植物炭黑对九种水产致病菌的抑制和吸附效果

为研究植物炭黑对常见水产致病菌的抑制和吸附效果,采用琼脂稀释法测定植物炭黑对9种水产致病菌的最小抑菌浓度,并将受试菌悬液和不同浓度的植物炭黑混合,测定受试菌的吸附率、解吸附率和植物炭黑吸附力。结果表明,植物炭黑对溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)、哈维氏弧菌(Vibrio harveyi)的MIC均为200 mg/mL,对迟缓爱德华菌(Edwardsiella tarda)MIC为12.5 mg/mL,对其他6种致病菌的MIC均为25 mg/mL;当受试菌浓度为106CFU/mL时,随着植物炭黑浓度的增加,受试菌吸附率逐渐增大,至100%后保持不变,解吸附率逐渐减小,至0后保持不变,且当植物炭黑浓度为2 mg/mL时,试验组受试菌的吸附率均可达100%,解吸附率均为0;当受试菌浓度保持不变,植物炭黑浓度逐渐增加时,植物炭黑吸附力逐渐减小。因此,植物炭黑对常见水产致病菌具有较好的吸附效果,对淡水致病菌的抑制性强于海水致病菌。

黄芩总黄酮部位对常见水产致病菌的体外抑制作用

为寻找水产养殖领域天然、安全的抗生素替代品,探索黄芩醇提物对水产致病菌抑制作用的总黄酮部位.采用大孔树脂分离和抑菌圈法确定黄芩抗菌的总黄酮部位,采用紫外分光光度法和HPLC法分别对其进行定量和定性分析,采用琼脂稀释法测定黄芩总黄酮部位对7种水产致病菌的MIC.研究结果表明,黄芩中的黄酮类成分主要富集在30%醇洗和70%醇洗部位,并表现出明显的抑菌活性,其总黄酮含量达75.2%.黄芩总黄酮部位对其中6种水产致病菌的10个菌株均表现出较强的抑制作用,其MIC在0.36~1.43 mg/mL之间.黄芩总黄酮部位具有较广谱的抗水产致病菌作用,在水产养殖业有着广泛的应用前景.

基于磁控分离的水产致病菌微流控检测方法

针对当前水产致病菌传统检测方法中存在目标菌分离难、检测时间长、自动化程度低等问题,提出了一种基于磁控分离的水产致病菌微流控检测方法。设计了具有自动进样、磁控分离以及电化学阻抗检测等一体化功能的微流控芯片,创建了检测系统实验平台,优化选择了系统阻抗检测频率、磁控力及目标菌捕获时间等参数,并以常见水产致病菌大肠杆菌O157:H7为例对检测性能指标进行了实验验证,结果表明,与精度较高的标准平板计数法相比,检测精度基本相同,但避免了人工培养,检测时间由48 h减少为50 min,具有较高的分离检测速度和检测自动化水平。

水产致病菌对氟甲砜霉素敏感性及耐药性研究

研究了氟甲砜霉素对7种水产致病菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),进行了氟甲砜霉素及其它24种抗菌药物对7种水产致病菌的药敏试验,并测定了7种水产致病菌对氟甲砜霉素的耐药性。结果表明,氟甲砜霉素对水产致病菌有较好的抑菌效果,测试的7种菌中有5种菌对氟甲砜霉素高度敏感,1种菌中度敏感,1种菌产生耐药性,而且测试菌对氟甲砜霉素的耐药性获得速率也较慢。

