针刀疏筋解结术对类风湿关节炎家兔滑膜炎症的影响及作用机制研究

目的观察针刀疏筋解结术对类风湿关节炎(RA)模型家兔膝关节滑膜组织NF-κB/Bcl-2通路活性及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、Bax、caspase-3表达的影响,探讨其抑制RA滑膜炎症的作用机制。方法24只新西兰白兔随机分为正常组、模型组、药物组和针刀组,每组6只,除正常组外,其余组采用卵蛋白+弗氏完全佐剂膝关节腔注射复制RA模型,分别予相应干预,连续18 d。测定家兔膝关节痛阈、膝关节周径,超声观察关节腔积液、滑膜厚度及内部血流信号,HE染色观察膝关节滑膜组织形态,TUNEL染色观察滑膜组织成纤维样滑膜细胞(FLS)凋亡情况,免疫组化检测滑膜组织TNF-α、IL-1β、IL-6表达,RT-PCR检测滑膜组织核因子(NF)-κBp65、Bcl-2mRNA表达,Westernblot检测滑膜组织NF-κBp65、p-NF-κBp65、Bcl-2、Bax、caspase-3蛋白表达。结果与正常组比较,模型组家兔膝关节痛阈降低、膝关节周径增加,超声评分和滑膜组织病理评分增加;滑膜组织FLS凋亡率降低,TNF-α、IL-1β、IL-6表达升高,NF-κBp65、Bcl-2 mRNA和蛋白及p-NF-κBp65蛋白表达升高,Bax、caspase-3蛋白表达降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,药物组和针刀组家兔膝关节痛阈增加、膝关节周径减小,超声评分和滑膜组织病理评分减少;滑膜组织FLS凋亡率升高,TNF-α、IL-1β、IL-6表达降低,NF-κBp65、Bcl-2m RNA和蛋白及p-NF-κBp65蛋白表达降低,Bax、caspase-3蛋白表达升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论针刀疏筋解结术可能通过降低滑膜组织NF-κB/Bcl-2通路活性,促进FLS凋亡,减少TNF-α、IL-1β、IL-6产生,抑制RA滑膜炎症,减轻膝关节肿胀、提升痛阈。

橄榄苦苷调节Hippo-YAP/TAZ信号通路对膝骨关节炎大鼠滑膜炎症的影响

目的探讨橄榄苦苷(OL)通过调节Yes相关蛋白(YAP)/转录共激活因子PDZ结合基序(TAZ)信号通路对膝骨关节炎(KOA)大鼠滑膜炎症的影响。方法采用改良的Hulth法构建KOA大鼠模型,并随机分为Model组、低剂量OL组(20 mg/kg)、高剂量OL组(40 mg/kg)、高剂量OL+VT103组(40 mg/kg+10 mg/kg YAP/TAZ抑制剂),每组12只,另取12只大鼠作为正常对照组(NC组)。观察各组大鼠的情况,Lequesne MG评分对各组大鼠行为学进行评估;ELISA试剂盒检测大鼠血清中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)的表达;苏木精-伊红(HE)染色检测大鼠滑膜组织的病理损伤;qRT-PCR法检测滑膜组织中YAP和TAZ mRNA的表达;Western blot检测大鼠滑膜组织中YAP、磷酸化YAP(p-YAP)、磷酸化TAZ(p-TAZ)、TAZ、B细胞淋巴瘤/白血病-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达。结果与NC组比较,Model组大鼠Lequesne MG评分升高、血清中TNF-α和IL-6的表达增加、YAP和TAZ mRNA表达增加、p-YAP/YAP、p-TAZ/TAZ、Bax蛋白表达升高(P<0.05);与Model组比较,低剂量、高剂量OL组大鼠Lequesne MG评分降低、血清中TNF-α和IL-6的表达减少、YAP和TAZ mRNA表达减少、p-YAP/YAP、p-TAZ/TAZ、Bax蛋白表达降低(P<0.05);VT103可明显减弱OL对KOA大鼠滑膜组织的保护作用(P<0.05)。结论OL可能通过激活YAP/TAZ信号通路减轻膝骨关节炎大鼠滑膜炎症。

