盐益智仁-盐小茴香药对止泻活性部位筛选及“谱效”关系研究

目的筛选盐益智仁-盐小茴香药对(YZYH)止泻活性部位,并通过“谱效”关系研究推测其药效物质基础和质量标志物。方法制备大鼠脾肾阳虚泄泻模型,测定盐益智仁-盐小茴香药对石油醚(YZYH⁃L)、乙酸乙酯(YZYH⁃M)、水(YZYH⁃H)3部位药效指标,包括体重、肛温、腹泻潜伏期(diarrhea incubation period,DIP)、腹泻指数(diarrheal index,DI)等行为学指标及一氧化氮合成酶(nitric oxide synthetase,NOS)、环磷酸鸟苷(cyclic guanosine monophosphate,cGMP)、磷酸肌酸激酶(creatine phosphate kinase,CPK)等生化指标;建立不同部位高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)图谱,采用灰色关联法分析各部位化学成分与止泻药效指标间的“谱效”关系。结果与空白对照组大鼠相比,15 d后,模型组大鼠出现泄泻证主症关键病理指标—水样便,同时,伴随食后腹胀、食欲不振和弓背等脾阳和肾阳虚泄泻的次症典型特征;给与治疗药物后,泄泻主症和次症均有不同程度的改善,其中阳性药、YZYH⁃M部位第28天后泄泻模型大鼠关键指标DIP极显著延长(P<0.01)、DI极显著降低(P<0.01),以及脾、肾阳虚泄泻的次症典型特征代表性指标体重、24 h摄食、饮水量、肛温和血清生化指标NOS、cGMP、CPK等活性的调节作用均较其它给药组好;“谱效”关系研究表明茴香醛、4号色谱峰等成分与DIP、DI、NOS、cGMP、CPK 5个药效指标的关联度重要。结论YZYH⁃M部位为药对止泻活性部位,其作用机制与抑制胃肠功能亢进和调节机体能量代谢与免疫相关;茴香醛及4号峰作为药对的质量标志物。

两色金鸡菊降血脂活性部位筛选研究

目的:研究两色金鸡菊降血脂活性部位。方法:采用溶剂法通过降血脂活性筛选确定较佳的提取溶剂,并对提取物精制纯化进行降血脂活性考察。结果:两色金鸡菊水提物在高剂量下能显著降低高血脂小鼠血清中TC和LDL-C含量;水提物精制部位在低剂量下可显著降低血清TC和LDL-C含量;水提物和水提物经大孔吸附树脂30%乙醇洗脱部位高剂量下均可显著降低血清TC和LDL-C蛋白含量。结论:两色金鸡菊的最佳提取溶剂为水,大孔吸附树脂30%乙醇洗脱部位为活性部位。

蔷薇红景天总黄酮提取物对Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤的保护作用及其活性部位筛选

目的考察蔷薇红景天总黄酮提取物(TFE)对β淀粉样蛋白25-35(Aβ_(25-35))诱导的PC12细胞损伤的保护作用及其活性部位筛选。方法采用20μmol·L^(-1)Aβ_(25-35)诱导PC12细胞损伤,经AB-8大孔吸附树脂色谱法分离蔷薇红景天TFE,得水及20%、40%、60%、80%、95%乙醇洗脱物(即TFE-0%、TFE-20%、TFE-40%、TFE-60%、TFE-80%和TFE-95%)。计算不同体积分数乙醇洗脱物浸膏得率(赋予0.3权重),紫外分光光度法检测不同体积分数乙醇洗脱物总黄酮含量(赋予0.7权重),综合评价不同体积分数乙醇洗脱物。MTT法检测不同体积分数乙醇洗脱物对损伤后PC12细胞活力的影响;采用倒置显微镜观察细胞形态;采用2,4-二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶(LDH)的活性;采用黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶(SOD)的含量;酶联免疫测定(ELISA)法分别检测细胞上清中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、环氧合酶-2(COX-2)和白细胞介素-1β(IL-1β)的分泌水平。结果TFE-40%总黄酮浓度和浸膏得率的综合得分高于其他不同体积分数乙醇洗脱物。与空白组比较,模型组细胞间隙变大,数目减少,出现细胞碎片,突触明显减少,存活率和SOD水平明显降低(P<0.05),LDH水平明显升高(P<0.05);与模型组比较,TFE-40%、TFE-60%洗脱物和盐酸多奈哌齐组细胞形态均有一定程度改善,数目增多,突触增加,细胞形态较完整;TFE-40%、TFE-60%、TFE-80%及TFE-95%组的细胞上清液中IL-6、TNF-α、COX-2和IL-1β的水平均明显降低(P<0.05)。结论蔷薇红景天TFE-40%洗脱物对Aβ_(25-35)诱导的PC12细胞损伤具有较好保护作用,为最佳活性部位,其机制可能与拮抗Aβ_(25-35)的神经毒性和抑制细胞炎症的发生有关。

