益生菌结合灵芝多糖对高血脂小鼠脂质代谢和抗氧化的影响

探究益生菌结合灵芝多糖对高血脂小鼠脂质代谢异常和抗氧化酶活性的影响。结果表明:与高脂饲料对照组(HG)相比,活性益生菌组(HG-P)、多糖组(HG-G)、活性益生菌+多糖组(HG-PG)小鼠血清GLU、TC、TG、LDL-C水平均显著降低,HDL-C水平显著升高,IL-1β、IL-6、TNF-α水平显著降低,小鼠肝脏中TC、TG水平和ALT、AST活性显著降低,SOD、CAT、POD活性显著升高,MDA含量显著降低,其中HG-PG组表现的效果最好。研究还表明益生菌结合灵芝多糖显著提高了小鼠肝脏中AMPKα/Nrf2信号通路AMPKα、Nrf2、HO-1 mRNA的表达水平,同时降低了脂质代谢基因SREBP1、FAS、LP1 mRNA的表达水平。综上所述,益生菌结合灵芝多糖具有改善高血脂小鼠脂质代谢异常、缓解细胞氧化应激损伤、减少肝脏组织脂质积累的作用。

灵芝多糖对糖尿病肾病小鼠的改善作用及机制研究

研究了灵芝多糖(Ganoderma lucidum polysaccharide,GLP)对糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)小鼠的作用。成功构建DN小鼠模型后GLP干预。检测小鼠空腹血糖和24 h尿蛋白含量,测定尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)和肌酐(serum creatinine,Scr)水平,结合伊红和马松染色观察肾脏病理形态,采用酶联免疫吸附试验测定肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)、白细胞介素6(interleukin-6,IL-6)和白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)的水平,使用蛋白免疫印迹法检测晚期糖基化终产品受体(receptor for advanced glycation end-products,RAGE)、Ⅳ型胶原蛋白(collagen type IV,COL-Ⅳ)和诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)蛋白的表达含量。DN组小鼠空腹血糖、24 h尿蛋白、BUN和Scr及其肾组织中TNF-α和IL-6水平均升高(P<0.05),血清中IL-10水平降低(P<0.05),RAGE、COL-Ⅳ和iNOS蛋白的表达量升高(P<0.05);而治疗组小鼠病理损伤及纤维化改变均有改善,定量指标得到好转。GLP可以改善DN小鼠,机制与抑制RAGE信号通路有关。

海南市售灵芝多糖含量比较研究

目的 选择灵芝多糖作为评价指标,初步评价海南市售灵芝质量。方法 选取海南中部五指山、保亭、琼中地区的市售灵芝进行询价比价,筛选出10种常见市售灵芝作为研究对象,通过蒽酮—硫酸显色法显色,使用紫外分光光度计测定吸收度,参考《中国药典》2020年版一部灵芝质量标准和四部通则,折干折纯计算市售灵芝中多糖含量,比较质量,同时参考零售价格判断质量与价格是否具有相关性。结果 海南中部地区10种常见市售灵芝质量不同,不同品种灵芝多糖含量有明显差异,不同商店的相同品种质量也不同,质量与零售价格不成正比。结论 除紫芝和赤芝外,其余灵芝品种质量标准不完善甚至缺失,政府相关部门应加强市售灵芝监管,同时建议消费者理性购买和使用灵芝。

灵芝多糖的构效关系、提取工艺及药理作用研究进展

灵芝是一种广受欢迎的药食两用真菌,因其极高的药用价值而被广泛地研究和栽培。灵芝多糖作为重要的生物活性成分,具有抗肿瘤、免疫调节、抗炎、降血糖、保护肝脏、调节中枢神经等作用。本文通过灵芝多糖的构效关系、提取工艺和药理作用3个方面做出了详细的归纳和阐述,以期为灵芝多糖的开发和综合应用提供理论依据。

