海洋来源真菌A-f-11中吲哚二酮哌嗪类抗肿瘤活性成分的研究

对海洋来源具有抗肿瘤活性的真菌A-f-11中活性次级代谢产物进行了研究,采用活性追踪的方法从乙酸乙酯提取物中分离得到7个含吲哚基的二酮哌嗪类化合物,根据化合物的光谱特征和理化性质分别鉴定为cyclo-L-tryptophyl-L-proline(1),N-Prenyl-cyclo-L-tryptophyl-L-proline(2),tryprostatin B(3),dem ethoxyfum itrem orgin C(4),fum it remorgin C(5),cyclotrypros-tatins B(6)和fum itrem orgin B(7),其中化合物2为新天然产物。利用丽丝胺罗丹明法,对7个单体化合物的抗肿瘤活性进行了初步评价。

海洋来源真菌Hypocrea virens的次级代谢产物研究

目的研究海洋来源真菌Hypocrea virens发酵液的化学成分。方法采用硅胶柱色谱、Sepha-dex LH-20凝胶柱色谱、开放ODS柱色谱以及HPLC等方法进行分离纯化,通过理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果分离得到10个化合物,分别鉴定为bisdethiobis-(methylthio)glio-toxin(1)、胶霉毒素(gliotoxin,2)、5-羟基-3-羟甲基-2-甲基-7-甲氧基色原酮(5-hydroxy-3-hydroxymethyl-2-methyl-7-methoxychromone,3)、6-甲基苯-1,2,4-三醇(6-methyl-benzene-1,2,4-triol,4)、3β-羟基-胆甾-5-烯(3β-hydroxy-cholesta-5-ene,5)、3-异丁基-8-羟基吡咯并哌嗪-2,5-二酮(3-isobutyl-8-hydroxypyrrolopiperazine-2,5-dione,6)、3-苄基哌嗪-2,5-二酮(3-benzylpiperazine-2,5-dione,7)、3-苄基-8-羟基吡咯并哌嗪-2,5-二酮(3-benzyl-8-hydroxypyrrolopiper-azine-2,5-dione,8)、3S*,4R*-二羟基-3-甲基戊烷-2-酮(3S*,4R*-dihydroxy-3-methylpentan-2-one,9)、3R*,4R*-二羟基-3-甲基戊烷-2-酮(3R*,4R*-dihydroxy-3-methylpentan-2-one,10)。结论化合物1、3、4、8～10均为首次从Hypocrea属真菌中分离得到,化合物5为首次从真菌Hypocrea virens中分离得到。

海洋来源真菌烟曲霉(Aspergillus fumigatus)次级代谢产物研究(Ⅱ)

对一株海洋来源的微生物（Aspergillus fumigatus.）中的次级代谢产物进行了研究,采用硅胶柱色谱方法进行分离纯化,根据理化性质和光谱数据鉴定了化合物的结构,分别为环-（丙-缬）（1）,环-（色-脯）（2）,N-[2-（4-羟基苯基）乙基]乙酰胺（3）,对羟基苯乙酰胺（4）,4,8-二羟基-1-四氢萘醌（5）,3,4-二羟基苯甲酸甲酯（6）,麦角甾醇（7）和过氧化麦角甾醇（8）。化合物1~8均首次从该菌株中分离。

海洋来源真菌Aspergillus sydowi PFW-13中的吲哚-喹唑啉类生物碱及其抗肿瘤活性

目的研究海洋来源真菌萨氏曲霉（Aspergillus sydowi）PFW-13发酵产物中的抗肿瘤活性次级代谢产物。方法采用活性追踪的方法、利用色谱手段分离获得单体化合物,根据波谱分析及其理化性质确定其结构,利用SRB法评价单体化合物的细胞毒活性。结果获得6个吲哚-喹唑啉类生物碱,其结构分别鉴定为fumiquinazolines A（1）、fumiquinazolines C（2）、fu-miquinazolines D（3）、fumiquinazolines F（4）、fumiquinazolines G（5）、fumiquinazolines J（6）,其中化合物6为新天然产物。化合物2和6对肿瘤细胞tsFT210、A549、BEL-7402、HL60和P388的半数抑制浓度（IC50）在1×10^-5-1×10^-4mol·L^-1之间。结论以上化合物均为首次从该种真菌中分离得到。

