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HLA-G基因敲除人滋养层干细胞模型构建
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作者 王思东 程延飞 +4 位作者 曹丹丹 崔馨元 庄白妹 张博伦 姚元庆 《生殖医学杂志》 CAS 2023年第8期1216-1222,共7页
目的构建人白细胞抗原G(HLA-G)基因敲除的人滋养层干细胞(TSC)模型,初步探究HLA-G对TSC向绒毛外滋养层细胞(EVT)分化的影响。方法利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除人TSC的HLA-G基因,将TSC向EVT细胞分化,采用免疫荧光染色及实时定量聚合... 目的构建人白细胞抗原G(HLA-G)基因敲除的人滋养层干细胞(TSC)模型,初步探究HLA-G对TSC向绒毛外滋养层细胞(EVT)分化的影响。方法利用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除人TSC的HLA-G基因,将TSC向EVT细胞分化,采用免疫荧光染色及实时定量聚合酶链式反应(qPCR)方法观察HLA-G基因敲除对其标志基因表达的影响。结果经测序、免疫荧光染色及蛋白质印记法(WB)验证,成功获得了HLA-G基因完全敲除的人TSC细胞系。HLA-G^(-/-)-TSC可诱导分化为EVT样细胞,HLA-G^(-/-)-EVT的标志基因表达量与野生型相比无显著性差异(P>0.05)。结论本研究成功构建了稳定的HLA-G基因敲除人TSC模型,且HLA-G并不明显影响EVT的分化过程。 展开更多
关键词 人白细胞抗原G 滋养层干细胞 绒毛外滋养细胞 CRISPR/Cas9
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滋养层干细胞研究进展
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作者 张居作 徐君飞 薛立群 《动物医学进展》 北大核心 2015年第8期74-77,共4页
滋养层干细胞对胚胎附植、胚胎存活和胎盘发育起关键作用,是研究胎盘发育和功能的理想体外模型。目前,国内外对滋养层干细胞的研究处于方兴末艾之势,已经建立了以鼠为代表的小动物滋养层干细胞培养体系,对人的滋养层干细胞分离培养也取... 滋养层干细胞对胚胎附植、胚胎存活和胎盘发育起关键作用,是研究胎盘发育和功能的理想体外模型。目前,国内外对滋养层干细胞的研究处于方兴末艾之势,已经建立了以鼠为代表的小动物滋养层干细胞培养体系,对人的滋养层干细胞分离培养也取得一些进展。但对猪、牛、羊等大动物滋养层干细胞的研究进展还非常缓慢,至今仍未能获得理想的模型,其分化方向、培养体系、标记基因的选择等都还存在不确定性,严重阻碍了后续研究的开展。 展开更多
关键词 滋养层干细胞 培养体系 标记基因
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猪滋养层干细胞样细胞的分离培养 被引量:2
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作者 宋志强 刘畅 +4 位作者 冯冲 龙川 赵勤丽 刘忠华 潘登科 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第5期156-160,共5页
滋养层干细胞(TSc)是形成胎盘组织细胞的前体细胞,与胚胎着床和胎盘形成密切相关。体外分离滋养层干细胞为研究滋养层的发育与功能提供了研究工具和基础。滋养层干细胞已经成功从小鼠附植前囊胚中获得,在猪上也有相关报道,但并没有关于6... 滋养层干细胞(TSc)是形成胎盘组织细胞的前体细胞,与胚胎着床和胎盘形成密切相关。体外分离滋养层干细胞为研究滋养层的发育与功能提供了研究工具和基础。滋养层干细胞已经成功从小鼠附植前囊胚中获得,在猪上也有相关报道,但并没有关于6d囊胚中分离到猪滋养层干细胞(pTSc)的报道。本试验通过对6d孤雌囊胚透明带进行划口处理,饲养层和基础培养液中附加碱性成纤维生长因子(bFGF)和人白血病抑制因子(hLIF)分离猪滋养层干细胞样细胞。同时,通过采用形态学和基因表达分析的方法对获得的猪滋养层干细胞样细胞进行了初步鉴定。结果显示,本试验分离得到的细胞呈现上皮样细胞形态,细胞间结合紧密,边缘光滑,核质比较大,RT-PCR结果显示表达滋养层干细胞标记基因Cdx2,体现了滋养层干细胞特征。结果表明,本试验成功在6d孤雌囊胚分离得到猪滋养层干细胞样细胞,为后续研究猪滋养层发育提供了试验基础。 展开更多
关键词 滋养层干细胞 体外囊胚 分离培养
