结核潜伏感染者筛选和免疫预防治疗研究进展

现阶段,结核分枝杆菌(Mycobacterium Tuberculosis,MTB)潜伏感染筛选与免疫预防存在诸多限制因素,取得的效果仍有不足,这些因素均会对结核病防控产生一定的影响。然而,灵敏度、特异度更高的筛查方式,以及高效且持久的免疫预防疫苗、简化的用药治疗方案正处于研发与观察阶段,现已成为结核病防控工作的研究重点,同时也给MTB潜伏感染者带来了更多的希望。本文针对MTB潜伏感染者的筛选现状,以及免疫预防研究成果进行综述,分析各项筛查方法的优劣,以及最新的预防与治疗研发动态,以便明确此群体防控工作的进展情况,为基层医院筛选和防治结核病提供一定的参考。

南通某师范学校新生结核潜伏感染情况及危险因素分析

目的:了解南通某师范学校新生结核潜伏感染(latent tuberculosis infection,LTBI)情况,分析影响藏族学生发生LTBI的危险因素,为结核病防控工作提供依据。方法:对2023年南通某师范学校新生进行问卷调查,采用结核菌素纯蛋白衍生物试验(purified protein derivative,PPD)或γ干扰素释放试验(interferon-gamma release assay,IGRA)、X线胸片/胸部CT筛查LTBI。根据LTBI筛查结果,将藏族学生设为对照组和LTBI组,采用单因素及多因素Logistic回归模型分析影响藏族学生发生LTBI的危险因素。结果:共筛查新生1663例,筛查率为100.00%。检出LTBI阳性142例,总检出率为8.54%,其中汉族97例,藏族43例,其他民族2例,无活动性肺结核患者。藏族学生中LTBI阳性检出率为15.25%,明显高于汉族学生的7.13%(P<0.05)。单因素分析显示,藏族学生对照组与LTBI组BMI、是否吸烟、母亲文化程度、初中时是否寄宿、是否有结核病密切接触史、接种卡介苗、结核病核心知识知晓、既往是否有结核病史等资料比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,结核病密切接触史(OR=12.896,95%CI:1.822~91.276)是藏族新生发生LTBI的危险因素,知晓结核病防治核心知识(OR=0.089,95%CI:0.023~0.340)及母亲文化程度高中及以上(OR=0.029,95%CI:0.006~0.144)是藏族新生LTBI的保护因素。结论:南通某师范学校藏族新生LTBI发生率较高,发生LTBI的风险与结核病密切接触、结核病防治核心知识知晓情况和母亲文化程度有关,应加强对南通地区藏族学生及家长结核病防治知识的宣传教育。

伪狂犬病病毒在小鼠原代神经细胞中潜伏感染模型的建立

缺少PRV良好的潜伏感染模型已成为研究其潜伏感染机制的障碍。为建立PRV潜伏感染的体外细胞模型,本研究通过分离新生鼠背根神经节(DRG)获取神经细胞,并利用间接免疫荧光试验(IFA)对其进行鉴定,获得了DRG中的神经细胞。采用重组报告病毒r PRV-EGFP感染神经细胞,同时添加阿昔洛韦(ACV)抑制病毒复制以建立潜伏感染,并采用棋盘法对病毒感染剂量和ACV浓度进行优化,结果显示,感染复数(MOI)为0.001,ACV浓度为0.5 mmol/L,病毒能够在神经细胞中稳定建立潜伏感染。采用荧光定量RT-PCR、病毒滴度测定、药物刺激再激活的方法对潜伏感染模型鉴定,结果显示,潜伏感染时病毒不能复制,且不产生感染性病毒粒子;而经LY294002(PI3K抑制剂)诱导病毒再激活后,病毒大量复制并产生感染性病毒粒子。本研究首次利用小鼠原代神经细胞建立了PRV的潜伏感染模型,该模型的建立为PRV潜伏感染机制的研究奠定了基础。

