氧化砷抑制胃癌SGC-7901细胞增殖和诱导凋亡作用

目的研究氧化砷对胃癌细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用．方法应用细胞集落形成实验、ＭＴＴ，ＴＵＮＥＬ染色、流式细胞仪技术，研究氧化砷对胃癌细胞ＳＧＣ７９０１的增殖抑制、细胞毒和诱导凋亡的作用．结果氧化砷能显著抑制胃癌细胞ＳＧＣ７９０１的生长，５μｍｏｌ／Ｌ氧化砷抑制程度明显强于１μｍｏｌ／Ｌ（Ｐ＜００５），５μｍｏｌ／Ｌ和１μｍｏｌ／Ｌ的氧化砷作用后的细胞集落形成率分别为１２４％±３３％和６８％±２６％，明显低于对照组的２０６％±５７％（Ｐ＜００１）．氧化砷对胃癌细胞具有较强的细胞毒作用，１０μｍｏｌ／Ｌ氧化砷作用２４ｈ细胞杀伤率为２４６％，４８ｈ接近５０％．氧化砷作用于细胞后，可看到较为典型的细胞凋亡的形态学变化：细胞核固缩，染色质凝集，呈新月型紧贴于核膜周边，核碎裂，染色质片断化，凋亡小体形成等．流式细胞仪ＤＮＡ直方图上出现典型的亚二倍体“凋亡峰”．ＴＤＴ染色法显示，细胞凋亡指数为７３％～１５１％．氧化砷的细胞毒作用呈时间和剂量依赖性，且表现为细胞周期特异性，作用４８ｈ后，ＳＧＣ７９０１细胞的细胞周期变化明显，Ｇ０／Ｇ１期细胞从５４２％下降到１７７％，而Ｇ２／Ｍ期细胞则从２０?

低剂量氧化砷治疗早幼粒细胞白血病的实验研究

背景与目的:低剂量三氧化二砷(arsenictrioxide,As2O3)是治疗急性早幼粒细胞性白血病(APL)的有效手段之一,它不仅对初发APL病人有效,而且对全反式维甲酸(ATRA)已耐受的复发APL病人可获得完全缓解。然而,目前其诱导APL缓解的机制尚不清楚。为此,本研究试图探讨低剂量As2O3治疗APL的可能机制。方法:以APL细胞株NB4和来源于APL患者骨髓的原代细胞为模型,通过观察细胞形态、对四氮唑蓝的还原能力和细胞表面分化抗原的变化来鉴定细胞分化;并应用免疫荧光和Westernblot分析细胞内PML-RARα融合蛋白的变化。结果:0.25μmol/LAs2O3联合环腺苷酸(cAMP)拟似物8-对氯苯硫基环腺苷酸(8-CPT-cAMP)可诱导NB4细胞和原代细胞分化,而且该效应能被蛋白激酶PKA的抑制剂H89抑制。进一步研究还显示8-CPT-cAMP可以促进As2O3介导的PML-RARα融合蛋白降解。结论:cAMP可增强As2O3对APL细胞的分化诱导效应。

氧化砷诱导结肠癌细胞凋亡及其分子机制

目的 观察不同浓度As2 O3 对结肠癌Lovo、LS 174T细胞株生长的影响。方法 0 12 5～ 2 μmo1/L的As2 O3 与结肠癌细胞株Lovo、LS 174T共同孵育 ,观察不同浓度As2 O3 作用不同时间对结肠癌细胞的生长抑制作用、细胞形态学改变、DNA的变化。结果 1～ 2 μmol/LAs2 O3 作用的结肠癌细胞呈凋亡特征性改变 :细胞膜不发生破裂 ,细胞核出现核浓缩、核碎裂和凋亡小体形成 ;流式细胞仪检测在G1期前出现亚二倍体凋亡峰 ;细胞DNA抽提琼脂糖凝胶电泳呈凋亡特征性条带。结论 1～ 2 μmol/LAs2 O3 可诱导结肠癌细胞凋亡 ,肿瘤细胞凋亡与Fas、Fas

氧化砷诱导胰腺癌细胞凋亡的实验研究

目的 :观察不同浓度As2 O3 对胰腺癌细胞生长的影响。方法 :0 .1～ 2 μmol/LAs2 O3 与胰腺癌细胞株SW 1990、SW 890 2共同孵育 ,观察不同浓度As2 O3 作用、不同时间对胰腺癌细胞的生长抑制情况。结果 :经1～ 2 μmol/LAs2 O3 处理的胰腺癌细胞呈典型的凋亡特征性改变 :用HE染色光镜观察可见凋亡小体形成 ,流式细胞仪检测在G1期前出现亚二倍体凋亡峰 ,细胞DNA抽提电泳后发现凋亡特征性Ladder。结论 :As2 O3

