海藻糖敷料对激光损伤兔皮肤屏障功能的修复及体外促细胞生长、迁移和抗炎作用研究

目的:探究海藻糖敷料对激光损伤兔动物模型皮肤的修复作用,并探索其体外促细胞生长、迁移和抗炎作用。方法:试验兔脊柱两边各脱毛4个区域,随机分为正常组(N)、模型组(M)、对照组(P)和实验组(T)。除正常组外,其余各组使用激光照射造模;对照组及实验组分别使用透明质酸敷料及海藻糖敷料贴敷。于第0天、第3天、第7天、第14天和第21天对创面进行红斑和焦痂、水肿程度评分,以评价海藻糖敷料对皮肤修复效果。以L929细胞及HaCaT细胞为研究对象探索海藻糖敷料体外促细胞生长、迁移和抗炎作用。将细胞分为空白组(培养基)、正常组(细胞液+培养基)、对照组(细胞液+培养基+透明质酸)及实验组(细胞液+培养基+海藻糖)。使用MTT比色法检测各组L929细胞24 h、48 h及72 h增殖率,划痕试验检测各组L929细胞6 h、12 h和24 h迁移力;使用TNF-α及IFN-γ诱导HaCaT细胞建立炎症反应模型后,24 h后检测各组IL-6、IL-8和MDC表达水平。结果:创面给予敷料后7 d,实验组水肿评分[(1.1±0.3)分]较模型组[(1.2±0.4)分]显著降低(P<0.05);第14天,相较于模型组,实验组及对照组水肿、红斑焦痂评分有下降趋势但差异无统计学意义(P>0.05)。病理结果显示,对照组、实验组较模型组第14天炎细胞浸润微有减少。细胞实验结果显示,与正常组相比,对照组和实验组4 h、48 h及72 h的细胞增殖率均有明显增加;与正常组相比,对照组及实验组6 h、12 h和24 h的细胞迁移率均有明显增加(P<0.05);与细胞炎症模型组相比,实验组细胞上清液中IL-6、IL-8和MDC的表达水平明显降低(P<0.01)。结论:海藻糖敷料对激光所致兔皮肤屏障受损创面的组织炎症、愈合有一定修复作用;其机制可能与其能促进细胞增殖、细胞迁移及抑制炎症的功能相关。

高效液相色谱法测定化妆品中海藻糖的含量

通过对影响海藻糖测定条件(流动相、色谱柱、提取溶剂、超声时间)的研究,建立了高效液相色谱法快速测定化妆品中海藻糖含量的分析方法。化妆品中海藻糖经体积比1∶9的乙腈水溶液超声提取20 min后,使用体积比3∶1的乙腈-水(含体积分数0.2%三乙胺)溶液作为流动相等度洗脱,用Waters Xbrige-NH2氨基柱(250 mm×4.6mm×5μm)进行分离检测化妆品中海藻糖。该方法的线性范围为0.1~5 mg/mL,检出限为0.33 g/kg,定量限为1.0g/kg,加标回收率为92.4%~106%,相对标准偏差<5%。

陆生蓝藻地木耳中海藻糖提取工艺研究

该研究从三氯乙酸浓度、三氯乙酸用量、提取温度及时间4个方面初步探讨从地木耳中提取海藻糖的工艺,该研究通过单因素和正交试验,优化从地木耳中提取海藻糖的工艺条件,通过考察三氯乙酸浓度、用量、提取温度和时间对提取率的影响,确定最佳工艺条件。最佳工艺条件为0.3 M三氯乙酸浓度,用量5 mL,提取温度80℃,时间50 min。