个体化护理干预对结核潜伏感染及活动性结核患者的影响

目的:探讨个体化护理干预对结核潜伏感染及活动性结核患者的应用价值。方法:选取2022年1—12月首都医科大学附属北京胸科医院结核潜伏感染或活动性结核患者86例,以随机法将所有患者分为干预组及常规组,各43例。常规组采用常规护理,干预组采用个体化护理干预。比较两组肺功能[第1秒用力呼气容积(FEV_(1))、FEV_(1)占用力肺活量百分比(FEV_(1)/FVC)]、自我管理水平、6 min步行距离(6MWD)、生活质量。结果:干预后,两组FEV_(1)、FEV_(1)/FVC水平均高于干预前,干预组高于常规组,差异有统计学意义(P<0.05);干预后,两组健康饮食、良好睡眠评分均高于干预前,且干预组高于常规组,差异有统计学意义(P<0.05);干预后,两组6MWD均长于干预前,且干预组长于常规组,差异有统计学意义(P<0.05);干预后,两组圣乔治呼吸疾病问卷评分均低于干预前,且干预组低于常规组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:个体化护理干预应用于结核潜伏感染及活动性结核患者,有助于改善其肺功能、生活质量,提高自我管理水平,延长6MWD。

DosR抗原Rv2626c通过lncRNA MacORIS诱导巨噬细胞活化的结核潜伏感染机制研究

目的 探讨结核潜伏感染(LTBI)表达的DosR抗原Rv2626c在巨噬细胞活化中的作用和长链非编码RNA(lncRNA)MacORIS对其的调控作用。方法 将人急性单核细胞白血病细胞系THP-1诱导为巨噬细胞,根据转染物的不同分为4组:阴性对照(NC)组[转染NC-小干扰RNA(siRNA) 24 h]、MacORIS-siRNA组(转染MacORIS-siRNA 24 h);NC-siRNA+重组蛋白Rv2626c(rRv2626c)组(转染NC-siRNA 24 h,再用3μg·mL^(-1)rRv2626c刺激24h)、MacORIS-siRNA+rRv2626c组(转染MacORIS-siRNA24h,再用3μg·mL^(-1)rRv2626c刺激24h)。检测各组细胞lncRNAMacORIS、Toll样受体(TLR)2、TLR4、表面共刺激分子(CD80、CD86、CD163、CD206)、吲哚胺2,3-双加氧酶1(IDO1)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-1β的表达情况。采用生物信息学方法预测并构建lncRNA MacORIS的竞争内源RNA(ceRNA)网络,对lncRNA MacORIS潜在的靶微小RNA进行验证。结果 rRv2626c可有效促进巨噬细胞lncRNA MacORIS和IDO1上调(P<0.05)。rRv2626c可依赖于lncRNA MacORIS诱导THP-1细胞中TLR2的表达(P<0.05)。rRv2626c可依赖于lncRNA MacORIS上调巨噬细胞中CD80、CD86、TNF-α、IL-1β的表达(P<0.001)。与NC组比较,MacORIS-siRNA组miR-141-3p、miR-150-5p、miR-33-5p、miR-200-3p和miR-203-3p相对表达量均显著升高(P<0.05)。结论 rRv2626c可促进巨噬细胞极化到M1表型,并促进TLR2和炎症因子表达,这些变化均依赖于lncRNA MacORIS。lncRNA MacORIS可负调控miR-141-3p、miR-150-5p、miR-33-5p、miR-200-3p和miR-203-3p的表达。

