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浆细胞瘤多样异位基因1在卵巢癌组织中的表达及其对SKOV3细胞恶性生物学行为的影响 被引量:5
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作者 李晓珍 任琛琛 +1 位作者 刘灵 刘泇希 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期153-157,共5页
目的:研究人浆细胞瘤多样异位基因1(plasma-cytoma variant translocation gene 1,PVT1)对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:选取2015年11月至2017年4月郑州大学第三附属医院妇产科收治的卵巢癌患者32例。利用实时荧光... 目的:研究人浆细胞瘤多样异位基因1(plasma-cytoma variant translocation gene 1,PVT1)对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。方法:选取2015年11月至2017年4月郑州大学第三附属医院妇产科收治的卵巢癌患者32例。利用实时荧光定量PCR检测PVT1在32例卵巢癌组织及癌旁组织的表达。通过CCK-8法、划痕法及Transwell法检测PVT1对卵巢癌细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响。结果:PVT1在SKOV3细胞和卵巢癌组织表达水平均明显升高(均P<0.01);PVT1表达水平与卵巢癌者组织学分级、FIGO分期及淋巴结转移具有相关性(P<0.05或P<0.01)。转染PVT1 siRNA 36、48 h后,SKOV3细胞中PVT1表达水平明显下降(P<0.05);敲减PVT1的表达能够降低SKOV3细胞的增殖能力(P<0.05),抑制SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力(P<0.05或P<0.01)。结论:PVT1在卵巢癌中高表达,抑制PVT1表达能够抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移和侵袭能力。 展开更多
关键词 卵巢癌 浆细胞瘤多样异位基因1 增殖 迁移 侵袭
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长链非编码RNA浆细胞瘤多样异位基因1对幽门螺旋杆菌感染胃上皮细胞系引起的炎症反应和细胞迁移的影响 被引量:10
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作者 竟晓慧 李凌雪 +1 位作者 韩涛涛 史娟 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期228-235,共8页
目的研究长链非编码RNA浆细胞瘤多样异位基因1(PVT1)在幽门螺旋杆菌(HP)感染相关胃癌中的作用。方法在HP感染的胃黏膜正常上皮细胞(GES-1)中,用实时定量PCR(qRT-PCR)检测PVT1的表达;通过瞬时转染小干扰RNA,在胃癌细胞系SGC-7901中敲低PV... 目的研究长链非编码RNA浆细胞瘤多样异位基因1(PVT1)在幽门螺旋杆菌(HP)感染相关胃癌中的作用。方法在HP感染的胃黏膜正常上皮细胞(GES-1)中,用实时定量PCR(qRT-PCR)检测PVT1的表达;通过瞬时转染小干扰RNA,在胃癌细胞系SGC-7901中敲低PVT1,然后与HP共培养,用qRT-PCR检测炎症相关细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素(IL)-1β、IL-6及IL-8的表达情况;在敲低PVT1后,通过细胞划痕实验,检测PVT1对胃癌细胞增殖及迁移能力的影响。RNA下拉联合质谱分析技术检测能够与PVT1相互结合的蛋白,并用RNA下拉实验联合Western blot验证质谱分析结果的准确性。结果在HP感染的胃黏膜正常上皮细胞GES-1中,PVT1明显上调(t=7.160,P=0.019)。在胃癌细胞中敲低PVT1,再用HP感染,发现炎症因子TNF-α(t=3.899,P=0.011)、IL-1β(t=14.610,P=0.000)、IL-8(t=6.557,P=0.001)的表达受到明显抑制。PVT1敲低后,对胃癌细胞的增殖能力无影响,但抑制细胞的迁移能力。PVT1可能与RPS8蛋白相互作用。结论PVT1可能作为促炎因子促进胃癌细胞迁移,在HP感染相关的胃癌中发挥调节作用。 展开更多
关键词 幽门螺旋杆菌 长链非编码RNA 浆细胞瘤多样异位基因1 炎症相关因子 胃癌
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变异性浆细胞瘤异位1基因对高糖培养的大鼠心脏成纤维细胞的影响及其机制 被引量:1
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作者 白杨 黄婷 +1 位作者 李真真 王琰 《新乡医学院学报》 CAS 2021年第11期1017-1024,共8页
目的探讨变异性浆细胞瘤异位1(PVT1)基因对高糖培养的大鼠心脏成纤维细胞(CF)的影响及其作用机制。方法取对数生长期CF并随机分为空白对照组、高糖组、PVT1小干扰RNA(siRNA)组、PVT1 siRNA阴性对照(NC)组(PVT1 siRNA NC组)。空白对照组... 目的探讨变异性浆细胞瘤异位1(PVT1)基因对高糖培养的大鼠心脏成纤维细胞(CF)的影响及其作用机制。方法取对数生长期CF并随机分为空白对照组、高糖组、PVT1小干扰RNA(siRNA)组、PVT1 siRNA阴性对照(NC)组(PVT1 siRNA NC组)。空白对照组和高糖组细胞不进行转染,PVT1 siRNA组及PVT1 siRNA NC组细胞分别转染PVT1 siRNA及PVT1 siRNA NC试剂;转染24 h后,高糖组、PVT1 siRNA组、PVT1 siRNA NC组细胞用含25 mmol·L^(-1)葡萄糖的培养基培养,模拟高糖培养条件,空白对照组细胞不作处理。采用天狼猩红染色法观察高糖处理24 h后4组细胞胶原纤维沉积情况。流式细胞术检测高糖处理24 h后4组细胞细胞周期分布情况。采用实时荧光定量聚合酶链反应法检测高糖处理24 h后4组细胞中PVT1、转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))mRNA及微RNA(miR)-93-5p的表达。采用Western blot法检测高糖处理24 h后4组细胞中TGF-β_(1)、Smad2/3、磷酸化Smad2/3(p-Smad2/3)、Smad7、p21、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)表达情况。