游离药物浓度监测及其应用研究进展

血浆中游离药物浓度与受体部位药物平衡,因而其与药效或药物不良反应密切相关。在特定病理生理情况下,对游离药物进行监测(TDM)更有意义。本文介绍了常用的游离药物浓度监测的样品处理和检测方法,及其在抗癫痫药、心血管药物、免疫抑制剂、蛋白酶抑制剂等游离药物浓度监测的应用。

高效迎头分析法测定药物-人血清白蛋白混合液中游离药物浓度

用高效迎头分析法 (HPFA)测定了药物 人血清白蛋白 (HSA)混合液中游离药物的浓度。样品溶液不经任何处理直接进样到装有内表面反相固定相的色谱柱中 ,用 67mmol/L磷酸盐缓冲液 ( pH 7 4 ,I =0 17mol/L)作流动相。当进样体积足够大时 ,游离药物以平顶峰的形式被洗脱出来 ,平顶峰区域洗脱液中的药物浓度等于样品溶液中游离药物的浓度。收集平顶峰区域的洗脱液 ,然后将一定体积的洗脱液注入到反相色谱柱中 ,测定游离药物的浓度。用该法测定酮基布洛芬 HSA和头孢哌酮 HSA两种混合液中游离药物的浓度 ,并与超滤法进行了比较 ;考察了进样体积和流速对平顶峰形成的影响。结果表明 ,获得平顶峰所需的最小进样体积随药物不同而不同 ;流速对平顶峰的形成没有影响。高效迎头分析法与超滤法测得的游离药物浓度相同 。

游离药物浓度监测指导癫癎患者联合用药

目的指导癫癎患者合理用药。方法观察西安交通大学医学院第二附属医院2007～2010年服用丙戊酸(VPA)和卡马西平(CBZ)癫癎患者3 906例,其中抽取100例监测游离药物浓度。结果 VPA和CBZ联合用药相比单一用药时,VPA浓度在有效浓度范围内的比例由72.5%降低至54.8%,CBZ浓度在有效浓度范围内的比例由58.0%增加至84.3%。单用或联合用药时,在高浓度VPA和CBZ的蛋白结合率明显下降,游离浓度增加。结论 VPA和CBZ在联合用药时要根据血药浓度监测结果调整给药剂量,在高浓度时应监测游离药物浓度。

中空纤维离心超滤法研究乙醇对氨茶碱游离药物浓度的影响

目的探讨乙醇对氨茶碱游离药物浓度的影响。方法采用中空纤维离心超滤(HFCF-UF)前处理技术结合高效液相色谱(HPLC)法对氨茶碱游离药物浓度进行测定,并比较乙醇加入前后游离药物浓度的变化。结果加入乙醇后氨茶碱游离药物浓度增加,且血浆乙醇浓度与游离药物浓度呈线性相关关系。结论加入乙醇可能会影响血浆中的氨茶碱与血浆蛋白的结合,游离药物浓度增加,易出现毒副作用及毒性反应。

新剂型药物血浆中游离药物浓度研究方法概述

新剂型药物改善了血浆中游离药物浓度比率,从而降低毒性提高药效,因而检测血浆中游离药物浓度具有重要意义。新剂型药物游离浓度测定和药物血浆蛋白结合率测定有一定差别,主要在于新剂型药物引入的新的外源性蛋白(或其他影响药物游离率的辅料),存在血浆中蛋白特异性差异大、蛋白浓度变化大和游离药物浓度较低三方面问题。因而一般血浆蛋白结合率试验的方法不一定都适用于新剂型药物游离浓度测定。本文就常见的游离药物浓度测定方法(超速离心法、超滤法、平衡透析法和快速平衡透析法)及其优缺点和适用范围做一个概要介绍,为新剂型药物的研发提供帮助。

血浆蛋白含量与丙戊酸游离药物浓度的相关性

目的观察丙戊酸血浆总浓度、游离浓度与血浆蛋白含量的相关性。方法体外制备相同蛋白含量、不同丙戊酸浓度血浆与不同蛋白含量相同丙戊酸浓度血浆;同时,收集14例服用丙戊酸钠的癫痫患儿血浆,用Lowry法测定血浆蛋白含量;用超滤法分离血浆游离丙戊酸;用荧光偏振免疫法测定血浆中丙戊酸总浓度和游离浓度。结果丙戊酸血浆游离浓度及游离分数与血浆总浓度之间具有显著相关性(P<0.05),并与血浆蛋白含量显著相关(P<0.05)。结论丙戊酸钠治疗剂量根据患者血浆蛋白含量及血浆药物总浓度确定较合适。