结核分枝杆菌潜伏感染抗原Rv2628c-Rv1737c融合蛋白的原核表达与免疫原性分析

目的原核系统表达、纯化结核分枝杆菌潜伏感染抗原Rv2628c-Rv1737c融合蛋白,并检测其能否被结核感染者外周血PBMC细胞识别,通过小鼠模型判定其免疫原性。方法按照原核系统密码子特点,全基因合成Rv2628c-Rv1737c表达核酸序列,构建表达质粒pET24a-Rv2628c-Rv1737c,原核细胞内诱导表达、亲和层析纯化Rv2628c-Rv1737c蛋白;分离不同患者样本PBMC细胞,抗原刺激后,通过q-PCR分析IFN-γmRNA表达差异,判定融合蛋白能否被TB感染者识别;联合融合佐剂DMT免疫BALB/c小鼠,检测体液免疫应答水平。结果原核克隆的重组表达质粒pET24a-Rv2628c-Rv1737c测序正确,融合蛋白以包涵体表达形式存在,经复性、亲和纯化后,分子量为57 kDa,纯度90%以上。以Rv2628c-Rv1737c融合蛋白刺激TB感染者,尤其TB潜伏感染(LTBI)者,外周血PBMC细胞IFN-γmRNA水平高于健康对照者(P<0.05);同时,BCG+Rv2628c-Rv1737c/DMT诱导小鼠能产生高水平的IgG抗体。结论原核重组可获得高纯度Rv2628c-Rv1737c融合蛋白,其作为潜伏感染抗原,可被TB感染者PBMC细胞识别,具有较强的免疫原性,是具有潜力的TB候选亚单位疫苗靶抗原,可用于TB感染尤其是潜伏感染的预防及实验室诊断。

重庆市病原学阳性肺结核患者密切接触者结核分枝杆菌潜伏感染现状及影响因素

目的了解病原学阳性肺结核患者密切接触者结核分枝杆菌潜伏感染(LTBI)现状及影响因素,为制定LTBI干预措施提供基础依据。方法采用多阶段分层整群随机抽样方法选取重庆市39个区县病原学阳性肺结核患者密切接触者为研究对象,通过问卷调查收集人口学信息等资料,采用γ-干扰素释放试验(IGRA)检测结核分枝杆菌感染状态。采用χ^(2)检验和二元logistic回归模型对LTBI影响因素进行分析。结果共纳入密切接触者2591例,男女性别比为0.69∶1,平均年龄(35.72±16.64)岁。检出LTBI 1058例,结核分枝杆菌潜伏感染率为40.83%。单因素分析结果显示,不同年龄、身体质量指数(BMI)、职业、文化程度、婚姻状态,是否患有慢性病或大手术史,是否与指示病例共同居住,以及与指示病例累计接触时长是否≥250 h者,感染率不同,差异均有统计学意义(均P<0.05);感染率随年龄和BMI升高均呈上升趋势(均P<0.001),随文化程度升高呈下降趋势(P<0.05)。Logistic回归分析显示,年龄45~54岁(OR=1.951,95%CI:1.031~3.693)、55~64岁(OR=2.473,95%CI:1.279~4.781)、其他职业(OR=0.530,95%CI:0.292~0.964)、教师(OR=0.439,95%CI:0.242~0.794)、学生(OR=0.445,95%CI:0.233~0.851)、初中及以下文化程度(OR=1.412,95%CI:1.025~1.944)、BMI<18.5 kg/m2(OR=0.762,95%CI:0.586~0.991)、与指示病例共同居住(OR=1.621,95%CI:1.316~1.997)、与指示病例累计接触时长≥250 h(OR=1.292,95%CI:1.083~1.540)是LTBI的影响因素(均P<0.05)。结论病原学阳性肺结核患者密切接触者结核分枝杆菌潜伏感染率高,需重点关注高龄、农民、与患者接触程度高的密切接触者,及时采取针对性干预措施以降低发病风险。

非编码RNA与人巨细胞病毒潜伏感染关系的研究进展

人巨细胞病毒(HCMV)是一种高宿主特异性疱疹病毒,其感染率高、潜伏感染激活后的致病性强。由于目前尚无针对病毒潜伏感染的监测手段,导致HCMV临床诊断困难。近年来有研究报道非编码RNA在疱疹病毒的潜伏感染过程中发挥重要作用,提示可以将HCMV感染相关的特异性非编码RNA应用于病毒潜伏感染期的诊断和监测。本文就与HCMV潜伏感染相关的非编码RNA调控机制作简要综述,进一步阐明非编码RNA与HCMV潜伏感染的关系。