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雌激素受体α抑制剂MPP在小鼠囊胚形成和滋养层干细胞中影响YAP核定位 被引量:1
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作者 许颂华 朱灵华 +5 位作者 刘玥 王晓江 钟玉环 苏杨 许丽旋 王世鄂 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2019年第1期6-13,共8页
目的研究雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)抑制剂甲基-哌啶-吡唑(methyl-piperidino-pyrazole,MPP)在小鼠桑葚胚和滋养层干细胞(trophoblast stem cells,TSCs)中对YAP的影响。方法收集昆明(kunming,KM)小鼠8-细胞胚,置于0μmol/L... 目的研究雌激素受体α(estrogen receptorα,ERα)抑制剂甲基-哌啶-吡唑(methyl-piperidino-pyrazole,MPP)在小鼠桑葚胚和滋养层干细胞(trophoblast stem cells,TSCs)中对YAP的影响。方法收集昆明(kunming,KM)小鼠8-细胞胚,置于0μmol/L(对照组)和5μmol/L(实验组)MPP中培养,分别于8h、12h和24h后收集各组桑葚胚,采用免疫荧光技术观察YAP表达,采用Real Time-PCR检测MPP处理24h后Yap mRNA表达变化;将小鼠TSCs置于0μmol/L、2.5μmol/L、5μmol/L和10μmol/L MPP中培养,48h后观察细胞形态改变,分别检测Sox2、YAP、Cdx2 mRNA和蛋白表达水平。结果小鼠8-细胞胚经MPP处理24h后,桑葚胚YAP蛋白核定位水平降低,Yap mRNA水平无显著改变;经MPP处理48h后,5μmol/L组小鼠TSCs细胞出现细胞团块,10μmol/L组细胞增殖明显受抑制;与对照组相比,5μmol/L组细胞Sox2 mRNA表达水平升高,Yap和Cdx2 mRNA水平无显著改变,团块状细胞中的YAP蛋白失去明显的核内定位,SOX2和CDX2阳性细胞的表达更加密集。结论 ERα在小鼠桑葚胚和TSCs中调控YAP核定位,其在TSCs细胞中的作用与CDX2和SOX2的表达有关。 展开更多
关键词 雌激素受体Α 桑葚胚 滋养层干细胞 YAP
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牛滋养层干细胞样细胞系的建立
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作者 田宇婧 鲁文赓 +3 位作者 张彧 林皓 倪和民 郭勇 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第26期20-24,共5页
为了成功建立牛滋养层干细胞样细胞系,探讨牛滋养层干细胞样细胞(Bovine Trophoblastic Stem-like Cells)体外培养条件及相关影响因素,以胎牛子宫成纤维细胞条件培养液作为培养基,胶原铺被培养皿,利用体外受精牛囊胚培养得到牛滋养层干... 为了成功建立牛滋养层干细胞样细胞系,探讨牛滋养层干细胞样细胞(Bovine Trophoblastic Stem-like Cells)体外培养条件及相关影响因素,以胎牛子宫成纤维细胞条件培养液作为培养基,胶原铺被培养皿,利用体外受精牛囊胚培养得到牛滋养层干细胞样细胞,并调整培养体系,以探讨其最适生长条件。结果表明:利用添加FBS、β-巯基乙醇、肝素以及胎牛子宫成纤维细胞条件培养液的DMEM/F12,体外培养牛囊胚,可以初步建立牛滋养层干细胞样细胞系。 展开更多
关键词 滋养层干细胞 体外培养囊胚
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四倍体滋养层干细胞的分离培养与鉴定
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作者 王海豫 肖翼 黄粤 《基础医学与临床》 2021年第7期975-981,共7页
目的建立可在体外培养的小鼠四倍体滋养层干细胞(TTSCs)系,为研究胎盘发育提供新的细胞模型。方法用电融合的方法获得四倍体胚胎并进行体外培养,挑取克隆并传代后获得细胞系。通过中期染色体计数检测染色体数目;RT-qPCR、Western blot... 目的建立可在体外培养的小鼠四倍体滋养层干细胞(TTSCs)系,为研究胎盘发育提供新的细胞模型。方法用电融合的方法获得四倍体胚胎并进行体外培养,挑取克隆并传代后获得细胞系。通过中期染色体计数检测染色体数目;RT-qPCR、Western blot、免疫荧光检测标志基因表达;显微注射检测细胞的体内发育潜能。结果建立了可以传代培养并且可在体内发育的TTSCs。分化条件下,TTSCs分化基因的表达量与二倍体滋养层干细胞(TSCs)存在差异(P<0.001)。结论可传代的TTSCs系可以在体外建立,但其维持自我更新及分化的机制与二倍体TSCs有所不同。 展开更多