替米考星对水产致病菌体内外抗菌和对异育银鲫毒性作用

研究替米考星对3种水产致病菌体外抗菌作用,替米考星对嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophilia)感染异育银鲫的防治效果和替米考星对异育银鲫的急性毒性作用。应用二倍稀释法研究质量浓度为0.125、0.25、0.5、1、2、4、8、16、32、64、128 mg/L的替米考星对嗜水气单胞菌(Aeromonas hyolrophila)、温和气单胞菌(Aeromonas sobria)和鳗弧菌(Vibrio anguillarum)的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),并计算MBC/MIC比值。腹腔注射0.3 m L浓度为9×10~8CFU/m L的嗜水气单胞菌菌液感染体质量为(217.65±25.26)g的异育银鲫,分别在感染后1、24和48 h以0、50、100、150 mg/kg鱼体重的剂量分别口灌替米考星,计算替米考星对嗜水气单胞菌感染异育银鲫的保护率。应用剂量为0、260、300、340、387、440 mg/kg的替米考星口灌异育银鲫,记录异育银鲫的死亡率,计算替米考星对异育银鲫的半数致死量LD_(50)。结果表明,替米考星对嗜水气单胞菌、温和气单胞菌和鳗弧菌的MIC分别为4.00、0.50和1.00mg/L,MBC分别为64、32和32 mg/L,MBC/MIC比值分别为16、64和32;100和150 mg/kg鱼体重剂量的替米考星对嗜水气单胞菌人工感染异育银鲫的保护率可达100%;替米考星对异育银鲫口灌的24、48、72和96 h的半数致死剂量LD_(50)分别为344.0、306.3、298.5和298.5 mg/kg。替米考星对3种水产致病菌具有一定的体外抗菌效果;替米考星对嗜水气单胞菌感染的异育银鲫具有一定的保护作用;但同时替米考星对异育银鲫也具有中等毒性。本研究可为替米考星在水产养殖中的合理使用提供参考。

烟酸诺氟沙星对3株水产致病菌的抗生素后效应

采用微量接种菌落计数法，测定了烟酸诺氟沙(norfloxacin nicotinate，NN)对副溶血弧菌、嗜水气单胞菌及溶藻弧菌等3种水产致病菌的抗生素后效应(post—antibiotic effects，PAE)。结果表明，诺氟沙星对3种水产致病菌具有明显的抗生素后效应。不同MIC倍数浓度的NN对细菌的PAE各不相同，4MIC的PAE最高，对3q7T-4、SS—18和3q8T-2三种致病菌的PAE分别为3．1h,2．5h和3．7h，而低浓度的药物则PAE较低，0．5MIC的PAE分别为0．4h,0．6h和0．7h。

2种肉桂醛制剂对水产动物致病菌抑菌、杀菌效果比较

肉桂醛具有良好的抑菌、杀菌效果,但难溶于水、易氧化的特性限制了肉桂醛的应用范围。为提高肉桂醛水溶性并避免被氧化,本研究构建了纳米乳和羟丙基(β)环糊精包合物两种肉桂醛制剂,以链霉素为阳性对照,比较二者对创伤弧菌(Vibrio vulnificus)、哈维弧菌(Vibrio harveyi)、荧光假单胞菌(Pseudomonas fluorescens)、嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)、迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)、温和气单胞菌(Aeromonas sobria)的抑菌、杀菌效果。结果表明:肉桂醛纳米乳制剂对上述6种水产致病菌的最小抑菌浓度(MIC)为0.93、2.05、1.67、14.88、9.30、1.86 mg/mL,最小杀菌浓度(MBC)为2.40、6.00、1.86、16.00、10.23、5.00 mg/mL,抑杀效果均大幅度优于肉桂醛-羟丙基(β)环糊精包合物。结论:与羟丙基(β)环糊精包合物相比,肉桂醛纳米乳制剂有更高的载药量,对致病菌有更强的抑菌、杀菌活力。虽然两种制剂对致病菌的抑菌、杀菌活力远低于链霉素,但是在绿色无抗水产养殖中仍具有潜在的应用前景。

浅谈监测水产动物致病菌耐药性的重要意义

细菌对抗微生物药物耐药的问题,已经成为全球范围的重大公共卫生问题。毫无疑问,抗微生物药物的广泛而大量使用是导致细菌产生耐药性的重要因素之一。对于细菌耐药性进行监测,就是阐明细菌耐药机制、细菌耐药性发展趋势及细菌耐药性与抗微生物药物应用关系等问题的重要途径。

单过硫酸氢钾粉对5种水产常见致病菌的体内外抑菌作用

研究了单过硫酸氢钾粉对5种水产常见致病菌的体内、外抑菌作用,测定了体外最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)及以保护率为指标的体内抑菌效果。结果表明,体外抑菌实验中,单过硫酸氢钾粉对爱德华氏菌Edwardsiella、温和气单胞菌Aeromonas sobria、嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila、迟钝爱德华氏菌Edwardsiella tard、荧光假单胞菌Psudomonas fluorescens均有明显的抑制作用,其对5种菌的MIC分别为1、0.25、0.125、0.25、0.5μg/ml;MBC与MIC相同。而体内抑菌实验中,随着单过硫酸氢钾粉浓度的增加,由5种致病菌引起鲫鱼的死亡率逐步降低。统计分析发现,使用0.25μg/ml单过硫酸氢钾粉药浴鲫鱼,即可对由5种致病菌引起的鲫鱼病害有治疗的作用。