从NF-κB/Bcl-2信号通路调控成纤维样滑膜细胞凋亡角度探讨中医药抑制类风湿关节炎滑膜炎症机制的研究进展

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是一种以关节滑膜炎症为主要特征的自身免疫性疾病,成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)的抗凋亡是导致该病病情发展的主要因素。如何促进FLS凋亡并抑制炎症反应是目前RA治疗和研究的重点。核因子κB(nuclear factor kappa-B,NF-κB)/B淋巴细胞瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)信号通路在RA发病过程中发挥了关键作用,其与FLS炎症倾向、抗凋亡等密切相关。研究并探讨NF-κB/Bcl-2信号通路调控FLS凋亡的机制及作用,介绍中医药靶向该通路促进FLS凋亡进而抑制RA滑膜炎症的研究现状,旨在为中医药治疗RA的研究提供一定基础。

加味独活寄生合剂对膝骨关节炎小鼠血清IL-6、IL-1β、TNF-α及滑膜炎症的影响

目的探讨加味独活寄生合剂对膝骨关节炎小鼠血清白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及滑膜炎症的影响,初步判定加味独活寄生合剂治疗膝骨关节炎的最佳剂量。方法将36只C57/BL6j小鼠随机分为空白组、模型组、西药对照组及中药低、中、高剂量组,除空白组外均通过膝关节注射木瓜蛋白酶溶液建立膝骨关节炎模型,空白组、模型组予生理盐水灌胃,西药对照组予双醋瑞因胶囊溶液灌胃,中药低、中、高剂量组分别按照6.28、12.56、25.12 g/kg剂量灌胃加味独活寄生合剂。连续灌胃8周后,各组小鼠进行改良Lequesen MG量表评分,ELISA测定各组小鼠血清中IL-6、IL-1β、TNF-α含量;HE染色及Masson染色观察膝关节滑膜组织结构形态及纤维组织增生情况。结果与空白组相比,模型组改良Lequesen MG量表评分显著升高(P<0.01),血清炎症因子含量明显升高(P<0.01),HE染色可见滑膜组织丰富的血管增生及大量炎性细胞浸润等滑膜炎症表现,Masson染色可见大量胶原纤维增生;西药对照组、中药低剂量组改良Lequesen MG量表评分较模型组显著降低(P<0.01),血清炎症因子含量均明显降低(P<0.01),HE染色见滑膜炎症改善,Masson染色见胶原纤维增生减轻;中药中、高剂量组较西药对照组和中药低剂量组改良Leque⁃sen MG量表评分显著降低(P<0.01),血清炎症因子含量明显降低(P<0.01);HE染色示滑膜炎症明显好转,Masson染色见胶原纤维增生明显减轻。结论加味独活寄生合剂可降低膝骨关节炎小鼠血清IL-6、IL-1β、TNF-α含量,改善膝关节滑膜炎症;12.56 g/kg剂量的加味独活寄生合剂对膝骨关节炎小鼠病情改善最明显。

基于自噬-NLRP3炎症小体-IL-1β信号轴探究热补针法对类风湿关节炎寒证模型家兔滑膜炎症的影响

目的观察热补针法对类风湿关节炎(RA)寒证模型家兔滑膜组织自噬-NOD样受体蛋白3(NLRP3)炎症小体-白细胞介素(IL)-1β信号轴的影响,探讨热补针法治疗RA滑膜炎症的作用机制。方法48只新西兰家兔随机分为正常组、模型组、3-甲基腺嘌呤(3-MA)组、雷帕霉素组、热补针法组及平补平泻组,每组8只。以弗氏完全佐剂+卵蛋白诱导联合低温冷冻法复制RA寒证家兔模型。热补针法组和平补平泻组于“足三里”分别施热补针法及平补平泻针法针刺,留针30 min,1次/d,连续14 d;3-MA组和雷帕霉素组分别耳缘静脉注射3-MA和雷帕霉素溶液,1次/2 d,共7次。免疫组化染色检测膝关节滑膜组织IL-1β表达,免疫荧光染色检测滑膜组织NLRP3表达,透射电镜观察滑膜细胞自噬小体形态,Western blot检测滑膜组织自噬蛋白5(Atg5)、UNC-51样激酶1(ULK1)、微管相关蛋白轻链3(LC3)、Beclin-1蛋白表达。结果与正常组比较,模型组家兔膝关节周径显著增加、皮温显著降低(P<0.05),滑膜组织IL-1β、NLRP3表达显著升高(P<0.05),Atg5、ULK1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1蛋白表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,3-MA组家兔膝关节周径显著增加、皮温显著降低(P<0.05),滑膜组织IL-1β、NLRP3表达显著升高(P<0.05),Atg5、ULK1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1蛋白表达显著降低(P<0.05);热补针法组、平补平泻组和雷帕霉素组家兔膝关节周径显著缩小、皮温显著升高(P<0.05),滑膜组织IL-1β、NLRP3表达显著降低(P<0.05),Atg5、ULK1、LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、Beclin-1蛋白表达显著升高(P<0.05),且热补针法组作用优于平补平泻组。透射电镜观察显示,正常组家兔滑膜细胞胞浆内自噬小体、溶酶体散在分布;模型组和3-MA组家兔滑膜细胞偶见自噬小体分布;雷帕霉素组和热补针法组家兔滑膜细胞可见吞噬泡及双层膜结构的自噬小体,溶酶体数量增加;平补平泻组家兔滑膜细胞偶见吞噬泡、自噬小体及溶酶体等结构。结论热补针法能抑制RA寒证模型家兔膝关节滑膜炎症反应,其机制可能与调节自噬-NLRP3炎症小体-IL-1β信号轴有关。

