UV激光微束作用于细胞膜的机理研究

本文分别选用DOPC脂质体、非洲爪蟾和洋葱表皮等为材料,初步研究激光微束作用于细胞膜的作用机理,样品经由Nd/YAG激光器产生的355nm的UV激光微束作用,在膜上产生可恢复性小孔,选脂质体上的这种孔作Raman微区扫描,部位分别选在孔中心、孔边缘和孔外区域,得到三种谱图.根据膜的特性,在分子水平上对此作用机理建立了一个分子模型,很好地解释了实验结果和观察到的一些现象.

利用激光微束穿刺法将外源基因导入小麦的研究

用激光微束穿刺法将携带有新霉素磷酸转移酶（ＮＰＴ－Ⅱ）基因的质粒ｐＪＩＴ１０１导入京花１号小麦幼胚细胞。方法是将小麦幼胚细胞进行高渗缓冲液预处理，用微米级的激光微束处理，然后在卡那霉素培养基上筛选出具抗性的愈伤组织及绿色小植株。第一年，从１５０个小麦幼胚中，在卡那霉素培养基上筛选出４株绿苗，取两株进行ＮＰＴ－Ⅱ酶活性分析，测到了ＮＰＴ－Ⅱ酶的活性。第二年重复实验，从２４５个小麦幼胚中，经筛选获得１株绿苗，进行了叶片ＤＮＡＰＣＲ扩增检测，转化的绿色小苗扩增出所导入的ＮＰＴ－Ⅱ基因编码的片段。结果表明，外源ＮＰＴ－Ⅱ基因已导入了小麦，并实现了整合表达。

激光微束切割小冰麦异附加系染色体的研究

利用微束激光并选用适当的功率密度，可将小冰麦异附加系花粉母细胞染色体切割成２～３段。这个技术的建立，使激光微束应用于染色体片段、ＤＮＡ。

激光微束细胞操作系统

提出构建一种用于生物细胞操作的激光微束系统。即由Nd∶YAG激光经物镜聚焦形成的光刀和He Ne激光器经物镜聚焦形成的光镊组成的激光微束系统 ,进行了总体设计、关键部件设计和选择。在构建的激光微束操作实验系统上实现了非接触细胞操作 ,验证了光镊的力学效应。采用Nd∶YAG经显微物镜会聚形成光刀可以对细胞或细胞器进行打孔或切割染色体。

锗硅异质结晶体管单粒子效应激光微束模拟

对国产锗硅异质结双极晶体管(SiGe HBT)进行了单粒子效应激光微束辐照试验,观测SiGeHBT单粒子效应的敏感区域,测试不同外加电压和不同激光能量下SiGe HBT集电极瞬变电流和电荷收集情况,并结合器件结构对试验结果进行分析。试验结果表明:国产SiGe HBT位于集电极/衬底结内的区域对单粒子效应敏感,波长为1064nm的激光在能量约为1.5nJ时诱发SiGe HBT单粒子效应,引起电流瞬变。入射激光能量增强,电流脉冲增大,电荷收集量增加;外加电压增大,电流脉冲的波峰增大;SiGe HBT的单粒子效应与外加电压大小和入射激光能量都相关,电压主要影响瞬变电流的峰值,而电荷收集量主要依赖于入射激光能量。

SRAM激光微束单粒子效应实验研究

结合器件版图,通过对2 k SRAM存储单元和外围电路进行单粒子效应激光微束辐照,获得SRAM器件的单粒子翻转敏感区域,测定了不同敏感区域单粒子翻转的激光能量阈值和等效LET阈值,并对SRAM器件的单粒子闭锁敏感度进行测试。结果表明,存储单元中截止N管漏区、截止P管漏区、对应门控管漏区是单粒子翻转的敏感区域;实验中没有测到该器件发生单粒子闭锁现象,表明采用外延工艺以及源漏接触、版图布局调整等设计对器件抗单粒子闭锁加固是十分有效的。

利用激光微束穿刺法将杀虫蛋白基因导入油菜的研究

利用激光微束照射油菜子叶柄，将来自苏云金杆菌的杀虫蛋白（Ｉｎｓｅｃｔｉｃｉｄａｌｃｒｙｓｔａｌｐｒｏｔｅｉｎ，ＩＣＰ）基因导入油菜细胞中，经植株再生和卡那霉素筛选，获得了转基因植株。对转基因植株进行了ＰＣＲ检测和饲虫实验，发现转基因植株为ＰＣＲ扩增阳性，某些植株表现出了较强的抗虫性。实验结果表明外源抗虫基因已被整合到油菜基因组并得到了表达。

用激光微束穿刺法将双抗虫基因导入红掌的研究

红掌(Anthurium andraeanum Lind.)是世界名贵花卉,其花独特,佛焰苞艳丽,瓶插寿命长,作为切花栽培有很高的经济价值。慈菇蛋白酶抑制剂是来源于慈菇储藏器官(根茎)的一种天然抗虫物质,属于丝氨酸蛋白酶抑制剂类,能抑制胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和激肽释放酶,对某些鳞翅目、双翅目以及鞘翅目等昆虫有毒杀作用。通过激光微束穿刺法将构建的含抗虫基因API-A、API-B和选择性标记基因NPT-Ⅱ的质粒pBUBA导入红掌细胞中,通过卡那霉素抗性筛选和聚合酶链式反应(PCR)技术分析表明,抗卡那霉素的绿苗中大部分为阳性植株。