海洋来源真菌烟曲霉中胶霉毒素类成分研究

为了从海洋来源的微生物中寻找新的抗肿瘤活性天然产物,对一株具有较强细胞毒活性的海洋来源真菌烟曲霉进行系统分离研究,以抗肿瘤活性为指标,采用硅胶柱层析、葡聚糖凝胶LH-20和HPLC等方法从中分离出4个单体化合物,经波谱数据分析及与文献对照分别鉴定为gliotoxin(1),bisdethiobis(methylthio)gliotoxin(2),d idehydrobisdethio-bis(methylthio)gliotoxin(3)和bis-N-norgliovictin(4),其中化合物(1)在0.15 mg/L浓度下对温敏型小鼠乳腺癌细胞(tsFT 210)显示了很强的细胞毒活性.

海洋来源真菌烟曲霉(Aspergillus fumigatus)次级代谢产物研究(Ⅰ):生物碱

对一株海洋来源的微生物中的次级代谢产物进行了研究，从中分离并鉴别了5个喹唑啉生物碱类化合物（1～5），分别为fumiquinazoline G（1），fumiquinazoline F（2），fumiquinazoline A（3），fumiquinazoline C（4）和fumiquinazoline D（5）。

海洋来源真菌Hypocrea virens菌丝体的化学成分研究

采用硅胶柱色谱、Sephadex LH-20凝胶柱色谱、开放ODS柱色谱以及HPLC等对海洋来源真菌Hypocreavirens的菌丝体进行化学成分分离,通过理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。从菌丝体的丙酮提取物中分离得到8个化合物,分别鉴定为1(10→6)Abeo-(22E,24R)-ergosta-5,7,9,22-tetraene-3α,11α-diol(Ⅰ)、24-甲烯基羊毛脂烷-8-烯-3β-醇(Ⅱ)、(22E,24R)-麦角甾-5,7,22-三烯-3β-醇(Ⅲ)、(22E,24R)-麦角甾-8,22-二烯-3β,5α,6β,7α-四醇(Ⅳ)、5α,9α-过氧-(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β,6β-二醇(Ⅴ)、5α,8α-过氧-(22E,24R)-麦角甾-6,22-二烯-3β-醇(Ⅵ)、(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-3β,5α,6β-三醇(Ⅶ)、3β,5α,9α-三羟基-(22E,24R)-麦角甾-7,22-二烯-6-酮(Ⅷ),其中化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅷ均为首次从该属真菌中分离得到,化合物Ⅲ、Ⅵ、Ⅶ为首次从该种真菌中分离得到。

海洋来源真菌Fusarium sp.次级代谢产物的研究(Ⅱ)

采用多种色谱技术对海洋来源真菌Fusariumsp.的发酵物进行化学成分分离,通过波谱及理化性质分析确定了化合物的结构。从菌丝体的丙酮提取物中共分离得到10个化合物,分别为1,3,5-三羟基-7-甲基蒽醌(1)、6-羟基芦荟大黄素(2)、3-O-β-D-吡喃葡萄糖基-豆甾-5,24(28)Z-二烯(3)、尿嘧啶核苷(4)、次黄嘌呤核苷(5)、吡咯并哌嗪-2,5-二酮(6)、3-异丙基吡咯并哌嗪-2,5-二酮(7)、尿嘧啶(8)、10S-羟基十八碳酸(9)、甘露醇(10)。其中化合物1、3和9均为首次从该属真菌中分离得到。