肌骨超声监测下巴瑞替尼对类风湿关节炎滑膜炎症改善程度的临床疗效观察

目的:探究肌骨超声监测下巴瑞替尼对类风湿关节炎滑膜炎症改善程度的效果。方法:选择2021年1月至2022年4月本院收治的92例类风湿关节炎患者为观察对象,依据随机原则分为两组,各46例。两组均予以改善病情抗风湿药物(csDMARDs)药物治疗,观察组同时予以肌骨超声监测下巴瑞替尼治疗,均持续治疗6个月。对比两组治疗前后肌骨超声评分、实验室指标变化,并统计不良反应发生率。结果:治疗后,两组灰阶滑膜炎/腱鞘炎评分、能量多普勒滑膜炎/腱鞘炎评分较治疗前均降低,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,两组血清类风湿因子(RF)、抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP)、红细胞沉降率(ESR)及C反应蛋白(CRP)水平较治疗前均降低,且观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组的不良反应发生率(17.39%)与对照组(12.50%)对比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:肌骨超声监测下巴瑞替尼治疗类风湿关节炎能更好地改善滑膜炎症,降低实验室指标,减少超声多普勒血流信号,且不会增加不良反应,具有较高推广价值。

艾灸改善RA滑膜炎症机制的研究进展

类风湿关节炎以滑膜组织和细胞的异常炎性增生为病理特征,疼痛、活动障碍和关节畸形等症状严重影响患者的生活质量。艾灸温经散寒、通络止痛,在改善类风关滑膜炎症方面具有疗效确切、安全便捷等优势。作为类风关的重要保守治法之一,艾灸在抑制滑膜成纤维细胞异常增殖、调控炎性介质表达及信号通路传导、调节细胞自噬与铁死亡水平三个方面具有重要作用。未来应进一步探索艾灸改善类风关滑膜炎症的作用机制及其相互关系,以期完善其科学依据。

通络止痛方对人膝骨关节炎滑膜炎症细胞上清IL-1β及TNF-α的影响

目的:观察通络止痛方对人膝骨关节炎滑膜炎症细胞上清白细胞介素-1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量的影响。方法:取本院行全膝关节置换术患者术中废弃滑膜组织,经I型胶原酶消化后进行细胞培养,取上清液,加入不同浓度通络止痛方干预,分为:(1)高浓度组:2.5 mg/m L;(2)中浓度组:0.25 mg/m L;(3)低浓度组:0.025 mg/m L;(4)对照组:0 mg/m L。应用酶联免疫吸附法检测观察各浓度组对上清液干预后IL-1β及TNF-α的浓度。结果:高中低浓度组较对照组上清液中IL-1β及TNF-α含量明显降低(P<0.05),且下降的幅度与通络止痛方的浓度呈正相关(IL-1β:r=0.38,P<0.05;TNF-α:r=0.41,P<0.05)。IL-1β及TNF-α的高浓度组达到抑制高峰,与中、低浓度组比较,差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论:通络止痛方对人膝骨关节炎滑膜炎症细胞上清IL-1β及TNF-α有抑制作用,随浓度增高,抑制程度越明显。