利用激光微束穿刺法将GUS基因导入百脉根并获得转基因植物的研究

利用激光微束穿刺法将ＧＵＳ基因导入百脉根并获得转基因植物的研究周奕华韩厉玲王兰岚宋桂英陈正华（中国科学院遗传研究所北京１００１０１）ＩｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎｏｆＧＵＳＧｅｎｅｉｎｔｏＬｏｔｕｓａｎｄＡｃｑｕｉｓｉｔｉｏｎｏｆＴｒａｎｓｇｅｎｉｃＰｌａ...

采用激光微束将绿色荧光蛋白基因导入大肠杆菌

将ＮｄＹＡＧ三倍频脉冲激光微束系统用于含有绿色荧光蛋白基因的质粒ｐＳ６５Ｔ的转化，利用激光微束技术在经高渗液处理过的大肠杆菌ＤＨ５α上打孔，将质粒成功导入ＤＨ５α中，通过筛选、检测，证明该方法是一种新的，快速有效的转化方法。

激光微束诱导pSV－β质粒导入Hela细胞的研究

本文报道了用一套Ｎｄ：ＹＡＧ紫外激光微束系统研究基因转移。我们以ｐＳＶ－β质粒（β─半乳糖苷酶基因）作为报道基因，利用紫外激光微束将其导入Ｈｅｌａ细胞中，通过组织化学染色检测到质粒在Ｈｅｌａ细胞中获得表达，在最佳的激光辎照条件下，Ｈｅｌａ细胞的导入表达成功率在８０％以上。本工作是国内首次报道激光微束诱导外源基因进入动物细胞中并获得表达，为激光微束技术在动、植物细胞高效率导入外源ＤＮＡ的研究中摸索到一套经验，也将有力地促进这一技术在细胞工程方面的应用。

利用激光微束力学效应操纵生物体的实验研究

用光线光学方法对光束作用于微粒的力学问题进行分析 .

激光微束技术及其在基因转移研究中的应用

本文中介绍了我们设计和安装的一套激光微束系统,该系统分为二部份:激光源和显微镜.工作波长355nm是由电子调Q Nd:YAG激光经KDP倍频和混频后得到的.这束光从显微镜的左边引入45°反射,再经×100物镜聚焦.光束直径小于1μ.这束激光可给细胞打孔,约在1秒内小孔自行修复,在修复之前荧光物质和质粒可以扩散进细胞.我们成功地把GUS基因导入烟草花粉细胞中并得到瞬间表述,还把DAPI-λDNA导入M85胃癌细胞必观察到兰色荧光.从本工作初步表明这种导入方法很有发展前途.

激光微束在植物外源基因转化上的应用

本文概述了近年来激光微束在植物外源基因转化上的最新进展,激光微束转化法的关键技术及应用。并对其今后的应用前景作了展望。

激光微束技术的研究进展

激光微束技术是激光技术在遗传学和生物学领域中获得许多成功应用之后形成的一门属于边缘学科的新技术,本文简述激光微束系统的研究进展以及它在遗传学,生物学领域中的若干新应用.

激光微束诱导鲶鱼受精卵融合的研究

本文论及激光微束诱导胡子鲶（C．fuscus）受精卵融合的一种技术及其对鲶鱼遗传变异和生长发育的影响。实验表明：一些融合卵发育非常健全；实验所得成年鱼中，有一条体色变为白色、一条变成略带淡紫色，二条O形和O须都有变化；融合鱼体长比对照（未经激光处理）鱼约长1．5倍，体重比对照鱼约重2倍；抗寒性能比对照亦提高1．5℃～2℃．

激光微束诱发家蚕雄核发育的研究

激光微束照射家蚕受精卵,可以诱发雄核发育,孵化率达29%左右。标志卵色的全部雄蚕,表现出发育齐,茧层率高,群体匀整度高等特点。伴生的畸形蚕较少,畸变率只有4%左右。

激光微束与生物微体操纵器

从激光动力学研究的历史沿革出发，简要介绍了激光微束作为一种新型生物微体操纵器在物理和生物两个领域的研究现状和进展．

激光微束与光钳系统及其在生物学中的应用

本文从激光的生物效应出发 ,简要阐述了激光微束与光钳系统的出现历程及其装置构造 ,系统分析了其作用原理 ,并介绍了其作为一新技术 ,在外源基因导入、体外辅助受精、细胞融合和显微操纵染色体与生物大分子等方面的应用状况 ,同时对其应用前景作一展望。

激光微束切割小冰麦异附加系染色体的研究

利用激光微束,并选用适当的功率密度可将小冰麦异附加系花粉细胞染色体切割成2～3个片段,这个技术的建立为激光微束应用于染色体片段DNA微克隆及基因定位提供可能。