玉女煎体外抗炎最佳活性部位筛选及其物质基础研究

目的筛选玉女煎复方体外抗炎的最佳活性部位,并对其成分进行分析,探讨其物质基础。方法玉女煎复方采用水提取,提取物浓缩后经D101大孔树脂进行粗分,分为水洗脱、30%乙醇-水洗脱、60%乙醇-水洗脱及95%乙醇-水洗脱4个洗脱部位。采用脂多糖诱导小鼠巨噬细胞炎症模型评价玉女煎水提液及各洗脱部位的抗炎活性,使用MTT法和Griess法检测细胞活力和一氧化氮生成量。随后对筛选出的最佳活性部位的抗炎活性进行验证。采用ELISA法检测IL-1β、TNF-α、IL-6水平,用显微暗场成像法观察细胞形态,用免疫荧光实验检测细胞内NF-κB p65表达。最后通过中压色谱分离凝胶柱分离结合活性追踪的方法对最佳活性部位成分进行分离,用核磁共振仪进行鉴定。结果玉女煎水提液、水洗脱部位、30%乙醇-水洗脱部位及60%乙醇-水洗脱部位均有抗炎活性,其中水洗脱部位和30%乙醇-水洗部位抗炎活性弱于水提液,60%乙醇-水洗脱部位抗炎活性最强,95%乙醇-水洗脱部位无抗炎活性。60%乙醇-水洗脱部位对脂多糖诱导的细胞形态改变、NF-κB p65表达及入核增加的抑制作用最强,从该部位分离出了sonnerphenolic B、(+)-nyasol、broussonin A、2,4-二甲基苯甲酸和2,4-二羟基苯甲酸5个化合物,其中3个归属知母。结论60%乙醇-水洗脱部位为玉女煎抗炎的最佳活性部位,知母可能是其抗炎活性的主要贡献者。

金槐枝叶活性部位筛选及其化学成分研究

目的:筛选金槐枝叶的抗氧化和α-葡萄糖苷酶的抑制活性部位,研究其化学成分。方法:以α-葡萄糖苷酶抑制为筛选模型,并结合ABTS法、DPPH法对金槐枝叶不同极性部位进行活性评价,采用大孔树脂、C_(18)柱色谱和高效液相色谱等分离技术对活性部位进行分离纯化,根据波普数据分析以及文献比对鉴定化合物结构,并测定化合物对α-葡萄糖苷酶的抑制活性。结果:金槐枝叶乙酸乙酯部位的抗氧化和α-葡萄糖苷酶的抑制活性强于其他部位,并从中分离得到5个黄酮苷类化合物,分别鉴定为芦丁(1)、山柰酚3-O-芸香糖苷(2)、山柰酚3-O-洋槐糖苷(3)、Kaempferol 3-(2Grhamnosylrutinoside)(4)、Kaempferol 3-O-(2,6-di-α-L-rhamnopyranosyl)-β-D-galactopyranoside (5),且5个化合物均具有良好的α-葡萄糖苷酶抑制活性,IC_(50)分别为(79.92±3.24)μg/mL、(82.03±4.45)μg/mL、(89.21±3.87)μg/mL、(148.28±5.78)μg/mL、(152.36±4.96)μg/mL,化合物1~3的抑制活性高于阳性对照阿卡波糖。结论:乙酸乙酯部位是金槐枝叶的主要活性部位,且从中分离得到的化合物4和5为首次从该植物中分离得到。