另取对数生长期CF,随机分为未转染组、PVT1 siRNA+miR-93-5p inhibitor组、PVT1 siRNA+miR-93-5p NC组、PVT1 NC+miR-93-5p inhibitor组、PVT1 NC+miR-93-5p NC组;未转染组细胞不进行转染,PVT1 siRNA+miR-93-5p inhibitor组细胞转染PVT1 siRNA和miR-93-5p inhibitor,PVT1 siRNA+miR-93-5p NC组细胞转染PVT1 siRNA和miR-93-5p NC,PVT1 NC+miR-93-5p inhibitor组细胞转染PVT1 NC和miR-93-5p inhibitor,PVT1 NC+miR-93-5p NC组细胞转染PVT1 NC和miR-93-5p NC,转染24 h后,用含25 mmol·L^(-1)葡萄糖的培养基处理5组细胞,模拟高糖培养条件。采用Western blot法检测高糖处理24 h后5组细胞中TGF-β_(1)、Smad7、ColⅠ蛋白表达表达情况。结果与空白对照组比较,高糖组细胞数量增多,红色胶原纤维沉积增加;与高糖组比较,PVT1 siRNA组细胞间隙变大,红色胶原纤维沉积减小;PVT1 siRNA NC组细胞红色胶原纤维沉积与高糖组相近。高糖组、PVT1 siRNA组、PVT1 siRNA NC组G_(0)+G_(1)期细胞比例显著低于空白对照组,S+G_(2)+M期细胞比例显著高于空白对照组(P<0.05);PVT1 siRNA组G_(0)+G_(1)期细胞比例显著高于高糖组,S+G_(2)+M期细胞比例显著低于高糖组(P<0.05);PVT1 siRNA NC组G_(0)+G_(1)期细胞比例显著低于PVT1 siRNA组,S+G_(2)+M期细胞比例显著高于PVT1 siRNA组(P<0.05);高糖组和PVT1 siRNA NC组G_(0)+G_(1)期细胞比例、S+G_(2)+M期细胞比例比较差异无统计学意义(P>0.05)。高糖组、PVT1 siRNA组、PVT1 siRNA NC组细胞中PVT1、TGF-β_(1) mRNA相对表达量均显著高于空白对照组,miR-93-5p相对表达量显著低于空白对照组(P<0.05);PVT1 siRNA组细胞中PVT1、TGF-β_(1) mRNA相对表达量显著低于高糖组,miR-93-5p相对表达量显著高于高糖组(P<0.05);PVT1 siRNA NC组细胞中PVT1、TGF-β_(1) mRNA相对表达量均显著高于PVT1 siRNA组,miR-93-5p相对表达量显著低于PVT1 siRNA组(P<0.05);高糖组和PVT1 siRNA NC组细胞中PVT1、TGF-β_(1) mRNA及miR-93-5p相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。高糖组、PVT1 siRNA组、PVT1 siRNA NC组细胞中α-SMA、ColⅠ、TGF-β_(1)蛋白相对表达量及(p-Smad2/3)/(Smad2/3)显著高于空白对照组,p21、Smad7蛋白相对表达量显著低于空白对照组(P<0.05);PVT1 siRNA组细胞中α-SMA、ColⅠ、TGF-β_(1)蛋白相对表达量及(p-Smad2/3)/(Smad2/3)显著低于高糖组,p21、Smad7蛋白相对表达量显著高于高糖组(P<0.05);PVT1 siRNA NC组细胞中α-SMA、ColⅠ、TGF-β_(1)蛋白相对表达量及(p-Smad2/3)/(Smad2/3)显著高于PVT1 siRNA组,p21、Smad7蛋白相对表达量显著低于PVT1 siRNA组(P<0.05);高糖组和PVT1 siRNA NC组细胞中α-SMA、ColⅠ、p21、TGF-β_(1)、Smad7蛋白相对表达量及(p-Smad2/3)/(Smad2/3)比较差异无统计学意义(P>0.05)。PVT1 siRNA+miR-93-5p NC组细胞中TGF-β_(1)、ColⅠ蛋白相对表达量显著低于未转染组,Smad7蛋白相对表达量显著高于未转染组(P<0.05);PVT1 NC+miR-93-5p inhibitor组细胞中TGF-β_(1)、ColⅠ蛋白相对表达量显著高于未转染组,Smad7蛋白相对表达量显著低于未转染组;未转染组细胞中TGF-β_(1)、Smad7、ColⅠ蛋白相对表达量与PVT1 NC+miR-93-5p NC组、PVT1 siRNA+miR-93-5p inhibitor组比较差异无统计学意义(P>0.05)。PVT1 NC+miR-93-5p inhibitor组、PVT1 siRNA+miR-93-5p inhibitor组、PVT1 NC+miR-93-5p NC组细胞中TGF-β_(1)、ColⅠ蛋白相对表达量显著高于PVT1 siRNA+miR-93-5p NC组,Smad7蛋白相对表达量显著低于PVT1 siRNA+miR-93-5p NC组(P<0.05);PVT1 siRNA+miR-93-5p inhibitor组、PVT1 NC+miR-93-5p NC组细胞中TGF-β_(1)、ColⅠ蛋白相对表达量显著低于PVT1 NC+miR-93-5p inhibitor组,Smad7蛋白相对表达量显著高于PVT1 NC+miR-93-5p inhibitor组(P<0.05);PVT1 siRNA+miR-93-5p inhibitor组与PVT1 NC+miR-93-5pNC组细胞中TGF-β_(1)、Smad7、ColⅠ蛋白相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论PVT1基因沉默可促进miR-93-5p/Smad7通路活化,抑制TGF-β_(1)/Smad通路激活,进而抑制高糖培养的CF纤维化进程。 展开更多
关键词 心脏成纤维细胞 高糖 浆细胞1基因 微RNA-93-5p 转化生长因子-β_(1)
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浆细胞瘤异位基因1表达下调对高糖环境下肾小球系膜细胞增殖的影响及机制 被引量:3
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作者 李敏 吴汪丽 +1 位作者 彭云 肖一平 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第14期10-13,共4页
目的观察长链非编码RNA(lncRNA)中的浆细胞瘤异位基因1(PVT1)表达下调对高糖环境下肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质(ECM)相关蛋白表达的影响,探讨PVT1在糖尿病肾病发病中的作用机制。方法培养人肾小球系膜细胞,分为正常对照组、高糖组... 目的观察长链非编码RNA(lncRNA)中的浆细胞瘤异位基因1(PVT1)表达下调对高糖环境下肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质(ECM)相关蛋白表达的影响,探讨PVT1在糖尿病肾病发病中的作用机制。方法培养人肾小球系膜细胞,分为正常对照组、高糖组、高糖+control siRNA组、高糖+PVT1 siRNA组。正常对照组在5.55 mmol/L的低糖DMEM完全培养基中培养,高糖组、高糖+control siRNA组、高糖+PVT1 siRNA组均在25mmol/L的高糖DMEM完全培养基中培养。高糖+control siRNA组、高糖+PVT1 siRNA组分别转染control siRNA、PVT1 siRNA。分别培养0、24、48、72 h后,采用CCK-8法测算各组细胞增殖率。采用流式细胞术检测各组细胞G1、S期比例。采用qRT-PCR法检测各组细胞PVT1 mRNA表达。