从“经筋”理论论治膝骨关节炎滑膜炎症的思路探讨

从经筋与滑膜的关系及在膝骨关节炎(OA)中的意义为出发点,用中医学"经筋"理论结合现代医学研究中滑膜炎症在膝OA病程中的关键作用,形成"经筋—软组织—滑膜"的整体思路,明确作用靶点,为膝OA的中、西医结合预防和治疗提供新的思路。

基于体外细胞模型的建立探讨通络止痛方对滑膜炎症反应的影响

目的建立滑膜炎症反应体外细胞模型,研究通络止痛方中君药的主要有效成分桂皮醛和白芍总苷对滑膜成纤维细胞TNF-α、NO的影响,评价其对膝关节骨性关节炎滑膜炎症的作用。方法取大鼠滑膜组织用胶原酶法进行分离培养后,以高、中、低浓度的LPS分别经12、24、48 h刺激FLS炎症反应,测定最佳反应浓度和时间并诱导FLS;将高、低浓度的桂皮醛和白芍总苷分别经12、24、48 h干预后,Griess法测定NO浓度,ELISA法测定TNF-α释放量。结果不同浓度的LPS在不同时间对FLS炎症反应均有一定的诱导作用(P<0.05),但在1μg/m L作用24 h时炎症反应程度最高;高、低浓度的CA、TGP在不同时间对滑膜炎症反应均有抑制作用,高浓度组均比低浓度组抑制TNF-α、NO释放作用强,48 h时2种药物对TNF-α的释放抑制作用最强,而NO则是24 h时。结论不同浓度的CA、TGP均可不同程度有效抑制炎性介质的释放,减轻滑膜炎症反应。

TLRs/MyD88信号通路在膝骨性关节炎患者滑膜炎症中的作用

目的探讨Toll样受体/人髓样分化因子88(TLRs/MyD88)信号通路在膝骨性关节炎患者滑膜炎症中的作用。方法2017年1月-2019年1月,回顾性收集广东省佛山市中医院收治的膝骨性关节炎患者120例,同时收集健康志愿者50例作为对照组,观察2组患者膝关节液中TLRs/MyD88信号通路相关炎症指标[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1(IL-1)和基质金属蛋白酶-13(MMP-13)],同时检测观察组滑膜中TLRs/MyD88信号通路中相关指标(TLR2、TLR4、MyD88),分析TLRs/MyD88信号通路相关指标与膝骨性关节炎病情严重度的相关性。结果与对照组比较,观察组关节液中TNF-α、IL-1和MMP-13表达增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。滑膜细胞中TLR2阳性细胞比为(53.93±12.73)%,TLR4阳性细胞比为(59.73±14.74)%,MyD88阳性细胞比为(63.85±15.96)%。Pearson线性相关性分析显示滑膜厚度、髌上囊液体深度、髌下囊液体深度、关节腔液体深度与TLR2、TLR4、MyD88、TNF-α、IL-1、MMP-13均显著正相关(P<0.05)。膝骨性关节炎患者Lysholm膝关节评分与TLR2、TLR4、MyD88、TNF-α、IL-1、MMP-13均显著负相关(P<0.05)。结论TLRs/MyD88信号通路可能在膝骨性关节炎患者中被激活,加速膝关节退变的发展过程。