极端高温对截形叶螨体内海藻糖含量及海藻糖转运蛋白基因的影响

【目的】明确高温对截形叶螨(Tetranychus truncatus)海藻糖转运蛋白基因的影响,为有害生物的绿色防控提供理论依据。【方法】根据高温诱导下的截形叶螨转录组数据获取两条海藻糖转运蛋白基因TtTret1-like和TtTret1的CDS序列和蛋白氨基酸序列;利用ExPASy、ProScale、MEGA等分析工具对TtTret1-like和TtTret1进行生物信息学分析;利用实时荧光定量PCR(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)技术分析TtTret1-like和TtTret1在截形叶螨不同发育阶段及不同高温(38、42、46、50℃)处理下的表达特性;采用微量法测定不同高温处理下截形叶螨的海藻糖含量;利用RNA干扰(RNAi)技术沉默TtTret1-like和TtTret1,探究其在应对高温中的功能。【结果】生物信息学分析表明,TtTret1-like和TtTret1的CDS全长分别为1389和1569 bp,分别编码463和523个氨基酸,预测的蛋白分子量分别为50189.03和57358.10 Da,等电点分别为8.87、8.70。TtTret1-like和TtTret1均为碱性氨基酸和疏水性氨基酸且同属于不稳定蛋白;二级结构预测为螺旋和卷曲结构;两个海藻糖转运蛋白均具有协同转运蛋白超家族(major facilitator superfamily,MFS)的保守结构域及12个跨膜结构域。氨基酸序列相似性和系统发育分析表明,TtTret1-like和TtTret1与蛛形纲其他物种海藻糖转运蛋白序列的一致性较高,尤其与二斑叶螨(T.urticae)的亲缘关系最近。TtTret1-like在卵期、幼螨期和成螨期的表达量较高;TtTret1在幼螨期高表达。随处理温度的升高,TtTret1-like的表达量大致呈上升趋势,在50℃时表达量最高;而TtTret1的表达量随处理温度的升高先上升后下降,在42℃时表达量达到最高;高温胁迫后截形叶螨体内的海藻糖含量显著升高。沉默TtTret1-like和TtTret148 h后,截形叶螨体内整体海藻糖含量上升,但血淋巴海藻糖含量下降;用50℃高温处理截形叶螨2 h,然后恢复至96 h时,截形叶螨存活率分别为11%和46.67%,显著低于对照组。【结论】截形叶螨TtTret1-like和TtTret1在其抵御高温胁迫过程中具有重要的作用。

海藻糖对高湿挤压肉类类似物品质特性的影响

为改善大豆蛋白肉类类似物的纤维化度和其他品质特性,探究高湿挤压过程中海藻糖(trehalose,TR)的添加比例对大豆蛋白肉类类似物品质的影响,采用湿法挤压技术制作大豆蛋白肉类类似物,分析TR的不同添加比例对大豆蛋白肉类类似物色泽、质构特性、流变特性和微观结构的影响。此外,还分析了TR的添加对肉类类似物中蛋白质二级结构的影响。结果表明,添加了6%TR的肉类类似物的硬度为(11.82±0.53)kgf,咀嚼度为(10.02±0.39)kgf,并且表现出了最高的纤维化度,为1.99±0.05,相比于未添加TR的样品增加了22%。表观观察到所有添加了TR的样品外观较0%TR的样品更平整光滑。此外,还发现添加了6%TR的样品的亮度值为56.68±0.19,最接近于熟制鸡胸肉的亮度值56.34±0.40。扫描电镜结果显示,添加了6%TR的肉类类似物相较于0%TR的样品有着更明显的各向异性结构。总而言之,肉类类似物中TR的最佳添加比例为6%,并且TR是制备高品质特性大豆蛋白肉类类似物的一种较理想的添加剂。