关键词 四倍体 滋养层干细胞 胚胎发育 胎盘发育 分化
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过表达Msx2促进小鼠胚胎干细胞向滋养层干细胞命运转变
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作者 姚春萌 王晴 帅领 《南开大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期34-38,共5页
第一次细胞命运决定中相同的卵裂球逐渐分化形成内细胞团(inner cell mass,ICM)和滋养外胚层(trophectoderm,TE)两个不同的谱系,这一过程的正确进行是小鼠胚胎正常发育的必要条件.然而小鼠的ICM与TE尽管最初来源于相同的卵裂球,却有着... 第一次细胞命运决定中相同的卵裂球逐渐分化形成内细胞团(inner cell mass,ICM)和滋养外胚层(trophectoderm,TE)两个不同的谱系,这一过程的正确进行是小鼠胚胎正常发育的必要条件.然而小鼠的ICM与TE尽管最初来源于相同的卵裂球,却有着不可逾越的屏障,自然情况下ICM与TE两个谱系之间不能相互转变.在小鼠胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESCs)中利用piggyBac(PB)转座子系统过表达基因Msx2,并将Msx2过表达的小鼠ESCs培养在滋养层干细胞(trophoblast stem cells,TSCs)的条件培养基中进行诱导,可以使小鼠ESCs转变为TSCs,这一结果为研究第一次细胞命运决定的潜在机制提供了理论依据. 展开更多
关键词 胚胎干细胞 滋养层干细胞 Msx2 PIGGYBAC
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常见组蛋白修饰调控滋养层细胞谱系分化的研究进展
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作者 郑丽彬 李珣 +1 位作者 毛晗馨 曹彬 《中华生殖与避孕杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期205-211,共7页
胎盘是决定妊娠建立及维持胎儿正常生长发育的重要器官,其介导了母胎间的复杂对话。滋养层细胞是执行胎盘功能的一类重要细胞类型,在胎盘发育过程中,滋养层干细胞可分化为多种滋养层细胞亚型,从而维持胎盘的结构和功能。组蛋白修饰可通... 胎盘是决定妊娠建立及维持胎儿正常生长发育的重要器官,其介导了母胎间的复杂对话。滋养层细胞是执行胎盘功能的一类重要细胞类型,在胎盘发育过程中,滋养层干细胞可分化为多种滋养层细胞亚型,从而维持胎盘的结构和功能。组蛋白修饰可通过调控染色质的结构及基因转录参与滋养层细胞谱系的建立和维持。本文系统性总结了重要组蛋白甲基化及乙酰化修饰调控滋养层干细胞分化及胎盘发育的复杂作用及机制。 展开更多
关键词 胎盘 组蛋白修饰 滋养层干细胞
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干细胞巢的主要细胞成分及其组合模型 被引量:3
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作者 张建新 《临床医学进展》 2018年第8期694-701,共8页
经络是人体中定向干细胞、成体干细胞、多能干细胞和胚胎干细胞等活动交流、协同进化的巨系统,主要表现为干细胞巢的出现以及不同种类干细胞巢的有序分布。人体成体干细胞有7 ±215;4 ±215;2 ±215;8 ±215;7 = 3136... 经络是人体中定向干细胞、成体干细胞、多能干细胞和胚胎干细胞等活动交流、协同进化的巨系统,主要表现为干细胞巢的出现以及不同种类干细胞巢的有序分布。人体成体干细胞有7 ±215;4 ±215;2 ±215;8 ±215;7 = 3136种:7为7个层次,4为4大基本组织(结缔组织、肌肉组织、神经组织和上皮组织),2为左右两侧对称,8为8类细胞,7为从低等级到高等级金字塔式累积叠加的7个进化等级。构建干细胞巢的主要细胞是多种类型的定向干细胞,也常被称为过渡倍增细胞等,其来源及其构建干细胞巢时的组合方式是有规律可循的,亲本干细胞的干细胞巢特定结构一般能够遗传出现在子代干细胞的干细胞巢中。在干细胞与其干细胞巢的互作体系中,干细胞巢的区域性特征决定了干细胞的特异性功能特征,引进地质学中的板块概念主要反映干细胞巢基本稳定不变的静态成分,同一板块内多能干细胞C1448及其成体干细胞C1448n(2 ≤ n ≤ 7)的干细胞巢主要细胞成分及其组合模型(6 + 3 + 1)是完全相同的,这决定了多能干细胞C1448与其所辖第一等级乃至第n等级成体干细胞C1448n拥有高度相同相似的干细胞巢结构。 展开更多
