吸收且较低血药浓度就能发挥抗肿瘤、抑制酪氨酸活性,抗肥胖、神经保护等药理作用。

纳米乳液提高氧化白藜芦醇口服生物利用率及透皮吸收效率

本研究制备纳米乳液改善氧化白藜芦醇在水溶液中的溶解性能,通过体外药物溶出实验、脂解实验、Caco-2跨膜细胞转运实验、透皮吸收实验评价了纳米乳液对氧化白藜芦醇生物利用率的改善效果。结果表明:氧化白藜芦醇纳米乳液和氧化白藜芦醇化合物自身的生物利用率在进食状态下分别为61.22%和23.47%,禁食状态下为56.12%和22.45%。纳米乳液使氧化白藜芦醇在小肠上皮细胞的扩散速度由中速上升至快速,扩散形式为被动渗透,表观渗透系数Papp(AP-BL)值1.69×10^-5 cm/sec,Papp(BL-AP)值8.94×10^-6cm/sec,ER=Rpapp(AP-BL)/(BL-AP)=1.89。6 h时氧化白藜芦醇纳米乳液和化合物的经皮扩散透过量分别为51.76和5.73μg/cm^2 skin。结论:氧化白藜芦醇纳米乳液比化合物本身的生物利用率提升了3倍,显著提升氧化白藜芦醇在小肠上皮细胞内的吸收转运量(提升2~4倍)和透皮吸收效率(p<0.05),本实验为氧化白藜芦醇的应用奠定研究基础,为其有效地发挥生物活性提供理论依据。

氧化白藜芦醇对小鼠肝癌淋巴结转移的抑制作用

目的考察氧化白藜芦醇对小鼠肝癌淋巴结转移的抑制作用。方法 70只小鼠随机均分为正常对照组、模型组、阿霉素组(5 mg/kg)、白藜芦醇组(40 mg/kg)、氧化白藜芦醇低、中、高剂量组(20、40、60 mg/kg),各组腹腔注射给药21 d。然后,测量小鼠体质量及肿瘤、淋巴结体积和质量,计算免疫器官指数,检测淋巴结转移情况及MMP-9、VEGF-C mRNA表达。结果与模型组比较,氧化白藜芦醇组小鼠体质量、胸腺指数、脾脏指数无显著差异(P>0.05);肿瘤、淋巴结体积和质量明显减少(P<0.05,P<0.01),并呈浓度依赖性;淋巴结转移更少;MMP-9、VEGF-C mRNA表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论氧化白藜芦醇可有效抑制小鼠肝癌淋巴结转移,并对免疫器官的影响较小。

氧化白藜芦醇对鲜切苹果及果汁褐变的影响

为研究氧化白藜芦醇(oxyresveratrol,OXY)对苹果褐变的抑制作用,采用不同浓度的OXY对鲜切苹果、苹果汁进行处理,探讨在不同储藏阶段切片色度和果汁褐变度变化情况及OXY对苹果汁内多酚氧化酶(polyphenol oxidase,PPO)和过氧化物酶(peroxidase,POD)活性的影响。结果表明:OXY可改善苹果切片的感官品质,显著延缓切片L*值的降低(P<0.05),抑制a*、b*、ΔE值的升高(P<0.05)。同时,OXY还能显著降低苹果汁褐变度(P<0.05),显著抑制苹果汁内PPO和POD活性(P<0.05)。综上,OXY能有效抑制鲜切苹果片及苹果汁褐变,其作用机制可能是通过抑制苹果内PPO和POD活性实现。