菜薹镉低积累“油蔬两用”油菜品种筛选及海藻糖对其镉积累和品质的影响

为完善镉(Cd)污染农田“油蔬两用”油菜安全生产栽培调控技术,本试验以22个甘蓝型“油蔬两用”油菜品种为材料,采用盆栽试验,根据Cd积累量和地上部干质量差异,筛选Cd低积累油菜品种。并进一步研究外源海藻糖喷施时期(苗期、薹期、苗期+薹期)和浓度(10、20、40、80 mmol·L^(-1))对Cd低积累品种油菜生长发育、薹Cd积累及品质的影响。结果表明:Cd胁迫下22个油菜品种各部位Cd积累量和地上部干质量差异显著,其中安农油1号(ANY-1)和同油杂2号(TYZ-2)具有高生物量和低Cd积累的特性,较适宜油蔬两用种植。与对照(CK)相比,Cd处理导致油菜生长受阻,菜薹产量及品质下降。外源喷施10~40mmol·L^(-1)海藻糖可不同程度缓解Cd对油菜的毒害作用,降低菜薹Cd积累,提高菜薹产量和品质,其中苗期喷施20mmol·L^(-1)海藻糖为最佳喷施时期和浓度。苗期喷施20mmol·L^(-1)海藻糖缓解了2个油菜品种Cd毒害,叶绿素含量(SPAD)、地上部鲜质量、根鲜质量、根颈粗较不喷施海藻糖处理相比分别显著提高了13.4%~16.1%、59.1%~63.3%、42.1%~103.6%和30.6%~37.8%,菜薹Cd含量显著降低了61.5%~70.6%,菜薹产量、可溶性蛋白含量和可溶性糖含量分别提高了28.4%~34.5%、41.9%~46.0%和62.6%~76.1%。综上所述,Cd污染土壤种植菜薹Cd低积累油菜品种ANY-1和TYZ-2,结合苗期喷施20mmol·L^(-1)海藻糖,可有效降低菜薹Cd积累,保障菜薹食用安全,提高菜薹产量和品质。

外源施用6-磷酸海藻糖生物制剂对甘薯营养品质和产量的影响

6-磷酸海藻糖(T6P)是调控植物生长发育的重要信号分子,外源施用T6P能够提高小麦、菜豆等作物的产量和淀粉含量,但在甘薯上的应用效果尚无报道。以徐紫薯8号为供试材料,设置不同T6P制剂浓度梯度(80、400 mg/L)和施用方式(叶面喷施和灌根),系统地探究了外源施用T6P制剂对甘薯光合特性、营养品质和产量的影响。结果表明,与对照相比,叶面喷施和灌根T6P制剂均能够提高甘薯叶片叶绿素相对含量和净光合速率,并促进地上部生物量的积累。相比于灌根处理,叶面喷施对甘薯块根营养品质的提升效果显著。在低浓度和高浓度叶施条件下,收获薯块中的可溶性总糖、淀粉、花青素、干物质含量分别比对照提高了26.29%~31.55%、14.00%~16.07%、63.85%~64.62%、12.36%~14.45%,徐紫薯8号产量提高了27.51%~36.06%。不同叶施浓度间薯块营养品质和产量不存在显著差异。验证试验结果显示,普薯32号和心香2个品种在低浓度叶施处理下分别增产21.27%和34.33%。综合考虑,低浓度叶面喷施T6P制剂对甘薯增产提质具有一定的应用价值。

杨树桑黄6-磷酸海藻糖合成酶基因克隆鉴定与表达分析

对杨树桑黄(Sanghuangporus vaninii)6-磷酸海藻糖合成酶基因(SvTPS)进行克隆和生物信息学分析,并进行原核表达;采用荧光定量PCR方法研究SvTPS在杨树桑黄菌丝体和不同年份子实体中的表达情况,测定菌丝体和不同年份子实体中SvTPS活性。结果表明:SvTPS DNA序列长度为1894 bp,编码576个氨基酸。SvTPS相对分子质量为65130,等电点为6.21,脂肪系数为88.14,平均亲水系数为-0.281,不稳定系数为42.41。SvTPS氨基酸序列与暴马桑黄(S.baumii)的相似性最高,仅有一个TPS单结构域;SvTPS二级结构中α-螺旋、β-折叠、延伸链、无规卷曲占比分别为48.61%、5.56%、15.62%、30.21%。三年生子实体SvTPS的表达量最高,菌丝体的表达量最低。菌丝体的SvTPS活性最低;随着栽培时间增加,SvTPS活性增加,三年生子实体的最高。研究结果为进一步探讨SvTPS在杨树桑黄生长发育过程中的功能提供参考。

