伪结核棒状杆菌灭活苗对山羊的免疫效果评价

伪结核棒状杆菌(Cp)是羊体表脓肿及干酪样淋巴结炎(CLA)的重要病原,接种疫苗是防控Cp感染致病最有效的手段之一。以Cp万州株(WZ)作为疫苗株,甲醛为灭活剂,ISA 201 VG为佐剂制备灭活苗,对山羊进行免疫,首免后28 d进行二免,二免后30 d以WZ株攻毒,连续观察65 d。通过检测免疫和攻毒山羊的增质量、体温、血常规、血清免疫球蛋白G(IgG)水平、淋巴结脓肿数量及载菌量等,综合评价Cp灭活苗的免疫保护效果。结果显示:与对照组相比,受免山羊血清IgG抗体在首免后第3、4周和二免后第2~4周均显著升高,且二免IgG抗体明显高于首免。攻毒发现,对照组山羊体温在攻毒后7 d内均高于免疫组,攻毒后1~8周内对照组山羊增质量均低于免疫组,且免疫组山羊脓肿数量及Cp数均明显少于对照组,提示该灭活苗免疫可缓解因Cp感染引起的山羊体质量下降及体温升高,减少Cp攻毒引起的脓肿数量和淋巴结Cp载菌量。综合表明:所制备Cp灭活苗可提高山羊的免疫水平,对该病原感染具有较好的保护作用。

恶性骨肿瘤灭活再植临床研究进展

Jaffe于1972年首先开展HDMTX化疗治疗骨肉瘤.以后经Rosen等学者的发展,化疗方案已趋于成熟.目前,骨肉瘤的生存率已明显提高,有的报告已高达80%.另外,给药途径也由单一的静脉发展到动脉,有的还和热疗结合起来使肿瘤的局部得到进一步的控制,这样肢体恶性肿瘤高位截肢的传统治疗观念就被打破了.

LED白光的亚甲蓝光化学法血浆病毒灭活研究

目的探讨LED白光的亚甲蓝光化学法对血浆中的病毒灭活效果。方法血浆中加入终浓度为1μM的亚甲蓝,以LED白光为光源,比较不同处理方式(10 cm/5 cm照射间距、单侧/双侧照射)、不同照射强度(30000 lx、35000 lx、40000 lx、45000 lx、50000 lx)和不同处理时间点(10 min、20 min、30 min)的血浆中凝血因子的活性及Sindbis病毒的灭活效果。结果在50000 lx照射强度下,随着照射时间的增加,血浆温度逐渐升高,升温幅度为5 cm间距>10 cm间距,双侧照射>单侧照射。5 cm/10 cm间距、单侧/双侧照射对凝血因子Ⅷ和纤维蛋白原(FIB)活性的影响均没有显著差异。以10 cm间距、双侧照射的处理方式作为病毒灭活装置条件参数,用30000 lx、35000 lx、40000 lx、45000 lx和50000 lx的光照强度分别照射5 min后,血浆中Sindbis病毒被灭活,滴度下降均>4 LogTCID50/0.1 mL;照射20 min后,血浆中凝血因子Ⅷ活性>70%、FIB活性>60%。光照强度与凝血因子损失的相关分析表明:不同的光照强度与凝血因子Ⅷ的活性损失没有相关性,光照的强度对FIB的影响表现在照射的20 min以内,照射强度越大FIB活性下降越严重,但照射30 min后不同的光照强度对FIB的影响已没有显著性差异。照射时间与凝血因子的损失高度相关,不同光照强度下凝血因子都随着照射时间的增加而损失。结论LED白光可以作为亚甲蓝病毒灭活方法的新光源,在合适的条件下有效灭活血浆中的病毒,并保留血浆中凝血因子的活性。