黑灵芝多糖对脂多糖诱导的IEC-6肠上皮细胞损伤的保护作用

目的:探究黑灵芝多糖(PSG-1)对脂多糖(LPS)诱导的IEC-6肠上皮细胞损伤的保护作用及其机制。方法:采用LPS构建肠上皮细胞IEC-6损伤模型,研究PSG-1对IEC-6细胞的干预效果。采用细胞计数盒(cck-8)法测定PSG-1干预对细胞活力的影响。运用western-blot技术探究细胞中肠道紧密连接蛋白和环氧化酶cox-2表达的变化,基于转录组测序技术分析PSG-1潜在的保护机制并对其进行验证。结果:PSG-1干预可以显著提升LPS造成的细胞活力降低和肠道紧密连接蛋白ZO-1、Claudin-1和Occludin的表达,而且PSG-1对LPS引起的cox-2异常高表达具有抑制效果。转录组测序及划痕试验和蛋白免疫印迹试验结果表明:PSG-1能显著增强细胞的迁移能力并抑制促凋亡蛋白Bax、Caspase-3和Caspase-9的表达。结论:PSG-1对LPS诱导的肠上皮细胞IEC-6具有显著的保护作用,细胞迁移和凋亡可能是PSG-1发挥其保护效应的关键途径。

菌草灵芝多糖肽对闽西南黑兔生长性能、血液生化指标及免疫机能的影响

【目的】研究日粮中添加菌草灵芝多糖肽(JCGLPP)对闽西南黑兔生长性能、血液生化指标及免疫功能的影响,为JCGLPP在肉兔中的应用提供依据。【方法】选取(33±2)d、初始体质量(655.65±25.90)g、健康状况良好的断奶闽西南黑兔公兔100只,随机分为4组,对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别饲喂在基础饲粮中添加50,100和150 mg/kg JCGLPP的日粮,56 d后统计腹泻率和死亡率,测算平均日采食量(ADFI)、平均日增重(ADG)以及料重比(F/G);屠宰后取背腰最长肌,测定pH值、滴水损失率和剪切力;采集血清,测定总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)质量浓度,尿素氮(UN)、丙二醛(MDA)浓度,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性以及IgG、IgA、IgM和IL-6质量浓度;计算心脏、肝脏、肾脏、圆小囊、脾脏、胸腺和蚓突器官指数;测定十二指肠、空肠、回肠黏膜炎性因子IL-1α、IL-2和分泌型免疫球蛋白(sIgA)质量浓度及肠道淀粉酶、纤维素酶和胰蛋白酶活性。【结果】①各组间兔的终末体质量、平均日增重、平均采食量和料重比均无显著差异(P>0.05);对照组兔的腹泻率和死亡率最高,Ⅱ组兔的腹泻率显著低于对照(P<0.05)。②试验组兔肌肉的pH、滴水损失和剪切力均与对照无显著差异(P>0.05)。③Ⅱ组兔血液中的TP、ALB质量浓度及SOD、GSH-Px活性显著高于对照(P<0.05),而UN和MDA浓度显著低于对照(P<0.05)。④Ⅱ组兔血液中的IgG、IgA、IgM质量浓度均显著高于对照(P<0.05),而IL-6质量浓度各组差异不显著(P>0.05)。⑤各组兔免疫器官指数差异均不显著(P>0.05);试验组兔十二指肠、空肠、回肠IL-1α、IL-2和sIgA质量浓度大多显著高于对照(P<0.05),肠道淀粉酶活性均显著低于对照(P<0.05),Ⅰ组兔的肠道纤维素酶和胰蛋白酶活性、Ⅱ组兔的肠道胰蛋白酶活性显著高于对照(P<0.05)。【结论】JCGLPP对闽西南黑兔的促生长作用不明显,但能提高机体的抗氧化和免疫能力,降低腹泻率和死亡率,添加量以100 mg/kg为宜。