大豆海藻糖-6-磷酸磷酸酶基因GmTPP的鉴定及其在生长发育和非生物胁迫响应中的表达分析

海藻糖在植物代谢、生长发育和抗逆性中起着重要作用。海藻糖-6-磷酸磷酸酶(TPP)基因对海藻糖的生物合成至关重要。大豆是重要豆类作物,种子含有丰富的蛋白质和油脂,其TPP基因家族少有报道。为分析TPP基因在大豆中的结构和功能,利用生物信息学方法在大豆全基因组中筛选得到15个GmTPP基因。系统发育分析表明,这15个GmTPP可分为3个亚家族,每个GmTPP含有9~11个内含子,同一亚家族的GmTPP基因的内含子数目相同。顺式作用元件分析表明,GmTPP基因参与植物激素和环境胁迫反应。此外,还利用转录组数据研究这些GmTPP在不同组织中的表达模式以及对不同的非生物胁迫的表达特征。结果显示,GmTPP在大豆各个组织器官中均有特定的表达模式,在盐胁迫、干旱胁迫处理下表达不同。该研究不仅为揭示GmTPP基因家族在大豆海藻糖调控中的作用奠定了基础,也为利用TPP基因家族提高大豆抗逆性提供一定的参考价值。

海藻糖对高温胁迫龙须菜的生理及基因表达的影响

为了探讨海藻糖在大型藻类抗逆中的作用及其机制,实验利用生理生化分析、高效液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)、荧光定量PCR(qRT-PCR)方法分析了外源海藻糖对高温胁迫下大型海藻龙须菜生长、抗逆相关物质和酶活性、植物激素及相关基因表达的影响。结果发现,外源添加10 mmol/L海藻糖使龙须菜的相对生长速率和脯氨酸含量分别升高0.34倍(3 d)和0.30倍(24 h),叶绿素荧光参数、超氧化物歧化酶和海藻糖-6-磷酸合成酶活性升高,但丙二醛含量和脂氧合酶(LOX)活性降低。同时,海藻糖激活了龙须菜中水杨酸代谢关键酶——异分支酸合成酶的活性及其基因表达,促进了水杨酸的积累(2.05倍)。此外,海藻糖可以使热激蛋白70基因表达稳定升高、lox2基因表达下调(12 h)。可见,外源海藻糖可以通过清除活性氧自由基,降低膜脂过氧化,促进渗透保护物质和抗逆植物激素水杨酸的积累等来促进高温下龙须菜的生长。本研究证明了海藻糖在龙须菜抗高温胁迫中具有重要作用,为龙须菜的抗逆育种工作提供了参考。

海藻糖激活核因子E2相关因子2改善缺氧复氧诱导的H9C2心肌细胞损伤的研究

目的通过建立氧糖剥夺-缺氧复氧(oxygen-glucose deprivation/reoxygenation,OGD/R)损伤模型模拟心肌缺血再灌注损伤,探讨海藻糖对OGD/R大鼠H9C2心肌细胞损伤的影响及其作用机制。方法H9C2细胞分为对照组、OGD/R组、海藻糖组(OGD/R+海藻糖)、联合组(OGD/R+海藻糖+ML385)。四甲基偶氮唑盐法检测细胞增殖能力,并通过检测乳酸脱氢酶及Hoechst/丙啶碘化物染色检测细胞膜受损情况。Western blot检测核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)及其下游相关蛋白表达;活性氧、线粒体膜电位检测氧化应激水平;Western blot检测凋亡相关蛋白表达。结果与对照组比较,OGD/R组细胞活力明显降低。与OGD/R组比较,不同浓度海藻糖干预能显著提升细胞活力,与海藻糖浓度呈正相关(P<0.01);与OGD/R组比较,海藻糖组线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,MMP)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)、Nrf2、血红素加氧酶1和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸醌氧化还原酶1、Bcl-2、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(cysteinyl aspartate specific proteinase-3,Caspase-3)表达明显增高,活性氧、丙二醛、应答元素结合蛋白1、Bax、Bax/Bcl-2、裂解型Caspase-3表达明显降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。与海藻糖组比较,联合组活性氧、丙二醛及肿瘤坏死因子α、白细胞介素(interleukin,IL)1βmRNA、IL-6 mRNA表达明显增高,MMP、GSH水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);联合组Bax、Bax/Bcl-2、裂解型Caspase-3表达明显高于海藻糖组(1.77±0.08 vs 1.20±0.20,3.41±1.45 vs 0.99±0.15,4.10±1.05 vs 1.79±0.52,P<0.01),Bcl-2、Caspase-3表达明显低于海藻糖组(0.58±0.21 vs 1.23±0.25,0.87±0.25 vs 1.45±0.31,P<0.01)。结论海藻糖可以被视为一种Nrf2激活剂,通过激活Nrf2抑制氧化应激和凋亡,改善OGD/R诱导的心肌细胞损伤。