采用Western blot法检测各组细胞ECM相关蛋白纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子β_1(TGF-β_1)及Ⅰ型纤溶酶原激活物抑制因子(PAT-1)蛋白的表达。结果高糖组细胞各时间点细胞增殖率均高于正常对照组,高糖+PVT1 siRNA组各时间点细胞增殖率均低于高糖组(P均<0.05)。与正常对照组比较,高糖组细胞G1期比例减少、S期比例增多;与高糖组比较,高糖+PVT1 siRNA组G1比例增加、S期比例减少(P均<0.05)。高糖组、高糖+control siRNA组PVT1 mRNA相对表达量均高于正常对照组,高糖+PVT1 siRNA组PVT1 mRNA相对表达量低于高糖组(P均<0.05)。高糖组、高糖+control siRNA组、高糖+PVT1 siRNA组FN、TGF-β_1、PAT-1蛋白表达均高于正常对照组,高糖+PVT1 siRNA组FN、TGF-β_1、PAT-1蛋白表达均低于高糖组(P均<0.05)。结论在高糖环境下,肾小球系膜细胞中PVT1表达明显增加,下调PVT1表达可明显抑制肾小球系膜细胞的增殖、抑制ECM相关蛋白的表达。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 浆细胞基因1 肾小球系膜细胞 高糖 细胞外基质 糖尿病肾病
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LncRNA PVT1对弥漫大B细胞淋巴瘤细胞活性的影响及其机制
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作者 路晓辉 李文永 +1 位作者 王孟林 陈香莉 《青岛大学学报(医学版)》 CAS 2024年第3期381-387,共7页
目的 探究长链非编码RNA(LncRNA)浆细胞瘤变体异位基因1(PVT1)对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞生物学行为的影响,并分析其潜在机制。方法 收集41例DLBCL病人和15例淋巴结反应性增生(RLH)病人的组织标本,体外培养人正常B淋巴细胞GM12878... 目的 探究长链非编码RNA(LncRNA)浆细胞瘤变体异位基因1(PVT1)对弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞生物学行为的影响,并分析其潜在机制。方法 收集41例DLBCL病人和15例淋巴结反应性增生(RLH)病人的组织标本,体外培养人正常B淋巴细胞GM12878和人DLBCL细胞(OCI-Ly3、U2932、TMD8),对TMD8细胞进行转染,将其分为control组(只转染Lipofectamine-2000)、si-NC组(转染si-NC)、inhibitor-NC组(转染inhibitor-NC)、si-PVT1组(转染si-PVT1)、miR-145-5p inhibitor组(转染miR-145-5p inhibitor)、si-PVT1+miR-145-5p inhibitor组(转染si-PVT1和miR-145-5p inhibitor)。应用qRT-PCR方法检测各组细胞PVT1 mRNA和miR-145-5p表达,Western Blot方法检测CDK6蛋白表达,CCK-8法检测TMD8细胞增殖,流式细胞术检测TMD8细胞周期变化,Transwell实验检测TMD8细胞迁移和侵袭能力,RNA pull down和双荧光素酶报告基因法验证PVT1、miR-145-5p与细胞周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)的靶向关系。结果 DLBCL组织PVT1 mRNA、CDK6蛋白的表达水平高于RLH组织,miR-145-5p表达低于RLH组织(t=14.264~24.445,P<0.05)。与GM12878细胞比较,OCI-Ly3、U2932、TMD8细胞中PVT1 mRNA、CDK6蛋白表达均增加,miR-145-5p表达均减少(F=69.557~234.718,P<0.05)。6组细胞PVT1 mRNA、miR-145-5p、CDK6蛋白表达及增殖率、G0/G1期细胞比例、S期细胞比例、迁移和侵袭细胞数差异有统计学意义(F=25.589~319.150,P<0.05);与control组比较,si-PVT1组细胞PVT1 mRNA、CDK6蛋白、增殖率、S期细胞比例、迁移和侵袭数量降低,miR-145-5p表达、G0/G1期细胞比例升高(P<0.05),miR-145-5p inhibitor组呈相反变化(P<0.05);下调miR-145-5p表达可减弱敲低PVT1对TMD8细胞恶性生物学行为的抑制作用(P<0.05)。过表达PVT1 mRNA增高CDK6蛋白表达、细胞增殖率、S期细胞比例、迁移和侵袭数量,降低miR-145-5p表达、G0/G1期的细胞比例(F=38.025~327.887,P<0.05)。miR-145-5p是PVT1的靶基因,且miR-145-5p可靶向下调CDK6表达。结论 敲低PVT1可抑制DLBCL细胞恶性生物学行为,其作用机制可能与调控miR-145-5p/CDK6轴有关。 展开更多
关键词 淋巴 大B细胞 弥漫性 RNA 长链非编码 浆细胞变体基因1 miR-145-5p 细胞周期蛋白依赖激酶6
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沉默变异性浆细胞瘤异位1抑制鼻咽癌细胞增殖作用的机制研究
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作者 万仁强 翁泽平 +1 位作者 师小径 裴娜娜 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 2020年第5期485-490,共6页
目的探讨变异性浆细胞瘤异位1(plasmacyto-mavarianttranslocation1,PVT1)抑制鼻咽癌细胞增殖的分子机制。方法构建特异性的shRNA PVT1慢病毒载体,包装慢病毒(LV/shRNA PVT1)并转导鼻咽癌C666-1细胞,检测Smad4的表达;LV/shRNA PVT1转导C... 目的探讨变异性浆细胞瘤异位1(plasmacyto-mavarianttranslocation1,PVT1)抑制鼻咽癌细胞增殖的分子机制。方法构建特异性的shRNA PVT1慢病毒载体,包装慢病毒(LV/shRNA PVT1)并转导鼻咽癌C666-1细胞,检测Smad4的表达;LV/shRNA PVT1转导C666-1细胞24 h后转染Smad4 siRNA,通过细胞计数、四甲基偶氮唑蓝(MTT)法及流式细胞术分析沉默Smad4对LV/shRNA PVT1介导的鼻咽癌细胞生长及细胞周期的影响,并检测细胞周期相关调控因子的表达。结果下调PVT1后鼻咽癌细胞中Smad4的表达升高,而用siRNA沉默Smad4表达后,结果显示,抑制Smad4表达可阻断LV/shRNA PVT1介导的细胞生长抑制效应,同时细胞周期结果显示,与对照组相比,shRNA PVT1/Smad4 siRNA组细胞G1期比例降低,S期和G2期比例升高,并且CDK4、CDK6及c-myc的mRNA水平升高。结论下调PVT1可抑制鼻咽癌细胞增殖,并升高Smad4的表达,沉默Smad4可阻断shRNA PVT1对鼻咽癌细胞增殖的抑制效应;提示Smad4可能是PVT1作用的一个下游靶基因,下调PVT1可能通过Smad4抑制鼻咽癌细胞增殖。 展开更多
