烟草疫霉菌的培养及大量产生游动孢子囊和游动孢子方法的研究

烟草疫霉菌 (Phytophthoranicothianae)在燕麦培养基上生长良好 ,菌丝在滴加了土壤浸出液的皮氏培养液中 ,可在 3d内产生大量的游动孢子囊 ,游动孢子囊经低温处理后再培养 2

诱导大豆疫霉菌大量产生游动孢子囊的最佳方法研究

大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)是疫霉菌中难在培养条件下形成孢子囊的菌种之一。对诱发大豆疫霉菌产生游动孢子囊的10种方法进行比较研究,结果表明,供试的10种方法除了MSS溶液法外均能诱发产生游动孢子囊,其中以土壤浸出液法和皮氏液加土壤浸出液法效果最佳,产孢量大,所需的时间最短,游动孢子囊成熟度一致,且能一次性释放出游动孢子,从而成功地解决了大豆疫霉菌产生孢子囊难这一重要问题。

影响大豆疫霉菌(Phytophthora sojae)游动孢子产生的条件

间歇性地给菌丝块换水可以诱导菌丝产生孢子囊 ,进而释放游动孢子。挑取 5～ 8块直径为 8mm于利马豆或 V8汁平板上培养 4～ 8d的菌块 ,置于直径 7cm的培养皿内 ,加入蒸馏水正好没过菌块表面 ,每 30 min换水一次 ,换水 4次后加入 15 ml Petri培养液 ,2 5℃、黑暗条件下培养 18～ 2 0 h,可诱发菌块大量产孢。

辣椒疫霉游动孢子在不同基因型辣椒根表侵入活动的初步研究

辣椒疫病是为害辣椒的世界性、毁灭性病害。70年代以来,我国的新疆、甘肃、吉林、北京及江苏等地辣椒疫病逐年加重,造成的损失愈来愈大。以往,我国对辣椒疫病的研究主要在病原鉴定、发生规律及防治方面,对病原菌的侵入活动研究报道不多。1991～1993年,我们对辣椒疫霉游动孢子在不同基因型辣椒根表侵入活动进行了研究。 1 辣椒疫霉游动孢子在不同基因型辣椒根表侵入时间。

辣椒疫霉菌保存及游动孢子诱导技术研究

[目的]探索辣椒疫霉菌保存和游动孢子诱导技术。[方法]辣椒疫霉菌在5种不同培养基中,26℃暗培养3 d,再光照培养6 d后,将培养基平分6块,置于2个培养皿中,加入40 ml无菌水,一个计算孢子囊数,另一个于16℃光照0.5 h后,计算游动孢子数。[结果]辣椒疫霉菌在5种培养基中的菌落形态差异明显,生长速度关系是OMA>CMA>CA>PSA>BA,产生孢子囊数量最多的培养基是BA和PSA,最少的为OMA;释放游动孢子量在CMA上最多,BA、PSA、CA和OMA上无显著差异;该菌在试管斜面中,于16℃下可以保存9个月。[结论]诱导辣椒疫霉菌游动孢子的最佳方法是:将该菌在CMA培养基上,于26℃暗培养3 d,再持续光照培养6 d后,加无菌水置16℃光照0.5 h;最佳的保存温度是16℃;游动孢子的浓度与孢子囊的浓度没有正相关性。

大豆疫霉根腐病菌单游动孢子的毒性遗传与变异

采用离体叶柄伤口接种法测定大豆疫霉根腐病菌 4 4号生理小种单游动孢子连续 3代或 4代分离后代的毒性 ,结果表明 :从S1中选择与亲本相比毒性不发生变异的 1号单游动孢子菌株 (4 4号生理小种 )和变异最大的 30号单游动孢子菌株 (1号生理小种 )继续分离 2代或 3代 ,单游动孢子毒性变异趋势主要是从 4 4号生理小种变异为 3号生理小种 ,也有变异成毒性公式为 7或1a ,7的单游动孢子。大豆疫霉根腐病菌无性世代毒性变异几率很高 ,多数单游动孢子毒性在分离后代中都发生变异 ,产生不同的小种或毒性公式 。