海洋来源真菌Penicillium sacculum次级代谢产物的研究

目的研究海洋来源真菌Penicillium sacculum的次级代谢产物。方法采用多种色谱方法进行分离纯化,通过理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构;采用台盼蓝排斥法和MTT法进行抗肿瘤活性测试。结果从发酵液和菌丝体中共分离得到10个化合物,结构鉴定为(R)-1,3-二氢-6-甲氧基-3-甲基异苯并呋喃-4,5-二醇(1)、灰黄霉素(2)、1,6-二羟基-3-甲氧基-8-甲基酮(3)、1-羟基-3-甲基酮(4)、1,3,6-三羟基-8-甲基酮(5)、1,8-二羟基-3-甲基蒽醌(6)、1,3,5-三羟基-7-甲基蒽醌(7)、6-羟基芦荟大黄素(8)、腺嘌呤(9)、胸腺嘧啶(10);化合物1和3对人急性髓细胞性白血病细胞HL-60分别具有较强和中等强度的抑制活性。结论化合物1和4均为首次从该属真菌中分离得到;首次对化合物1的1H-NMR和13C-NMR谱信号进行了全归属;化合物1和3具有抗肿瘤活性。

海洋来源真菌Aspergillus aculeatus中一个新的具有长交叉共轭系统的甾体（英文）

本文对海洋来源的内生真菌棘孢曲霉(Aspergillus aculeatus)的次级代谢产物进行了研究,从其提取物中分离得到一个新的具有较长交叉共轭系统的甾体类化合物,通过各种波谱分析方法确定其结构为15α-羟基-(22E,24R)-麦角甾-3,5,8(14),22-四烯-7-酮(15α-hydroxy-(22E,24R)-ergosta-3,5,8(14),22-tetraen-7-one)。测试了该化合物在体外对小鼠白血病细胞株P388、人早幼粒白血病细胞株HL-60、人前列腺癌细胞株PC-3的细胞毒作用。

海洋来源真菌Hypocrea virens次级代谢产物的研究(Ⅱ)

目的研究海洋来源真菌Hypocrea virens发酵产物的化学成分。方法采用硅胶柱色谱和Sephadex LH-20凝胶柱色谱等方法进行分离纯化,通过理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。结果分离得到7个化合物,结构鉴定为异光黄素(1)、1-乙酰基-β-卡波林(2)、苯并噻唑啉-2-硫酮(3)、2,2'-二硫化二苯并噻唑(4)、吡咯并哌嗪-2,5-二酮(5)、腺苷(6)、2-乙酰胺基-2-去氧-α-D-吡喃葡萄糖(7)。结论化合物1～5均为首次从该属真菌中分离得到,化合物6、7为首次从该种真菌中分离得到。

1株海洋来源真菌Nigrospora sp.蒽醌类化合物及其生物活性研究

目的对1株海洋来源真菌Nigrosporasp.(TA26-9)中的蒽醌类化合物进行结构表征,筛选评价生物活性。方法采用波谱分析方法和单晶衍射技术对化合物进行结构表征,采用微量稀释法测定化合物对10株致病菌的抗菌活性,采用Solis改良法测定化合物的卤虫致死活性。结果结构表征确定了6个蒽醌类化合物(1~6)的结构。对化合物1~6及其乙酰化衍生物3a,4a,5a^5d生物活性评价表明,所有化合物对辣椒炭疽病菌Colletotrichum capsici都有选择性抗菌活性,MIC=0.26~1.22μmol/L;除化合物3外,对玉米大斑病菌Setosphaeria turcica也表现出很好的抗菌活性,MIC=0.27~4.82μmol/L。特别地,化合物3a具有广谱抗菌活性,对8株致病菌的MIC在0.27~4.32μmol/L之间,该化合物还显示卤虫致死活性,在25μg/mL浓度下对卤虫Artemia salina的致死率为78.9%。结论海洋来源真菌Nigrosporasp.(TA26-9)中的蒽醌类化合物具有选择性抗菌活性,具有开发成抗菌剂的潜力。