灵芝多糖饮料对高脂联合STZ诱导的糖尿病小鼠糖脂代谢的改善作用

为探究长白山赤灵芝子实体多糖饮料对糖尿病小鼠的糖脂代谢的影响及保护作用。本研究利用高脂饮食结合腹腔注射链脲佐菌素诱导法建立糖尿病小鼠模型,设立正常对照组、模型对照组,并以盐酸二甲双胍为阳性对照,灌胃低、中、高不同剂量的灵芝多糖饮料探究对糖尿病小鼠的糖脂代谢改善作用,测定经灵芝多糖饮料作用后小鼠的空腹血糖值、胰岛素抵抗指数以及甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、超氧化物歧化酶活力、丙二醛等相关指标的变化情况。结果表明:与模型组相比,灵芝多糖饮料低、中、高剂量组的小鼠空腹血糖值分别下降了35.46%、39.05%、42.28%,胰岛素抵抗指数分别极显著(P<0.01)下降43.10%、50.25%、54.18%;高剂量组小鼠甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇含量分别下降46.83%、50.79%,高密度脂蛋白胆固醇上升107.81%;此外,灵芝多糖饮料能够提高糖尿病小鼠血清中超氧化物歧化酶活力,极显著降低丙二醛含量(P<0.01)其中L-GLB组、M-GLB组、H-GLB组分别下降18.66%、30.15%、44.54%,因此,灵芝多糖饮料可以缓解糖尿病引发的氧化应激,改善糖尿病引起的脏器肿大,保护DM小鼠的肝脏、肾脏和脾脏,在一定程度上能够改善由长期高血糖导致的肝脏损伤。

复配灵芝多糖与牛乳酪蛋白水解物对巨噬细胞和小鼠的免疫调节作用

该文基于牛乳酪蛋白水解物和灵芝多糖的免疫调节功效,探究其复配物对巨噬细胞和小鼠的免疫调节作用及其潜在协同效应。利用低中高剂量(100、200、500µg/mL)复配物样品及其单组分(200µg/mL)样品,测定巨噬细胞增殖能力、吞噬能力、分泌NO、IL-6、TNF-α的能力,测定小鼠免疫脏器指数、淋巴细胞增殖能力、迟发型变态反应程度和NK细胞活性。结果显示:与空白组相比,中高低剂量复配物、灵芝多糖和牛乳酪蛋白水解物均能显著提高巨噬细胞的吞噬能力(116.78%、133.47%、137.73%、131.07%、124.63%)、NO释放量(22.19、27.77、29.49、28.82、26.17μm)、IL-6释放量(0.317、0.323、0.293、0.309、0.297μg/mL)、TNF-α释放量(0.42、0.50、0.54、0.52、0.47μg/mL)(P<0.05)。复配物低中高剂量均能增加小鼠足趾厚度差(0.305、0.354、0.429 mm)、提高脾淋巴细胞转化能力(25.30%、34.20%、36.13%)、NK细胞活性(0.36、0.53、0.74)(P<0.05)。研究结果表明,复配物能促进巨噬细胞和小鼠的免疫调节作用,并且存在一定的协同作用。

反复冻融法制备灵芝多糖工艺优化、结构表征及抗氧化活性分析

为提高灵芝多糖的提取得率,获得抗氧化活性更高的多糖组分,利用响应面试验优化反复冻融提取灵芝多糖的工艺条件,采用乙醇分级法对冻融多糖进行分离得到3种多糖(GLPf30、GLPf60、GLPf80),评价热水浸提(G. lucidumpolysaccharidewater, GLPw)、反复冻融多糖(GLPf)及乙醇分级的多糖GLPf30、 GLPf60、GLPf80的抗氧化活性,以高效阴离子交换色谱(HPAEC)和红外光谱(FT-IR)进行结构表征。结果显示,最佳冻融条件为:溶胀比14:1(mL/g),冻融时间140 min,冻融次数3次。在此条件下,灵芝多糖提取得率为2.71%,明显高于传统水提(2.36%)。HPAEC和FT-IR结果表明,5种多糖均是由六种单糖(岩藻糖、葡糖胺、半乳糖、葡萄糖、木糖和甘露糖)组成的以吡喃糖为骨架的酸性多糖,但它们的单糖组成和理化性质有较大差异,尤其是GLPf30的氨基葡萄糖(GlcN)占比最高(达到37.66%)。GLPf30的抗氧化能力明显高于其他两种多糖(GLPf60和GLPf80)及其前体物GLPf。研究结果为灵芝多糖的合理开发和高值化利用提供科学依据。