建立掘氏疫霉单游动孢子无性系方法的研究

建立单游动孢子无性系是研究疫霉菌遗传学的重要试验手段。采用常规的实验室诱发掘氏疫霉孢子囊和游动孢子的方法,其单游动孢子发育为有效菌株的比率较低(一般低于50％)。作者经过多次比较试验,对诱导产生孢子囊的方法和单孢分离的方法进行改进,使有效菌株率提高到80％以上,每小时可分离60-80个单游动孢子。

荔枝霜疫霉游动孢子及卵孢子生物学特性研究

为了更深入理解荔枝霜疫霉在果园内侵染流行规律．利用植物病理学方法．通过离体培养研究了环境因素对荔枝霜疫霉游动孢子释放、萌发及卵孢子萌发的影响。结果表明，在荔枝果肉培养基中，孢子囊萌发的温度等于或小于孢子囊形成的温度时．孢子囊主要以释放游动孢子的方式萌发．28℃是荔枝霜疫霉孢子囊释放游动孢子的临界温度。荔枝霜疫霉在荔枝果肉培养基中，于26℃下培养7d后，游动孢子释放最适温度范围为12～20℃，最适pH值为5～7；游动孢子萌发的最适温度为20～24℃，最适pH值为7-9；孢子囊在水滴中才释放游动孢子．游动孢子在水滴中方可萌发。荔枝霜疫霉在荔枝果皮和叶片煎汁培养基中均可产生卵孢子。当温度为28℃，pH值为5，12h光暗交替光照时，卵孢子的萌发率最高，可达到49．68％；温度是影响孢子囊萌发和萌发方式的主要因素．水是游动孢子释放和萌发的必要条件。卵孢子广泛存在于果园中，为翌年初侵染源：荔枝霜疫霉主要以游动孢子再次侵染寄主．

马铃薯和洋葱水溶性成分对致病疫霉游动孢子萌发和附着胞形成的影响

马铃薯和洋葱水溶性成分对致病疫霉游动孢子萌发和附着胞形成的影响收稿日期：１９９５０７２５蒋继志１，郑小波１，陆家云１，道家纪志２（１南京农业大学植物病原生物研究所，南京２１００９５；２日本国名古屋大学农学部）ＥＦＦＥＣＴＳＯＦＷＡＴＥ...

棉铃疫病菌孢子囊产生及游动孢子悬液稀释的方法

本文报道棉铃疫病菌即苎麻疫霉菌(Phytophthora boehmeriae)孢子囊的离体生产及游动孢子悬液的稀释方法。将疫病菌菌饼置于马铃薯葡萄糖培养液(PDL)或菜豆葡萄糖培养液(BDL)中,24C条件下暗培养48—72小时,然后将菌丝块在20-22℃条件下用矿质盐溶液(MSS)更换漂洗(4次)培养10-12小时并辅以光照(日光灯);最后除去MSS,继续光照培养12小时即可得到大量孢子囊。黑暗条件可抑制孢子囊的形成而促进卵孢子的产生。培养液采用BDL优于PDL,除了产孢量更高外,突出的特点表现在菌丝块的颜色变化与产孢同步,菌丝块由淡橙色转变为紫色,指示孢子大量产生。Tris-琥珀酸盐缓冲液(Tris-Succinate Buffer,TSB,pH6.8.5.0mmol/L)是效果很好的定量稀释液,可维持游动孢子较高的运动活性。

烟草疫霉菌游动孢子接种剑麻方法研究

为更准确鉴定剑麻对斑马纹病的抗病性,以不同的培养方法对剑麻斑马纹病病原菌-烟草疫霉菌产孢的效果进行了比较,并研究了游动孢子接种剑麻斑马纹病的方法。试验结果表明:菌丝块-水培法产生孢子囊及游动孢子,速度最快,数量最多,且方法简单,是最佳的培养方法;刺伤-棉花保湿法接种剑麻叶片,操作简单方便,接种成功率高,是利用游动孢子接种剑麻斑马纹病的最好方法。