问荆止血作用活性部位筛选及作用机制研究

目的筛选问荆止血作用的活性部位,初步探讨其止血作用机制。方法制备问荆石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水部位提取物,将昆明小鼠随机分成14组:空白组、云南白药组,水部位组、正丁醇部位组、乙酸乙酯部位组、石油醚部位组(各极性部位剂量:6、4、2 g/kg),连续给药7 d后,采用断尾法和眼眶取血法测定出血时间(BT)、凝血时间(CT);采用自动凝血仪测定凝血四项:凝血酶原时间(PT)、凝血酶时间(TT)、活化部分凝血酶时间(APTT)、纤维蛋白原(FIB)浓度。结果与空白组比较,乙酸乙酯部位(剂量:6、4、2 g/kg)组、石油醚部位(剂量:6 g/kg)组可显著缩短小鼠的BT、CT、PT、APTT(P<0.01);石油醚部位(剂量:4 g/kg)组可缩短小鼠的BT、CT、PT、APTT(P<0.05),正丁醇部位(剂量:6、4、2 g/kg)组、水部位(剂量:6、4、2 g/kg)组及石油醚部位(剂量:2 g/kg)组对小鼠的BT、CT、PT、APTT均无明显影响(P>0.05),各提取部位对小鼠的TT及FIB浓度均无明显影响(P>0.05)。结论问荆止血作用活性部位为石油醚部位、乙酸乙酯部位,作用机制与激活内、外源性凝血系统有关。

兴安毛连菜抗炎活性部位筛选及作用机制研究

目的筛选兴安毛连菜抗炎作用的活性部位,初步探讨其作用机制。方法制备兴安毛连菜醇提物石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水不同极性部位提取物;利用脂多糖(LPS)诱导RAW264.7细胞建立体外炎症模型;利用噻唑蓝(MTT)法检测不同极性提取部位对细胞增殖活性的影响,确定安全给药范围;Griess法和酶联免疫吸附测定法(ELISA)分别检测细胞上清液中一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)的含量。结果兴安毛连菜醇提物各极性提取部位药液浓度为100、50、25μg/ml时,对细胞无明显毒性;与模型组比较,兴安毛连菜醇提物乙酸乙酯部位(高、中、低剂量组)均能使炎症因子NO、TNF-α、IL-6、IL-1β的分泌量显著降低(P<0.01),并呈现剂量依赖性;石油醚部位组、正丁醇部位组、水部位组未见明显抑制NO、TNF-α、IL-6、IL-1β的分泌。结论兴安毛连菜醇提物抗炎作用活性部位主要集中在乙酸乙酯部位,其作用机制是通过抑制NO、TNF-α、IL-6、IL-1β的分泌。

二至丸活性部位对D-半乳糖衰老模型大鼠SOD、MDA、MAO、LPF及衰老相关蛋白P16、P21影响的研究

目的:通过观察二至丸活性部位对D-半乳糖衰老模型大鼠各组织中氧化应激相关指标及衰老蛋白的影响,探讨其延缓衰老的作用机制。方法:对二至丸中女贞子和墨旱莲进行分离提取,提取出总三萜、总黄酮及总多糖活性部位,并使用分光光度法进行活性部位测定。将70只雄性SD大鼠按体质量随机分为空白组、模型组、三萜组、黄酮组、多糖组、活性部位合并组及二至丸水煎液组共7组,以100 mg/(kg·d)的剂量腹腔注射D-半乳糖建立大鼠衰老模型,连续8周;造模后各组给药干预,连续6周。采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定各组大鼠肝组织SOD、MDA含量,脑组织MAO、LPF含量及脑海马区P16、P21蛋白表达水平。结果:与模型组相比,各给药组大鼠SOD活性均显著升高(P<0.05,P<0.01),其中黄酮组差异无统计学意义(P>0.05);各给药组大鼠MDA、MAO、LPF含量均显著降低(P<0.01);各给药组大鼠P16、P21蛋白水平均明显下降(P<0.05,P<0.01)。与水煎液组相比,合并给药组MAO含量差异有统计学意义(P<0.05),三萜组与合并给药组P16蛋白表达差异有统计学意义(P<0.05)。结论:二至丸活性部位与水煎液的抗衰老效果相当,其中调节单胺氧化酶、P16蛋白方面,活性部位合并给药组的效果优于水煎液组。二至丸各活性部位均能够不同程度地延缓模型大鼠的衰老程度,其作用机制可能与调控脑海马区衰老蛋白表达,抑制机体氧化应激水平相关。