海洋来源真菌Cochliobolus lunatus产抗污损活性大环内酯化合物zeaenol的发酵优化

目的优化海洋来源真菌Cochliobolus lunatus(TA26-46)的发酵条件,以期提高抗污损活性大环内酯zeaenol的产量。方法运用单因素试验设计和正交试验设计,对该菌株产zeaenol的氮源、前体、盐度和培养基中不同离子等发酵条件进行优化。结果结果表明:最佳优化发酵条件为可溶性淀粉10g·L^(-1),氮源为硝酸钠5g·L^(-1),乙酸钠浓度为5g·L^(-1),盐度为1%。结论在最佳发酵条件下,zeaenol产量可达155.4mg·L^(-1),比优化前提高了5倍。

特殊生态环境真菌的分离培养及抗肿瘤活性筛选

目的从特殊环境样品中分离纯化真菌,并筛选获取抗肿瘤活性菌株供筛选新药、无活菌株供真菌核糖体工程转化研究。方法利用单菌落挑选与划线培养技术,分离纯化真菌。通过摇床发酵培养,提取制备发酵样品。采用MTT法结合细胞形态学检测的方法,用K562细胞测试发酵样品的抗肿瘤活性。结果从采自湖北巴东偏远山区6个不同砖窑内的窑土样品中分离真菌32株,从天津塘沽驴驹河渤海湾潮间带海泥样品中分离真菌102株。其中,在100 mg.L-1样品浓度下有明显抗肿瘤活性的陆生真菌2株、海洋来源真菌12株,即使在1 000 mg.L-1的高浓度下也没有抗肿瘤作用的无活性真菌8株。结论从窑土、潮间带海泥等样品中分得真菌134株,从中筛选获取抗肿瘤活性菌株14株(占菌株总数的10.4%),无活性菌株8株。活性菌株为筛选抗肿瘤天然产物提供了药源菌株,无活性菌株则为真菌核糖体工程转化研究提供了菌株材料。

广西涠洲岛柳珊瑚共附生真菌多样性及其抑菌活性

文章使用4种分离培养基,从10个广西涠洲岛柳珊瑚样本中分离可培养真菌,通过菌落形态观察和内转录间隔区序列系统发育分析,得到涠洲岛柳珊瑚共附生真菌多样性信息,并采用96孔板法测定了真菌发酵液乙酸乙酯提取物的抑菌活性和抗生物被膜形成活性。试验结果表明,从涠洲岛柳珊瑚样本中分离得到191株共附生真菌,鉴定为26个种。这些真菌均属于子囊菌门,分布于6个属:曲霉属(Aspergillus)、青霉属(Penicillium)、链格孢属(Alternaria)、枝孢菌属(Cladosporium)、黑孢霉属(Nigrospora)和Parengyodontium属。曲霉属(Aspergillus)为优势种属,占总菌株种类的69.23%;次优属为枝孢菌属(Cladosporium)。抑菌活性筛选发现有11种真菌至少对一种指示菌有抑制活性,占菌种总数的42.31%;有7种真菌对表皮葡萄球菌生物被膜形成具有抑制活性,半数有效浓度(EC_(50))范围为40.3~155μg·mL^(-1),菌株Penicillium cinnamopurpureum GXIMD00518、Aspergillus carneus GXIMD00519具有抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌生物被膜形成活性,EC_(50)分别为105.4μg·mL^(-1)和117.4μg·mL^(-1)。