一类具有多时滞非局部扩散HIV潜伏感染模型的时空动力学分析

该文建立了一类具有多时滞非局部扩散HIV潜伏感染模型来研究HIV在宿主体内感染机制.具体地,考虑了初始病毒感染到HIV病毒成功整合到靶细胞DNA中和细胞感染到病毒产生这两个时滞,同时也考虑了空间异质环境中自由病毒的非局部扩散.首先证明了系统解半流的全局适定性,紧性和渐近光滑性,其次通过下一代再生算子定义给出基本再生数泛函表达式,以及其非局部算子扰动的特征值问题的主特征值与基本再生数的关系.利用无穷维系统的持久性理论研究了模型的一致持久性.再次,通过将本征函数设置为Lyapunov泛函的积分核讨论了系统全局阈值动力学.具体地,当R_(0)≤1时无感染平衡态是全局稳定的,否则系统感染平衡态是全局稳定的.最后通过数值模拟验证了理论结果.此外数值结果表明:(1)增加扩散率和减少细胞延迟时间将增加病毒的最终载量;(2)扩散内核函数影响R_(0)的值以及病毒的最终载量.这说明病毒非局部扩散和时滞在宿主内HIV感染过程中起着关键的作用.

HIV-1转录延伸调控潜伏感染的分子机制

人类免疫缺陷病毒1型(HIV-1)作为获得性免疫缺陷综合征(AIDS)的主要致病病原体,目前尚无有效治愈方法。现有的抗逆转录病毒疗法(ART)虽然可以有效抑制病毒复制,但却无法清除潜伏感染的细胞。因此,当前面临的主要挑战是找到安全、有效的方法清除HIV-1潜伏储存库。HIV-1潜伏维持和再激活分子机制的研究已经揭示了HIV-1转录延伸过程在其中所起的核心作用。本综述主要概述HIV-1转录延伸的具体分子过程以及对潜伏感染的调控作用,为进一步探究HIV-1如何实现潜伏和活跃转录之间的平衡提供理论支持,为实现AIDS治愈提供新方向。

结核潜伏感染诊断治疗的研究进展

全球大约有25%的人口遭受结核分枝杆菌的感染,其中5%~10%的潜伏感染者可能发展为活动性结核病,故准确地识别、早期治疗结核潜伏感染对遏制结核病的传播至关重要。目前对于潜伏性结核的诊断多采用结核菌素测试、干扰素释放试验及胸片检查,但特异性差,无法区分潜伏感染与活动性感染,新型的特异性生物标志物有待进一步研究。目前针对艾滋病病毒感染者、免疫抑制剂使用者、器官移植接受者等,在接受治疗过程中需要定期筛查结核分枝杆菌潜伏感染。对于这些个体合并结核潜伏感染是否预防抗结核治疗取决于是否有活动性结核病的风险。潜伏感染的预防策略通常包括异烟肼单独治疗、利福平单独治疗、异烟肼加利福平的方案,在治疗的同时需警惕药物不良反应的发生。对于多重耐药的结核潜伏感染者,预防性治疗策略包括新型抗结核药物如贝达喹啉、德拉马尼和氟喹诺酮等及其联合疗法,仍在持续研究中。本文综合了近年来的国内外指南和研究进展,概述了当前结核潜伏感染的诊断和治疗研究进展。

煤工尘肺患者的结核潜伏感染风险及危险因素分析

目的:分析煤工尘肺结核潜伏感染风险及危险因素。方法:选取2020年1月至2023年7月赣州市第五人民医院救治的煤工尘肺患者80例,采用X线胸片和干扰素释放试验(QuantiFERON-TB GOLD,QFT)筛查结核潜伏感染情况,通过病历档案收集患者临床资料,采用Logistic回归模型分析此类患者结核潜伏感染的危险因素。结果:80例煤工尘肺患者结核潜伏感染率为63.75%,划作结核潜伏感染组、无结核潜伏感染组分别有51例和29例。两组在工种、工作场所通风情况和吸烟频率的比较差异有统计学意义(P<0.05);但在年龄、文化程度、婚姻状况等其他资料比较,差异无统计学意义。Logistic回归模型结果显示,混合工种、工作场所通风情况差是煤工尘肺结核潜伏感染的独立危险因素(P<0.05)。结论:煤工尘肺结核潜伏感染风险较高,混合工种、工作场所通风情况差是煤工尘肺结核潜伏感染的独立危险因素,应加强煤工尘肺患者结核预防意识,降低感染风险。

