半夏提取物对淡色库蚊幼虫的杀虫活性

通过不同萃取相(石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇和水)提取半夏(Pinellia ternata)的活性物质,采用浸液法测定半夏提取物对淡色库蚊(Culex pipiens pallens)幼虫的杀虫活性。结果表明,半夏甲醇提取物对淡色库蚊幼虫具有显著的毒杀活性;在0.5 mg·mL^(-1)浓度处理下,石油醚、氯仿萃取相对淡色库蚊幼虫具有显著的杀虫活性,致死率在50%以上。对石油醚、氯仿萃取相进行室内毒力测定,LC50分别为0.21和0.31 mg·mL^(-1)。研究结果可为新型植物源农药综合利用提供参考。

蒙山地区地椒精油对淡色库蚊的生物活性及其成分分析

目的探究蒙山地区地椒精油对淡色库蚊幼虫和成蚊的生物活性并对其成分进行分析,为植物源杀虫剂的研制提供理论依据。方法用挥发油提取器提取地椒精油,采用幼虫浸渍法测定地椒精油对淡色库蚊4龄幼虫的杀灭活性,采用密闭三角瓶熏蒸法测定对成蚊的熏蒸活性,通过气相色谱-质谱法(GC-MS)分析地椒精油的化学成分。采用SPSS 25.0软件分析,计算半数致死浓度(LC50)、击倒中时(KT50)、毒力回归方程及95%置信限并进行卡方检验。结果幼虫杀灭活性测定显示地椒精油对淡色库蚊4龄幼虫的24 h LC50值为104.74μg/mL(χ^(2)=0.787,P=0.853);雌性成蚊熏蒸活性的KT_(50)值为20.73 min,差异有统计学意义。地椒精油中共检测出50种化合物,其中γ-松油烯的相对含量最高(12.18%),其次是左旋龙脑(8.56%)、3,4,5-三甲基甲苯(7.39%)和麝香草酚(6.04%)。结论蒙山地区地椒精油对淡色库蚊幼虫和成蚊均具有一定的杀虫活性,有望作为潜在的杀虫剂。

不同植物精油对淡色库蚊生物活性的筛选及成分分析

目的筛选对淡色库蚊幼虫和成蚊均有较高生物活性的植物精油,获得对淡色库蚊有生物活性的精油成分。方法采用药液浸养法测定19种植物精油对淡色库蚊幼虫的毒杀活性;选取幼虫毒杀活性实验中24 h死亡率超过50.00%的精油,采用密闭三角瓶熏蒸法测定其对雌性成蚊的熏蒸活性;选择对幼虫和成蚊均有较高活性的精油,通过气相色谱-质谱联用技术(chromatography-mass spectrometry,GC-MS)分析其成分。结果大葱与马樱丹精油对淡色库蚊Ⅲ龄幼虫活性较好,在80μg/mL浓度下,蚊幼虫24 h平均死亡率高达100.00%;香附、檀香、肉桂和雪松精油活性次之,蚊幼虫24 h死亡率分别为91.67%、91.67%、88.33%、83.33%。选择上述6种精油开展成蚊熏蒸实验,结果大葱、雪松和香附精油的熏蒸活性较好,击倒中时(median knockdown time,KT50)值分别为5.31、8.60和9.49 min。选择对幼虫和成蚊均有较高活性的大葱、香附和雪松精油进行GC-MS成分分析,结果显示,大葱、香附和雪松精油中分别鉴定出32、62和48种成分,涉及烃类、醇、醛、胺、酮、酸、酚、酯等多种化合物。结论大葱、雪松和香附精油对淡色库蚊幼虫和成蚊均有较强的生物活性,在媒介蚊虫的防治中有潜在的应用价值。

紫苏精油纳米乳液对非成虫期淡色库蚊杀灭活性的初步探讨

目的探讨紫苏精油及紫苏精油纳米乳液对淡色库蚊Culex pipiens pallens幼虫、蛹的毒性活性,为开发安全有效的植物源杀蚊剂提供科学依据。方法测定紫苏精油和纳米乳液对淡色库蚊幼虫和蛹的杀灭活性、持效性以及对非靶标生物的毒性。结果紫苏精油对一龄、二龄、三龄幼虫LC_(50)分别为25.4、43.0、46.6 mg/L;紫苏精油纳米乳液对一龄、二龄、三龄幼虫的LC_(50)分别为<25.0、35.1、38.1 mg/L。在幼虫的各阶段中,同等浓度下,纳米乳液的杀灭活性明显强于纯精油;在蛹期,同一浓度下,24、48 h精油组死亡率分别为1.3%、2.0%,而精油纳米乳组分别为34.7%、40%。在高浓度下,精油杀蚊幼活性仅维持1~2 d,而纳米乳液的杀灭活性可延长至5 d;精油和纳米乳对于常见水生植物是无毒的;对于水中的鱼类,纳米乳包裹精油后毒性大幅度降低。结论与紫苏精油纯液相比,纳米乳液制剂更加稳定,对淡色库蚊幼虫、蛹的杀灭活性增高,对非靶标生物毒性减弱。紫苏精油纳米乳液有望作为一种绿色、可持续、有效的杀蚊剂,应用于现场非成虫期蚊媒控制。