GFAAS测定氧化砷处理移植性食管癌大鼠后各组织的砷浓度

用石墨炉原子吸收法测定了大鼠各组织中的砷浓度。在大鼠移植性肿瘤组织内一次性注射 10 μg砷后 ,观察不同时间大鼠各脏器砷的分布。组织通过 80℃水浴用硫酸 硝酸 高氯酸混酸体系封闭消解 2h后 ,滴加 30 %双氧水 ,得到定容的消化液。用 0 1%TritonX 10 0 0 2 %AgNO3溶液作消化液的基体改进剂 ,D2 灯校正背景 ,标准加入法校准曲线测定。此法相对标准偏差为 3 2 %～ 8 7%之间。检出限为 1 5 7μg·L- 1 。回收率为 81 7%～ 10 5 %。分析结果表明 ,注射到肿瘤组织内的砷 2h内扩散到其他组织达最大值 ,而后随机体代谢活动的结果 ,砷浓度随时间延长又渐渐减少。

氧化砷诱导食管癌细胞系细胞凋亡的形态学研究

目的在氧化砷（As2O3）作用于食管癌细胞株EC8712过程中，用光镜和电镜观察培养细胞凋亡的形态改变方法ECh712于199培养基常规培养，以3μmolAs2O3作用于细胞，72h收获细胞，作光镜（HE染色，TUNEL标记）、透射电镜和流式细胞仪检查.结果3μmolAs2O3作用72h，出现许多凋亡细胞，培养细胞部分变圆，脱落.在光镜下HE染色观察2种凋亡细胞.一种核小；圆形，致密呈固缩核、和核碎,另一种胞质红染，染色质凝集，二者TUNEL标记阳性．流式细胞仪检测有凋亡峰出现（亚G1／G0峰）．电镜检查有二种凋亡类型.一呈典型凋亡细胞核改变；在早期染色质凝集成块状，细胞器保存完好.第二期，随着染色质改变，细胞核变圆，饱满，核膜完整，染色质靠边，大块染色质，构成车轮状或半月状.核膜变性解体，使染色质逸出．最后细胞变性坏死.凋亡小体易见，小块状球状，膜包或裸露.另一种固缩细胞，细胞皱缩，胞质致密，核电子密度高.结论光镜和电镜检查结果证实As2O3可以诱导食管癌细胞系ECh712细胞凋亡，因此As2O3可作为食管癌辅助治疗药物．

氧化砷和维甲酸对PLZF-RARa阳性U937细胞的作用

目的:研究氧化砷(As2O3)和全反式维甲酸(AT-RA)对PLZF-RARα阳性细胞的作用。方法:稳定转染PLZF-RARα基因的U937细胞(U937/PLZF)经As2O3、ATRA处理后,Wright-Giemsa染色观察细胞形态,MTT法检测细胞生长增殖状态,流式细胞术(FCM)检测细胞周期和细胞表面分化抗原CD11b、CD64、CD14等的表达变化,荧光免疫细胞化学染色检测融合蛋白表达,细胞化学染色和硝基蓝四氮唑(NBT)还原试验观察细胞功能分化情况。结果:U937/PLZF细胞在去除四环素条件培养后,PLZF-RARα表达明显增加。As2O3(0.5μmol/L)联合ATRA(1μmol/L)使U937/PLZF细胞核质比缩小,核仁减少但未消失;生长增殖受抑;S期细胞减少;CD11b表达增高;PLZF-RARα蛋白表达减弱,分布以胞核弥漫细小颗粒为主。细胞化学染色和NBT反应变化不明显。结论:0.5μmol/L As2O3联合1μmol/L ATRA可使PLZF-RARα阳性U937细胞产生轻微的形态学分化趋势,尚不足以引起其发生功能分化。

氧化砷诱导人小细胞肺癌细胞凋亡的研究

目的 研究砷剂 (As2 O3 )对人小细胞肺癌细胞凋亡诱导作用以及干扰素 (IFNα 2b)对As2 O3 作用的影响。方法 采用DNA电泳、TUNEL原位末端标记和免疫细胞化学染色检测不同浓度As2 O3 作用不同时间对人小细胞肺癌细胞凋亡诱导作用及相关基因蛋白的表达。结果 在一定的浓度范围内 ,As2 O3 可诱导人小细胞肺癌细胞凋亡 ,并且随浓度的升高和作用时间的延长 ,凋亡细胞数增加 ,相关基因蛋白Bcl 2、PCNA表达降低。联合使用IFNα 2b可增强凋亡诱导作用。结论 As2 O3 可诱导人小细胞肺癌细胞凋亡 ,且与药物浓度和作用时间有关。IFNα