结核潜伏感染的研究进展

结核潜伏感染(LTBI)是人体感染结核分枝杆菌后无临床症状但产生持续免疫反应的一种状态。因其有进展为活动性结核病和引起结核传播的风险,尤其在高危人群中风险明显增加,所以值得重视。本文围绕LIBI检测方法、诊断标准、LIBI高危因素、筛查对象及治疗等方面进行了综述,重点对活动性结核病密切接触者、HIV感染、肾移植、肿瘤坏死因子拮抗剂、大剂量糖皮质激素、透析人群、新型生物制剂IL-17和IL-23抑制剂、免疫检查点抑制剂与LIBI之间的关系进行了讨论,提出识别易发展为活动性结核病的高危人群,对这部分高危人群进行筛查同时对符合化学预防性治疗人群积极给予治疗,是降低结核病发生率的重要措施。

个体化护理干预对结核潜伏感染及活动性结核患者的影响

探究个体化护理干预对结核潜伏感染及活动性结核患者的影响。方法 对本院2022年1月-2023年6月治疗的100例结核潜伏感染及活动性结核患者在征得本人同意下通过双盲随机的形式进行分组,分别采用不同的护理方法,对照组接受常规护理,观察组接受个体化护理,对比两组的护理结局。结果 观察组护理后的FVC、FEV1、以及FEV1/FVC指标均高于对照组(P<0.05)。两组护理3个月的急性发作和再入院率无统计学意义(P>0.05),观察组护理6个月、护理1年的急性发作和再入院率以及并发症发生率均低于对照组(P<0.05)。结论 结核潜伏感染及活动性结核患者通过个体化护理能够利于病情稳定控制,降低再入院率以及急性发作率,提高肺功能,促进康复。

T细胞免疫检测和蛋白芯片技术筛查人类免疫缺陷病毒感染者结核潜伏感染的效果分析

目的:分析T细胞免疫检测和蛋白芯片技术筛查人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者结核潜伏感染的效果。方法:选取2021年8月—2023年8月贵阳市公共卫生救治中心收治的HIV感染者86例作为研究对象。对HIV感染者进行T细胞免疫检测及蛋白芯片技术筛查,以结核分枝杆菌培养结果作为“金标准”,比较两种筛查方法检查结核潜伏感染的效能。结果:“金标准”结果显示,86例HIV感染者中66例存在结核潜伏感染。T细胞免疫检测筛查结核潜伏感染的灵敏度、特异度、准确度高于蛋白芯片技术,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:T细胞免疫检测筛查HIV感染者结核潜伏感染的效果优于蛋白芯片技术,灵敏度、特异度、准确度更高,值得临床推广。

安顺市石雕从业者尘肺合并肺结核潜伏感染的现状研究

目的分析安顺市石雕从业者尘肺合并肺结核潜伏感染的现状及影响因素。方法选取2020年6月—2023年6月于本院就诊的石雕从业者146例作为研究对象,所有患者均进行结核感染T细胞检测(QFT),依据检测结果将其分为阳性组和阴性组,比较两组患者一般资料,并通过Logisitic多因素分析法分析石雕从业者尘肺合并肺结核潜伏感染的影响因素。结果146例尘肺患者中,有6例阳性患者,占4.11%,纳入阳性组;其余140例均为阴性,纳入阴性组。阳性组患者中,吸烟占比明显高于阴性组,营养膳食不均衡占比也高于阴性组(P<0.05);Logisitic多因素分析结果显示,吸烟频率≥10支/d、营养膳食不均衡均是尘肺患者QFT阳性的危险因素(P<0.05)。结论安顺市石雕从业者结核潜伏感染发病率高,应当定期地进行体检和黄曲霉毒素(AFT)检查,并降低吸烟量,保障营养均衡。