豆科植物乙醇提取物对雌性淡色库蚊的趋避效果

为开发新型的植物源蚊虫驱避剂,于2021年在江西农业大学校园内,采用实验室自制的昆虫趋避实验装置测试国槐、紫荆、黄花决明、肥皂荚、紫藤、龙爪槐、鄂羊蹄甲、合欢、美丽胡枝子、小槐花等10种豆科植物乙醇提取物对淡色库蚊雌蚊成虫的趋避活性。结果表明:10种豆科植物中紫藤、紫荆、黄花决明、肥皂荚4种植物提取物对淡色库蚊雌蚊具有较好驱避作用,其中紫藤对淡色库蚊成虫的驱避效果最好(趋避率为78.66%),其次是紫荆(趋避率为70.95%);而合欢、小槐花、美丽胡枝子这3种豆科植物提取物对淡色库蚊雌蚊成虫具有引诱作用,以美丽胡枝子的引诱效果最强(趋避率为-55.67%)。综合结果表明,紫藤、紫荆提取物对淡色库蚊具有较好驱避作用,具有开发成为驱蚊剂的潜力;而美丽胡枝子提取物对淡色库蚊具有较好引诱效果,具有开发成为蚊虫引诱剂的潜力。

2023年山东省微山湖流域淡色库蚊抗药性调查

目的掌握山东省微山湖流域优势蚊种对5种常用卫生杀虫剂的抗药性水平,为合理有效的蚊幼虫防制提供科学指导。方法2023年5—10月在微山湖流域设立监测点:任城区、鱼台县、微山县、滕州市、邹城市,采用勺捕法采集淡色库蚊幼虫。采用幼虫浸渍法,测定淡色库蚊3龄末4龄初幼虫死亡数。结果2023年微山湖流域各地区孳生淡色库蚊幼虫对高效氯氰菊酯、溴氰菊酯、敌敌畏、残杀威等化学杀虫剂的抗性倍数均大于166,对高效氯氰菊酯和溴氰菊酯的抗性倍数最高,均处于高抗水平。对敌敌畏和残杀威处于中抗或低抗水平,对Bt处于低抗或敏感水平。结论2023年微山湖流域优势蚊种已对常用卫生化学杀虫剂均产生了不同程度的抗药性。在灭蚊工作中,要注重环境整治和杀虫剂的科学合理使用。

冬青油与肉桂油对淡色库蚊的生物活性

为进一步明确冬青油(wintergreen oil)与肉桂油(cinnamon oil)对蚊虫的生物活性,本研究采用浸液法、"Y"型嗅觉仪法和密闭三角瓶熏蒸法,分别测定了两种精油对淡色库蚊Culex pipiens pallens幼虫的毒杀作用以及对成虫的驱避和熏杀活性。结果显示:肉桂油和冬青油对淡色库蚊幼虫均具有较强的毒杀作用,处理24 h的LC50分别为71.87 mg/L和102.83 mg/L。在0.5μL的供试剂量下,冬青油与肉桂油在20 min内对淡色库蚊的驱避率均在80%以上,显示了较好的驱蚊活性。冬青油对淡色库蚊具有明显的熏蒸击倒作用,12μL/L浓度下的KT50为3.97min;而肉桂油则具有较好的熏蒸致死活性,熏蒸5 h的LC50为0.31μL/L。冬青油与肉桂油按1∶1体积比混配后对淡色库蚊表现出较好的击倒和致死效果。冬青油和肉桂油既对淡色库蚊幼虫具有较强的毒杀作用,又对淡色库蚊雌成虫表现出较好的驱避和熏杀活性,具有开发成为植物源蚊虫防控剂的潜力。