紫荆皮镇痛抗炎活性部位的筛选

目的对紫荆皮的镇痛抗炎活性部位进行筛选。方法利用热板法、乙酸扭体法的疼痛模型,研究紫荆皮产生止痛效果的活性部位;利用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、蛋清致大鼠脚跖肿胀和棉球致大鼠肉芽肿的急慢性炎症模型,探究紫荆皮发挥抗炎作用的活性部位。结果紫荆皮的醋酸乙酯萃取部位,对通电热板所产生的痛阈与自身给药前和正常对照组比较明显延长(P<0.01);对乙酸刺激所引起的小鼠扭体反应发生率与正常对照组比较明显下降(P<0.01);对均匀涂布二甲苯所引起的小鼠耳廓肿胀,脚跖皮下注射蛋清所引起的大鼠脚跖肿胀,以及埋棉球所引起的大鼠肉芽肿与正常对照组比较抑制明显,差异有统计学意义(P<0.01)。结论紫荆皮的镇痛抗炎活性部位主要为醋酸乙酯萃取部位。

黄柏抗痛风活性部位筛选及其对腹膜炎小鼠的保护作用

目的 研究黄柏不同萃取部位抗痛风作用,筛选有效部位并初步探究其作用机制。方法 采用单钠尿酸盐(MSU)诱导小鼠腹腔巨噬细胞及骨髓来源巨噬细胞(BMDM)建立细胞痛风模型,经黄柏不同极性部位给药后,ELISA法检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)分泌,从而筛选出活性部位,最后研究活性部位在小鼠体内抗痛风作用及相关机制。结果 黄柏醇提液各萃取部位中,正丁醇部位能降低细胞IL-1β水平和巨噬细胞的吞噬能力(P<0.01),但对TNF-α无明显影响(P>0.05)。与模型组比较,正丁醇部位各剂量组小鼠腹腔灌洗液IL-1β、IL-6水平和中性粒细胞募集程度均降低(P<0.05,P<0.01),其中高剂量组效果最明显,但各给药组TNF-α水平无明显变化(P>0.05)。结论 正丁醇部位为黄柏抗痛风活性部位,其抗痛风机制可能是通过降低细胞吞噬MSU晶体的能力,从而减少IL-1β、IL-6等细胞因子释放,进而减少中性粒细胞募集程度,改善痛风症状。

石南藤镇痛活性部位筛选及其纯化

目的筛选石南藤镇痛活性部位,并对其进行纯化。方法采用阳离子树脂富集纯化活性部位,HPLC法测定墙草碱含量。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测醋酸扭体小鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6、PGE2水平。结果墙草碱在0.0198~0.1980 mg/mL范围内线性关系良好(r>0.9999),平均加样回收率为103.09%,RSD为1.75%。最优纯化工艺为取2 BV 0.4 g/mL上样液,以2 BV/h体积流量流过树脂,5 BV 70%乙醇以2 BV/h体积流量洗脱,墙草碱纯度3.52%,得率20.63%,除杂率79.37%。阳离子洗脱液部位可有效减少小鼠疼痛扭体次数,降低1L-1β、TNF-α水平(P<0.01)。结论HPLC法准确稳定,重复性好,阳离子树脂纯化效率高,操作性强,工艺简便,可用于纯化具有镇痛活性的石南藤,其镇痛机制可能与减少炎症因子的释放有关。

蒙古苍耳抑制坏死性凋亡(necroptosis)活性部位化学成分研究(Ⅰ)

苍耳(Xanthium strumarium)为民间传统药用植物,本课题组前期研究发现蒙古苍耳大孔树脂50%乙醇洗脱部位具有显著的抑制细胞坏死性凋亡(necroptosis)活性。为明确蒙古苍耳(X.mongolicum)的活性成分,活性部位采用反复硅胶柱色谱、Sephadex LH-20柱色谱、制备高效液相色谱、重结晶等多种方法进行分离和纯化,运用NMR、MS等波谱方法并结合文献数据对分离得到的化合物进行结构鉴定。结果表明:从该活性部位中分离得到14个化合物,分别鉴定为hydroxydihydrobovolide(1)、树莓酮(2)、水杨醇(3)、对羟基苯乙酮(4)、对羟基苯甲醛(5)、咖啡酸乙酯(6)、阿魏醛(7)、异东莨菪素(8)、3,3′-bis(3,4-dihydro-4-hydroxy-6-methoxy-2H-1-benzopyran)(9)、axillarin(10)、槲皮素(11)、(+)松脂素(12)、β-谷甾醇(13)和棕榈酸(14)。化合物1-4、7-10均为首次从苍耳中分离得到。