伪狂犬病毒在潜伏感染猪体内的组织分布

潜伏感染是猪伪狂犬病防治和净化工作中的重要障碍之一。本研究用伪狂犬病毒(PRV)gG-/LacZ+标记毒株感染经过PRV灭活疫苗免疫的PRV阴性仔猪,建立了猪伪狂犬病毒潜伏感染动物模型,再用地塞米松激活PRV在猪体内的潜伏感染。运用免疫组织化学SABC染色法研究了PRV在潜伏感染猪和潜伏感染激活猪体内部分组织的分布情况。结果显示,阳性细胞主要分布在神经系统的大脑、小脑、脑干、三叉神经和视神经以及非神经系统的扁桃体、肺和肾等部位。阳性细胞数量随着攻毒后时间的发展呈现减少的趋势,而注射地塞米松后,阳性细胞数量在上述组织中显著增加。

γ干扰素释放试验在检测结核分枝杆菌潜伏感染中的应用

结核病（tuberculosis,TB）是严重危害人民群众健康的呼吸道传染病,被列为我国法定重大传染病之一。据世界卫生组织估计,全球约有1/3人群存在潜伏性结核感染（latenttuberculosis infection,LTBI）,其中感染人群一生中约有5%～10%会发展为活动性结核[1]。我国为结核病高发国家,LTBI数目十分庞大。根据现有资料显示,我国Mtb感染率为44.5%（结核菌素试验硬结直径≥5mm为阳性）[2]。

EB病毒潜伏感染的套细胞淋巴瘤模型研究

目的:建立EBV潜伏感染的套细胞淋巴瘤模型,为淋巴瘤预防与治疗的研究奠定基础。方法:利用新霉素耐性的重组遗传基因EBV(NeoR EBV)和B95-8 EBV对套细胞淋巴瘤细胞株SP49、SP53和Jeko-1进行感染,选出EBV阳性的MCL细胞株,采用免疫荧光法和Southern blot进行鉴定,采用Western blot和流式细胞仪检测EBV阳性的MCL细胞株的免疫表型及生物学活性。结果:成功获得SP49/EBV、SP53/EBV细胞株,均表达EBER1、EBNA2和LMP1,其免疫表型只有CD38表达增强,两细胞株均具有低增殖功能,凋亡抵抗性,成瘤能力下降等特点。结论:本研究建立的SP49/EBV和SP53/EBV细胞株,具有体内EBV潜伏感染的静息B细胞低增殖活性的特征,可成为研究体内EBV潜伏感染的良好模型。

外周血IFN-γ的检测在结核分枝杆菌潜伏感染诊断中的价值

目的探讨利用酶联免疫斑点(Elispot)法检测外周血结核抗原特异性γ干扰素(IFN-γ)应答反应在诊断结核分枝杆菌潜伏感染的价值。方法将150例健康者按结核暴露程度分成4级,采用Elispot技术检测其外周血单个核细胞(PBMC)结核菌抗原特异性IFN-γ分泌水平;其中111例进行结核菌素皮试(PPD皮试);39例采用全血干扰素试剂(Quantiferon-TB-Gold,QFT-G)进行IFN-γ分泌水平的平行检测。结果采用Elispot检测结果显示体外IFN-γ应答反应水平与结核菌暴露程度成正相关(r=0.4155,P<0.0001),不同暴露程度分级的IFN-γ应答阳性率分别是:4级(55.6%)、3级(33.3%)、2级(16.7%)、1级(6.8%)。不同暴露程度分级与PPD皮试结果的相关性没有统计学意义(r=0.1206,P=0.2073);不同暴露程度分级的PPD皮试反应阳性率分别为4级(33.3%)、3级(27.8%)、2级(11.1%)、1级(22.0%)。对Elispot检测结果与QTF-G检测结果进行平行比较分析,两种方法检测结果没有统计学差异(χ2=0.125,P=0.7237)。结论外周血结核抗原特异性γ干扰素(IFN-γ)应答反应水平与结核菌暴露程度成正相关,Elispot检测体外IFN-γ应答反应在诊断结核分枝杆菌潜伏感染的价值优于PPD皮试,可以用于对潜伏感染者的筛查。