41种植物精油对淡色库蚊的熏蒸活性

为发现具有较高杀蚊活性的精油,推动植物精油类卫生杀虫剂的创制,本研究采用三角瓶熏蒸法测定了17科41种植物精油对淡色库蚊Culex pipiens pallens雌成蚊的熏蒸活性,并进一步采用密闭圆筒法验证其杀虫毒力大小。三角瓶熏蒸法测定表明,在12μL/L浓度下,留兰香油(spearmint oil)、薰衣草油(lavender oil)、山苍子油(Litsea cubeba oil)等26种精油均有较强的熏蒸作用,KT50小于15 min。该26种精油用密闭圆筒熏蒸法进一步测定表明,在浓度为10μL/L时,冬青油(wintergreen oil)、艾叶油(blumea oil)、薄荷油(peppermint oil)、桉叶油(Eucalyptus robusta oil)和蓝桉油(E.globulus oil)等植物精油熏蒸活性较强,其KT50分别为16.91,21.20,22.57,18.43和19.48 min。结果证明冬青油、艾叶油、薄荷油、桉叶油和蓝桉油等5种精油对淡色库蚊具有较强的熏蒸活性,具备作为淡色库蚊防控剂开发的潜力,值得进一步研究。

14种菊科植物提取物对松材线虫和淡色库蚊的光活化毒杀作用

以甲醇作溶剂,采用超声波提取法对14种菊科植物进行粗提,并采用浓度稀释法、结合紫外光光照处理,测定这些提取物对松材线虫和淡色库蚊的光活化毒性。研究结果表明,大部分提取物具有光活化活性,其中鲤肠、万寿菊活性最高,表现出明显的光活化毒性;500μg/mL鲤肠提取物处理对淡色库蚊的光照活性比非光照活性高48.96倍,以1 000μg/mL的浓度处理24 h可100%杀死供试的松材线虫;微甘菊、白花蒲公英、鱼眼草提取物也对松材线虫表现出光活化效应,光照处理的死亡率明显比非光照处理高。

淡色库蚊细胞色素P450抗性相关基因克隆与初步鉴定

[目的 ]探讨淡色库蚊细胞色素P45 0与溴氰菊酯抗药性的关系。 [方法 ]采用一对昆虫细胞色素P45 0简并引物 ,以反转录 聚合酶链反应从淡色库蚊扩增特异片段 ,T/A直接克隆法筛选阳性克隆 ,对新序列进行cDNA芯片和逆Northern分析。 [结果 ]从淡色库蚊对溴氰菊酯敏感品系和抗性品系获得 112个阳性克隆 ,其中 2 4个阳性克隆测序后显示为细胞色素P45 0新序列 ,由GenBank登录上网 ;经国际细胞色素P45 0命名委员会鉴定分别属CYP4家族CYP4C、CYP4D、CYP4H和CYP4J等 4个亚家族 ;2 4个CYP4cDNA片段中 ,来自敏感品系的 2个片段(NYDS3和NYDS5 )和来自抗性品系的 4个片段 (NYDR6、NYDR9、NYDR15和NYDR17)在两品系间存在差别 ,cDNA芯片信号亮度值均是抗性品系大于敏感品系 ,倍数在 3 .1～ 9.7范围内 ;NYDR17仅与抗性探针杂交 ;逆Northern再鉴定 ,获得了与cDNA芯片一致的结果。 [结论 ]淡色库蚊CYP4与溴氰菊酯抗性相关 ;在淡色库蚊溴氰菊酯抗性机理中 ,可能存在P45 0基因点突变而导致的特异表达。

淡色库蚊对常用杀虫剂的抗性现状及治理对策

目的调查江苏省淡色库蚊对常用杀虫剂的抗性现状,提出蚊虫抗药性治理对策。方法在江苏省徐州、连云港和无锡3市郊区采集淡色库蚊幼虫,采用WHO生物测试法进行测定。结果江苏省淡色库蚊对氯菊酯和生物丙烯菊酯敏感;对敌敌畏抗性系数是29.42~205.55,属于高度抗性;对溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、残杀威和双硫磷产生不同程度的抗药性。结论应加强对淡色库蚊抗药性监测,科学合理使用杀虫剂,预防或延缓抗药性产生。

山东省淡色库蚊抗药性及现场治理方法的研究

目的 为延缓蚊虫抗性的发生和发展 ,更好地选用卫生杀虫剂 ,控制卫生害虫 ,测定了山东省部分地区淡色库蚊对常用杀虫剂混用的敏感性。方法 采用WHO生物测试法 ,计算LC50 、回归方程、增效系数。结果 氯氰菊酯 +残杀威、氯氰菊酯 +DDVP复配共毒系数分别在 12 5 .78～ 3 95 .2 1之间、12 7.3 7～ 3 64 .5 0之间 ,显示出较好的增效作用。DDVP +残杀威复配效果较差。结论 当淡色库蚊产生抗药性后 ,采用有机磷或氨基甲酸酯类杀虫剂与拟除虫菊酯类混用的方法 ,能取得较好效果。