海藻糖药理作用研究进展

海藻糖(trehalose)是一种天然存在的二糖类物质,其以多种形式广泛存在于自然界中。由于海藻糖在细胞保护、应激耐受等方面的特殊作用,其研究及应用前景备受关注。本文总结了近年来对海藻糖药理作用及其作用机制研究的进展,以期为海藻糖的临床应用提供理论线索。

海藻糖基麦芽五糖及其微球的体外消化和酵解

为研究包埋前后的海藻糖基麦芽五糖(N-G7)在模拟消化液及体外酵解过程中的变化,采用口腔、胃部及小肠的体外消化模型分析消化前后溶液中N-G7的质量和N-G7微球(ALGCa)中的糖组成变化,应用体外发酵技术评价N-G7微球的发酵行为,检测不同时间点的pH值、菌体浓度(OD600)、产气量、短链脂肪酸(SCFA)浓度等指标的变化,并探究其对人体肠道微生物构成的影响。结果表明:N-G7在口腔消化2 min后在强酸性的胃部环境中几乎不被水解,在小肠中N-G7的水解率达到了82.70%。采用不同质量分数(1%、2%、3%)的海藻酸钙对其进行包埋,形成的微球保留80%以上的N-G7到达结肠。在体外酵解中,各实验组的pH随时间延长逐渐降低,OD600随时间延长逐渐增加。质量分数2%的ALG-Ca组产气量和碳源消耗率在0~6 h内达到最低,而后逐渐增加,证明包埋后的N-G7发酵体系属于缓慢发酵。与对照相比,质量分数2%的ALG-Ca组产生大量SCFA,肠道菌群组成发生变化,更有利于益生菌的生长。

海藻糖与芽胞杆菌A2混用增强黄瓜抗缺水胁迫和抗枯萎病能力

通过盆栽实验,研究海藻糖和芽胞菌A2混用对黄瓜抗旱能力及其对枯萎病的协同防病促生作用,为黄瓜枯萎病的防控提供依据。将海藻糖(T20)、芽胞菌(A2)、海藻糖和芽胞菌混和物(A2-T20)与灭菌基质拌匀,使海藻糖和芽胞菌A2在基质中的终浓度分别为20mmol·kg^(-1)基质和1×10^(7) CFU·kg^(-1)基质,每处理3重复,每重复8株黄瓜苗。缺失胁迫实验结果表明:缺水胁迫10d时,正常浇水组中芽胞菌A2处理与CK的黄瓜苗生长状况无明显差异,但海藻糖T20处理抑制黄瓜生长。缺水组中清水对照处理黄瓜苗出现萎蔫,其它处理生长状态较好,其中芽胞菌A2处理的黄瓜株高、叶面积、根鲜重和地上部鲜重显著高于CK;芽胞菌A2和A2-T20处理的根活力比清水处理CK分别增加了13.03μg·0.5g^(-1)·3h^(-1)和31.73μg·0.5g^(-1)·3h^(-1)(P<0.05)。盆栽防病实验结果表明,A2-T20处理对黄瓜枯萎病的平均防效达到43.18%。上述结果表明,芽胞菌A2可帮助黄瓜抵御缺水胁迫,与海藻糖混和使用的抗旱和防病效果进一步提高,为生产中黄瓜枯萎病的防控提供实用技术。