甲型流感病毒H1N1型灭活病毒标准物质研究

以人工培养真实病毒为原料,研制了一种甲型流感病毒H1N1型灭活病毒标准物质。该标准物质经化学灭活及灭活效果验证后,联合多家实验室采用数字PCR定量检测方法对拷贝数浓度进行定值,对标准物质的均匀性、稳定性及不确定度进行了评估。结果显示该标准物质均匀性良好,在-80~-70℃保存条件下稳定保存5个月,标准物质最终定值结果为(1384.5±249.3)copies/μL(k=2)。该标准物质可为H1N1型甲型流感病毒检测的全过程提供计量溯源和质量控制支撑,有助于提升相关核酸检测结果的准确性和可靠性。

肝移植术中输注病毒灭活血浆与冰冻血浆对术后指标的影响对比分析

目的探讨肝移植术中输注病毒灭活血浆与输注普通血浆(包括新鲜冰冻血浆和普通冰冻血浆)的疗效差异,为肝移植患者输注病毒灭活血浆的有效性提供实验和理论依据。方法回顾性分析2018年1月至2023年9月期间在本院施行肝移植术的154例患者,根据术中输注血浆的不同,先将患者分为病毒灭活血浆组与普通血浆组。随机在两组内各选取36例患者进行研究。统计学分析比较两组患者基本资料、手术前后相关肝功能指标、凝血指标及术中相关变量的变化。结果两组患者基本资料包括性别、年龄、身高、体重、血型,及术前实验室指标TP、TBIL、IBIL、ALB、ALT、AST、FIB、APTT、PT、INR经过组间比较结果显示,仅ALB微有差异(P<0.05),其余指标差异无统计学意义(P>0.05);术后两组患者TP、TBIL、IBIL、ALB、ALT、AST、FIB、APTT、PT、INR差异均无统计学意义(P>0.05),术中变量包括术中输血浆量、术中输冷沉淀量、术中输血小量板、术中失血量、术中并发症心脏骤停(%)差异均无统计学意义(P>0.05)。结论肝移植患者术中输注病毒灭活血浆与普通血浆疗效无显著差异,但目前认为病毒灭活血浆安全性更高。适合肝移植术中开展应用。

AlGaN基深紫外LED光源灭活柯萨奇病毒研究

为探究在高温热处理AlN模板上制备的不同发光波长AlGaN基LED器件对病毒的灭活效率,本工作在发光波长257~294 nm范围内制备了7组不同发光波长AlGaN基深紫外LED器件,并探究其对柯萨奇病毒灭活效率。实验结果表明,高温热处理AlN模板可以将AlN模板位错密度降低至1.33×10^(7)cm^(-2),为制备高效率AlGaN基LED器件奠定了良好基础;基于高温热处理AlN模板制备的AlGaN基LED器件,在灭活距离2 cm、紫外辐照时间30 s实验条件下,发光中心波长在257~278 nm之间的AlGaN基LED器件对柯萨奇病毒灭活率≥99.90%,而发光中心波长为288 nm、294 nm的LED对柯萨奇病毒灭活率仅为99.47%及96.15%。根据以上研究结果,波长在257~278 nm之间的AlGaN基LED器件适合在病毒消杀领域应用;在本工作实验条件下,波长大于288 nm的AlGaN基深紫外LED器件对病毒灭活效果较差。

罗伊氏乳杆活菌和热灭活菌对小鼠抑郁样行为的影响及作用机制

为了探究罗伊氏乳杆活菌与灭活菌对小鼠肠道菌群失衡引起的抑郁样行为的作用及作用机制,采用头孢曲松钠(Ceftriaxone sodium,CRO)处理构建肠道菌群失衡小鼠抑郁模型,并用罗伊氏乳杆活菌(Live Lactobacillus reuteri,Live LR)和热灭活菌(Heat-killed Lactobacillus reuteri,HK LR)进行干预。采用ELISA试剂盒测定5-羟色胺、5-羟基吲哚乙酸、色氨酸和皮质酮质量浓度;通过H&E染色观察结肠组织形态;通过高通量测序和生物信息学分析对肠道微生物组进行分析。结果表明:Live LR和HK LR干预缓解了小鼠抑郁样行为,修复了CRO引起的肠道菌群失调,并减少了结肠组织炎细胞浸润。两种益生菌的作用机制存在差异,Live LR侧重于肠道菌群的重塑,而HK LR则通过其代谢产物直接发挥抗炎作用。