关键词 鼻咽癌 浆细胞1 SMAD4 细胞增殖 细胞周期
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长链非编码RNA变异性浆细胞瘤异位1通过调控微小RNA-214-3p/人凋亡抑制蛋白X轴影响皮肤黑色素瘤细胞的顺铂耐药性 被引量:1
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作者 胡珍 吴庭 +1 位作者 孙弦 刘睿 《安徽医药》 CAS 2022年第6期1226-1231,共6页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)变异性浆细胞瘤异位1(PVT1)调控微小RNA(miR)-214-3p/人凋亡抑制蛋白X(XIAP)对皮肤黑色素瘤(CMM)细胞的顺铂(DDP)耐药性的影响。方法该研究起止时间为2020年3—9月。体外培养人皮肤黑色素瘤SK-MEL-1/DDP细... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)变异性浆细胞瘤异位1(PVT1)调控微小RNA(miR)-214-3p/人凋亡抑制蛋白X(XIAP)对皮肤黑色素瘤(CMM)细胞的顺铂(DDP)耐药性的影响。方法该研究起止时间为2020年3—9月。体外培养人皮肤黑色素瘤SK-MEL-1/DDP细胞,将细胞分为空白对照组(NG组,不做处理)、阴性转染组(NC组,转染PVT1-inhibitor阴性对照)、抑制PVT1表达组(PVT1-inhibitor组,转染PVT1-inhibitor)、共转染组(PVT1-inhibitor-miR-214-3p-inhibitor组,转染PVT1-inhibitor同时转染miR-214-3p-inhibitor)。采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测SK-MEL-1/DDP细胞PVT1、miR-214-3p水平;MTT法检测四组SK-MEL-1/DDP细胞增殖能力及对DDP的耐药性;流式细胞仪检测四组SK-MEL-1/DDP细胞凋亡率;蛋白质印迹法(Western blotting)检测四组SK-MEL-1/DDP细胞XIAP、细胞增殖相关核抗原Ki-67、凋亡相关蛋白B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达水平。应用TargetScan数据库预测PVT1与miR-214-3p的靶向关系,双荧光素酶报告基因实验验证。结果与NG组、NC组比较,PVT1-inhibitor组SK-MEL-1/DDP细胞增殖抑制率[(22.87±3.43)%比(0.00±0.00)%、(0.08±0.01)%]、凋亡率[(40.05±6.06)%比(15.69±2.35)%、(17.01±2.55)%]、miR-214-3p及Bax表达均显著升高(P<0.05),PVT1、药物半数抑制浓度(IC_(50))值[(15.13±0.45)µg/L比(45.03±1.35)µg/L、(47.81±1.33)µg/L]、Ki-67、Bcl-2蛋白、XIAP mRNA及其蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);与PVT1-inhibitor组比较,PVT1-inhibitor+miR-214-3p-inhibitor组SK-MEL-1/DDP细胞增殖抑制率[(15.12±2.27)%比(22.87±3.43)%]、凋亡率[(27.88±4.19)%比(40.05±6.06)%]、miR-214-3p及Bax表达均显著降低(P<0.05),IC_(50)值[(23.98±0.72)µg/L比(15.13±0.45)µg/L]、Ki-67、Bcl-2蛋白、XIAP mRNA及蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。TargetScan数据库预测显示miR-214-3p是PVT1的潜在靶基因,双荧光素酶报告基因实验证实二者存在靶向关系。结论下调lncRNA PVT1可靶向上调miR-214-3p表达,抑制XIAP表达,减弱CMM SK-MEL-1/DDP细胞对DPP耐药性。 展开更多
关键词 黑色素 抗药性 长链非编码RNA变浆细胞1 微小RNA-214-3p 人凋亡抑制蛋白X 顺铂耐药性
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PVT1通过TGF-β1/SMAD通路促进子宫内膜基质细胞过度纤维化的研究
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作者 杨强 张志伟 +1 位作者 邱娟娟 王雨潇 《中国性科学》 2024年第1期82-86,共5页
目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)浆细胞瘤多样异位基因1(PVT1)在调控子宫内膜基质细胞纤维化中的病理生理作用及分子机理。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人子宫内膜基质细胞(HESCs)中PVT1、胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ、转... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)浆细胞瘤多样异位基因1(PVT1)在调控子宫内膜基质细胞纤维化中的病理生理作用及分子机理。方法通过实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人子宫内膜基质细胞(HESCs)中PVT1、胶原蛋白Ⅰ、胶原蛋白Ⅲ、转化生长因子-β1(TGF-β1)、SMAD2及SMAD3的表达水平。结果PVT1过表达促进HESCs增殖(P<0.05),而PVT1沉默抑制HESCs增殖(P<0.05)。过表达PVT1在HESCs中上调胶原蛋白Ⅰ和胶原蛋白ⅢmRNA的表达(P<0.05),而PVT1被敲除时,胶原蛋白Ⅰ和胶原蛋白ⅢmRNA的表达水平被显著下调(P<0.05)。过表达PVT1在HESCs中可以进一步上调TGF-β1/SMAD信号相关基因(TGF-β1、SMAD2、SMAD3)的表达(P<0.05)。当PVT1被敲除时,TGF-β1/SMAD信号相关基因胶原蛋白Ⅰ和胶原蛋白ⅢmRNA的表达水平被显著下调(P<0.05)。PVT1可诱导HESCs上清液中TGF-β1的产生(P<0.05)。结论PVT1可通过TGF-β1/SMAD通路促进子宫内膜基质细胞过度纤维化而产生胶原蛋白。同时,PVT1可能是一个用于治疗子宫内膜粘连的新靶点。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 浆细胞瘤多样异位基因1 纤维化 子宫内膜基质细胞 转化生长因子-β1/SMAD通路
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弥漫大B细胞淋巴瘤中NFκB活化相关基因表达与Bcl2表达的关系 被引量:1