蠲痹颗粒对胶原诱导性关节炎模型大鼠滑膜炎症的影响

目的:探讨蠲痹颗粒对类风湿关节炎滑膜炎症的控制作用。方法:SD大鼠50只,随机分为空白对照组(5只)和造模组(45只)。造模组复制胶原诱导型关节炎(CIA)模型后,随机分为蠲痹低剂量组(10只)、中剂量组(10只)、高剂量组(10只),甲氨蝶呤组(10只),模型对照组(5只)。致炎第21天起每日给药干预,从第1天初次免疫前开始,每隔7天采用关节炎指数(AI)评分法及足趾容积测量法评价关节炎病变的发生及严重程度。并于第35天和第49天各处死一半动物,腹主动脉采血测血清白细胞介素-1β水平,取踝关节滑膜组织行HE染色。结果:①35 d时,蠲痹低剂量组、甲氨蝶呤组CIA大鼠AI评分与空白对照组比较显著增加(P<0.05);其他组AI评分有增加趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。49 d时,甲氨蝶呤组CIA大鼠AI评分与空白对照组比较,显著增加(P<0.05);蠲痹高剂量组与甲氨蝶呤组比较,在改善AI评分上明显优于甲氨蝶呤组(P<0.05)。②35 d时,蠲痹低剂量组CIA大鼠足趾容积与空白对照组比较,显著增加(P<0.05);其他组足趾容积有增加趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);49 d时,各给药组与模型对照组比较,足趾容积有减小趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。③35 d时,血清白细胞介素-1β水平,蠲痹低、中、高剂量组,甲氨蝶呤组,空白对照组与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);蠲痹高剂量组在改善血清白细胞介素-1β水平上优于甲氨蝶呤组(P<0.05)。49 d时,各组与模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01),蠲痹中、高剂量组在改善血清白细胞介素-1β水平上明显优于甲氨蝶呤组(P<0.01)。④CIA大鼠滑膜组织炎症评分,35 d时,蠲痹低、中、高剂量组,甲氨蝶呤组,空白对照组与模型对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。49 d时,蠲痹中剂量组在改善滑膜组织炎症评分上优于模型对照组,差异有统计学意义(P<0.05);蠲痹高剂量组明显优于模型对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:蠲痹颗粒能对抗CIA大鼠的炎症病变进展,减轻滑膜炎症。

TNF-α与β1,4-GalT-Ⅰ在膝骨关节炎滑膜炎症过程中的关系研究

目的探讨TNF-α与β1, 4-GalT-Ⅰ在膝骨关节炎(KOA)滑膜炎症过程中的关系。方法选取我院2016年3月至2018年2月诊断为KOA的15例患者作为观察组,选取同期15例健康检查者作为对照组,检测两组研究对象的滑膜组织TNF-α与β1, 4-GalT-Ⅰ的表达水平,并培养FLS,以酶联免疫吸附试验检测TNF-α的表达,以Real-time PCR检测β1, 4-GalT-Ⅰ的表达。结果观察组的TNF-α与β1, 4-GalT-Ⅰ相对表达量均明显高于对照组(P <0.05)。不同剂量TNF-α组的FLS,其β1, 4-GalT-Ⅰ相对表达量与对照组比较有统计学差异(P <0.05)。结论在KOA滑膜炎症过程中, TNF-α与β1, 4-GalT-Ⅰ参与了滑膜炎症的发生发展, TNF-α可能通过调控β1, 4-GalT-Ⅰ的表达参与KOA滑膜炎症。

中药抑制骨性关节炎滑膜炎症的作用机制的研究进展

阐述中药抑制骨性关节炎滑膜炎症的作用机制。中药可以改善软骨退变过程中软骨组成及代谢紊乱,调节骨性关节炎细胞因子的产生,抑制氧自由基的损伤,改善局部微循环、降低骨内压以及具有直接的抗炎作用等等,为中药治疗骨关节炎提供一定参考。

低浓度木瓜蛋白酶诱导兔早期膝骨关节炎滑膜炎症的时间曲线

背景:膝关节滑膜炎症在早期膝骨关节炎的发生发展中起重要作用。目的:比较低浓度木瓜蛋白酶不同诱导时间下兔膝骨关节炎滑膜炎症的变化,为研究膝关节滑膜炎提供数据支持。方法:将24只新西兰大耳白兔随机分为4组,分别在第1,4,7天右膝关节注入2%的木瓜蛋白酶和0.03 mol/L L-半胱氨酸混合液0.5 m L,在末次注射后第1,2,3周将兔子分批处死,空白对照组在第3周处死,记录兔膝关节局部皮温和周径,并取滑膜及髌下脂肪垫组织行病理学观察及酶联免疫吸附测定。结果与结论:(1)在造模后第1周有大量关节积液,膝关节局部皮温及周径均高于第2,3周;(2)滑膜组织中白细胞介素1、肿瘤坏死因子α、基质金属蛋白酶13浓度在第1,2,3周均高于空白组,且第1周时浓度最高,第2,3周差异无显著性意义;(3)滑膜组织形态学显示,第1,2,3周滑膜组织均增生、变厚,有炎性细胞浸润,随着造模时间的延长,滑膜组织中血管增生明显增加;(4)说明低浓度木瓜蛋白酶和0.03 mol/L L-半胱氨酸混合在1周内能形成兔膝关节滑膜炎症,并产生大量关节积液,随时间增加滑膜组织增厚、血管增生明显,关节积液减少。