丰城鸡血藤抗类风湿性关节炎活性部位的筛选

目的鉴定丰城鸡血藤各提取物化学结构,筛选该药物抗类风湿性关节炎的活性部位并探讨其作用机制。方法采用UPLC-Q-TOF-MS/MS,分别在正离子扫描模式下对各提取物中化学成分进行定性分析。建立Ⅱ型胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠模型,记录大鼠体质量变化趋势、足趾容积变化、关节炎指数,测定大鼠胸腺、脾脏指数,炎症因子TNF-α、IL-6、CRP和免疫球蛋白IgG、IgM、IgA水平。结果与模型组比较,三氯甲烷部位和乙酸乙酯部位给药组大鼠体质量增加(P<0.05,P<0.01),足趾肿胀度、关节炎指数、免疫器官指数、炎症因子和免疫球蛋白水平降低(P<0.05,P<0.01),且均优于正丁醇部位给药组。结论丰城鸡血藤三氯甲烷部位和乙酸乙酯部位有良好的抗类风湿性关节炎作用,其作用可能与降低血清炎症因子TNF-α、IL-6、CRP水平有关。

多伞阿魏抗胃癌活性部位的急性毒性试验研究

目的研究多伞阿魏抗胃癌活性部位的急性毒性,初步评价多伞阿魏抗胃癌活性部位的安全性,为其抗胃癌药物研发与临床用药提供参考。方法采用最大给药量法给小鼠灌胃多伞阿魏抗胃癌活性部位混悬液;给药前和给药后第14天分别称量小鼠体重;连续14 d观察小鼠的一般状况和死亡情况;给药后第14天小鼠眼球取血,测定小鼠的白细胞数(WBC)、红细胞数(RBC)、血红蛋白浓度(HGB)、血小板数(PLT)及淋巴细胞百分比(LYM);解剖小鼠,计算肝、脾、肾脏器指数;制作肝、脾、肾、胃组织病理切片,观察脏器病理损伤情况。结果多伞阿魏抗胃癌活性部位对小鼠的最大给药量为5.00 g·kg-1,给药期间多伞阿魏抗胃癌活性部位给药组小鼠给药后出现精神萎靡、倦怠、竖毛、毛发血色暗淡、粪便较粘稠的情况,24 h后均恢复正常,其他一般状况未见异常。此外,在实验14 d内,与空白对照组比较,多伞阿魏抗胃癌活性部位给药组小鼠饮食和体重变化均无明显差异(P>0.05),WBC、RBC、HGB、PLT及LYM均未见统计学差异(P>0.05),小鼠肝、脾、肾脏器指数均未见统计学差异(P>0.05),组织病理结果显示,肝、脾、肾、胃未见明显的病理改变。结论在本实验条件下,多伞阿魏抗胃癌活性部位在14 d内未见严重毒性反应,对小鼠的体重、饮食无明显影响,对小鼠的肝、脾、肾、胃无显著影响,但在给药后2 h内出现一定程度的刺激反应,24 h后均可逐渐恢复正常,这可能是由于多伞阿魏抗胃癌活性部位的神经刺激或胃肠道刺激所导致的应激反应。

羊角天麻抑菌作用及其活性部位初步研究

目的:探讨羊角天麻的抑菌作用及其活性部位。方法:提取羊角天麻水部位、石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、30%醇沉部位、60%醇沉部位、95%醇沉部位,采用琼脂平板二倍稀释法测定以上7个部位对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌的最低抑菌浓度,并探讨温度、紫外线对羊角天麻不同活性部位抑菌活性的影响。结果:羊角天麻水部位对MRSA、金黄色葡萄球菌、粪肠球菌有抑制作用,60%醇沉部位、95%醇沉部位对MRSA、金黄色葡萄球菌有抑制作用,抑菌圈直径分别为(21.2±0.6)、(20.4±0.1)、(19.6±0.6)、(20.6±0.1)、(22.2±0.2)、(17.5±0.2)、(20.3±0.3)mm,石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位无抑菌活性。此外,羊角天麻水部位、60%醇沉部位、95%醇沉部位对高温和紫外线敏感。结论:羊角天麻具有确切的体外抑菌活性,水部位是抑制MRSA、粪肠球菌的主要活性部位,60%乙醇沉部位是抑制金黄色葡萄球菌的主要活性部位,该研究为羊角天麻的综合利用与开发提供了理论依据。