海洋真菌来源化合物(＋)-terrein的发酵优化及其生物活性

目的对海洋来源真菌Aspergillus terreus中的(+)-terrein代谢产物进行发酵优化,以期获得足够的样品进行药理活性评价。方法采用不同发酵条件对微生物进行发酵优化,运用柱色谱层析技术对目标产物进行分离纯化,对化合物进行细胞毒及抗细菌活性评价。结果研究表明,最优发酵条件为土豆液体发酵培养基,发酵时间为28d,在该条件下目标产物单一,易分离纯化。用上述最优发酵条件,摇床发酵时间12d的产量与静置发酵28d的产量相当。细胞毒活性测试结果显示,(+)-terrein具有强的细胞毒活性,对NCIH460、A549和BT474肿瘤细胞株的IC50值分别为3.12、3.32和3.45μg/mL。结论在优化条件下,静置发酵28d,(+)-terrein的产量可达0.254g·L-1,而摇床发酵12d其产量为0.263g·L^(-1),明显缩短了发酵时间。此外,该化合物对NCI-H460、A549和BT474肿瘤细胞具有较好的细胞毒活性,具有开发为抗癌药物的潜在价值。

海洋真菌Penicillium sp.产抗肿瘤天然产物brefeldin A的发酵优化研究

目的 对海洋来源真菌Penicillium sp.产抗肿瘤天然产物brefeldin A进行发酵优化,以期获得高产率目标化合物。方法 运用单因素实验设计,重点考察了培养方式、发酵培养基组成(如碳源、氮源、盐度等)以及培养条件(温度、摇床转速)等因素。结果 最佳发酵条件为:马铃薯200 g/L,麦芽糖10 g/L,淀粉20 g/L,海盐15 g/L,28℃,摇床转速160 r/min,培养14 d。结论 在该发酵条件下,brefeldin A的实际产量达到40 mg/L,较优化前提高了近10倍。

海洋Penicillium sp.FJ-1中一个抗真菌活性的新橙酮苷（英文）

红树植物内生真菌的代谢物中存在很多新的活性化合物。通过对红树植物海榄雌中一株内生真菌Penicillium sp.FJ-1的研究,利用硅胶柱色谱方法分离得到了一个新橙酮苷(Z)-7,4'-dimethoxy-6-hydroxy-aurone-4-O-β-glucopyranoside(1)。通过波谱分析方法确定其化学结构。化合物1具有显著的抗白色念珠菌活性,强度优于氟康唑,与两性霉素B相当,并且能够浓度依赖性抑制磷脂酶分泌。

产紫青霉G59的庆大霉素抗性突变株新产抗肿瘤活性产物研究

目的阐明真菌无活性野生株产紫青霉G59的庆大霉素抗性突变株2-5-3-1新产抗肿瘤活性产物。方法在活性跟踪和薄层检测指导下,通过与原始菌样品直接对照,利用液液萃取、柱层析、制备薄层层析、重结晶等技术,分离纯化活性产物。根据理化常数和波谱数据鉴定化合物结构。用MTT法测试样品对K562细胞的抑制活性。结果从突变株2-5-3-1发酵物中分离鉴定了麦角甾醇（1）、fructigenine A（2）、rugulosuvine A（3）、大黄素（4）和ω-羟基大黄素（5）。化合物1~5在100μg/ml浓度下对K562细胞的抑制率分别为52.8%、60.8%、41.2%、84.6%和37.1%,其中1、2和4的IC50分别为93.1、58.4和30.0μg/ml。结论化合物1~5均为产紫青霉G59不生产而突变株新产抗肿瘤活性产物。用DMSO介导的庆大霉素抗性筛选方法可以将无活性真菌野生株转化成活性突变株并供新产活性产物研究。

南极深海来源真菌Penicillium crustosum PRB-2中1个新的二酮哌嗪类化合物

目的 通过OSMAC策略,研究南极海洋来源真菌Penicillium crustosum PRB-2的次级代谢产物。方法 采用硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、高效液相色谱(HPLC)等分离方法对菌株发酵提取物进行分离纯化;运用NMR、MS等现代波谱学方法,确定化合物结构;通过活性筛选评价化合物活性。结果 从P. crustosum PRB-2中分离到1个新化合物chainstatin(1)和2个已知化合物penilloid A(2)、tryhistatin(3)。化合物1是首次报道C-5位被2-甲基戊-2-醇取代的二酮哌嗪类化合物。化合物1具有较弱的抗氧化活性,IC50值为294μmol/L。