耐高浓度氨基糖甙类抗生素肠球菌的研究进展

随着肠球菌院内感染率增加,耐药或多重耐药肠球菌已成为院内感染的重要病原菌。肠球菌对氨基糖甙类药物表现出高度的耐药性,极大地影响了临床用药的选择。重视对耐高浓度氨基糖甙类抗生素肠球菌耐药表型的筛选,从分子水平对耐氨基糖甙类抗生素肠球菌的耐药机制及耐药基因进行研究,可从理论上指导临床采取合理措施对肠球菌感染进行有效治疗和预防。

冬虫夏草防治氨基糖甙肾毒性损伤的实验研究

为阐明冬虫夏草（简称虫草）对氨基糖甙肾毒性损伤的防治作用，我们进行了一系列的实验研究，结果表明：在庆大霉素急性肾损伤模型中，接受虫草治疗的大鼠尿ＮＡＧ酶、血肌酐水平低于对照组，肾小球滤过和保钠功能优于对照组。离体肾灌注（ＩＰＫ）研究证明，虫草可提高ＩＰＫ代谢率，增加肾小球滤过，保护肾小管正常运转。此外虫草还可减轻体外培养的肾小管细胞对庆大霉素损伤的易感性。虫草作用的机理可能包括：（１）拮抗氨基糖甙所致肾脏氧耗下降，提高肾小管Ｎａ＋－Ｋ＋－ＡＴＰ酶活力；（２）减轻氨基糖甙溶酶体损伤和脂质过氧化损伤；（３）降低组织钙含量；（４）通过诱导肾小管细胞ｃ－ｍｙｃ基因表达，以及对损伤状态下肾内肾组织表皮生长因子（ＥＧＦ）调节的保护，促进肾小管的再生修复。

氨基糖甙类抗生素不同给药法与血药浓度的关系

对４５例使用庆大霉素（ＧＴＭ）和丁胺卡那霉素（ＡＭＫ）的住院病人，对其不同给药法进行了血药浓度的测定（ＴＤＸ仪），同时监测肾功能。结果，ＧＴＭ组１６例（１６０ｍｇ／ｄ，ｂｉｄ，ｉｍ，连用５ｄ）血药浓度Ｃ＿（ｍａｘ）（μｇ／ｍｌ）４．０±０．９，峰值偏低。ＡＭＫ组２９例（４００ｍｇ／ｄ，分为ｑｄ与ｂｉｄ，ｉｍ和ｉｖ），血药浓度ｑｄ与ｂｉｄ分别为（μｇ／ｍｌ）：ｉｍ组１８．６±２．７与８．０２±２．０；ｉｖ组１７．２±４．０与７．２±２．９，有显著性差异（Ｐ＜０。０１）。用药前、后肾功能监测均在正常值范围。本结果初步表明：ｑｄ给药法可提高抗菌效果，降低肾毒性。

三例氨基糖甙类抗生素致聋患者的线粒体DNA测序分析

应用PCR扩增产物直接对3名氨基糖甙类抗生素致聋患者的线粒体DNA进行序列分析，结果表明，他们的线粒体DNA均存在第1555位核苷酸A－G的突变．因此认为该突变是人体对氨基精甙类抗生素致聋遗传易感性的分子基础，与氨基糖甙类抗生素共同作用造成耳聋。

高效液相色谱-电喷雾离子阱质谱法分析6种氨基糖甙类抗生素

采用高效液相色谱-电喷雾离子阱质谱(HPLC-MSn)联用,分离和鉴定6种氨基糖甙类抗生素及其中的杂质,并探讨这6种结构相似的氨基糖甙类抗生素的质谱裂解规律。采用Agilent SB-C18(250 mm×4.6mm,5μm)色谱柱,流动相为0.05mol/L三氟乙酸溶液-甲醇(90∶10)和0.05 mol/L五氟丙酸溶液-甲醇(65∶35);在正离子检测方式下,用电喷雾离子阱质谱法对阿司米星、异帕米星、大观霉素、威替米星、奈替米星、西索米星及其杂质进行多级质谱分析。异帕米星、威替米星、奈替米星、西索米星及其杂质在二级质谱分析时,均可发生B环(脱氧链霉胺)与C环(氨基葡萄糖)之间的糖苷键断裂,生成脱去C环的碎片离子,并进一步发生A环(氨基葡萄糖)与B环之间的糖苷键断裂,生成A环或B环的碎片离子。鉴定了6种氨基糖甙类抗生素中7个杂质的结构。

