TRAF6/Runx2信号轴对牙龈卟啉单胞菌诱导血管平滑肌细胞钙化调控作用的研究

目的:探讨肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor receptor-associated factor 6,TRAF6)/Runt-相关转录因子-2(Runt-related-transcription factor-2,Runx2)信号轴对牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)诱导小鼠血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cell,VSMC)钙化的调控作用。方法:用热灭活的P.gingivalis和VSMC共培养,在21 d时检测VSMC的钙化沉积和钙含量;并检测VSMC收缩标志物α-平滑肌肌动蛋白(alpha smooth muscle actin,α-SMA)和平滑肌22α(smooth muscle 22 alpha,SM22α),以及成骨标志物碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)、骨钙素(osteocalcin,OC)和Ⅰ型胶原A1(type I collagen A1,ColⅠA1)的基因和蛋白表达。此外,检测P.gingivalis诱导VSMC后TRAF6和Runx2的表达,进一步通过抑制TRAF6,检测其对Runx2表达以及VSMC和主动脉的钙化情况的作用。结果:P.gingivalis可促进VSMC发生钙化沉积以及钙含量增加(P<0.05);并且P.gingivalis能显著促进成骨标志物的表达,抑制VSMC收缩标志物表达(P<0.05);当抑制TRAF6表达时,能降低P.gingivalis诱导VMSC中Runx2的表达,并抑制VSMC和主动脉壁的钙化沉积,显著降低VSMC中钙含量(P<0.05)。结论:P.gingivalis促进VSMC成骨标志物表达,抑制收缩标志物表达,最终诱导VSMC发生钙化;并进一步证实P.gingivalis可通过TRAF6/Runx2信号轴调控VSMC和主动脉钙化。

牙龈卟啉单胞菌:从毒力因子到疫苗研发

牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)是革兰氏阴性口腔致病菌之一,其定植于牙龈内厌氧菌生物膜中,引起局部牙周炎。Pg由定植的牙龈局部通过体液扩散到全身引起多种疾病,如:心脑血管疾病、自身免疫性疾病、阿尔兹海默症、癌症等。药物难以到达牙龈部位且持续给药易引起菌体的耐药,不能达到根除的效果。因此,选择合适的抗原位点刺激机体免疫系统产生中和抗体是疫苗研究的关键。本文对Pg的致病及其机制进行了概括,并全面综述了相关的毒力因子,为清除和预防Pg感染提供靶标,同时从疫苗学角度评价和分析这些毒力因子作为疫苗的潜力。

光动力疗法辅助治疗慢性牙周炎对牙龈卟啉单胞菌的影响

目的评估抗微生物光动力疗法(aPDT)辅助龈下刮治和根面平整术(SRP)对牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)检出率的影响。方法选取慢性牙周炎患者32人,随机分为实验组(光动力组)(16例)和对照组(16例),实验组进行龈下刮治和根面平整+光动力疗法,对照组进行龈下刮治和根面平整术,评价基线、治疗后3、6个月的微生物指标。采集龈下菌斑和唾液样本,对慢性牙周炎致病菌P.g进行聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)检测,观察P.g菌的检出率。结果实验组和对照组在随访期的P.g阳性率均有所降低。对照组第3、6个月与基线相比,P.g阳性率改善不显著(P>0.05),但实验组无论在第3、6个月,与基线相比都显著降低(P<0.05),且在第3个月时两组间有统计学差异(P<0.05)。结论抗微生物光动力疗法辅助治疗慢性牙周炎可以更为有效地抑制P.g。

血清CCL21、CYTL-1水平与慢性牙周炎患者牙龈卟啉单胞菌感染及牙周临床指标的相关性

目的探讨血清趋化因子21(CCL21)、细胞因子样蛋白1(CYTL-1水平)与慢性牙周炎(CP)患者牙龈卟啉单胞菌(PG)感染及牙周临床指标的相关性。方法选取2019年6月至2023年5月在本院就诊的303例CP患者为实验组研究对象,并选取同期206例非CP患者作为对照组。根据CP患者病情严重程度分为轻度CP组(183例)、中度CP组(86例)、重度CP组(34例),分析患者一般资料及牙周指标的差异。检测血清中CCL21和CYTL-1表达水平。分析血清CCL21和CYTL-1表达水平与PG感染和牙周临床指标的相关性;采用ROC曲线分析CCL21和CYTL-1对CP的诊断价值。结果实验组PG的阳性率(68.32%)远高于对照组(17.96%)(P<0.05)。实验组中血清CCL21表达水平(270.82±33.77pg/mL)显著高于对照组(237.56±40.07pg/mL)(P<0.05),血清CYTL-1表达水平(174.41±29.85ng/mL)显著低于对照组(206.44±38.23ng/mL)(P<0.05)。随着CP患者病情的不断加重,PG的阳性率、血清CCL21表达水平和牙周指标呈现不同程度的上升趋势;而血清CYTL-1水平随着病情严重程度呈下降趋势(P<0.05)。CCL21表达水平与PG阳性感染和牙周指标均呈正相关(r=0.566、0.486、0.444、0.417、0.528,均P<0.05);CYTL-1表达水平与PG阳性感染和牙周指标均呈负相关(r=-0.584、-0.451、-0.433、-0.407、-0.456,均P<0.05);CCL21和CYTL-1两项者联合诊断CP结果优于任何一项单独分析(Z两项联合-CCL21=4.142,Z两项联合-CYTL-1=3.824;P<0.05)。结果CP患者血清中CCL21表达上调,CYTL-1表达下调与PG感染和牙周临床指标密切相关,且二者联合对CP有一定的诊断价值。