灵芝多糖对葡聚糖硫酸钠诱导小鼠溃疡性结肠炎的影响

目的探究灵芝多糖(GLP)对葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的小鼠溃疡性结肠炎(UC)的影响。方法36只雄性KM小鼠随机分为正常组、模型组、美沙拉秦组和灵芝多糖低、中、高剂量组,每组6只。灵芝多糖低、中、高剂量组分别灌胃50、100、200 mg/kg灵芝多糖溶液,美沙拉秦组灌胃300 mg/kg美沙拉秦混悬液,正常组和模型组灌胃等量生理盐水,持续21 d,每日1次。前14 d,所有小鼠均饮用正常水,后7 d,除正常组外,其他组小鼠均采用自由饮用3%DSS溶液7 d构建UC模型。造模期间记录小鼠体质量并进行疾病活动指数(DAI)评分;取材后测量小鼠结肠长度并称重;HE染色法观察小鼠结肠组织病理学变化;ELISA法测定小鼠结肠组织样本中炎症因子TNF-α、IL-6、IL-1β、IL-10含量。结果与模型组比较,灵芝多糖中、高剂量组能够在一定程度上延缓体质量下降和DAI上升(P<0.01),结肠长度显著增加(P<0.01),结肠重量显著减少(P<0.01),结肠组织病理学损伤程度减轻,炎性细胞浸润减少,结肠组织中TNF-α、IL-6、IL-1β含量显著降低(P<0.01),IL-10含量显著升高(P<0.01)。结论灵芝多糖对DSS所导致的UC小鼠结肠组织病理损伤具有改善作用,可能与其调控促炎因子和抗炎因子分泌水平的平衡有关。

含灵芝多糖的复方制剂免疫调节功能及安全性评价

目的:评价含灵芝多糖的复方制剂免疫调节功能及安全性。方法:参照保健食品检验与评价技术规范(2003版),通过测定正常小鼠淋巴细胞增殖能力、耳肿胀程度、溶血空斑数、吞噬百分率和吞噬指数、自然杀伤(NK)细胞活性,分别从细胞免疫、体液免疫及非特异性免疫综合评价含灵芝多糖的复方制剂免疫调节功能;通过小鼠急性经口毒性试验、细菌回复突变(Ames)试验和大鼠30 d喂养试验综合评价其安全性。结果:在细胞免疫试验中,受试物对刀豆蛋白A(ConA)诱导的淋巴细胞增殖能力和耳肿胀程度均无显著影响(P>0.05);在体液免疫试验中,受试物低剂量组(0.17 g/kg)、中剂量组(0.33 g/kg)、高剂量组(1.00 g/kg)分别使小鼠抗体生成细胞数目提高10.98%、12.08%、17.63%(P<0.05);在非特异性免疫试验中,受试物中剂量组、高剂量组能显著提高单核巨噬细胞的吞噬能力(P<0.05)和NK细胞活性(P<0.01)。受试物对雌雄小鼠急性经口剂量最大耐受量(MTD)均大于42.56 g/kg,属无毒级物质;Ames试验结果阴性,未见致突变作用;大鼠30 d喂养试验中,受试物各剂量组对大鼠体质量、周食物利用率、血常规指标、血液生化学指标及主要脏器系数均未产生显著影响(P>0.05),组织学检查未发现明显病理变化。结论:含灵芝多糖的复方制剂可以调节小鼠免疫功能,作为保健食品食用是安全的。