游离药物测定在治疗药物监测中的意义

药物在治疗血浓度范围内的血浆蛋白结合率通常是较为恒定的，总浓度水平基本上可以反映游离药物浓度。近年发现有些药物的血药总浓度与游离药物水平不平行。此时，游离药物测定的临床价值明显优于总浓度测定。游离药物测定最常用的方法有平衡透析法和超滤法等，后者具有简便快捷的特点，且所需血样量极少，适合病人血样分析。临床上常进行游离药物测定的有某些抗癫痫药，抗抑郁药和心血管药物等。

毛细管电泳法快速测定大鼠血浆中丙吡胺游离药物和总药物浓度及血浆蛋白结合率

目的:建立一个全新、简单、快速的高效毛细管电泳方法,不需要对血浆样品进行任何前处理,血浆样品直接进样测定丙吡胺在大鼠血浆中的游离药物浓度和总药物浓度及血浆蛋白结合率。方法:采用40.2 cm未涂层石英毛细管(75μm×375μm,有效长度30 cm),分别以p H 7.4的20 mmol·L^(-1)磷酸盐缓冲溶液和含有50 mmol·L^(-1)三羟甲基氨基甲烷(Tris)的20 mmol·L^(-1)磷酸盐缓冲溶液作为缓冲体系,测定游离药物浓度和总药物浓度。采用3.447 k Pa压力直接进血浆样品5 s,分离电压15 k V,温度20℃,检测波长190 nm。结果:方法的专属性强,在线测定血浆中总药物浓度时,丙吡胺与蛋白的结合得到充分破坏并与血浆蛋白成分在5 min内达到基线分离,丙吡胺在血浆中总质量浓度分别在1.0~20.0μg·m L^(-1)和20.0~200.0μg·m L^(-1)的低、高浓度区间内呈现良好的线性关系,相关系数分别为0.999 2和0.997 7,回收率为93.8%~110.7%。在体外血浆生物样品中,当预温孵的丙吡胺质量浓度为100、50、25、12.5、10μg·m L^(-1)时,血浆蛋白结合率平均值为86.7%、86.3%、86.4%、78.3%、74.7%。在体内血浆生物样品中,丙吡胺血浆蛋白结合率平均值范围在39.3%~91.5%。测定结果表明丙吡胺与大鼠血浆蛋白的结合具有一强、一弱2个结合位点,结合常数分别为5.3×10~4 mol^(-1)·L和1.2×10~2 mol^(-1)·L。绘制了大鼠在给药后24 h体内丙吡胺游离和总药物浓度的药时曲线。结论:利用所建立的新方法,将含丙吡胺的血浆生物样品直接进样,高效、快速地测定了大鼠体内外血浆生物样品中丙吡胺的游离药物和总药物浓度。新建立的方法灵敏,高效快速,操作简单,耗样量少,价廉,有潜在的广泛的应用价值。

免疫抑制剂检测策略的研究进展

免疫抑制剂是一类能够抑制移植排斥反应,维持器官移植术后患者健康的药物。由于治疗窗口窄、毒副反应大,个体差异大等特点,免疫抑制剂已成为重要治疗药物监测项目。然而临床上面临药物浓度结果与药效相关性不佳、侵入性操作风险等问题,限制其发展。随着相关研究发展,越来越多新检测策略出现,如游离药物浓度、干血斑、唾液检测等,进一步推动免疫抑制剂检测向着准确、便捷、低风险的方向发展。该文总结了免疫抑制剂各类检测策略的研究进展,为临床选择提供参考。

抗菌药物游离浓度测定的研究进展

抗菌药物游离浓度受多种因素影响,如血浆白蛋白水平、药物相互作用、个体差异等;在特定病理生理情况下,测定抗菌药物游离浓度比总浓度更具有临床指导意义。测定游离药物浓度的方法有很多,超滤法因简单快速而最常用。临床已开展了一些测抗菌药物游离浓度的研究,其中伏立康唑、替考拉宁等研究较多,为测定游离浓度的相关研究提供了很好的示范作用。