葡萄叶提取物对葡萄生单轴霉菌游动孢子释放、萌发和游动性的影响

为了研究不同品种及叶龄的葡萄叶提取物对葡萄生单轴霉菌游动孢子的影响,选用3个葡萄品种,制备其新叶、老叶的乙醇提取物,测定不同提取物对葡萄生单轴霉菌游动孢子释放、萌发和游动性的影响。结果表明,不同品种的葡萄叶提取物对霜霉病菌的游动孢子均有明显的抑制作用,并且新老叶之间差异较小;抗病品种巨峰叶片提取物在浓度为5 mg/m L时对游动孢子释放、萌发的抑制率都能达90%,并能使游动孢子失去游动性;感病品种红乳叶片提取物在浓度为10 mg/m L以上时才能达到上述效果;感病品种美人指叶片提取物在浓度为5 mg/m L时对游动孢子萌发的抑制率可达90%,在浓度为10 mg/m L时才对游动孢子的释放、游动性具有强烈的抑制作用。由结果可知,抗病品种的葡萄叶提取物的抑制效果要好于感病品种,而同一品种的新叶和老叶之间差异基本不显著。

恶疫霉有性杂交后代在土壤中的生长和游动孢子萌发研究

将恶疫霉突变株及其有性杂交后代的菌丝块 ( 2mm× 2mm)和游动孢子接种于灭菌土或自然土中 ,对它们的生长状况和游动孢子萌发率进行研究。结果显示 ,接种于灭菌土中的 7株杂交个体中 ,有 2株杂交个体的生长速率较快 ,其菌落半径分别为 8.0mm和 7.2mm( 3d) ,显著大于两亲本的菌落半径 (亲本AP1 4M-1 -52菌落半径为 3 .0mm ,另一亲本PK9Cn -2 -2 4生长较弱 ,不形成明显的菌落 ) ,其它杂交个体生长较弱 ,不形成明显的菌落 ;选择 3株杂交个体的游动孢子接种于灭菌土中 ,其中有两株杂交个体的游动孢子萌发率 (分别为 77.3 %和 71 .3 % )介于两亲本 (分别为 85.0 %和 67.7% )之间 ,但无显著性差异 (P =0 .0 5) ;另一杂交个体游动孢子萌发率 ( 59.7% )显著低于亲本AP1 4M -1 -52游动孢子萌发率 (P <0 .0 5)。而接种于自然土中的 7株杂交个体中 ,有 5株杂交个体长出少量菌丝和孢子囊 ,另 2株不生长 ;亲本菌株AP1 4M -1 -52有少量菌丝扩展和产生孢子囊 ,另一亲本菌株PK9Cn -2 -2 4无菌丝扩展 ;恶疫霉有性杂交个体及其亲本的游动孢子在自然中均不能萌发。结果表明恶疫霉有性杂交后代营养体和游动孢子在土壤中的生活能力与亲本相似。

大豆疫霉菌单游动孢子囊的分离方法

对大豆疫霉菌单游动孢子囊的分离及游动孢子的获得技术进行了研究,成功获得了大豆疫霉菌单游动孢子囊及游动孢子,明确了该技术在实施过程中的注意事项。

环境因素对胡椒瘟病菌游动孢子产量的影响

游动孢子是胡椒瘟病最主要的侵染源,其产量受环境条件影响,但是具体影响关系尚不明确。本研究利用胡椒瘟病菌孢子囊诱导技术,逐个分析光照、温度、湿度、pH等单一环境因素变化对胡椒瘟病菌游动孢子产量的影响。结果表明:光照强度在200~20000 lx时胡椒瘟病菌均可产孢,在5000 lx时产孢量最高(1.28×106个/mL),分别是2000和10000 lx的6.89倍和12.40倍;温度在20~30℃时,产孢量均能达到5.82×105个/mL以上,在25℃时产孢量最高;相对湿度在50%~99%时,产孢量均能达到2.27×105个/mL以上,其中相对湿度较低的条件下(50%和65%)游动孢子产量显著高于其他湿度条件;环境pH在6.0~8.0时,产孢量较高,pH 7.0时最高。综上所述,4种环境因素均对胡椒瘟病菌游动孢子产量具有显著影响,最适宜产孢的环境条件为光照强度5000 lx、温度25℃、相对湿度65%、pH 7.0。本研究为后续致病相关研究及田间病害防控奠定基础。