接骨膏促进新西兰兔骨折愈合的活性部位筛选

目的筛选接骨膏促进新西兰兔骨折愈合的活性部位。方法制备接骨膏醇提物以及乙酸乙酯部位、正丁醇部位,并与炼蜜调制成黏稠度适宜的膏药。以新西兰兔建立左前肢桡骨骨折模型,然后分为模型对照组、醇提物组、乙酸乙酯部位组、正丁醇部位组,每组6只。除模型对照组外,其余各组兔外敷接骨膏相应极性部位膏药,干预4周。通过X线检测兔骨折愈合情况,采用酶联免疫吸附测定法检测兔血清中白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、骨钙素(OC)、血管内皮生长因子A(VEGFA)、碱性成纤维细胞生长因子2(bFGF2)、碱性磷酸酶(ALP)水平,采用苏木素-伊红染色观察兔骨折部位病理学形态变化,采用免疫组化法检测兔骨折部位bFGF2蛋白的表达水平。结果正丁醇部位组兔骨折部位的愈合速度最快,醇提物组次之,乙酸乙酯部位组最慢;正丁醇部位组兔血清中TNF-α、IL-6水平下降最快,ALP、bFGF2、OC、VEGFA水平上升最快[且较醇提物组显著升高(P<0.01)],骨折部位的软骨细胞完全消失,形成大量骨髓腔,且骨髓腔内骨小梁正式形成,bFGF2表达水平也较醇提物组升高。结论接骨膏正丁醇部位促进兔骨折部位愈合的作用强于醇提物以及乙酸乙酯部位,是接骨膏促进骨折愈合的活性部位。

木棉皮抗消化道肿瘤活性部位筛选及抑制肿瘤转移机制

为筛选木棉皮醇提物抗消化道肿瘤活性部位,探究其抑制敏感肿瘤细胞增殖、转移作用机制,通过采用CCK-8(cell counting kit-8)法考查木棉皮醇提物不同极性萃取部位对人肝癌HepG2细胞、人胃癌SGC7901细胞、人结肠癌SW480细胞和人胰腺癌PANC-1细胞这4种肿瘤细胞的抑制作用,筛选出木棉皮醇提物抗肿瘤的活性部位和敏感细胞。采用细胞划痕实验、Transwell实验和细胞黏附实验,研究木棉皮醇提物抗肿瘤活性部位对敏感肿瘤细胞迁移、侵袭和黏附能力的影响。定量聚合酶链反应法(quantitative polymerase chain reaction,qPCR)检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)基因的mRNA转录水平。结果表明,木棉皮醇提物不同极性萃取部位中石油醚部位对人胃癌SGC7901细胞和人肝癌HepG2细胞的抑制率最大,且对人胃癌SGC7901细胞最为敏感。随着木棉皮醇提物石油醚部位浓度增加,在24、48、72 h时间段人胃癌SGC7901细胞的迁移面积相对于空白组有所减小(P<0.05)。与空白组相比,木棉皮醇提物石油醚萃取部位有抑制肿瘤细胞侵袭能力且在一定浓度范围呈剂量依赖性(P<0.05);随着木棉皮醇提物石油醚萃取部位浓度增加,细胞黏附抑制率逐渐提高(P<0.05)。木棉皮醇提物石油醚萃取部位可明显抑制MMP-2和MMP-9基因的mRNA转录水平(P<0.05)。可见,木棉皮醇提物石油醚萃取部位可通过调控MMP-2和MMP-9基因表达抑制人胃癌SGC7901细胞增殖、迁移、侵袭和黏附,提示该部位可能有抑制转移性胃癌细胞引起的继发性肿瘤作用。