紫外联合冷等离子体对玉米真菌灭活及毒素降解效果初探

用紫外联合冷等离子体处理对黄曲霉(Aspergillus flavus)、谢瓦曲霉(Aspergillus chevalieri)孢子灭活效果、机制以及对黄曲霉毒素(AFs)、呕吐毒素(DON)降解效果进行探究,结果表明,紫外联合冷等离子体处理80s时使两种真菌孢子完全灭活,并对细胞膜及细胞核造成损伤,处理600s时可灭活70%以上玉米粒携带的两种真菌。降解真菌毒素方面,处理标准品600 s时DON和黄曲霉毒素B族降解率分别超过60%和50%,黄曲霉毒素G族降解率小于50%;玉米粒携带的两种毒素需要较长时间降解,处理20min时DON降解率为36.41%,但AFs降解率不超过30%。紫外联合冷等离子体处理在真菌孢子灭活及真菌毒素降解上有一定应用前景。

基于改良碳青霉烯灭活试验(mCIM和eCIM)对耐碳青霉烯肠杆菌目(CRE)表型及分布研究

分析对耐碳青霉烯肠杆菌目(CRE)表型及分布进行改良碳青霉烯灭活试验(mCIM和eCIM)研究。从我院的患者中收集了103例,时间跨度为2021年1月至2023年1月。在进行临床细菌分离时,排除了同一患者同一部位的重复菌株,最终筛选出了138株CRE菌株。使用全自动细菌鉴定仪进行细菌分离试验,采用PCR法检测CRE耐药基因,分析了mCIM/eCIM与碳青霉烯酶抑制剂增强试验的结果。结果 我院2021年1月-2023年1月共纳入103例患者,从138株CRE菌株中分离出97株肺炎克雷伯菌(占比70.29%),15株黏质沙雷菌(占比10.87%),以及26株大肠埃希菌(占比18.84%)。这些菌株分布在不同的医学科室,其中重症医学科占比最高(56.52%),其次是神经内科重症病房(21.74%)。在这138株CRE菌株中,检测到101株产KPC-2,7株产KPC-3,23株产NDM-1,5株产NDM-5,以及2株同时产KPC-2和NDM-1。对于产KPC的108株菌株,mCIM/eCIM检测准确率为98.15%,与PCR结果的一致性为高。而对于产NDM的28株菌株和同时产KPC和NDM的2株菌株,mCIM/eCIM也能够准确鉴定,但无法区分同时产KPC和NDM的情况。与PCR结果相比,方法 的一致性Kappa值分别为1.000和0.560。在对108株产KPC的菌株进行碳青霉烯酶抑制剂增强试验时,准确鉴定了105株,敏感性为97.22%,特异性为100%。与PCR比较,一致性Kappa值为0.972。对于28株产NDM菌株,该试验准确鉴定了27株,敏感性为96.43%,特异性为100%。与PCR比较,一致性Kappa值为0.976。因此,mCIM和eCIM对CRE型检测敏感性较高,可快速准确鉴定CRE表型,操作简单,且干扰因素较少,具有较高的临床价值。