灵芝多糖治疗糖尿病足的网络药理学分析

目的:运用网络药理学方法研究灵芝多糖(ganoderma lucidum polysaccharide,GLP)治疗糖尿病足(diabetic foot,DF)的作用机制。方法:通过查阅文献、TCMSP、PharmMapper数据库获得GLP化学成分信息及其作用靶点。通过GeneCards和OMIM数据库检索DF相关靶点。基于在线软件Venny 2.1获得二者交集靶点。运用Cytoscape软件构建“成分-靶点-疾病”网络图。使用STRING数据库和Cytoscape软件进行蛋白互作(PPI)网络分析,根据度值筛选出核心靶点。结合DAVID数据库对核心靶点进行基因本体(GO)功能和京都基因与基因组百科全书(KEGG)分析。结果:GLP与DF的交集靶点有98个,其中非受体酪氨酸蛋白激酶(SRC)、热休克蛋白90α编码基因(HSP90AA1)、HRas原癌基因(HRAS)、Ras同源基因家族成员A(RHOA)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(AKT1)、表皮生长因子受体(EGFR)等20个靶点可能是GLP治疗DF的关键靶点,参与癌症通路(pathways in cancer)、血管内皮生长因子(VEGF)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、脂质和动脉粥样硬化(lipid and atherosclerosis)、糖尿病并发症中的晚期糖基化终末产物及其受体(AGE-RAGE)等关键通路。结论:GLP在治疗DF方面显示出多靶点、多通路协同作用的特点,这将为中药多糖治疗糖尿病足研究提供有益的参考。

赤灵芝多糖对ETEC所致肠炎的影响及机制研究

目的研究赤灵芝多糖(ganoderma lucidum polysaccharides,GLP)对产肠毒素型大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)诱导小鼠肠炎的作用效果及机制。方法选用24只6~8周龄雄性SPF级昆明小鼠,利用ETEC菌液腹腔注射诱导建立小鼠肠炎模型。采用随机数字表法分为为正常组、ETEC感染组、ETEC感染+高剂量GLP组,ETEC感染+低剂量GLP组,每组6只。采用HE染色观察小鼠小肠组织病理变化,采用免疫印迹法检测各组小鼠小肠组织中C反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、肿瘤坏死因子(tumour necrosis factor,TNF)-α和白细胞介素(interleukin,IL)-6蛋白的表达情况。检测各组小鼠小肠组织中Toll-样受体4(Toll-like receptor4,TLR4)、核因子κB p65亚基(nuclear factor-κB p65,NF-κB p65)、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor88,MyD88)mRNA的表达水平,探查GLP通过TLR4核因子κB(nuclear factor-κB,NF-κB)信号通路对ETEC诱导的小鼠肠道炎症的调控作用。结果与正常组比较,ETEC感染组小鼠出现精神萎靡,食欲减弱,小肠绒毛破损,组织中可发现大量的炎性浸润,疾病活动指数(disease activity index,DAI)呈上升趋势(P<0.05),小鼠小肠组织中TLR4、NF-κB p65、MyD88 mRNA的相对表达量和CRP、TNF-α、IL-6的蛋白表达水平增高(P<0.01)。与ETEC感染组比较,ETEC感染+不同剂量组中小鼠精神状态和食欲有所改善,小鼠小肠组织中TLR4、NF-κBp65、MyD88的mRNA相对表达量均降低(P<0.01)。ETEC感染+高剂量组中小鼠小肠组织CRP、TNF-α、IL-6蛋白表达水平降低(P<0.01),ETEC感染+低剂量组降低程度差异无统计学意义(P>0.05)。与ETEC感染+低剂量组比较,ETEC感染+高剂量组小鼠小肠组织TLR4、MyD88 mRNA的相对表达量和IL-6蛋白表达水平均降低(P<0.05)。结论GLP可有效缓解ETEC诱导的小鼠肠道的炎症,且可能通过调控TLR4/NF-κB信号通路发挥抗炎作用,其作用效果可能与浓度呈正比。