关键词 干细胞分化 干细胞巢分布 经络学说 外遗传 干细胞巢模型 板块学说 癌症干细胞 滋养层干细胞
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国际舞台上中国干细胞研究专家2010年1~2月的学术成果
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《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第23期4330-4331,共2页
干细胞研究是当今生物医学研究最热门的领域,20世纪初就有科学家提出了"干细胞"这个概念,直到今日,干细胞可以自我更新,通过细胞分裂产生的两个子细胞中至少有一个仍是干细胞,同时在特定的条件下可以分化成不同类型的功能细胞... 干细胞研究是当今生物医学研究最热门的领域,20世纪初就有科学家提出了"干细胞"这个概念,直到今日,干细胞可以自我更新,通过细胞分裂产生的两个子细胞中至少有一个仍是干细胞,同时在特定的条件下可以分化成不同类型的功能细胞,与之相关的一个衡量标准是可以形成有功能的器官或整个个体,在这公认的定义中,尚没有揭开的谜底还有很多很多。 展开更多
关键词 胚胎干细胞 内胚层 滋养层干细胞 骨髓间充质干细胞
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胎盘体外模型的研究进展 被引量:1
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作者 刘佳乐 漆洪波 +1 位作者 张华 陈昶 《现代妇产科进展》 北大核心 2023年第9期701-704,共4页
胎盘是妊娠期间维持胎儿生命的重要过渡性器官,其发育和功能障碍是早产、先兆子痫、宫内生长受限等妊娠并发症的原因。了解胎盘的发育和功能对于阐明相关疾病的发病机制具有重要意义。然而,由于伦理和早期的技术限制,对于胎盘的研究并... 胎盘是妊娠期间维持胎儿生命的重要过渡性器官,其发育和功能障碍是早产、先兆子痫、宫内生长受限等妊娠并发症的原因。了解胎盘的发育和功能对于阐明相关疾病的发病机制具有重要意义。然而,由于伦理和早期的技术限制,对于胎盘的研究并不充分。近年来,研究人员探索出体外人胎盘小叶灌注模型、胎盘芯片以及滋养层干细胞和类器官培养模型,用于模拟胎盘、研究胎盘的发育和功能。本文简述了胎盘的生理结构和上述三种体外胎盘研究模型的进展,以及它们用于胎盘研究的进展和存在的挑战。 展开更多
关键词 胎盘 体外模型 灌注模型 器官芯片 滋养层干细胞 类器官
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体外建立灵长类动物滋养层细胞系的研究进展
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作者 常晓青 姜良霞 +1 位作者 张朴尧 谭韬 《昆明理工大学学报(自然科学版)》 北大核心 2022年第3期106-116,共11页
滋养层(Trophoblast)是构成胎盘的主要细胞类型,但调节灵长类动物滋养层细胞特别是滋养层干细胞(Trophoblast Stem Cell,TSC)发育的分子机制的研究因为材料来源和伦理的限制,目前知之甚少.因此,建立灵长类动物滋养层细胞模型对胎盘发育... 滋养层(Trophoblast)是构成胎盘的主要细胞类型,但调节灵长类动物滋养层细胞特别是滋养层干细胞(Trophoblast Stem Cell,TSC)发育的分子机制的研究因为材料来源和伦理的限制,目前知之甚少.因此,建立灵长类动物滋养层细胞模型对胎盘发育以及胎盘相关疾病的研究极为重要,目前已经建立了多种不同的灵长类滋养层细胞系模型.本文分别从:组织来源的灵长类滋养层细胞、灵长类胚胎干细胞诱导的滋养层细胞、灵长类胚胎直接来源的滋养层干细胞以及从体细胞中重编程得到的滋养层干细胞4种不同来源的滋养层细胞进行综述,回顾并探索其建立过程、优缺点,以及滋养层细胞系应用的研究进展. 展开更多
关键词 胎盘 灵长类动物滋养层细胞 滋养层干细胞 胎盘类器官模型
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