CYP2C19基因多态性对侵袭性真菌感染患者伏立康唑游离型药物浓度的影响

目的:考察CYP2C19基因多态性对侵袭性真菌感染患者伏立康唑游离型药物浓度的影响。方法:收集三峡中心医院使用伏立康唑进行治疗的患者的血液标本,进行CYP2C19基因型检测和伏立康唑游离型药物浓度测定,分析CYP2C19基因3种亚型对伏立康唑游离型药物浓度的影响。结果:78例患者的伏立康唑平均游离型药物浓度为(2.33±1.09)mg·mL^(-1),3组CYP2C19基因亚型患者伏立康唑游离型药物浓度有显著差异(P<0.01),组间多重比较显示,3组CYP2C19基因亚型患者伏立康唑游离型浓度为EM型<IM型<PM型。结论:CYP2C19基因型多态性对伏立康唑游离型药物浓度有显著影响。

高效液相色谱法测定人血浆中游离安妥沙星浓度研究

目的建立高效液相色谱法测定人血浆中游离安妥沙星浓度的方法。方法用超离心法进行样品处理,色谱柱为Alltima C18柱(150 mm×4.6mm,5μm),柱温为室温,流动相为乙腈-0.05 mol·L^(-1)磷酸盐缓冲液(p H3.0)=13∶87,流速为1.0 m L·min^(-1),波长为293 nm,进行专属性、标准曲线与定量下限、精密度与回收率、稳定性考察。结果游离安妥沙星在0.08~5.49μg·m L^(-1)呈现良好线性关系,日内和日间精密度相对标准偏差(RSD)2.78%~10.03%,回收率为92.09%~108.96%。结论本方法快速,精密,准确测定游离安妥沙星,可用于受试者给药后安妥沙星的测定。

有限采样法估算中国肾移植患者游离霉酚酸体内暴露量及其对药物相关不良反应的预测价值

目的:采用有限采样法(limited sampling strategy,LSS)估算中国肾移植术受者体内总霉酚酸(total mycophenolic acid,tMPA)和游离霉酚酸(free mycophenolic acid,fMPA)的AUC_(0-12 h),并探究其对MPA相关不良反应的预测意义。方法:纳入2019年4月至2020年1月中山大学附属第一医院收治的30例服用霉酚酸酯治疗的肾移植术后患者,随访至少3个月。采用高效液相色谱串联质谱法检测tMPA和fMPA浓度,非房室分析计算临床药动学参数,以多元逐步线性回归法建立LSS模型,受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线分析tMPA及fMPA药动学参数与药物不良反应间的相关性。结果:四点预测模型适用于tMPA和fMPA暴露量的估算,其中给药后1,2,5,9 h处MPA血药浓度对tMPA和fMPA暴露量的预测准确性较高,R^(2)分别为0.936和0.931。相比于tMPA-AUC_(0-12 h),fMPA-AUC_(0-12 h)与MPA相关不良反应的相关性更为显著,发生不良反应的患者fMPA-AUC_(0-12 h)水平显著高于正常患者(P=0.043),ROC曲线显示fMPA-AUC_(0-12 h)预测MPA相关不良反应发生的临界值为0.405μg·h·mL^(-1)。结论:基于LSS的肾移植术后患者tMPA和fMPA体内暴露量估算方法可简化临床采样过程,提高患者依从性。fMPA-AUC_(0-12 h)水平与MPA相关不良反应显著相关,对fMPA进行浓度监测能够提高MPA用药安全性。

超滤法结合高效液相色谱法测定达托霉素对厄他培南血浆蛋白结合率的影响

目的考察达托霉素对厄他培南血浆蛋白结合率的影响。方法采用超滤法结合HPLC法,测定在健康人血浆及模拟人低蛋白血浆中,未加和加入不同浓度达托霉素后厄他培南游离药物浓度的变化。色谱柱:Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-10 mmol·L^-1醋酸钠溶液(8∶92,v/v);流速:1.0 mL·min^-1;柱温:30℃;检测波长:295 nm;进样量:10μL。结果厄他培南游离浓度在1~50μg·m L^-1与峰面积线性关系良好(r=0.9999),回收率均大于95%,日内、日间精密度RSD均小于5%。在健康人血浆中,未加及加入10、100μg·mL-1达托霉素后,厄他培南的血浆蛋白结合率分别为(95.96±0.04)%、(94.87±0.29)%、(93.81±0.10)%。在模拟人低蛋白血浆中,未加及加入10、100μg·mL^-1达托霉素后,厄他培南的血浆蛋白结合率分别为(89.28±0.46)%、(88.76±0.51)%和(87.45±0.50)%。结论厄他培南在低蛋白血浆中的蛋白结合率明显低于健康人血浆中的蛋白结合率(P<0.05)。在这两种血浆中,高浓度达托霉素可使厄他培南血浆蛋白结合率显著降低(P<0.05)。因此临床在合用厄他培南和达托霉素,尤其是蛋白浓度较低,应注意厄他培南血浆蛋白结合率的变化。