重复利用型磁性酶在提取灵芝多糖及三萜中的应用研究

目的 制备一种可重复利用型磁性纳米粒子Fe_(3)O_(4)固定化纤维素酶提取灵芝中多糖和三萜的成分,提高灵芝多糖和三萜的提取率及纤维素酶的重复利用率。方法 通过制备磁性纳米Fe_(3)O_(4),合成磁性纳米Fe_(3)O_(4)@SiO_(2),用APTES进行功能化修饰,得到氨基修饰的纳米粒子,两步法固定化纤维素酶。测量固定化酶的相对酶活性进行纤维素酶的重复利用性实验,采用酶辅助超声先水提再醇提提取灵芝有效成分。采用紫外分光光度计通过蒽酮-硫酸测定灵芝多糖含量、齐墩果酸测定灵芝三萜含量。结果 固定化酶相对活性循环5次相对酶活性在100%左右,灵芝提取物多糖提取率为5.3%,三萜提取率为2.0%。结论 磁性Fe_(3)O_(4)纳米粒子载体固定化纤维素酶具有良好的可重复利用性,减少纤维素酶的使用量。使用超声辅助固定化酶经过水提加乙醇提取有效提高了灵芝多糖及三萜的提取率。

中药灵芝多糖抗衰老作用的研究进展

人类衰老是不可避免的自然过程,其过程与器官功能逐渐丧失和再生能力下降相关。中医药在抗衰老领域具有悠久的历史,其理论独特,优势显著,是抗衰老研究的热点。灵芝作为常用的抗衰老中药,具有多种保健和药用功效。灵芝多糖是发挥灵芝大部分抗衰老治疗功能和性能的最具生物活性的成分。本综述回顾了灵芝多糖在抗衰老研究领域的进展以及其抗衰老的具体机制,以充分发挥其天然优势和独特价值,为中药抗衰老的研发和合理应用提供科学依据和重要参考。

灵芝多糖改善类风湿关节炎病理进展的作用机制探析

类风湿关节炎是一种复杂疾病,其发病机制尚未完全阐明,治疗药物也随着发病机制的研究在不断的开发和探索中。近年来,天然药物在治疗类风湿关节炎中的研究取得了显著成就,如在抗炎、抗氧化、免疫调节、促凋亡、抑制血管生成等方面具有丰富的治疗靶点。灵芝多糖是从中药灵芝子实体中获取的最丰富的生物活性成分之一。依据现代药理学的研究,推测灵芝多糖可通过抑制血管生成、抑制氧化应激、抑制骨破坏、阻断炎症细胞因子的表达、调节免疫作用等途径干预类风湿关节炎病理进程,缓解病情。通过探讨灵芝多糖对类风湿关节炎的作用机制及潜在治疗靶点,以期为临床治疗类风湿关节炎提供理论依据。

核磁共振氢谱法在灵芝多糖品质控制中的应用

建立并优化了灵芝多糖的氢-1核磁共振波谱(1H-NMR)快速检测方法。以异头氢区(δ4.42~5.40 ppm)为“指纹”鉴定区,通过比较样本光谱与标准光谱的相似性测定灵芝多糖,并开展了方法学验证。结果显示,利用该方法检测8批自提赤芝多糖的结果与标准图谱相似性均达到0.95以上,显示了良好的重现性。建立的1H-NMR快速检测法能快速、准确地检测灵芝多糖,具有操作简单、重复性好、专属性强、精确度高的特点。