海藻糖对猪睾丸组织冷冻保存效果的影响

为探讨添加不同浓度海藻糖对猪睾丸组织冷冻保存效果的影响,将猪睾丸组织分为7个处理组,分别为未冷冻的新鲜对照组、未添加海藻糖的冷冻Control组以及分别添加50、100、200、400和800 mmol/L不同浓度海藻糖的试验组,对冷冻-解冻后的睾丸组织的细胞活率、组织结构形态、细胞凋亡率及活性氧含量等指标进行检测。结果表明:与新鲜组比较,冷冻过程会造成睾丸细胞活率显著下降(P<0.05),细胞内活性氧含量显著上升(P<0.05),组织形态结构被严重破坏(P<0.05)、细胞凋亡率显著增加(P<0.05)。与未添加海藻糖的冷冻Control组相比,200 mmol/L海藻糖对冷冻-解冻后睾丸组织细胞活率、细胞凋亡及活性氧含量均有显著改善(P<0.05)。100 mmol/L海藻糖组冷冻-解冻后睾丸组织的形态结构、细胞凋亡及活性氧含量与200 mmol/L海藻糖组相比无显著性差异(P>0.05)。此外,800 mmol/L海藻糖组的细胞凋亡率显著高于其他组(P<0.05),细胞活率显著低于其他组(P<0.05)。综上所述,不同浓度海藻糖对猪睾丸组织冻存效果有显著影响,其中200 mmol/L为最适添加量。

热激-修复与海藻糖联合处理对植物乳植杆菌LIP-1冷冻干燥存活率的影响

以植物乳植杆菌LIP-1为研究对象,探究热激-修复与保护剂中添加海藻糖联合处理对菌株冷冻干燥抗性及常温贮藏稳定性的影响。结果表明:与未进行热激-修复处理的空白组(59.92%)和只进行热激-修复处理的对照组(70.23%)相比,经热激-修复与4 g/100 mL海藻糖联合处理的实验组菌株冷冻干燥存活率(81.65%)显著升高(P<0.05),探究其原因发现,实验组菌株细胞壁与细胞膜损伤程度与对照组相比显著降低,保护剂中添加海藻糖可使细胞膜不饱和脂肪酸占比维持在较高水平,减少细胞膜损伤,显著增强菌株的冷冻干燥抗性;同时,菌株在常温贮藏期间的稳定性也得到提高,第8周贮藏期结束时,实验组菌株存活率为51.66%,显著高于空白组(12.09%)和对照组(43.79%)(P<0.05),且实验组菌株胞内荧光强度(1969.23±37.22)显著低于空白组(3475.21±106.56)和对照组(2843.95±52.12)(P<0.05)。综上,热激-修复与保护剂中添加4 g/100 mL海藻糖联合处理可以提高菌株冷冻干燥抗性及常温贮藏稳定性。

超声辅助热处理联合海藻糖和谷氨酰胺转氨酶对未漂洗鱼糜凝胶特性的影响

研究海藻糖、谷氨酰胺转氨酶(glutamine transaminase,TGase)与超声波技术联用对热致未漂洗鱼糜凝胶品质的影响。首先对凝胶特性、持水性等凝胶特性指标进行测定,再对其构象及作用的变化进行分析。结果表明:在超声辅助处理的同时,添加质量分数4.5%海藻糖和/或质量分数0.05%TGase使鱼糜凝胶强度提升35.11%~169.25%,其中海藻糖抑制了蛋白质结构的展开,而TGase则表现出相反的作用;但实际上超声辅助处理抑制了TGase的催化作用,使凝胶强度降低至4737.23 g·mm,游离水相对含量降低19.52%,抑制了蛋白质过度交联;此外,超声处理促进了海藻糖保护作用下的蛋白质展开,当海藻糖与TGase同时存在时,各自对蛋白质结构的影响均被削弱。