柘木多酚和氧化白藜芦醇的制备与其抗氧化活性研究

目的:对柘木多酚及其中主要成分进行制备和抗氧化活性研究,为其开发利用提供参考。方法:柘木茎的75%乙醇提取物采用AB-8大孔树脂精制,对其中的主成分进行分离鉴定和HPLC含量测定,采用DPPH和ABTS法测试其抗氧化活性。结果:柘木茎经精制获得柘木多酚CTP-1、CTP-2;从CTP-1进一步分离获得化合物1,经鉴定为氧化白藜芦醇。HPLC分析表明,二者中均主要含有氧化白藜芦醇。抗氧化活性测验结果表明,CTP-1、CTP-2及氧化白藜芦醇对DPPH自由基的半数抑制浓度(IC50)值分别为19. 1、25. 3、11. 2μg·m L^(-1),对ABTS自由基的IC50分别为49. 3、60. 1、29. 7μg·m L^(-1)。结论:柘木多酚具有强抗氧化活性,氧化白藜芦醇是其主要活性成分。

氧化白藜芦醇清除自由基活性的密度泛函理论研究

采用密度泛函理论(DFT)的方法,分析了氧化白藜芦醇分子酚羟基在不同溶剂中清除自由基活性能力大小,对其三种抗氧化机制:H原子转移(HAT)机制、逐步电子转移质子转移(SET-PT)机制、质子优先损失电子转移(SPLET)机制进行了研究,探讨了在气相中不同位置酚羟基清除·OH、·OOH自由基的抗氧化机理。计算结果表明,在任何溶剂中氧化白藜芦醇分子C4’位的酚羟基活性最高,在气相和苯中HAT机制是清除自由基活性的最主要机制,在极性溶剂中SET-PT机制是热力学上最有利的途径,而在所有环境中SPLET机制都不是最主要的机制。

光甘草定和氧化白藜芦醇协同治疗黄褐斑作用评价

采用体外酪氨酸酶抑制实验并结合响应曲面法优化了光甘草定和氧化白藜芦醇协同抑制酪氨酸酶配比;将光甘草定和氧化白藜芦醇按照较优活性配比制备成胶束溶液,中波紫外照射法复制小鼠黄褐斑模型,给药治疗后,检测小鼠血清和皮肤组织中的超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)。结果表明,光甘草定和氧化白藜芦醇的最佳物质的量比为3∶5;光甘草定胶束溶液、氧化白藜芦醇胶束溶液及光甘草定和氧化白藜芦醇复配胶束溶液均可降低黄褐斑小鼠皮肤组织和血清中的脂质过氧化,提高SOD活性;与模型组相比,光甘草定和氧化白藜芦醇复配组在血清中的SOD活性升高了24.71U/m L,MDA含量降低了7.90U/m L;在皮肤组织中的SOD活性升高了15.14 U/mg prot,MDA含量降低了1.60 U/mg prot,说明光甘草定和氧化白藜芦醇复配胶束溶液效果最佳。光甘草定和氧化白藜芦醇对黄褐斑的形成具有保护作用,并且两者具有协同作用,联用效果更好。

采后氧化白藜芦醇处理对荔枝果实品质与耐贮性的影响

为研究氧化白藜芦醇(oxyresveratrol,OXY)对采后荔枝果实的保鲜作用,该试验以“岵山晚荔”荔枝果实为试材,采用0.05、0.1、0.2、0.3 g/L 4种不同质量浓度的OXY溶液和去离子水(对照组)对采后荔枝果实进行浸泡5 min的处理,通过测定贮藏期间OXY处理组和对照处理组对荔枝果实褐变指数、感病指数和商品率的影响,筛选出适宜的OXY处理浓度为0.2 g/L。而后以0.2 g/L OXY溶液和去离子水(对照组)处理采后荔枝果实,进一步探究OXY对荔枝果实采后品质和耐贮性的影响。结果表明,0.2 g/L OXY处理可保持果实较高的可溶性固形物、可滴定酸、可溶性糖和维生素C的含量,延缓采后荔枝果皮L^(*)值和a^(*)值的下降,较好地保持荔枝果实的外观色泽;抑制贮藏后期呼吸强度和失重率的增加,有效控制采后荔枝果实褐变指数和感病指数的升高,显著提高采后荔枝果实的商品率。