灭活植物乳杆菌对仔猪生长性能、血液生化指标及腹泻率的影响

试验主要研究灭活植物乳杆菌对仔猪生长性能、血液生化指标及腹泻率的影响。选用45头28日龄的健康杜×长×大三元杂交断奶仔猪,对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ组在基础饲粮中添加0.3 g/kg天蚕素抗菌肽,试验Ⅱ组在基础饲粮中添加0.3 g/kg灭活植物乳杆菌。结果表明,试验Ⅰ组与对照组相比平均日增重(ADG)提高了15.56%(P<0.05),腹泻率降低了7.3%(P>0.05);试验Ⅱ组与对照组相比ADG提高了26.67%(P<0.05),料重比(F/G)降低了13.73%(P<0.05),腹泻率降低了56.92%(P<0.05)。试验Ⅰ组与对照组相比大肠杆菌数量降低了37.25%(P<0.05),沙门氏菌的数量降低了75.07%(P<0.05);试验Ⅱ组与对照组相比大肠杆菌数量降低了40.43%(P<0.05),沙门氏菌的数量降低了90.03%(P<0.05),乳酸菌数量提高了74.59%(P<0.05)。与对照组相比,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组免疫球蛋白G含量均显著提高(P<0.05),分别提高了34.35%和60.31%;与对照组相比,试验Ⅰ组和试验Ⅱ组的血样中免疫球蛋白A、免疫球蛋白M、总蛋白、白蛋白含量都略有所提高的趋势,但差异不显著(P>0.05);与对照组相比,试验Ⅱ组与对照组相比血样中葡萄糖含量提高了15.70%(P<0.05),尿素氮含量降低了42.70%(P<0.05)。由此可见,在基础日粮中添加灭活植物乳杆菌,对于仔猪具有良好的饲喂效果,可改善仔猪生长性能,降低仔猪腹泻率,改善仔猪健康。

1型鸭疫里默氏菌3种不同佐剂灭活疫苗的比较

分别研制 1型鸭疫里默氏菌 (RA)灭活铝胶疫苗、RA灭活蜂胶疫苗和 RA灭活油乳剂疫苗 ,并从副作用和免疫保护率等方面对此 3种疫苗作了比较。结果表明 ,灭活油乳剂疫苗免疫保护率最高 ,免疫后 9d保护率达 83.3%,14d为 92 .8%～ 10 0 %,2 4d时仍为 10 0 %;其次是灭活蜂胶疫苗 ,灭活铝胶疫苗最差 ,但副作用则从铝胶疫苗、蜂胶疫苗、油乳剂疫苗依次增强。对于同一种疫苗 ,颈部皮下注射的副作用明显小于腿部肌肉注射。因此 ,建议选择油乳剂疫苗以颈部皮下注射途径免疫接种雏鸭 ,即可获得较长时间的保护。

高压热杀菌处理时D-果糖对枯草芽孢杆菌芽孢灭活的抑制机制

研究高压热杀菌(high-pressure thermal sterilization,HPTS)处理时D-果糖对枯草芽孢杆菌芽孢灭活的抑制作用。HPTS处理压力为200、600 MPa,处理温度为25、65、75℃,处理时间为20 min,D-果糖质量分数为0、15%、30%、60%。使用流式细胞术检测处理前后芽孢内膜的损伤情况,采用傅里叶红外光谱对处理前后芽孢蛋白质和内膜脂质进行分析,以揭示蛋白质结构与内膜脂质相态的变化。HPTS处理后芽孢内膜通透性增大,内膜完整性受损,然而随着添加的D-果糖质量分数的升高,芽孢内膜脂质的相态由液晶态逐渐转变为凝胶态,内膜稳定性增加、通透性降低、完整性提高,且芽孢蛋白质的有序二级结构的含量增加。不添加D-果糖时,600 MPa、75℃处理20 min后,芽孢死亡了5.31 lg(CFU/mL),芽孢悬浮液OD_(600)下降到0.41,2,6-吡啶二羧酸(2,6-pyridinedicarboxylic acid,DPA)泄漏率达93.56%,内膜受损的芽孢比率达到80.95%,芽孢蛋白质的α-螺旋和β-折叠结构含量分别下降到16%和17%;而当添加的D-果糖质量分数提升到60%时,相同条件的HPTS处理后,芽孢存活数量上升了1.69 lg(CFU/mL),芽孢悬浮液OD_(600)上升了0.09,内膜受损的芽孢比率减少了20.74个百分点,芽孢蛋白质的α-螺旋和β-折叠结构含量分别回升到25%和28%。D-果糖抑制了HPTS处理对芽孢结构的破坏和孢内关键物质的泄漏,且这种作用与D-果糖质量分数呈正相关。