淡色库蚊酯酶等位基因及其在自然种群中的频率分布

酯酶基因扩增所产生的酯酶活性升高是库蚊 Ｃｕｌｅｘ ｐｉｐｉｅｎｓ 对有机磷杀虫剂抗性的主要机理之一。采用分子杂交技术和限制性酶切片段长度多态性 （ Ｒ Ｆ Ｌ Ｐ） 分析， 已鉴定出多种酯酶等位基因类型。该文通过酯酶基因特异性片段的 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增及扩增片段的酶切片段分析， 对淡色库蚊 Ｃｕｌｅｘ ｐｉｐｉｅｎｓ ｐａｌｌｅｎｓ 四种有机磷抗性品系的酯酶等位基因进行分型， 并测定分析自然种群中不同酶型的频率分布。研究结果表明： Ｐ Ｃ Ｒ 分型方法具有快速、准确的特点。不同的有机磷杀虫剂对酯酶等位基因具有明显的选择作用。双硫磷品系为 Ｂ１ 型； 毒死蜱和敌百虫品系为 Ｂ２ 型； 马拉硫磷品系为 Ｂ１ 型和 Ｂ１／ Ｂ２ 杂合型。不同地区采集的种群表现出不同的酶型频率分布。

淡色库蚊对溴氰菊酯抗药性和敏感性相关基因克隆和序列分析

目的 获取淡色库蚊对溴氰菊酯抗药性和敏感性相关基因。 方法 通过正、反向抑制性差减杂交获取对溴氰菊酯抗药性和敏感性淡色库蚊的差异表达基因 ,并以基因芯片和逆 Northern对所获基因进行杂交鉴定。 结果 正、反向抑制性差减杂交各获得 5 2 3和 2 86个克隆 ,经芯片鉴定后在抗性品系高表达的基因分别有15 5个 (2～ 3倍 )和 42个 (3倍以上 ) ,在敏感品系中高表达的基因分别有 15个 (2～ 3倍 )和 9个 (3倍以上 )。对 3倍以上差异表达和特异表达基因进行单向测序 ,根据最高同源性比对结果 ,线粒体 r RNA基因、6 0 S核糖体蛋白基因、40 S核糖体蛋白 S4基因、胰蛋白酶前体基因、糜蛋白酶 A前体基因、视蛋白基因等在抗性品系中高表达 ;而 40 S核糖体蛋白 S2 9基因和肌球蛋白调控轻链 2在敏感品系中高表达 ;另外 ,1,4- α-葡聚糖分支酶和核糖体蛋白 46基因在抗性品系中特异表达。 结论 所获得的 13个差异表达基因和

淡色库蚊幼虫对四种杀虫剂的抗药性调查

目的 了解淡色库蚊对4种常用杀虫剂的抗药性情况,为科学使用杀虫剂提供依据。方法 采用WHO提供的幼虫浸液法,并与实验室敏感品系淡色库蚊测试结果比较。结果 除昆山品系淡色库蚊对溴氰菊酯较敏感外(R/S=1.29);南京、昆山两地区蚊虫对所测杀虫剂均产生不同程度抗药性。结论 在灭蚊工作中应采取综合性防治措施,科学合理使用杀虫剂。

江苏省淡色库蚊对常用杀虫剂的抗性研究

目的了解江苏省淡色库蚊对4种常用杀虫剂的抗性现状。方法区分剂量法。结果镇江、苏州、连云港3地农村敌敌畏抗性(24h死亡率分别为62.5%,51.7%,4.7%)和城区溴氰菊酯的抗性(24h死亡率分别为76.4%,24.2%,68.6%)均达中抗以上,无论是农村或城区,氯氰菊酯的抗性(24h死亡率分别为镇江96.4%,94.0%;苏州100%,72.9%;连云港79.2%,52.3%)均在中抗以下。结论镇江、苏州、连云港3地经过长期的化学防治,蚊虫对一些杀虫剂产生了明显的抗性。因此这些地区今后在进行蚊虫化学防治时应换用其他种类的杀虫剂。