海藻糖对樱桃番茄果实品质的影响

文章以樱桃番茄为主要原料,研究质量浓度为1 g/L的海藻糖对樱桃番茄的保鲜效果。在常温下测定樱桃番茄的腐烂指数、质量损失率、硬度、pH值、总可溶性固形物(total soluble solids,TSS)、可滴定酸(titratable acid,TA)、维生素C(Vc)、番茄红素、还原糖以及可溶性蛋白质等指标。结果表明,采用1 g/L的海藻糖处理樱桃番茄后,显著抑制了果实腐烂指数和质量损失率的上升,延缓了可滴定酸质量浓度、维生素C和可溶性蛋白质质量比的下降。因此,海藻糖处理樱桃番茄后抑制了果实的腐烂,显著提高了果实的贮藏品质,延长了其保质期。

高温胁迫下二斑叶螨体内海藻糖、山梨醇、丙二醛和蛋白质含量的应激变化

旨在明确二斑叶螨响应极端高温胁迫的生理机制。设置38℃、42℃、46℃和50℃4个温度梯度,2 h、4 h和6 h 3个胁迫时间,测定高温胁迫后其体内海藻糖、山梨醇、丙二醛和蛋白质含量的变化。结果表明,相同温度下,随着处理时间的延长,二斑叶螨雌成螨体内海藻糖含量升高,山梨醇(除38℃和42℃)、丙二醛(除38℃)和蛋白质(除38℃)含量降低;处理时间相同时,随着处理温度的升高,二斑叶螨雌成螨体内海藻糖、山梨醇、MDA和蛋白质含量呈现先增后减的趋势。其中,二斑叶螨雌成螨体内海藻糖含量最高为16.2873 mg/g±0.7162 mg/g,是对照的2.66倍;山梨醇含量最高为20.1677 mg/g±0.3741 mg/g,是对照的2.07倍;MDA含量最高为0.7823 nmol/mg±0.075 nmol/mg,是对照的1.76倍;蛋白质含量最高为0.5509 mg/g±0.0147 mg/g,是对照的1.18倍。说明二斑叶螨可通过调整体内海藻糖、山梨醇、MDA和蛋白质含量来应对高温胁迫。

茶树海藻糖-6-磷酸合成酶(TPS)基因家族鉴定与表达分析

【目的】海藻糖-6-磷酸合成酶(trehalose-6-phosphate synthase,TPS)是植物体内海藻糖生物合成通路中的关键酶。对茶树[Camellia sinensis(L.)O.Kuntze]TPS基因家族进行鉴定和分析,并研究其在逆境胁迫下的表达模式,为开展TPS基因功能验证提供基础。【方法】利用生物信息学方法鉴定茶树CsTPS基因家族成员,分析其编码的蛋白理化特性、保守基序与结构域、染色体定位、系统进化关系和启动子顺式作用元件等生物学信息,利用转录组数据结合RT-qPCR技术分析CsTPS家族成员在干旱、盐和低温胁迫下的表达模式。【结果】在茶树基因组中鉴定到16个TPS基因家族成员,系统发育分析将它们划分为Class I和Class II两个亚族。同一亚族成员具有相似的motif组成和基因结构。共线性与进化分析表明,CsTPS基因在茶树基因组内发生了基因复制事件,且它们在进化过程中经历了纯化选择作用。RT-qPCR结果显示,6个候选基因CsTPS3、CsTPS5、CsTPS6、CsTPS9、CsTPS11和CsTPS14均被PEG、NaCl和低温胁迫诱导,且表达模式与转录组结果一致。【结论】从茶树全基因组中系统鉴定出16个TPS家族成员。茶树CsTPS3、CsTPS5、CsTPS6、CsTPS9、CsTPS11和CsTPS14基因对干旱、盐和低温胁迫均有响应,但其敏感性水平各不相同。