酸浆乙酸乙酯活性部位抗胃溃疡的机制研究

为了研究幽门结扎和乙醇诱导两种胃溃疡模型对酸浆乙酸乙酯活性部位抗胃溃疡的作用机理,采用幽门结扎胃溃疡模型测定胃液量、游离酸、总酸量及蛋白酶活性,采用乙醇诱导胃溃疡模型检测血浆中一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和组织匀浆液中表皮生长因子(EGF)的表达;通过蛋白质印迹法(Western blot)和实时荧光定量核酸扩增检测系统(QPCR)分析胃粘膜中环氧化酶1和2(COX-1/2)的蛋白表达和mRNA表达。结果显示:EAF以100、250和500 mg/kg 3个剂量灌胃时,均能显著降低胃液量、游离酸、总酸和胃蛋白酶活性(P<0.05)。EAF中、高剂量组能显著增加血浆中NO含量和SOD活性(P<0.05),降低MDA水平(P<0.01),上调胃组织匀浆液中EGF表达(P<0.05)。关于EAF对COX蛋白和mRNA表达的影响,COX-1的表达水平无显著差别(P>0.05),EAF各剂量组与模型组和对照组相一致。但相对于模型组,EAF各剂量组明显抑制COX-2蛋白和mRNA表达的上调(P<0.05)。EAF可能通过对大鼠胃液量、游离酸度、总酸度和胃蛋白酶活性的抑制,促进氧自由基清除剂SOD、保护因子NO和EGF的合成,降低MDA的损害和抑制COX-2信号通路,从而提高溃疡愈合质量。

甘草地上部分活性部位的急性毒性和长期毒性实验研究

[目的]探索甘草地上部分活性部位对小鼠的急性毒性及大鼠的长期毒性,评价其安全性,为合理开发利用甘草地上部分资源以及临床应用提供可靠的理论依据。[方法]甘草地上部分活性部位33.2 g/kg灌胃给予昆明种小鼠,24 h内两次(间隔5 h)经口灌胃给予受试物,持续观察14 d内小鼠的急性毒性反应;SD大鼠随机分为对照组和甘草地上部分低、中、高剂量组,按8.3、16.6、33.2 g/kg剂量连续灌胃甘草地上部分活性部位90 d,观察大鼠的一般状况,并分别于给药后45、90 d进行血液学指标检测与血清生化指标检测,给药后90 d进行大体解剖及病理学检查,观察甘草地上部分活性部位的长期毒性反应。[结果]急性毒性实验中小鼠的一般状态、饮食、分泌物、排便未见异常,无小鼠死亡,肉眼尸检心、肝、脾等主要脏器组织未见明显异常;长期毒性实验中,各组大鼠与对照组比较,一般状况、血液学及血清生化指标未见明显差异;病理检查未见主要脏器组织形态学改变。[结论]甘草地上部分活性部位无急性毒性和长期毒性,在治疗剂量范围内用药安全性高。

当归挥发油对子宫的双向作用及其活性部位筛选

目的 研究当归挥发油 (AN)及其酸性部位 (A1)、酚性部位 (A2 )和中性非酚性部位 (A3)对子宫的作用并筛选出具有最佳抑制作用的活性部位。方法 采用离体子宫肌张力记录法 ,薄层色谱和气相色谱 质谱分析法。结果 ①当归挥发油对正常离体大鼠子宫收缩功能呈双向作用 ,小剂量 (≤ 2 0mg/L)略有兴奋作用 ,大剂量 (≥160mg/L)则明显抑制之。较大剂量AN可浓度依赖性地抑制缩宫素诱发的子宫兴奋作用 ,也可明显抑制高钾引起的子宫收缩。②色谱分析结果表明A3 活性部位的组成明显不同于挥发油、A1和A2 。在正常离体大鼠子宫标本 ,A1(0～160mg/L)呈兴奋作用 ,仅在 3 2 0mg/L才出现明显的抑制作用 ;小剂量A2 (≤ 10mg/L)略有兴奋 ,而大剂量 (≥ 2 0mg/L)表现为抑制作用 ;A3 (10～ 160mg/L)均表现为抑制作用 ,其IC5 0 为 3 2 5mg/L ,抑制效价强度是挥发油的 3 7倍。结论 当归挥发油对子宫收缩功能的影响 ,依剂量呈现小剂量兴奋、大剂量抑制的双向性特征 ;A3