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作者 杨文秀 陈玉梅 +1 位作者 王松 孟青 《贵州医药》 CAS 2010年第11期963-967,共5页
目的探讨DLBCL中Bcl2表达与MALT1和CARMA1表达的关系,了解3种分子对DLBCL临床特征和发展过程的影响。方法收集非特指DLBCL病例42例及其收集临床病理资料,用免疫组化染色检查肿瘤中Bcl2和MALT1蛋白的表达,RTPCR检查CARMA1 mRNA水平,对收... 目的探讨DLBCL中Bcl2表达与MALT1和CARMA1表达的关系,了解3种分子对DLBCL临床特征和发展过程的影响。方法收集非特指DLBCL病例42例及其收集临床病理资料,用免疫组化染色检查肿瘤中Bcl2和MALT1蛋白的表达,RTPCR检查CARMA1 mRNA水平,对收集和检查资料进行统计学分析。结果半数以上病例不同程度表达Bcl2(29/42,69.05%)和MALT1蛋白(28/42,66.67%),全部病例都检测出CARMA1 mRNA表达。Bcl2与MALT1蛋白表达呈明显正相关,Bcl2阳性表达病例的CARMA1 mRNA水平明显高于阴性表达病例。Bcl2和MALT1阳性和阴性表达病例相比较:阳性表达病例的临床分期较晚,但IPI指数没有明显差异。CARMA1 mRNA高表达和低表达水平病例比较:临床分期无明显差异,但高表达水平者具有较高的IPI指数。Bcl2、MALT1和CARMA1的表达与DLBCL患者的发病年龄、性别无明显相关。结论 DLBCL中Bcl2的表达可能部分与肿瘤中MALT1和CARMA1对NFκB的异常活化有关,Bcl2、MALT1和CARMA1表达可能与肿瘤的临床发展和预后有关。 展开更多
关键词 淋巴 黏膜相关淋巴基因1 CARMA1
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PVT1及TNF基因多态性与2型糖尿病性肾病病位、病性的相关性研究 被引量:2
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作者 纪春敏 郑晓军 +1 位作者 洪冠宇 王全兴 《亚太传统医药》 2022年第6期112-115,共4页
目的:探讨浆细胞瘤异位基因(PVT1)rs6918698及肿瘤坏死因子(TNF)rs1800629基因多态性与2型糖尿病性肾病(DKD)病位、病性形成的相关性。方法:收集195例汉族DKD患者,与134例健康人群相对照。以证素辨证体系剖析DKD病位、病性证素的分布特... 目的:探讨浆细胞瘤异位基因(PVT1)rs6918698及肿瘤坏死因子(TNF)rs1800629基因多态性与2型糖尿病性肾病(DKD)病位、病性形成的相关性。方法:收集195例汉族DKD患者,与134例健康人群相对照。以证素辨证体系剖析DKD病位、病性证素的分布特点,并检测基因多态性,探讨两者的相关性。结果:气虚在PVT1rs6918698GC型上分布比例显著升高,与无气虚比较,差异具有统计学意义(P<0.01);痰证在TNFrs1800629GG基因型上分布比例显著升高,与无痰证比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:PVT1基因rs6918698多态性与气虚相关,风险基因GC可能是DKD患者多发气虚的遗传学基础之一;TNF基因rs1800629多态性与痰相关,提示风险基因GG可能是DKD患者多发痰证的遗传学基础之一。 展开更多
关键词 2型糖尿病肾病 浆细胞基因 坏死因子 单核苷酸多态性 证素
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伴有cyclinD1阳性免疫表型的CD5阴性弥漫大B细胞淋巴瘤病理及分子特点1例报道
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作者 崔华娟 王炜 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期18-18,共1页
众所周知,由于染色体t(11;12)(q13;q32)异位不同程度地影响CyclinD1基因,而后者特异性地表达于套细胞淋巴瘤。本文介绍了一例罕见的表达CyclinD1而原位杂交荧光标记检测到染色体异位且CD5阴性的弥漫性大B细胞淋巴瘤。
关键词 弥漫大B细胞淋巴 CYCLIND1 CD5 CyclinD1基因 免疫表型 阴性 弥漫性大B细胞淋巴 染色体
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IS患者血清lncRNA PVT1、miR-214水平与继发性癫痫的相关性分析
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作者 郭舒雯 赵雄飞 代昌飞 《脑与神经疾病杂志》 2024年第1期17-21,共5页
目的 探讨缺血性脑卒中(IS)患者血清长链非编码RNA变异性浆细胞瘤异位1 (lncRNA PVT1)、微小RNA-214 (miR-214)水平与继发性癫痫的相关性。方法 选取2018年6月至2021年6月眉山心脑血管病医院神内八科收治的280例IS患者作为研究对象,根... 目的 探讨缺血性脑卒中(IS)患者血清长链非编码RNA变异性浆细胞瘤异位1 (lncRNA PVT1)、微小RNA-214 (miR-214)水平与继发性癫痫的相关性。方法 选取2018年6月至2021年6月眉山心脑血管病医院神内八科收治的280例IS患者作为研究对象,根据患者1年内是否发生继发性癫痫,分为单纯IS组(212例)和继发性癫痫组(68例),根据癫痫的严重程度分为轻度癫痫组(19例),中度癫痫组(33例),重度癫痫组(16例)。另选取同时期来眉山心脏血管病医院神经八科体检的150例健康者作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法测定所有受试者血清lncRNA PVT1、miR-214水平;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清中白细胞介素-1β (IL-1β)、白细胞介素-6 (IL-6)、肿瘤坏死因子-α (TNF-α)水平;经Pearson法分析lncRNA PVT1与miR-214的相关性,及两者与IL-1 β、IL-6、TNF-α的相关性;采用多因素Logistic回归分析影响IS患者是否发生继发性癫痫的有关因素。结果 与对照组比较,单纯IS组和继发性癫痫组患者血清lncRNAPVT1水平明显升高,血清miR-214水平明显降低(P<0.05);与单纯IS组比较,继发性癫痫组患者血清lncRNA PVT1水平明显升高,血清miR-214水平明显降低(P<0.05)。与轻度癫痫组比较,中度癫痫组和重度癫痫组患者血清lncRNA PVT1水平明显升高,血清miR-214水平明显降低(P<0.05);与中度癫痫组比较,重度癫痫组患者血清lncRNA PVT1水平明显升高,血清miR-214水平明显降低(P <0.05)。继发性癫痫组患者血清lncRNA PVT1与IL-1 β、IL-6、TNF-α均呈正相关(P <0.05),血清miR-214与IL-1 β、IL-6、TNF-α均呈负相关(P <0.05),血清lncRNA PVT1与miR-214水平也呈负相关(P <0.05)。多因素Logistic回归分析表明,IL-1 β、IL-6、TNF-α、lncRNA PVT1及miR-214均与IS患者继发性癫痫的发生有关(P <0.05)。结论lncRNA PVT1水平升高及miR-124水平降低与IS患者继发性癫痫的发生有关,可作为评估IS患者发生继发性癫痫的血清标志物。 展开更多