氧化砷诱导早幼粒细胞白血病细胞凋亡的体内研究

细胞凋亡已成为当前肿瘤研究的热点之一［１］，氧化砷和硫化砷等砷化合物治疗急性早幼粒细胞白血病（ＡＰＬ）为促进凋亡治疗恶性肿瘤这一新的治疗途径提供了成功的范例［２］。我院自１９９４年１２月起应用三氧化二砷（Ａｓ２Ｏ３）治疗了３６例ＡＰＬ复发的患者，其中...

氧化砷治疗恶性血液病和肿瘤的研究进展

三氧化二砷是中药传统毒药 ,近年来 ,国内外学者应用其治疗以急性早幼粒细胞白血病为主的恶性血液病和某些实体瘤 (如肝癌、结肠癌等 ) ,疗效显著。体内外研究发现其主要细胞学和分子学机理涉及到 :①诱导细胞凋亡和促进部分分化 ;②降解某些特异性融合蛋白 ;③下调Bcl 2的表达 ;④下调线粒体跨膜电位△Ψm ;⑤活化半胱氨酸蛋白酶Caspases等作用。目前对氧化砷治疗后复发的防治、砷剂对细胞传导信号的影响等问题的研究正在进行中。

氧化砷对小鼠移植性肝癌的作用

目的 :研究三氧化二砷 (As2 O3)对体内抗上皮性实体瘤作用 ,用不同剂量As2 O3治疗小鼠移植性肝癌。方法 :在 5 0只小鼠腹腔分别注射 0 ,2 ,4,6,8μmol gAs2 O3,观察急性毒性作用之后 ,选择 1,2 ,3 μmol g剂量进行抑瘤实验 ;80只小鼠双侧腋下移植肝癌细胞 (1.5× 10 6 细胞 ) ,0 ,1,2 ,3 μmol gAs2 O3分别右腋下注射 ,每日 1次 ,共 10次。在接种肝癌细胞后第 3 0天处死小鼠检查实体瘤大小和慢性毒性反应。结果 :右侧肿瘤直接注射As2 O3组明显小于左侧 (P <0 .0 5 ) ;不同剂量相比 ,右侧给 2和 3 μmol gAs2 O3肿瘤重量小于对照组 (P <0 .0 0 1) ,左侧肿瘤 1和 2 μmol g组肿瘤大于对照组 (P <0 .0 5 ) ,3 μmol g组却相反 (P<0 .0 5 )。抑瘤机制是引起瘤细胞凋亡。慢性毒性作用引起肝 ,肾 ,脾损伤和血中白细胞降低。结论 :As2 O3在合适剂量和直接接触瘤细胞 ,对上皮性实体瘤将是一种有用的新疗法。

氧化砷抗胰腺癌作用及其机制的实验研究

目的:探讨氧化砷(As_2O_3)体外体内抗胰腺癌作用及其可能机制。方法:应用MTT比色法、流式细胞仪、裸鼠肾包膜下移植瘤抑制试验和细胞形态学方法进行检测。结果:As_2O_3抑制胰腺癌细胞生长并具有时间与浓度依赖性,6天组抑制50％细胞生长的药物浓度(IC_(50))为0.625～1.25μg/ml。癌细胞在As_2O_3作用下,G0/G1期细胞比例、凋亡指数(AI)增高,增殖指数(PI)下降,AI/PI比例增大。As_2O_3能显著抑制肾包膜下胰腺癌移植瘤生长。电镜检查证实As_2O_3诱导的胰腺癌细胞具有凋亡与分化特征。结论:As_2O_3抗胰腺癌细胞作用主要通过诱导细胞凋亡与分化而得到体现。

RT-PCR检测氧化砷治疗APL复发患者的PML-RARα融合基因

目的：探讨急性早幼粒细胞性白血病（ＡＰＬ）患者在氧化砷（Ａｓ２Ｏ３）治疗过程中，ＰＭＬ－ＲＡＲα融合基因的变化。方法：应用ＲＴ－ＰＣＲ技术动态观察１４例ＡＰＬ复发患者在Ａｓ２Ｏ３治疗过程中，骨髓单个核细胞中ＰＭＬ－ＲＡＲα转录本的改变。结果：检测的１１例诱导缓解患者中，９例存在阳性ＰＭＬ－ＲＡＲα转录本，随访的６例患者中，３例呈现ＰＭＬ－ＲＡＲα转阴，但２例分别在缓解后５、７个月转阳。