黄连素对3种水产动物致病菌的抑制作用研究

文章研究了黄连素对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、溶藻弧菌(V.alginolyticus)和嗜水气单胞菌(Aer-omonas hydrophila)等3种致病菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),检测了黄连素对病原菌菌体形态和生长曲线的影响,并以此解析黄连素对这3种致病菌的抑制特点和抑菌机制。结果显示,黄连素对副溶血弧菌、溶藻弧菌、嗜水气单胞菌的MIC和MBC分别为0.391 mg.mL-1和0.391 mg.mL-1、0.391 mg.mL-1和0.781 mg.mL-1、0.781 mg.mL-1和1.563 mg.mL-1,说明黄连素对3种致病菌均有明显的抑制作用,其中对副溶血弧菌的抑制效果最佳。同步结果显示,1.00 mg.mL-1黄连素不仅会严重破坏致病菌的菌体形态,而且使致病菌的迟缓期延长2～7 h,这暗示黄连素可能通过影响致病菌的细胞结构和生长繁殖来达到抑菌的效果。由此可见,黄连素在防治水产类细菌性疾病上有很好的应用潜力。

二氧化氯对水产动物致病菌的杀菌效果及安全性评价

为了评价二氧化氯在水产养殖中应用的安全性 ,达到合理用药的目的 ,对二氧化氯的杀菌效果、急性毒性等方面进行了一系列的试验。结果表明二氧化氯对鱼类致病菌具有很好的杀菌效果 ,对鲢、草鱼、鲤、鲫、大口鲶及中华鳖等水产养殖动物安全。

关于水产动物致病菌耐药性监测可行性等答读者问

作者等在《渔业致富指南》2008年第11期上发表题为“成都通威股份有限公司率先在国内开展水产养殖动物致病菌耐药性监测”的小文章后，陆续收到各地读者过电话或者电子邮件等方式传来的各种问题，综合各位读者提出的主要问题，现回答如下。

肉桂醛脂质体对3种水产动物致病菌抑菌效果比较

以肉桂醛为对照,比较了肉桂醛脂质体(LEC)对副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、哈氏弧菌(Vibrio harveyi)和迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tarda)的抑菌效果。结果表明,LEC和肉桂醛对3种菌均有明显的抑制作用,随着用药浓度的增大,抑菌能力增强。LEC对副溶血弧菌、哈氏弧菌和迟缓爱德华氏菌的最小抑菌浓度(MIC)折合成肉桂醛浓度分别为2. 50、1. 25、2. 50 mg/mL,最小杀菌浓度(MBC)均为5. 00 mg/mL。对照组肉桂醛的MIC分别为7. 81、7. 81、1. 95 mg/mL,MBC分别为7. 81、15. 62、1. 95 mg/mL。由于肉桂醛有难溶于水的缺点,因此易溶于水的LEC在水产养殖方面具有很好的应用前景。

盐酸土霉素对水产动物致病菌的抗菌作用(2)

3.2杀鲑气单胞菌（Aeromonassal monicida）杀鲑气单胞菌（A.salmonicida）是鲑科鱼类疖疮病的病原菌,是革兰氏阴性杆菌。盐酸土霉素对该菌的MIC测定结果如表5所示。

盐酸土霉素对水产动物致病菌的抗菌作用(3)

3.4迟缓爱德华菌迟缓爱德华菌(Edwardsiella tarda=Paracolobacterium anguillimortiferum)为革兰氏阴性杆菌,鳗鲡肝肾病的病原菌。关于这种致病菌对盐酸土霉素存在抗药性的问题,已经有少量报道。保科(1962)从患病的日本鳗鲡上分离的E.tarda,测定盐酸土霉素对其MIC为3.2μg/mL,认为还是比较敏感的。楠田等(1977)在三重县等地养殖真鲷上分离的E.tarda,测定盐酸土霉素对其MIC为0.2μg/mL,认为还是高度敏感的。