淡色库蚊幼虫对7种杀虫剂的敏感性和抗性调查

目的为了解江苏省淡色库蚊幼虫对卫生杀虫剂的敏感性和抗药性发生发展状况进行生物学抗性调查。方法幼虫浸渍法。结果实验室淡色库蚊幼虫对溴氰菊酯、高效氯氰菊酯、氯菊酯、生物丙烯菊酯、敌敌畏、残杀威和双硫磷幼虫敏感性LC50分别为0.001 3、0.003 8、0.027 7、0.181 3、0.018 3、0.096 8、0.000 4 mg/L。南京、徐州、连云港和无锡等地蚊虫幼虫抗性分别是敏感品系的数倍到200倍不等。结论江苏省淡色库蚊幼虫对敌敌畏、双硫磷、溴氰菊酯、高效氯氰菊酯和残杀威等杀虫剂均产生不同程度的抗性。抗性调查的结果为指导江苏省蚊虫防治以及合理使用卫生杀虫剂提供科学依据。

淡色库蚊(Culexpipienspallens)与击倒抗性(kdr)相关的钠通道基因突变

本研究采用RT -PCR技术,使用简并引物分别从淡色库蚊(Culexpipienspallens)敏感品系和抗溴氰菊酯品系中扩增出钠通道ⅡS4～ⅡS6区域的基因片段,长度为35 9bp。该基因片段所编码的氨基酸与黑尾果蝇(Drosophilamelanogaster)、家蝇(Muscadomestica)、埃及伊蚊(Aedesaegypti)、冈比亚按蚊(Anophelesgambiae)及德国小蠊(Blattellagermanica)等昆虫相应区域的氨基酸序列具有较高的同源性,其同源性分别为95. 8% ,95. 0 % ,10 0 . 0 % ,98 .3%和95 . 0 %。经序列比对,确认抗溴氰菊酯品系淡色库蚊钠通道基因在10 14位点发生了突变:该位点的碱基“A”突变为“T”,其对应氨基酸由亮氨酸(L)变为苯丙氨酸(F) ,该突变(L10 14F型)在多种昆虫中较为常见。

淡色库蚊氯菊酯抗性相关基因PR-OP全长cDNA的克隆及生物信息学分析

【目的】克隆淡色库蚊氯菊酯抗性相关视蛋白基因,并进行生物信息学分析,为阐明视蛋白基因的抗性机制及研制新型卫生杀虫剂奠定基础。【方法】依据库蚊抗性与敏感品系差异表达的EST片段设计PCR引物,采用RACE技术克隆淡色库蚊氯菊酯抗性相关基因PR-OP全长cDNA序列,并对其生物信息学进行分析。【结果】获得了长度为1 402 bp的淡色库蚊氯菊酯抗性相关基因PR-OP全长cDNA,其编码383个氨基酸。生物信息学分析结果表明,该基因编码蛋白为具有7个跨膜螺旋的膜蛋白,其保守域与视紫红质家族的保守域一致,该蛋白还具有2个信号肽切割位点和18个磷酸化位点。系统进化分析表明,该基因与淡色库蚊溴氰菊酯抗性相关视蛋白基因及致倦库蚊、埃及伊蚊视紫红质基因氨基酸序列同源性在69%以上,与家蚕、烟草天蛾、柞蚕、柑橘凤蝶、中华蜜蜂、黑腹果蝇视蛋白的氨基酸序列同源性均在56%以上。【结论】克隆了淡色库蚊氯菊酯抗性相关视蛋白基因(GenBank登录号为FJ917744),推测其与氯菊酯抗性相关。

2007～2008年江苏省淡色库蚊和家蝇的抗性研究

目的了解江苏省蚊蝇对常用杀虫剂的抗药性情况,指导蚊蝇防治的科学用药。方法蚊虫抗药性检测采用幼虫浸渍法,家蝇采用点滴法。结果南京市家蝇对敌敌畏、溴氰菊酯、高效氯氰菊酯和残杀威的抗药性均相对较高,而淮安市均为最低;4种杀虫剂中,残杀威抗性均为最高,其次为敌敌畏,溴氰菊酯抗性均为最低。淡色库蚊对高效氯氰菊酯、溴氰菊酯和仲丁威的抗性在淮安市均为最高,对双硫磷抗性在苏州市为最高;4种杀虫剂中,仲丁威抗性均为最高,溴氰菊酯除在淮安高于双硫磷外,抗性均为最低。结论在蚊蝇防治时应避免使用抗性较高的残杀威、仲丁威和敌敌畏,优先考虑使用溴氰菊酯等拟除虫菊酯类杀虫剂。