三氧化砷联合人参皂甙Rg3对抗肝癌的实验研究

目的论证三氧化砷联合人参皂甙Rg3对抗肝癌细胞的作用。方法在接种肝癌Bel-7402细胞株的雄性裸鼠和人肝癌SMMC-7721细胞株,使用三氧化砷联合人参皂甙Rg3,观察药物对肿瘤生长的影响。结果抑制肝癌生长作用明显增强,细胞实验的肝癌细胞增殖受抑制。结论三氧化砷联合人参皂甙Rg3有较明显的抗肝癌作用。

氧化砷诱导耐药MR2细胞凋亡的机理研究

目的 探讨As2 O3 诱导耐药急性早幼粒细胞白血病 (APL)细胞凋亡的机制。方法 以耐维甲酸早幼粒白血病细胞株MR2为研究对象 ,非耐药早幼粒细胞白血病NB4为对照组 ,利用流式细胞仪、DNA电泳、免疫组化等手段 ,观察As2 O3 治疗耐药APL细胞的效应途径。结果 As2 O3 能显著诱导MR2细胞凋亡。MR2细胞P 糖蛋白 (PgP)表达 (30 %～ 40 % )较NB4细胞 (10 %～ 2 0 % )明显增强 (P <0 0 0 1) ,MR2细胞topoⅡβ表达 (17 6± 6 18～ 2 6 5± 10 0 1)较NB4细胞 (2 8 8± 3 37～38 3± 9 2 8)明显降低 (P <0 0 5 )。 0 5～ 2 0 μmol/LAs2 O3 能显著降低MR2细胞PgP表达和增强topoⅡβ表达 (P均 <0 0 5 )。结论 topoⅡβ表达降低和PgP高表达可能参与维甲酸耐药机制。调节topoⅡβ和PgP表达可能是As2 O3

氧化砷诱导食管癌细胞凋亡线粒体超微结构和膜电位的改变

目的 :研究氧化砷 (As2 O3)诱导食管癌细胞凋亡的过程中线粒体超微结构和功能的变化。方法 :培养的食管癌细胞系SHEE85加入 3 μmol LAs2 O3,作用 2 ,4 ,6,12 ,2 4h ,在光镜和电镜下观察细胞形态。以罗丹明 (Rhodamine 12 3 )荧光探针标记线粒体 ,细胞荧光光度计检查线粒体荧光强度 ,计算线粒体跨膜电位 (MTP ,△Ψm)的改变。结果 :线粒体荧光强度的改变反映MTP的状态。荧光强度早期增加 ,中期下降 ,后期最低 ,2 4h后细胞核呈典型凋亡改变伴有线粒体肿胀。结论 :在As2 O3诱导下 ,SHEE85细胞线粒体有明显的形态和功能改变伴随线粒体跨膜电位的降低 ,线粒体改变是As2

从含砷废液和废渣中制备三氧化砷

研究了将含砷废液和硫化砷废渣进行综合处理,制备出含As_2O_3达99.0％以上的三氧化砷的方法。用这种方法消除了含砷废水、废渣对环境造成的污染。考察了温度、酸度、液固比、浸出时间等因素对硫化砷中砷浸出率的影响,其中温度和硫酸浓度的影响较大。

氧化砷对K526细胞增殖和凋亡的作用及其机制的初步研究

目的 :研究氧化砷 (As2 O3 )对 K5 6 2细胞增殖和凋亡的作用及其机制。方法 :以细胞形态、细胞生长及活力测定 ,流式细胞仪分析细胞周期相关 DNA含量并以基因组 DNA电泳等方法观察 As2 O3 对 K5 6 2细胞的作用 ,采用 Western印迹和 Northern印迹法就其作用机制进行初步探索。结果 :在 As2 O3 作用下 K5 6 2细胞生长受抑伴随活力下降 ;基因组 DNA电泳出现“梯”状条带 ,流式细胞仪检测出“凋亡峰”。实验进一步表明 As2 O3 可降低该细胞 bcr/abl融合蛋白的含量 ,但不影响 CML 特异性 bcr/abl融合基因的 m RNA水平。结论 :As2 O3 有抑制 K5 6 2细胞增殖和诱导该细胞凋亡的作用。初步研究结果表明 ,As2 O3 导致 bcr/abl融合蛋白含量降低 。