盐酸土霉素对水产动物致病菌的抗菌作用(1)

国外在比较早的时候就将盐酸土霉素用于防治水产动物传染性疾病的研究,这里主要介绍日本和欧洲一些国家,在利用盐酸土霉素防治水产动物传染性疾病之前完成的一些试验结果。便于我国的渔药生产企业在开发此类产品和水产养殖业者在使用此类药物时参考。

盐酸土霉素对水产动物致病菌的抗菌作用(5)

3．9诺卡氏菌 诺卡氏菌（Nocardia）属于革兰氏阳性丝状菌。是五条蛳等养殖鱼类诺卡氏菌病的病原菌。

盐酸土霉素对水产动物致病菌的抗菌作用(4)

3．7柱状黄杆菌 柱状黄杆菌（柱状嗜纤维菌Cytophaga columnaris=柱状曲绕杆菌Flex—ibactercolumnaris）是柱性病的病原菌．革兰氏阴性杆菌。

杀鱼爱德华氏菌新型毒力因子研究进展

杀鱼爱德华氏菌(Edwardsiella piscicida,又称迟缓爱德华氏菌),可感染多种重要水产养殖动物,对全球水产养殖业造成巨大经济损失。杀鱼爱德华氏菌具有很强的环境适应性与抗逆性,通过典型的胞内寄生引发严重感染,为研究水产致病菌毒力机制的模型菌株。除T3SS/T6SS系统等典型毒力因子外,近年来又在杀鱼爱德华氏菌中鉴定出众多新型毒力因子。本文主要综述了杀鱼爱德华氏菌一些新型毒力因子(如逃逸宿主免疫杀伤因子、毒素-抗毒素、硫氧还蛋白和蛋白酶类等)以及新型毒力调控因子的研究进展,可为研究该菌致病性提供参考。

虾源罗伊氏黏液乳杆菌的分离鉴定及其性质研究

本试验旨筛选一株防治水产致病菌能力强的虾源乳酸菌,并对其抑制水产致病菌的性质进行研究。以健康南美白对虾的不同肠段菌群为菌株分离来源,采用CaCO 3-MRS固体培养基分离纯化乳酸菌,再通过抑菌能力试验和溶血试验复筛获得安全菌株。对筛选的乳酸菌菌株进行16S rRNA测序鉴定,并评价其生长特性、耐受性、抗生素敏感性及不同处理的发酵上清液对水产病原菌的抑菌能力。结果显示:对常见水产致病菌抑菌能力最强的安全菌株经16S rRNA测序鉴定为罗伊氏黏液乳杆菌SAMMRS-1G。在菌株的生长特性上,罗伊氏黏液乳杆菌SAMMRS-1G的最适培养pH为5.0,最适培养温度为39℃,4~14 h为其对数生长期;从耐受性上看,罗伊氏黏液乳杆菌SAMMRS-1G对人工胃肠液和渗透压均具有一定的耐受性,在pH 3.0条件下静置培养4 h存活率为90.7%,3.0 g/L的胆盐浓度下培养4 h存活率为85.3%,60‰高盐度条件下静置培养4 h存活率为98.7%;在不同处理对罗伊氏黏液乳杆菌SAMMRS-1G发酵上清液抑菌能力影响方面,发酵上清液对致病菌的抑菌能力为创伤弧菌>金黄色葡萄球菌>副溶血弧菌>腐败希瓦氏菌>沙门氏菌>嗜水气单胞>大肠杆菌>假交替单胞菌>溶藻弧菌>霍乱弧菌>哈维弧菌,且发酵上清液具有良好的热稳定性,蛋白酶处理后抑菌能力在原来的82%以上,具有较强的稳定性;小鼠安全性试验表明,罗伊氏黏液乳杆菌SAMMRS-1G对小鼠的生长性能和脏器指数均无负面影响。综上可知,本试验筛选出的虾源罗伊氏黏液乳杆菌SAMMRS-1G是一株耐受性好、防治水产致病菌能力强、代谢产物活性稳定、具有益生菌潜力的安全乳酸菌,可为水产养殖替抗产品的开发提供参考菌种。