关键词 缺血性脑卒中 继发性癫痫 长链非编码RNA变浆细胞1 微小RNA-214
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LncRNA PVT1和Foxo3a在卵巢癌患者组织中的表达变化及临床意义
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作者 王艳玲 《医学理论与实践》 2024年第20期3534-3537,共4页
目的:探讨LncRNA PVT1和Foxo3a在卵巢癌患者组织中的表达变化及临床意义。方法:选择2021年1月—2023年12月我院收治的卵巢癌患者156例作为研究对象,将经手术摘除或剥除的卵巢癌组织和癌旁组织,通过RT-PCR技术,研究LncRNA PVT1与Foxo3a... 目的:探讨LncRNA PVT1和Foxo3a在卵巢癌患者组织中的表达变化及临床意义。方法:选择2021年1月—2023年12月我院收治的卵巢癌患者156例作为研究对象,将经手术摘除或剥除的卵巢癌组织和癌旁组织,通过RT-PCR技术,研究LncRNA PVT1与Foxo3a在卵巢癌、癌旁组织中的表达水平。采用受试者工作曲线(ROC)检测LncRNA PVT1和Foxo3a在卵巢癌中的诊断价值。采用χ2检验检测LncRNA PVT1、Foxo3a与临床病理特征的关系。结果:LncRNA PVT1、Foxo3a在卵巢癌中的表达与肿瘤的大小、FIGO分期、分化程度、淋巴结转移相关(P<0.05),与患者的年龄、腹膜转移、组织类型无关(P>0.05)。卵巢癌组织LncRNA PVT1、Foxo3a表达水平高于癌旁组织(P<0.05)。本次研究中以病理结果为金标准发现,LncRNA PVT1检查真阳性68例,真阴性为78例,Foxo3a检查真阳性为65例,真阴性为75例,联合检测真阳性为70例,真阴性为84例,由此可见,二者联合检测检查诊断情况高于LncRNA PVT1、Foxo3a单项检查,与金标准检出率较为相似。联合检测灵敏度、特异度和准确度均明显高于LncRNA PVT1、Foxo3a单项检测。结论:LncRNA PVT1与Foxo3a在卵巢癌中均呈显著高表达,二者在卵巢癌中具有潜在的临床应用价值。 展开更多
关键词 长链非编码核糖核酸 浆细胞基因1 叉头转录因子 卵巢癌
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lncRNA PVT1沉默对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移及STAT3通路的影响 被引量:6
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作者 赵书君 樊素珍 +1 位作者 牛志军 石岩玉 《现代肿瘤医学》 CAS 2020年第4期534-538,共5页
目的:研究沉默变异性浆细胞瘤异位1(plasmacytoma heterotopic 1,PVT1)基因对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移、信号转导及转录活化因子(STATs)3通路的影响。方法:体外培养卵巢癌SKOV3细胞株,设计PVT1 siRNA序列,转染细胞,分为siRNA组、阴性... 目的:研究沉默变异性浆细胞瘤异位1(plasmacytoma heterotopic 1,PVT1)基因对卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移、信号转导及转录活化因子(STATs)3通路的影响。方法:体外培养卵巢癌SKOV3细胞株,设计PVT1 siRNA序列,转染细胞,分为siRNA组、阴性对照组(NC)、空白对照组(BC),利用qRT-PCR检测各组细胞PVT1相对表达量,利用MTT法检测细胞增殖情况,利用划痕实验检测细胞迁移能力,利用Transwell实验检测细胞侵袭能力,利用WB法检测STAT3通路相关蛋白表达情况。结果:转染后,siRNA3组细胞中PVT1表达水平较BC组与NC组显著降低(P<0.05);转染后,与BC组与NC组比较,siRNA3组细胞增殖率较BC组与NC组显著降低(P<0.05),迁移、侵袭细胞数显著降低(P<0.05),p-STAT3蛋白,MMP2、MMP9、CD44、PCNA蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论:沉默PVT1可能抑制卵巢癌SKOV3细胞增殖、迁移与侵袭,其具体机制可能与STAT3信号通路有关。 展开更多
关键词 卵巢癌 浆细胞1 信号转导及转录活化因子3 细胞增殖 细胞迁移
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LncRNA PVT1在结直肠癌细胞增殖、侵袭和转移中的作用
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作者 姜帅 杨丽丽 杨威 《临床和实验医学杂志》 2019年第13期1384-1386,共3页
目的探讨长链非编码RNAs(lncRNAs)浆细胞瘤多样异位基因1(PVT1)在结直肠癌细胞增殖、侵袭和转移中的作用。方法结直肠癌细胞株HT-29分为三组,干扰PVT1(si-PVT1)组转染si-PVT1,干扰对照(si-NC)组转染si-NC,空白组不进行转染。采用CCK-8... 目的探讨长链非编码RNAs(lncRNAs)浆细胞瘤多样异位基因1(PVT1)在结直肠癌细胞增殖、侵袭和转移中的作用。方法结直肠癌细胞株HT-29分为三组,干扰PVT1(si-PVT1)组转染si-PVT1,干扰对照(si-NC)组转染si-NC,空白组不进行转染。采用CCK-8法检测24h、48h细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,划痕实验检测细胞迁移,Transwell小室检测细胞侵袭。结果转染后24h、48h,与空白组和si-NC组相比,si-PVT1组的LncRNAPVT1表达量显著减少(P<0.05),细胞增殖抑制率显著降低(P<0.05),细胞凋亡率显著降低(P<0.05),细胞划痕愈合率、细胞侵袭率都显著增加(P<0.05)。结论LncRNAPVT1在结直肠癌中可发挥抑癌基因的作用,抑制LncRNAPVT1的表达从而促进结直肠癌细胞增殖、侵袭和转移,抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 结直肠癌 长链非编码RNAs 浆细胞瘤多样异位基因1 细胞侵袭 细胞转移
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MALT1-A20-NF-κB信号分子在MM中的表达特点 被引量:2
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作者 王旭 徐玲 +7 位作者 张帆 徐艳 吴秀丽 杨力建 陈少华 李萡 卢育洪 李扬秋 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期373-377,共5页