氧化白藜芦醇的合成工艺改进及其抗氧化活性

将用于制备E型烯烃的Wittig-Horner反应法应用于氧化白藜芦醇的全合成中。以价廉易得的3,5-二甲氧基苄醇、2,4-二甲氧基苯甲醛为原料,经溴代、Arbuzov重排反应及Wittig-Horner反应得到2,3′,4,5′-四甲氧基二苯乙烯中间体,最后该中间体在AlCl 3作用下进行脱甲基反应,成功制备了目标产物氧化白藜芦醇。改进后的合成工艺步骤短、反应条件温和、操作便捷、产率较高。所合成的化合物通过熔点、红外光谱、质谱以及核磁共振仪确认结构。以维生素C、2,6-二丁基对甲酚(butylated hydroxytoluene,BHT)和特丁基对苯二酚(tert-butyl hydroquinone,TBHQ)为参照,通过ABTS阳离子自由基清除能力、DPPH自由基清除能力和铁离子还原能力讨论了氧化白藜芦醇的抗氧化活性,并与白皮杉醇、白藜芦醇、茶多酚作比较。结果表明,氧化白藜芦醇的ABTS阳离子自由基清除能力远大于维生素C、BHT、TBHQ,其DPPH自由基清除能力以及铁离子还原能力均强于白藜芦醇和BHT,抗氧化性良好。研究结果可促进氧化白藜芦醇在食品添加剂中的应用。

HPLC法测定氧化白藜芦醇的含量

目的:建立高效液相色谱法测定氧化白藜芦醇含量的方法。方法:采用Agilent TC-C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水(30∶70)为流动相,流速为1.0 ml·min^(-1),柱温为30℃,检测波长为329 nm,进样量为20μl。结果:在光照、高温、氧化、酸碱破坏下,分离度良好,氧化白藜芦醇在19.28～192.88μg·ml^(-1)范围内呈良好线性关系(r=0.999 7)。结论:本法操作简便,灵敏度高,重复性好,可有效控制氧化白藜芦醇质量。

氧化白藜芦醇体内外抑制小鼠肉瘤S180的作用初步研究

目的:研究氧化白藜芦醇在体外对肿瘤细胞株以及小鼠移植性肉瘤S180的抑制作用。方法:采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测氧化白藜芦醇对人的各种肿瘤细胞株体外增殖的抑制作用,并计算其半数抑制浓度(IC50)。建立小鼠S180肉瘤移植瘤模型,分为对照组、环磷酰胺组、氧化白藜芦醇80、40、20mg·kg-1剂量组,以实体瘤瘤块重量及抑瘤率为指标评价氧化白藜芦醇对小鼠移植瘤生长的抑制作用,并计算其胸腺指数和脾脏指数。结果:MTT结果显示,氧化白藜芦醇对K562,SK-OV-3,MCF-7,SMMC-7721,A549,HNE-1和SW-480细胞株IC50值分别为52.88±3.21,11.55±5.42,23.61±2.13,58.13±4.84,7.44±2.94,67.73±7.23和62.86±5.2μg·ml-1,有较好的抑制肿瘤细胞体外生长作用。体内试验显示氧化白藜芦醇对移植瘤的抑制作用明显,80、40、20mg·kg-1三个剂量组对S180移植瘤抑制率为77.78%,61.43%和38.56%,呈一定量效关系,并对胸腺指数和脾脏指数影响不大。

氧化白藜芦醇抗隐球菌体外药敏实验分析

目的 探讨氧化白藜芦醇联合抗真菌药物对隐球菌是否有增效作用。方法 参照美国临床实验室标准化委员会(CLSI)提出的标准方案M27-A3,对隐球菌进行氧化白藜芦醇与伊曲康唑、米卡芬净、5-氟胞嘧啶(5-FC)单药药敏实验,以及以分级抑菌浓度指数(FICI)为判定指标棋盘法联合药敏实验。观察单独应用氧化白藜芦醇与抗真菌药的最低抑菌浓度(MIC)、氧化白藜芦醇联合3种抗真菌药的MIC及3种抗真菌药物分别联合氧化白藜芦醇的FICI。结果 氧化白藜芦醇的MIC为250~1 000 mg/L;氧化白藜芦醇与米卡芬净、伊曲康唑、5-FC联合时FICI≤0.5的比例分别是87.5%、62.5%和5.0%。结论 氧化白藜芦醇对隐球菌有一定的抗真菌作用,其与米卡芬净、伊曲康唑联合有协同作用,与5-FC无相互作用。