牙龈卟啉单胞菌通过miR-21-5p/RASA1/ERK信号通路促进食管鳞癌自噬

目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Pg)促进食管鳞癌(ESCC)细胞自噬发生的分子机制。方法Pg感染siAtg7或氯喹(CQ)预处理的KYSE70细胞和KYSE140细胞,Western blot检测Atg7、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ和p62蛋白,荧光共聚焦显微镜检测mRFP-GFP-LC3标记ESCC细胞自噬流,CCK-8法检测ESCC细胞活性,迁移小室检测ESCC细胞迁移及侵袭能力。miR-21-5p inhibitor、RASA1过表达或U0126分别阻断miR-21-5p/RASA1/ERK信号通路,如上检测自噬相关表型变化。免疫组化检测ESCC组织中Pg丰度和LC3蛋白表达,RT-PCR检测ESCC及其癌旁组织中miR-21-5p的表达,统计分析Pg、LC3和miR-21-5p相关性。结果Pg感染诱导KYSE70细胞和KYSE140细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达上调、p62蛋白表达下调,增加了mRFP-GFP-LC3标记细胞中的红色、绿色和黄色荧光斑点数目和荧光强度,同时促进KYSE70细胞和KYSE140细胞增殖、迁移和侵袭能力增加,上述Pg诱导的ESCC细胞表型改变被CQ或siAtg7预处理逆转。miR-21-5p inhibitor、U0126或RASA1过表达质粒的预处理,也同样逆转了Pg对ESCC细胞自噬的促进作用。Pg丰度与miR-21-5p、LC3蛋白表达呈正相关。结论Pg通过miR-21-5p/RASA1/ERK信号通路促进ESCC自噬发生。

牙龈卟啉单胞菌感染在食管鳞癌中的作用及机制研究

食管癌是常见的消化道恶性肿瘤之一,预后差,生存率低。食管癌病因复杂,包括遗传、环境、微生物等多种因素。近年来,微生物在癌症的发生和发展中的作用成为研究热点。作为牙周病最重要病原体,牙龈卟啉单胞菌在食管鳞癌的发生、发展中起重要作用。该文就牙龈卟啉单胞菌与食管鳞癌发生发展的关系及发病机制作一综述,以期为食管癌防治提供新思路。

牙龈卟啉单胞菌通过GARP促进TGF-β/SMAD轴介导食管鳞状细胞癌细胞的上皮间质转化

目的:阐明牙龈卟啉单胞菌(Pg)诱导食管鳞状细胞癌(ESCC)细胞发生上皮间质转化(EMT)的分子机制。方法:KEGG分析Pg诱导的ESCC差异表达基因富集的生物学通路,WB和/或免疫荧光法检测Pg诱导的ESCC细胞中糖蛋白A重复优势蛋白(GARP)、TGF-β、pSMAD/SMAD、Snail、Oct4和EMT相关分子表达的变化,ELISA检测TGF-β1水平的变化,免疫组织化学法检测ESCC组织中GARP和TGF-β1的表达规律,Transwell实验和动物实验验证Pg对ESCC的促进作用。结果:ESCC细胞感染Pg后,TGF-β、Hippo、PI3K/Akt等信号通路被激活;Pg感染刺激ESCC细胞分泌总TGF-β1和活性TFG-β1的水平升高(均P<0.01),使SMAD2/3磷酸化并发生核转位,诱导N-cadherin、Snail、Oct4等蛋白表达升高、E-cadherin蛋白表达降低,由此促进ESCC细胞的迁移、侵袭和裸鼠皮下移植瘤的生长(均P<0.01)。在ESCC细胞中沉默GARP表达后,逆转了Pg所诱导的上述ESCC细胞表型变化。Pg丰度高的ESCC组织中TGF-β1和GARP蛋白表达高于低丰度的ESCC组织,且Pg丰度与TGF-β1、GARP表达存在正向关联(P=0.0015)。结论:Pg通过GARP激活TGF-β/SMAD轴促进ESCC细胞发生EMT,进而促进ESCC细胞的迁移、侵袭和生长,清除Pg或阻断TGF-β信号转导则可阻断上述Pg对ESCC的促进作用。