介质阻挡放电协同Ag-Cu/TiO_(2)-CS复合光催化剂灭活生物气溶胶的实验研究

选用大肠杆菌和杂色曲霉菌作为代表性细菌和真菌以制备生物气溶胶,采用溶胶-凝胶法制备了壳聚糖(CS)修饰的Ag-Cu/TiO_(2)-CS复合光催化剂,使用自制线管式介质阻挡放电反应器协同光催化剂对生物气溶胶进行灭活实验研究,考察初始浓度、放电功率、单一及协同处理对生物气溶胶的灭活影响,并通过SEM、胞外蛋白质与电解质测定探究了生物气溶胶灭活机理.结果表明:Ag、Cu掺杂比为2:2mol%时光催化剂灭菌效果最好,处理时间为10.5s时对大肠杆菌的灭活率为0.61-lg.相比介质阻挡放电单一处理,协同光催化处理后,菌体结构破损加重,胞内物质外泄增多,灭菌效率明显提升,在60W/催化灭活条件下,细菌、真菌的灭活率分别为2.89-lg、2.87-lg,且有效抑制生物气溶胶的复活,灭活后48h内细菌、真菌的复活率分别为-3.40-lg、-3.39-lg.

光动力技术对副溶血性弧菌的灭活作用

该文探究了姜黄素介导的光动力技术(photodynamic technology,PDT)协同柠檬酸处理对副溶血性弧菌的灭活效果和机理。通过平板菌落计数法测定光动力技术对副溶血性弧菌的灭活效果、扫描电镜观察细菌形态变化,酶标仪检测PDT处理后菌体活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平以及过氧化氢酶(catalase,CAT)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、腺苷三磷酸酶(adenosine triphosphatase,ATPase)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)的活性变化,琼脂糖凝胶电泳分析基因损伤程度。结果表明,PDT杀菌效果随姜黄素浓度增加、光照时间延长和柠檬酸(0.5 mg/mL)的添加而显著增强(在最高浓度姜黄素条件下P<0.05)。当姜黄素浓度为2μmol/L,柠檬酸质量浓度为0.5 mg/mL,光照2 min后,PBS中的副溶血性弧菌菌落总数从7.43 lg CFU/mL降至0。光敏剂姜黄素被蓝光激活后通过电子转移和能量转移产生具有强氧化性的ROS,菌体内ROS水平不断升高,胞内抗氧化酶(CAT、SOD)活性下降,ATPase活性下降,上清液中AKP活性上升,细菌发生严重形变甚至趋向于扁平,DNA条带变暗甚至消失,最终导致细胞死亡。综上,姜黄素介导的PDT对副溶血性弧菌有较强的杀灭作用,添加柠檬酸显著加强杀菌效果,为PDT在水产食品安全防控领域的推广应用提供了参考。

紫外联合过氧甲酸灭活真菌孢子的效能与机制

探索了紫外/过氧甲酸(UV/PFA)联合工艺对两种典型致病真菌(黑曲霉和黄曲霉)的灭活效能与机制.结果显示,UV/PFA在8min时可实现黑曲霉1.21-log、黄曲霉2.08-log的灭活,且效率高于单独PFA和单独UV的效率之和,表现出协同作用.联合灭活的机制主要是UV能活化PFA生成强氧化性的羟基自由基(·OH)对细胞膜造成破坏,提高胞内活性氧水平增大细胞应激,也便于PFA渗透进入细胞内部,从而增强灭活效率.联合灭活过程中起主要作用的是UV,其次是·OH,二者在黑曲霉灭活中的贡献率分别87%和11%,在黄曲霉灭活中的贡献率分别为71%和27%.此外,经过联合灭活后,真菌再生长的时间推迟,再生长的最大潜能也得到抑制.