华中枸骨叶总黄酮纯化及抗RA滑膜炎症活性评价

以总黄酮含量和转移率为评价指标,采用多种方法提取纯化华中枸骨叶总黄酮(ICTF),并以TNF-α诱导人关节滑膜成纤维细胞MH7A为滑膜炎症细胞模型评价其抗RA滑膜炎症活性,试剂盒测定炎症介质NO含量,RT-qPCR检测炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8 mRNA的转录水平.结果表明,华中枸骨叶乙醇总提取物经石油醚脱脂后,经D101大孔吸附树脂吸附,50%乙醇洗脱5 BV,再经葡聚糖凝胶Sephadex LH-20吸附后甲醇洗脱5 BV后,所得总黄酮含量达53.91%,转移率为39.53%;所得ICTF能剂量依赖性降低滑膜炎症模型细胞NO水平以及IL-1βmRNA的转录水平,200μg/mL剂量可显著降低IL-6和IL-8 mRNA的水平.该纯化方法稳定可行,所得ICTF具有抑制RA滑膜炎症潜力.

基于缺氧组织中NLRP3炎症小体的活化研究膝痹宁减轻KOA滑膜炎症的效应机制

目的基于缺氧组织中NLRP3炎症小体的活化研究膝痹宁减轻膝骨关节炎滑膜炎症的效应机制。方法大鼠分为空白组、KOA组、膝痹宁组。膝痹宁组药液灌胃,空白组、KOA组消毒生理盐水灌胃作为对照;第56天处死大鼠提取滑膜组织;HE染色评估滑膜炎症;缺氧探针免疫荧光染色观察大鼠膝关节滑膜组织缺氧程度;qPCR和Western blot检测缺氧转录因子1α(HIF-1α)、Caspase-1p10、NLRP3及GSDMD的mRNA和蛋白表达;ELISA法测定NLRP3炎症小体活化下游IL-1β、IL-18的水平。结果 HE染色发现,KOA组滑膜组织较空白组表现出更多的炎性细胞浸润,衬里层细胞排列紊乱,膝痹宁组较KOA组炎性细胞浸润减少。大鼠滑膜组织的探针免疫荧光染色显示,KOA组与较空白组缺氧程度加重,膝痹宁组则较KOA组减轻。同时,KOA组滑膜组织中HIF-1α的mRNA和蛋白表达水平均较高于空白组(P<0.01),膝痹宁组则较KOA组降低(P<0.01)。此外,KOA组Caspase-1p10、NLRP3、GSDMD的mRNA及蛋白表达水平均高于空白组(P<0.05),而膝痹宁组较KOA组有所降低(P<0.05)。KOA组滑膜组织中IL-1β、IL-18的水平较空白组升高(P<0.01),膝痹宁组较KOA组降低(P<0.01)。结论膝痹宁能有效改善KOA滑膜组织缺氧状况,降低HIF-1α的表达,减少NLRP3炎症小体的活化,减轻滑膜炎症。