蚊幼虫致病真菌──印度雕蚀菌游动孢子的生态因素观察

作者观察寄生于三带喙库蚊幼虫体内的印度雕蚀菌的生态因素。结果表明该菌游动孢子由成熟孢子囊中逸出及逸出后在水中的活力可受温度、水质等因素的影响。在３５℃、ｐＨ６．５～７．２的蚊幼虫孳生地水中，经１８ｈ，游动孢子的逸出率达１００％，在水中活力也强。低温、高温、水的清洁度、水中含氧量及光照等因素均可影响游动孢子的逸出。生理盐水可抑制游动孢子的活力及逸出。

禾谷多粘菌原质团和游动孢子囊的超微结构

本文描述了禾谷多粘菌原质团和游动孢子囊的超微结构。单核的原质团经分裂,形成多核原质团,进而发育成游动孢子囊,游动孢子囊中形成许多次生游动孢子。原质团和游动孢子囊中的次生游动孢子均含有细胞核、线粒体、高尔基体、内质网、液泡、具膜小管、脂质粒和核糖体等细胞器。成熟的游动孢子囊中还可见游离的鞭毛。

一种便捷高产的辣椒疫霉菌游动孢子产生方法

辣椒疫霉菌游动孢子的形成是辣椒疫病发生的前提,疫霉菌产孢条件的优化对辣椒疫病抗性育种具有重要意义。本试验对V8培养基的浓度、黑暗培养时间及无菌水处理等条件进行探索,以期获得辣椒疫霉菌游动孢子产生的最佳条件。结果表明:5%V8培养基最适合辣椒疫霉菌菌丝生长及产孢,产孢量可达100万个/m L,在光照试验中发现5 d黑暗处理时菌丝生长浓密且在光照条件下易于产孢。结果还发现,无菌水对产孢量有重要作用,黑暗处理后加入适量无菌水进行光照能够大大提高产孢量,最高产孢量可达750万个/m L。本试验简化了辣椒疫霉菌的培养,获得了游动孢子最佳产孢条件,为辣椒抗疫霉病研究奠定了基础。

致病疫霉游动孢子制备方法研究

为探索致病疫霉游动孢子的最佳制备条件,将致病疫霉分别培养7~12 d后向其中加入Petri’s溶液,收集孢子囊并统计其产量,之后收集不同培养时间的孢子囊,分别采用5种不同低温诱导组合方法(M1:10℃静置30 min后18℃静置30 min;M2:4℃静置30 min后10℃静置90 min;M3:4℃静置30 min后10℃静置60 min;M4:4℃静置3 h;M5:4℃静置2 h后18℃静置1 h)制备游动孢子,研究不同培养时间及不同制备方法对游动孢子产量的影响。结果表明,随着培养时间的延长,致病疫霉孢子囊产量先迅速增加,后增加速度放缓直至基本不再增加;用不同制备方法得到的游动孢子产量随着孢子囊培养日龄的增加均呈先升高后降低的趋势,用培养9 d收获的致病疫霉孢子囊制备游动孢子时游动孢子产量最高,且不同制备方法得到的游动孢子产量差异不显著。综上,如要快速大量制备致病疫霉游动孢子,可用培养9 d的致病疫霉孢子囊在10℃下静置30 min后再在18℃下静置30 min,如不考虑制备时间,可用培养9 d的致病疫霉孢子囊在4℃静置2 h后再在18℃静置1 h,可获得最大量游动孢子;孢子囊产量与游动孢子产量并不完全呈正相关。