氯化胆碱/乳酸/愈创木酚三元共熔溶剂提取灵芝多糖的工艺及其抗氧化活性研究

本研究采用氯化胆碱/乳酸/愈创木酚三元共熔溶剂(DES)来提取灵芝多糖(GLPs),优化DES溶剂提取灵芝多糖的工艺参数,采用傅里叶变换红外光谱(Fourier Transform Infrared Spectroscopy,FT-IR)和凝胶渗透色谱(Gel Permeation Chromatography,GPC)对GLPs结构进行了表征,并研究其体外抗氧化活性,最后,采用密度泛函理论初步研究了DES提取GLPs的分子机制。结果表明,在含水量为50%、提取温度为80℃、提取时间为1 h、料液质量体积比为1:30 g/mL的条件下,GLPs得率达9.20%±0.27%。FT-IR和GPC分析表明,4000~500 cm-1区域GLPs具有典型的多糖结构,GLPs的数均分子量为8057 Da,多分散系数为1.6。体外抗氧化活性测试显示,当GLPs质量浓度为5 mg/mL时,其总还原力为0.67±0.04。此外,GLPs对DPPH、OH和ABTS+自由基的清除能力的IC50值分别为2.366、6.179和2.440 mg/mL。密度泛函理论模拟分析表明,DES与葡萄糖之间的结合能为65.29 kcal/mol,远高于水与葡萄糖之间的结合能(20.38 kcal/mol),DES提取多糖是通过三重氢键相互作用来实现的。研究成果从分子水平上阐明了DES提取GLPs效果优于传统热水提取方法的内在机制。

灵芝多糖及其菌群代谢产物对HepG2细胞胰岛素抵抗的改善作用及机制

目的:探讨灵芝多糖及其菌群代谢产物对HepG2细胞胰岛素抵抗状态的影响及其作用机制。方法:以胰岛素(10^(-3)μmol/L)和地塞米松(10μmol/L)联合建立HepG2细胞胰岛素抵抗模型(insulin resistant HepG2,IRHepG2);使用CCK-8法评价灵芝多糖(Ganoderma lucidum polysaccharides,GLP)和灵芝多糖肠道菌群代谢物(Ganoderma lucidum polysaccharide flora metabolite,GLP-F)的细胞毒性;使用葡萄糖试剂盒、糖原试剂盒法评价GLP和GLP-F对IR-HepG2细胞葡萄糖消耗及糖原合成的影响;使用Western blot法检测了GLP与GLP-F对IR-HepG2细胞胰岛素信号级联中的关键蛋白IRS-1、AKT、GSK-3β、GLUT2、以及PEPCK的磷酸化或表达量的影响。结果:GLP和GLP-F均能显著增加IR-HepG2细胞的葡萄糖摄取量及糖原合成量(P<0.05),且GLP-F对IR-HepG2细胞葡萄糖消耗促进作用显著高于GLP(P<0.05);Western blot实验显示,GLP和GLP-F均能促进IR-HepG2细胞IRS-1、P-AKT、P-GSK-3β、GLUT2蛋白的表达,抑制PEPCK蛋白的表达,且GLP-F对PEPCK的抑制效用显著高于GLP(P<0.05)。结论:GLP与其在肠道菌群的介导下代谢产生的GLP-F具有同样的缓解肝脏胰岛素抵抗的生物学作用,并且在促进IR-HepG2细胞葡萄糖消耗以及抑制其糖异生限速酶活性方面,GLP-F比GLP具有更加显著的效果。

灵芝多糖结构及其组成研究

采用沸水回流法从赤灵芝子实体中提取多糖，经Sevage法除蛋白，乙醇沉淀，离心、流水透析、浓缩、冻干后得灵芝多糖，单糖经乙酰化处理进行外标法定量，并利用苯酚-硫酸法、紫外、红外及X衍射光谱法、凝胶分子排阻色谱-蒸发散射检测器法、气相和气质谱色谱法进行多糖组分、含量、结构和分子量分析研究，结果表明： 灵芝多糖为米黄色，得率为2%左右，其含量≥43%，红外光谱显示灵芝多糖结构主要为β-糖甘键连接的吡喃型葡聚糖，其多糖的主要单糖组分为葡萄糖，含量为89%左右，并含有其他少量的单糖组分D-阿拉伯糖、D-木糖、D-甘露糖、D-半乳糖。其多糖主要为同均糖，多糖为非晶型结构，分子量主要分布在8×10^4～2×10^5之间，分子质量主要为2×10^5的生物大分子。