氨基糖甙类抗生素JI-20A发酵培养条件的研究

研究了氨基糖甙类抗生素JI-20A分批发酵培养基和发酵工艺的优化。结果表明发酵培养基的优化组成为玉米淀粉60g/L,花生饼粉30g/L,麦芽糖10g/L,玉米浆8g/L,复合无机盐适量,淀粉酶适量,蛋氨酸1g/L和氯化钴6μg/mL。控制消后培养基pH值和氧的供应条件有助于抗生素JI-20A产生菌的菌体生长和产物合成。

核修饰基因与氨基糖甙类药物在母系遗传性聋发病机制及功能研究

目的对同时存在线粒体DNA 12S rRNA基因突变(A1555G突变)和存在个体表现出对氨基糖甙类药物不敏感的家系进行系统的资料收集和分子机制分析工作。方法对此家系进行体格检查、耳鼻咽喉专科检查、听力学检查,并对此家系进行线粒体DNA测定、线粒体单体型分型、氨基糖甙类药物敏感性检测、线粒体DNA相关核修饰基因TRMU和MTO1等研究。结果通过对全体成员的线粒体DNA序列测序分析,该家系的母系成员均有同质性A1555G突变;线粒体单体型分析为D5b1b;对发现的氨基糖甙类药物不敏感成员及家系中另一敏感成员行核基因TRMU和MTO1测序序列分析,对比发现MTO1基因变异:74202000_74202001insG和74202003delG,而TRMU基因未发现有意义的突变。结论线粒体DNA 12S rRNA基因突变家系中,存在对氨基糖甙类药物不敏感个体,MTO1为可能的核修饰基因,但其分子机制需要进一步深入研究。

氨基糖甙类抗生素一日一次给药法

氨基糖甙类抗生素是临床常用的药物之一,该药一日两次给药法已为临床广泛使用,然而,多年来一直有人探索一日一次给药法的可能性,目前关于其疗效的可靠性及安全性研究均取得了一些新进展。一、关于疗效可靠性的实验研究最近报道:氨基糖甙类的血清最大峰浓度或平均峰浓度与最小抑菌浓度(MIC)的比率,与病人治疗反应呈很好的正相关,这就是说,与MIC 和MBC 相比,相对较高的药物峰浓度是其临床抗菌治疗反应的决定因素。若每日药物总剂量相同,一日一次治疗时药物峰浓度最高,因而其杀菌活性也应当最好,大量试验结果均支持这一推论。

66例氨基糖甙类抗生素致聋患者的线粒体DNA1555位突变检测

目前认为 mt DNAA15 5 5 G突变与氨基糖甙类抗生素致聋 (AAID)有关。通过调查采集了 6 6例 AAID病例 ,采外周血作 PCR- RFL P分析 ,对照组为 30例正常人 ,分析 mt DNAA15 5 5 G突变在 AAID中的作用。研究发现 :6 6例AAID患者中 ,14例具有 A15 5 5 G突变 ,而其余的 5 2例和对照组均无此突变。这表明 mt DNAA15 5 5 G突变是人体对氨基糖甙类抗生素遗传易感性的分子基础之一 ,基因和环境因素的相互作用可能在 AAID的发生中起重要作用。

氨基糖甙类抗生素用药方案

氨基糖甙类抗生素用药方案孙昕，王睿（中国人民解放军总医院临床药理研究室北京１００８５３）氨基糖甙类抗生素是广谱抗生素，但因耳、肾毒性较大，限制了它的应用。近年来通过对用药方案的研究，发挥其抗菌优势，降低不良反应。１－日一次给药方案的设想１．１一日一次...