超滤-高效液相色谱法研究米卡芬净对头孢曲松血浆蛋白结合率的影响

目的建立HPLC法测定人血浆中头孢曲松的游离浓度,并考察米卡芬净对头孢曲松血浆蛋白结合率的影响。方法采用超滤法处理样品,色谱柱:Diamonsil C18(150 mm×4.6 mm,5μm);流动相:乙腈-0.03 mol·L^(-1)磷酸二氢钾溶液(12∶88,V/V,三乙胺调pH 7.5);流速:1.0 mL·min^(-1);柱温:30℃;检测波长:254 nm;进样量:10μL。结果头孢曲松游离质量浓度在0.5~100μg·mL^(-1)与峰面积线性关系良好(r=0.9999),回收率均大于95%,日内、日间精密度RSD均小于3%。在健康人血浆中,头孢曲松血浆质量浓度为100、300、500μg·mL^(-1)时的血浆蛋白结合率分别为(92.24±0.14)%、(74.42±1.00)%、(53.75±2.31)%,米卡芬净对头孢曲松血浆蛋白结合率无明显影响(P>0.05)。结论本方法可用于头孢曲松游离浓度的测定,方法快速准确、灵敏度高。

孩子用药选择剂型很重要

药物剂型可以根据给药途径分为口服制剂、吸入制剂、外用制剂、注射剂等，相对于成人而言，剂型因素对儿童用药安全影响更大。如新生儿的相对体表面积比成人大，而且皮肤角化层薄，外用药时皮肤吸收快而多，可能导致全身性不良反应；又如婴幼儿脂肪含量较成人低，脂溶性药物不能充分与之结合，可能导致血浆中游离药物浓度增加，进而引发不良反应等。

给孩子用药选剂型很重要

说到用药安全，很多人可能会马上想到药物本身的副作用，其实还有很多其他因素影响到用药安全，药物剂型就是其中之一。药物剂型可以根据给药途径分为口服制剂、吸入制剂、外用制剂、注射剂等。相较于成人而言，剂型因素对儿童用药安全影响更大。这是因为儿童的生理构造及用药体内过程和成人不同造成的。如新生儿的相对体表面积比成人大，而且皮肤角化层薄，皮肤外部用药时吸收快而多，可能导致全身性不良反应；又如婴幼儿脂肪含量较成人低，脂溶性药物不能充分与之结合，可能导致血浆中游离药物浓度增加，进而引发不良反应等。

用中空纤维离心超滤法联合HPLC-MS/MS测定人血浆中游离型氯氮平的浓度

目的建立一种测定人血浆中游离型氯氮平浓度的HPLC-MS/MS方法,并应用于临床治疗药物监测。方法以氘代氯氮平为内标,用中空纤维离心超滤法对血浆样品进行预处理。色谱柱为Waters Acquity BEN C18(2.1 mm×50.0 mm,1.7μm),流动相为0.1%甲酸水-0.1%甲酸甲醇,梯度洗脱,流速为0.5 mL·min^-1,柱温为50℃,进样量为2μL;用电喷雾离子源正离子模式将样品离子化,多反应监测模式下对氯氮平和内标进行测定。考察该方法的专属性、线性范围与定量下限、精密度与回收率、稳定性。结果氯氮平在1~500 ng·mL^-1内,线性关系良好,线性方程为y=1.30×10^-2x+1.93×10^-2(r=0.998 6),低、中、高浓度的平均回收率为92.21%~95.89%,日内、日间RSD均小于15%。结论本方法简便易行、专属性好、准确度高,可用于临床人血浆中监测游离型氯氮平的浓度。

第三章 体内药学特性评价指南

1药代动力学 资料来源：药品说明书、注册资料、企业申报材料、FDA／SFDA等政府网站等。 1．1关注药物蛋白结合率与分布特性。对蛋白结合率90％以上的药物，注意其蛋白结合与置换、导致游离药物浓度升高的相互作用。