木耳灭活原生质体融合育种研究

以黑木和毛木耳为亲本菌株 ,通过灭活原生质体融合 ,经过初筛和复筛 ,一株新的稳定的木耳高产菌株被选育出来。黑木耳和毛木耳原生质体分别被热灭活 (6 5℃ ,30min)和紫外线灭活 (30W ,30cm ,10min) ,双亲存活率为 3 5× 10 -7～ 3 2× 10 -8。在聚乙二醇诱导下融合继续生存 ,亲本原生质体融合被实现 ,重组频率为4 3× 10 -5。

介质阻挡放电联合脉冲电晕放电灭活水中维氏气单胞菌的效果与机制

将介质阻挡放电(DBD)与脉冲电晕放电(PCD)联合用于水中维氏气单胞菌的灭活,分析了DBD与PCD的协同效应,考察了电压、pH值、载气种类和流量等对DBD联合PCD(DBD/PCD)灭活维氏气单胞菌的影响,探讨了维氏气单胞菌的失活机制,分析了活性物质的种类和作用,并通过斑马鱼攻毒实验验证了DBD/PCD的安全性.结果表明:DBD/PCD对维氏气单胞菌的灭活效果明显高于DBD和PCD单独灭活效果,且二者的协同系数均大于1;经过420s的处理,DBD/PCD可将维氏气单胞菌的浓度降低7个数量级;增加放电电压可显著提高维氏气单胞菌的灭活效率;碱性条件下,氧气作为载气有利于维氏气单胞菌的灭活;在0.5~1.5L/min的范围内,空气流量对灭活效率的影响并不明显.DBD/PCD系统中产生的活性物质首先作用于维氏气单胞菌外膜,使其破裂,然后进入细胞内造成胞内蛋白和毒力基因的损伤,最终导致维氏气单胞菌失活.DBD/PCD系统产生的活性物质·OH、^(1)O_(2)和O_(2)·^(-)在维氏气单胞菌灭活过程中起到了重要作用.斑马鱼攻毒实验表明:DBD/PCD是一种安全高效的水体病原微生物灭活方法.

4种甲醛对Sabin株脊髓灰质炎病毒灭活动力学的比较

目的观察4种甲醛对脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型Sabin株的灭活效果。方法用4种甲醛(终浓度为92.5μg/mL)对3批脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型Sabin株进行灭活,微量滴定法测定病毒感染性滴度进行病毒灭活验证实验,绘制灭活动力曲线;酶联免疫吸附测定法检测灭活病毒液D抗原含量。结果 4种甲醛对3批脊髓灰质炎病毒Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型Sabin株灭活后,病毒感染性滴度均成下降趋势。在37°C灭活1 d滴度直线下降1 000 CCID50/mL以上,灭活到第4天均检测不到病毒;灭活后的病毒液D抗原含量回收率均大于80%,且4种甲醛对3批脊髓灰质炎病毒灭活后抗原影响无差异(P>0.05)。结论 4种甲醛对脊髓灰质炎病毒Sabin株样品灭活彻底,对脊髓灰质炎病毒Sabin株的D抗原破坏小,能较好地保持疫苗的有效成分,为甲醛质量控制及供应商筛选提供依据。

牛血清γ射线辐照灭活及其对品质影响的研究

为探究γ射线辐照灭活对牛血清品质的影响,以胎牛血清、新生牛血清为材料,研究8、10、11、12、13kGy 5个不同辐照剂量对牛血清中大肠埃希菌噬菌体的影响,以及12、20、25、30、35、40 kGy 6个不同辐照剂量对牛血清中主要成分含量、细胞增殖的影响。结果表明,≥12 kGy剂量的γ射线辐照能灭活牛血清中的病原微生物;辐照对除血红蛋白外的牛血清主要成分含量无显著影响,也不会降低内毒素含量;牛血清经≤35 kGy辐照剂量处理后,其Sp2/0-Agl4细胞的倍增时间和克隆率、Mv1 Lu细胞倍增时间均符合《中华人民共和国药典2020年版四部》新生牛血清标准。本研究可为γ射线辐照灭活在牛血清中的应用提供理论依据与技术支持。