目的:了解多发性骨髓瘤(MM)患者外周血中黏膜相关组织淋巴瘤异位基因1(MALT1)、A20与核转录因子κB(NF-κB)基因的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光实时定量PCR和相对定量分析法检测20例MM患者(Ⅰ期7例,Ⅱ期3例,Ⅲ期10例)及21例健... 目的:了解多发性骨髓瘤(MM)患者外周血中黏膜相关组织淋巴瘤异位基因1(MALT1)、A20与核转录因子κB(NF-κB)基因的表达特点。方法:采用SYBR GreenⅠ荧光实时定量PCR和相对定量分析法检测20例MM患者(Ⅰ期7例,Ⅱ期3例,Ⅲ期10例)及21例健康人外周血单个核细胞(PBMC)中MALT1、A20和NF-κB基因的表达情况。以β2微球蛋白基因(β2m)作为内参;采用相对定量公式:α^(-△Ct)×100%,分别计算MALT1、A20和NF-κB基因的表达水平。结果:MM患者PBMC中的MALT1和A20基因的表达水平较健康人都有明显的降低(P=0.000),而MM中NF-κB基因的表达水平较正常人有所升高,但无统计学差异(P>0.05)。在健康人组,MALT1和NF-κB的表达水平呈现正相关(P=0.001,r=0.666),而在MM组,MALT1、A20与NF-κB 3种基因均不存在明显相关性。同时,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期MM患者MALT1基因的表达量较健康人明显降低(P<0.05),A20基因的表达量较健康人明显降低(P<0.01),而Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ期MM患者MALT1、A20和NF-κB之间的表达情况均无统计学差异。结论:当MALT1-A20介导的细胞免疫和炎症的信号通路发生异常改变时,可能与MM的发生发展有着密切关系。 展开更多
关键词 多发性骨髓 多发性骨髓(MM) 黏膜相关组织淋巴基因1(MALT1) A20 NF-ΚB 基因表达
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LncRNA PVT1在结直肠癌中的表达及其临床意义 被引量:3
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作者 潘雪峰 朱小闪 +4 位作者 蔡丰波 张丽娟 张占洋 李俊堂 高春芳 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2021年第2期271-275,共5页
目的:探讨LncRNA PVT1在结直肠癌中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法:RT-qPCR法检测130例CRC患者癌组织和癌旁正常组织中LncRNA PVT1的表达,并揭示其表达的临床意义。结果:与癌旁正常组织相比较癌组织中的LncRNA PVT1呈高表达... 目的:探讨LncRNA PVT1在结直肠癌中的表达及其与临床病理特征之间的关系。方法:RT-qPCR法检测130例CRC患者癌组织和癌旁正常组织中LncRNA PVT1的表达,并揭示其表达的临床意义。结果:与癌旁正常组织相比较癌组织中的LncRNA PVT1呈高表达,其高表达与淋巴结转移和远处转移密切相关,而与T分级关系不大。LncRNA PVT1低表达和高表达患者的中位DFS分别为44个月和26个月(P=0.021);COX分析表明LncRNA PVT1表达水平和TNM分期均是预测DFS的独立影响因子。在Ⅰ期CRC中LncRNA PVT1高表达患者所占的比例显著高于血浆CEA升高患者的比例(P<0.0001)。结论:LncRNA PVT1在CRC的高表达与淋巴结转移和远处转移相关,是预测DFS的独立影响因子,另外其异常表达具有早期诊断CRC的潜在价值。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 浆细胞瘤多样异位基因1 结直肠癌 预后
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乳腺癌组织LncRNA PVT1 ABCG2 mRNA表达与病理特征间关系及KM曲线分析 被引量:1
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作者 徐亮 王杜娟 +2 位作者 谢倩 李松梅 黄述斌 《河北医学》 CAS 2022年第9期1457-1462,共6页
目的:探讨乳腺癌组织长链非编码RNA浆细胞瘤异位变异基因1(LncRNA PVT1)、三磷酸腺苷结合转运蛋白G2(ABCG2)mRNA表达与病理特征间关系及KM曲线分析。方法:选取2017年1月至2018年12月我院接受手术治疗的80例乳腺癌患者的病例资料;术中留... 目的:探讨乳腺癌组织长链非编码RNA浆细胞瘤异位变异基因1(LncRNA PVT1)、三磷酸腺苷结合转运蛋白G2(ABCG2)mRNA表达与病理特征间关系及KM曲线分析。方法:选取2017年1月至2018年12月我院接受手术治疗的80例乳腺癌患者的病例资料;术中留取乳腺癌组织和癌旁组织(距病灶2 cm),比较癌组织及癌旁组织LncRNA PVT1、ABCG2 mRNA表达,分析癌组织LncRNA PVT1、ABCG2 mRNA表达与病理特征的相关性,COX回归分析乳腺癌患者术后复发的影响因素,比较不同癌组织LncRNA PVT1、ABCG2 mRNA表达患者无病生存期。结果:癌组织LncRNA PVT1(0.076±0.011)、ABCG2 mRNA(3.27±0.45)表达高于癌旁组织(0.003±0.001)、(0.82±0.26)(t=59.114、42.165,P<0.05);癌组织LncRNA PVT1、ABCG2 mRNA表达与临床分期、病理分级、淋巴结转移有关(P<0.05);复发者癌组织LncRNA PVT1(0.084±0.010)、ABCG2 mRNA(3.75±0.59)表达高于未复发者(0.074±0.009)、(3.13±0.47)(t=4.048、4.644,P<0.05);COX回归分析显示,癌组织LncRNA PVT1、ABCG2 mRNA高表达均为术后复发独立危险因素(P<0.05);Kaplan-Meier生存分析显示,癌组织LncRNA PVT1、ABCG2 mRNA高表达者术后3年无病生存率低于低表达者(P<0.05)。结论:乳腺癌患者癌组织LncRNA PVT1、ABCG2 mRNA异常高表达,且与病理特征及无病生存期相关,有望成为新的治疗靶点。 展开更多
关键词 乳腺癌 长链非编码RNA浆细胞基因1 三磷酸腺苷结合转运蛋白G2 无病生存期
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PKCδ与MALT1对HIV-TB共感患者细胞免疫应答的作用
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作者 李邦跃 李黎 +1 位作者 钟雪梅 邹小广 《医学信息》 2024年第1期103-108,共6页