冬虫夏草对老年人氨基糖甙肾毒性损伤的保护作用

本研究观察了冬虫夏草对老年人氨基糖甙（ＡＧ）类肾毒性的影响。随机将２１例患者分为冬虫夏草治疗组和对照组。两组同时用丁胺卡那霉素０．４ｇ／ｄ，连续６天。虫草组用冬虫夏草口服，连续７天。动态观察了尿ＮＡＧ酶和β２－微球蛋白（β２－ｍ）变化，治疗后虫草组与对照组尿ＮＡＧ酶分别为２３．５１±１０．８４ｍｕ／ｍｇ·Ｃｒ、４５．４２±２６．９７ｍｕ／ｍｇ·Ｃｒ，Ｐ＜０．０５。虫草组治疗后尿β２－ｍ＞１．０ｍｇ／２４ｈ者１例（１０％）与用药１天时６例（６０％）比较，Ｐ＜０．０５。对照组治疗后与用药１天时尿β２－ｍ比较，无统计学意义。结果证明虫草组肾毒性损伤要轻于对照组，提示冬虫夏草对老年人ＡＧ肾毒性损伤有良好的保护作用。

线粒体DNA突变与氨基糖甙类抗生素致聋

近年来的研究表明 ,氨基糖甙类抗生素致聋与线粒体DNA突变有关。

铜绿假单胞菌对氨基糖甙类抗生素耐药状况及相关耐药基因检测

目的了解铜绿假单胞菌对氨基糖甙类抗生素的耐药状况,探讨其耐药机制。方法采用微量稀释法和纸片扩散法进行抗生素敏感试验,聚合酶链反应(PCR)检测5种氨基糖甙类修饰酶耐药基因。结果临床分离的264株铜绿假单胞菌对庆大霉素、妥布霉素和阿米卡星的耐药率分别为8.6%、7.5%和2.9%。被检耐药基因的20株铜绿假单胞菌中有6株检出氨基糖甙类修饰酶耐药基因,分别是aac(3)-Ⅱ(2/20)、aac(6′)-Ⅰ、(1/20)、ant(3")-Ⅰ(1/20)和ant(2")-Ⅱ(2/20)。结论该院铜绿假单胞菌对常用氨基糖甙类抗生素的敏感性高,此类抗生素仍是临床治疗铜绿假单胞菌感染的优先选择。产生氨基糖甙类修饰酶是该院临床感染铜绿假单胞菌对氨基糖甙类抗生素的耐药机制之一。

耐甲氧西林葡萄球菌中耐氨基糖甙类基因的检测研究

目的研究该院耐甲氧西林葡萄球菌对氨基糖甙类药物耐药的相关基因型的流行情况。方法用MicroScan Auto SCAN4细菌鉴定仪对该院2002年1～12月分离的60株耐甲氧西林葡萄球菌进行鉴定，药敏试验采用K-B法；利用聚合物酶链反应（PCR）法进行aac（6’）／aph（2”）、aph（3’）-Ⅲ、ant（4’，4”）等耐药基因的检测。结果24株耐甲氧西林溶血葡萄球菌（MRSH）中检出aac（6’）／aph（2”）、aph（3’）-Ⅲ、ant（4’，4”）基因分别为21株（87．5％）、8株（33．3％）、7株（29．2％）；36株耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）中检出aac（6’）／aph（2”）、aph（3’）-Ⅲ、ant（4’，4”）基因分别为33株（91．7％）、26株（72．2％）、3株（8．3％）。结论MRSH对氨基糖甙类抗生素的耐药机制主要是携带了aac（6’）／aph（2”）基因，表现在对庆大霉素和妥布霉素高度耐药，并与耐药表型基本相符；MRSA对氨基糖甙类抗生素的耐药机制主要是携带了aac（6’）／aph（2”）和aph（3’）-Ⅲ基因。表现在对庆大霉素、妥布霉素和阿米卡星高度耐药。MRSA对氨基糖甙类抗生素的耐药率比MRSH更高。MRSH和MRSA中的aph（3’）-Ⅲ、ant（4’，4”）基因检出率数据经统计软件处理，差异有统计学意义（P〈0．05）。