三色散凝胶贴膏剂的基质处方优化及其对KOA大鼠滑膜炎症的干预效应观察

目的优化三色散凝胶贴膏剂的基质处方工艺,研究其对膝骨关节炎(KOA)大鼠滑膜炎症的干预效应。方法以综合感官、初黏力、持黏力、剥离强度为评价指标,以聚丙烯酸钠、甘羟铝、酒石酸、甘油为考察因素,采用正交实验筛选最优基质处方。随后,将大鼠随机分为空白组、模型组、三色散凝胶贴膏剂组、三色散传统制剂组、三色散凝胶贴膏剂(含促渗剂)组。采用改良的Hulth法构建KOA模型,造模成功后,各给药组外敷膏药28 d。末次给药后,提取各组大鼠滑膜组织。HE染色评估滑膜炎症,天狼星红染色评估滑膜胶原沉积情况,Krenn评分评价滑膜炎症情况。Western blot和qPCR检测滑膜IL-1β、TNF-α、IL-6蛋白和mRNA表达。结果经过筛选得到三色散凝胶贴膏剂的最优基质处方为聚丙烯酸钠50 g,甘羟铝2.5 g,酒石酸3 g,甘油500 g,三色散150 g,纯水50 mL,卡波姆120 g,薄荷脑36 g。大鼠给药28 d后,HE及天狼星红染色结果显示,与模型组比较,三色散凝胶贴膏剂组和三色散传统制剂组炎性细胞浸润、胶原沉积减少,纤维化程度减轻,Krenn评分显著降低(P<0.01),炎症因子IL-1β、TNF-α、IL-6蛋白和mRNA表达降低(P<0.01);与三色散传统制剂组比较,三色散凝胶贴膏剂组Krenn评分,IL-1β、TNF-α和IL-6蛋白表达无显著差异,IL-1β、IL-6 mRNA表达显著降低(P<0.05),TNF-αmRNA表达无显著差异。与三色散凝胶贴膏剂组比较,三色散凝胶贴膏剂(含促渗剂)组Krenn评分显著降低(P<0.05),IL-1β蛋白表达显著下降(P<0.01),TNF-α和IL-6蛋白表达无显著差异,IL-1β、TNF-α、IL-6 mRNA表达显著下降(P<0.05,P<0.01)。结论优化的基质处方工艺稳定可行,操作方法简便,制备得到的三色散凝胶贴膏剂外观及黏附性良好,且能有效减轻KOA大鼠滑膜炎症,效果不亚于三色散传统制剂。加入促渗剂能增强三色散凝胶贴膏剂的抗炎效果,为进一步研究提供参考。

基于NLRP3炎症小体活化探讨“三色散”挥发油减轻膝骨关节炎滑膜炎症的机制

目的:基于NOD样受体家族3(NLRP3)炎症小体的活化探讨"三色散"挥发油减轻膝骨关节炎(KOA)滑膜炎症的机制。方法:采取水蒸气蒸馏法提取"三色散"挥发油,采用气质联用(GC-MS)技术分析其组成。提取雄性SD大鼠膝关节成纤维样滑膜细胞(FLS),采用CCK-8法检测10、25、50、100、250、500、1000μg/mL"三色散"挥发油对FLS存活率的影响;以脂多糖诱导12 h建立KOA炎症细胞模型,检测10、250μg/m L"三色散"挥发油对炎症模型细胞中NLRP3、胱天蛋白酶1(caspase-1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)的蛋白及其mRNA相对表达量的影响,检测炎症模型细胞上清液中白细胞介素1β(IL-1β)、IL-18水平。结果:提取得到黄色澄清且有独特芳香气味的"三色散"挥发油0.51~0.61 g,提取率为0.33%~0.41%(n=9)。从该挥发油中共分离得到化学成分41种,鉴定了其中的30种,其峰面积之和占总峰面积的90.0736%;相对含量较高的成分依次为芳姜黄酮(17.5739%)、δ-杜松烯(15.4345%)、姜黄酮(11.5095%)等。当"三色散"挥发油质量浓度为10~250μg/mL时,其对FLS存活率均无显著影响(P>0.05)。与空白组比较,模型组细胞中NLRP3、caspase-1、ASC的蛋白及其mRNA相对表达量以及细胞上清液中IL-1β、IL-18水平均显著升高(P<0.05);与模型组比较,"三色散"挥发油10、250μg/m L组细胞及上清液中上述指标的相对表达量或水平均显著降低(P<0.05)。结论:"三色散"挥发油可能通过抑制FLS中NLRP3炎症小体的活化而减少下游炎症级联反应,从而发挥其改善KOA滑膜炎症的作用。

循经火疗联合艾灸治疗老年膝骨性关节炎的疗效及对滑膜炎症、软骨代谢的影响

目的:探讨循经火疗联合艾灸对老年膝骨性关节炎(KOA)(寒湿痹阻型)患者疗效、滑膜炎症及软骨代谢的影响。方法:选择我院老年KOA(寒湿痹阻型)患者132例按随机数字表法分组,对照组66例患者采取依托考昔片+艾灸治疗,观察组66例在对照组基础上加用循经火疗,对比两组临床疗效、滑膜炎症、软骨代谢。结果:观察组的总有效率高于对照组(P<0.05);观察组治疗后的软骨厚度大于对照组,滑膜厚度、TNF-α、TLR-4、P物质、PG、COMP水平均低于对照组(P<0.05)。结论:循经火疗联合艾灸可通过改善KOA(寒湿痹阻型)患者的滑膜炎症状态,促进软骨代谢,提高临床疗效。