氧化白藜芦醇药理作用及其机制研究进展

氧化白藜芦醇是一种来源于植物的天然多酚化合物,早期研究证明其具有抗氧化、抗炎症、抗病毒、抗褐变、神经保护等多种生物活性。近年来,氧化白藜芦醇被发现还具有抗肿瘤、抗肥胖、抗糖尿病、保护肠黏膜等药理作用。与此同时,氧化白藜芦醇作为一种药物分子与机体疾病之间的作用机制也被进一步阐明。本文将总结近五年来氧化白藜芦醇的药理作用及相关机制研究新进展。

气相色谱法测定氧化白藜芦醇中的4种残留溶剂

目的:建立氧化白藜芦醇中叔丁醇、乙醇、乙酸乙酯、乙二醇4种有机溶剂残留量的测定方法。方法:以DB-624弹性石英毛细管柱为色谱柱(30 m×0.32 mm,1.8μm),采用氢火焰离子化检测器,载气为氮气,进样口温度为250℃,检测器温度为300℃,柱温采用程序升温(70℃保持3 min,以30℃ min^-1的速率升温至100℃,保持8 min,然后以30℃ min^-1的速率升温至210℃),流速为3 mL min^-1。以N,N-二甲基甲酰胺为溶剂,进样体积为1μL。结果:4种有机溶剂均能得到很好的分离。叔丁醇、乙醇、乙酸乙酯、乙二醇检测质量浓度线性范围分别为395.28~1482.3μg mL-1(r=0.9999)、398.16~1493.1μg mL^-1(r=0.9999)、395.84~1484.4μg mL^-1(r=0.9999)、53.12~199.2μg mL^-1(r=0.9996);定量限分别为9.88、19.91、19.79、53.12μg mL^-1,检测限分别为3.95、9.95、9.90、19.92μg mL^-1;精密度、重复性和稳定性的RSD均小于5.0%;乙醇、叔丁醇、乙酸乙酯和乙二醇平均回收率(n=9)分别为100.81%、96.72%、99.14%、99.51%,RSD分别为2.93%、3.98%、2.75%、3.34%,且精密度较好。测定样品三批,样品中叔丁醇的残留量分别为0.03%,0.12%和0.02%,乙醇、乙酸乙酯和乙二醇均未被检测到。结论:本文经方法学验证可用于氧化白藜芦醇中4种残留溶剂的分离与测定。

氧化白藜芦醇在体外抑制人肝癌细胞株增殖和迁移的实验研究

目的:研究氧化白藜芦醇对体外培养人肝癌细胞QGY-7701、SMMC-7721增殖和迁移能力的影响。方法:采用MTT法测定氧化白藜芦醇抑制肝癌细胞QGY-7701、SMMC-7721生长的IC50;采用Transwell法测定经不同浓度氧化白藜芦醇(25μM、50μM和100μM)以及白藜芦醇50μM与细胞共培养24h后细胞的迁移率。结果:MTT实验结果显示,氧化白藜芦醇抑制QGY-7701和SMMC-7721细胞的IC50值分别为100.37±21.97μM和74.39±9.30μM。Transwell实验结果显示,经25μM、50μM、100μM氧化白藜芦醇和白藜芦醇50μM处理24h后,各实验组细胞迁移率分别是74.96±2.85%、60.26±9.25%、38.58±8.69%和46.80±8.43%。且与对照组比较有显著性差异(P<0.05),氧化白藜芦醇浓度越高,细胞迁移率越低。结论:氧化白藜芦醇具有抑制体外培养人肝癌细胞QGY-7701、SMMC-7721的细胞增殖作用;可显著抑制肝癌细胞QGY-7701、SMMC-7721在体外培养条件下的迁移能力,其抑制能力呈浓度依赖性。