线粒体基因突变与氨基糖甙类抗生素耳毒性

近年来文献已报道氨基糖甙类抗生素大剂量使用普遍存在对前庭和耳蜗功能的损害，小剂量呈现耳毒易感性的遗传因素［１］，并发现氨基糖甙类抗生素致聋（ａｍｉｎｏｇｌｙｃｏｓｉｄｅａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｉｎｄｕｃｅｄｅａｆｎｅｓ，ＡＡＩＤ）家系成员的线粒体ＤＮＡ...

冬虫夏草对氨基糖甙肾毒性损伤的保护作用

本文前瞻性地观察了冬虫夏草对氨基糖甙(AG)类肾毒性的影响。按随机双盲将54例患者分为冬虫夏草治疗组和安慰剂组。两组同时接受庆大霉素6mg·kg^(-1)/d(18～32岁)或丁胺卡那霉素0.4g/d(55～73岁)注射,连续6天。动态观察尿NAG酶和β_2微球蛋白排泄的结果表明,冬虫夏草治疗组肾毒性损伤要轻于单用AG的对照组。冬虫夏草对临床AG肾毒性损伤具有良好的保护作用。

C57BL/6J小鼠在不同剂量氨基糖甙类药物暴露下听力损害的特点

目的探讨C57BL/6J小鼠在不同剂量氨基糖甙类药物毒性作用下听力损害的特点。方法采用不同剂量的庆大霉素对成年C57BL/6J小鼠进行腹腔注射,小鼠随机分成五组,药物剂量浓度分别为300mg/kg,200mg/kg,100mg/kg和50mg/kg。对照组为等量的注射用0.9%生理盐水,药物注射连续应用7天。分别于用药前(p0,对照组)以及用药后第2天(P2)、第4天(P4)、第7天(P7)检测动物的听功能(Click&Tonebrust),并进组间差异的比较分析。结果 (1)在50mg/kg组,用药后第7天的听阈值和对照组听阈分别为48.33±10.33(P7)和41.67±11.20(P0),两者相比具有显著性差异(P<0.05)。在100mg/kg组,用药后第4天的听阈值和对照组相比具有显著性差异(P4:48.89±9.16;P0:40.83±10.07,P<0.05)。在200mg/kg和300mg/kg组,用药后第2天的听阈值和对照组相比有显著上升(200mg/kg,P2:50.56±5.39;P0:40.42±9.66,P<0.05),(300mg/kg,P2:50.50±6.85,P0:40.00±11.00,P<0.05)。(2)各剂量组药物在Click和Toneburst(4kHz,8kHz&t16kHz)频率中,听力损害程度存在区别,损害程度依次为:200mg/kg组>300mg/kg组>100mg/kg组>50mg/kg组。(3)在8kHz&16kHz频率上,①50mg/kg与300mg/kg剂量组在给药后第2、4、7天均无明显听力变化(P>0.05)。②在100mg/kg组:与对照组相比,给药后第4天、第7天的听阈出现明显升高(P<0.05)。③在200mg/kg组:给药后第2、4、7天的听阈值亦出现显著升高(P<0.05)。(4)在给药后第7天,各剂量组的听阈均达到峰值。结论本研究表明:(1)随着给药剂量的增加,C57BL/6J小鼠听力损害出现的时间提前,但听力损害的程度并非同步加重;(2)以200mg/kg浓度给药后,小鼠听力在Click&Toneburst上均可以产生明显变化,同时小鼠的生理状态依然保持良好,因而200mg/kg(庆大霉素)浓度可能是C57BL/6J小鼠药物性致聋的理想剂量。