目的分析艾滋病与结核病双重感染(HIV-TB)患者外周血单个核细胞中PKCδ与MALT1对Th17细胞水平、炎症因子水平及mRNA表达水平的影响。方法收集2021年6月-2022年8月喀什地区第一人民医院收治的HIV-TB共感患者4例,分离外周血单个核细胞(PB... 目的分析艾滋病与结核病双重感染(HIV-TB)患者外周血单个核细胞中PKCδ与MALT1对Th17细胞水平、炎症因子水平及mRNA表达水平的影响。方法收集2021年6月-2022年8月喀什地区第一人民医院收治的HIV-TB共感患者4例,分离外周血单个核细胞(PBMC)培养后分为空白对照组和B106组[PKCδ抑制剂(B106)处理细胞]、MI-2组[MALT1抑制剂(MI-2)处理细胞]、B106+MI-2组[PKCδ抑制剂(B106)与MALT1抑制剂(MI-2)共同处理细胞]3个试验组。应用流式细胞术检测Th17细胞水平;采用ELISA法检测IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ、TNF-α、IL-10以及IL-22的水平及运用qPCR检测MALT1、Iκbα、P65以及IL-17、IL-23的mRNA表达水平,探讨PKCδ与MALT1对HIV-TB共感患者中细胞免疫应答的影响,并初步分析其作用机制。结果3个试验组中Th17细胞的数量均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);3个试验组中IL-6、IL-17、IL-23、IFN-γ、TNF-α、IL-10以及IL-22的浓度均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),但3个试验组之间比较,差异无统计学意义(P>0.05);3个试验组中IL-17、IL-23的mRNA表达水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);B106组MALT1、P65表达低于对照组,Iκbα表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),MI-2组Iκbα表达高于对照组,P65表达低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);B106+MI-2组与其他2个试验组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论抑制PKCδ或MALT1可拮抗HIV-TB共感患者的Th17细胞数量下降,抑制HIV-TB的炎症反应,抑制SYK/PKCδ/CARMA1-Bcl10-MALT1(CBM)复合物通路,可通过抑制NF-κB炎症通路拮抗HIV-TB的炎症反应。 展开更多
关键词 艾滋病 结核病 艾滋病与结核病双重感染 蛋白激酶Cδ 黏膜相关淋巴组织淋巴基因1
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LncRNA PVT1靶向miR-146a对结核分枝杆菌感染肺泡Ⅱ型细胞TLR4通路免疫效应的影响
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作者 孙沛 姜振伟 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第12期3029-3034,共6页
目的探讨长链非编码核糖核酸浆细胞瘤可变异位基因(LncRNA PVT)1靶向微小核糖核酸(miR)-146a对结核分枝杆菌感染肺泡Ⅱ型细胞Toll样受体(TLR)4通路免疫效应的影响。方法采用结核分枝杆菌株H37Rv感染人肺泡Ⅱ型上皮细胞A549,分别向感染... 目的探讨长链非编码核糖核酸浆细胞瘤可变异位基因(LncRNA PVT)1靶向微小核糖核酸(miR)-146a对结核分枝杆菌感染肺泡Ⅱ型细胞Toll样受体(TLR)4通路免疫效应的影响。方法采用结核分枝杆菌株H37Rv感染人肺泡Ⅱ型上皮细胞A549,分别向感染细胞转染LncRNA PVT1干扰阴性对照(si-NC)、si-LncRNA PVT1、miR-146a模拟物(miR-146a mimics)、miR-146a mimics阴性对照(miR-NC)、si-LncRNA PVT1+miR-146a抑制剂阴性对照(NC inhibitor)、si-LncRNA TUG1+miR-146a inhibitor,记为si-NC组、si-LncRNA PVT1组、miR-146a mimcs组、miR-NC组、si-LncRNA PVT1+NC inhibitor组、si-LncRNA TUG1+miR-146a inhibitor组,另取未转染的感染细胞为对照组。转染48 h后,倒置荧光显微镜观测转染效率;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测细胞上清肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6水平;实时荧光定量-聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测细胞LncRNA PVT1和miR-146a、TLR4、髓样分化因子(MyD88)、核转录因子(NF)-κB p65 mRNA表达;Western印迹检测细胞TLR4、MyD88、NF-κB p65及p-NF-κB p65蛋白表达水平;双荧光素酶报告基因及RT-qPCR法检测LncRNA PVT1与miR-146a、miR-146a与TLR4的靶向作用。结果si-NC组、si-LncRNA PVT1组、miR-146a mimcs组、miR-NC组、si-LncRNA PVT1+NC inhibitor组、si-LncRNA TUG1+miR-146a inhibitor组转染效率(81.21±4.15)%、(85.68±3.49)%、(86.55±5.03)%、(84.63±4.29)%、(83.41±4.73)%、(80.67±3.95)%;与对照组、si-NC组、miR-NC组比较,miR-146a mimics组、si-LncRNA PVT1组、si-LncRNA PVT1+NC inhibitor组和si-LncRNA TUG1+miR-146a inhibitor组TNF-α和IL-6水平显著下降,miR-146a表达显著上升,TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达和p-NF-κB p65蛋白表达显著下降(P<0.01);与si-LncRNA PVT1组、si-LncRNA PVT1+NC inhibitor组比较,si-LncRNA TUG1+miR-146a inhibitor组TNF-α和IL-6水平上升,TLR4、MyD88、NF-κB p65 mRNA及蛋白表达和p-NF-κB p65蛋白表达上升,差异有统计学意义(P<0.01);LncRNA PVT1直接靶向调控miR-146a;miR-146a直接靶向调控TLR4。结论抑制LncRNA PVT1可促进结核分枝杆菌感染肺泡Ⅱ型细胞的免疫效应,可能与靶向miR-146a抑制TLR4/MyD88/NF-κB通路、下调TNF-α和IL-6水平相关。 展开更多
关键词 长链非编码核糖核酸浆细胞可变基因LncRNA(PVT)1 微小核糖核酸-146a Toll样受体4 免疫效应
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