牙龈卟啉单胞菌促进阿尔茨海默病的机制研究进展

阿尔茨海默病(Alzheimer’s disease,AD)是最常见的神经退行性疾病之一。牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)感染与AD密切相关。本文综述了P.gingivalis及其毒力因子在AD发生发展过程中的多重作用及其机制,旨在深入阐明两者之间的内在联系。P.gingivalis可通过多种途径与AD发生发展相关联。首先,P.gingivalis可以增加神经炎症、促进淀粉样蛋白和Tau蛋白沉积、破坏血脑屏障等途径参与AD病理进程。其次,P.gingivalis分泌的牙龈蛋白酶能增加血脑屏障通透性并进入脑内诱导病理损伤是其促进AD的重要机制。临床样本检测也支持P.gingivalis或其效应分子促进AD病理进展。因此,P.gingivalis可能是AD的一个环境易感因素或可调控的风险因素。目前P.gingivalis在AD中的确切作用机制和P.gingivalis与其他可能影响AD的因素之间的关联研究不明确。本文深入分析P.gingivalis促进AD的分子机制,为研制P.gingivalis相关的AD新型防治策略提供参考。

不同釉质黏结剂对牙龈卟啉单胞菌和变形链球菌的影响

背景:光固化型和含氟光固化型釉质黏结剂对酸蚀后的牙釉质表面有一定封闭作用,含氟光固化型釉质黏结剂还能通过释放氟离子实现防龋功能,但缺乏对氟化物较长时间释放的研究,尤其缺乏经历1-3个月氟化物释放后局部致病菌量的变化信息。目的:分析青少年正畸治疗患者上前牙使用不同组分釉质黏结剂黏结固定矫治器引发的龈下菌斑中牙龈卟啉单胞菌和变形链球菌表达变化。方法:选择2016年1-12月就诊于上海市口腔医院接受正畸治疗的青少年患者90例,其中男43例,女47例,平均年龄(13.27±1.12)岁。采用随机数字表法将90例患者分为3组:化学固化组应用Unite™黏结树脂进行固定矫治器的黏结,光固化组应用Transbond XT光固化树脂进行固定矫治器的黏结,含氟光固化组应用GC光固化正畸黏结用水门汀进行固定矫治器的黏结,每组30例。在黏结托槽当天(初始黏结)及第1,2,3个月复诊时收集患者上前牙龈下菌斑标本,应用PCR技术检测牙龈卟啉单胞菌和变形链球菌的增殖表达量。结果与结论:①组内比较:随着黏结时间的增加,化学固化组3个月复诊时的牙龈卟啉单胞菌增殖表达显著高于初始黏结时(P<0.05);光固化组1个月复诊时的牙龈卟啉单胞菌增殖表达低于初始黏结时(P<0.05);含氟光固化组1,2个月复诊时的牙龈卟啉单胞菌增殖表达均低于初始黏结时(P<0.05)。化学固化组复诊1,2,3个月时的变形链球菌表达高于初始黏结时(P<0.05);含氟光固化组复诊1,2,3个月时的变形链球菌增殖表达均低于初始黏结时(P<0.05);光固化组复诊时的变形链球菌增殖表达与初始黏结时比较差异无显著性意义(P>0.05);②组间比较:1个月复诊时,光固化组、含氟光固化组牙龈卟啉单胞菌增殖表达低于化学固化组(P<0.05);2,3个月复诊时,含氟光固化组牙龈卟啉单胞菌增殖表达低于光固化组、化学固化组(P<0.05)。1,2,3个月复诊时,光固化组、含氟光固化组变形链球菌增殖表达低于化学固化组(P<0.05),含氟光固化组变形链球菌增殖表达低于光固化组(P<0.05)。③结果显示,在固定正畸中,使用不同组分的釉质黏结剂黏结托槽后,短期内对患者口内牙龈卟啉单胞菌和变形链球菌的增殖表达有不同程度影响,其中含氟光固化釉质黏结剂在托槽黏结初期有助于减少牙釉质脱矿、龋病和牙周炎症的发生。

牙龈卟啉单胞菌在肺癌中的相关研究与进展

牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis)是引发牙周炎的一种核心病原微生物,不仅与慢性牙周炎等口腔疾病密切相关,近年来被发现与癌症的发生、发展及预后均具有显著相关性。肺癌作为全球发病与死亡人数均为首位的恶性肿瘤,一直都是研究者关注的重点与热点。肺癌的发病原因复杂,涉及多种因素,包括吸烟、职业因素、空气污染、电离辐射、饮食与营养、遗传因素等。研究者们也开始关注到口腔微生物群与全身健康的关系,特别是与肺癌之间的联系。本文总结了牙龈卟啉单胞菌在肺癌中的相关研究最新进展,主要包括病因、致病机制等,并探讨了其作为肺癌潜在治疗靶点的可能性,旨在为肺癌的预防和治疗策略提供新的思路与方向。

牙龈卟啉单胞菌在非酒精性脂肪肝病进展中的作用

以牙龈卟啉单胞菌为代表的牙周致病菌不仅危害口腔健康,还与非酒精性脂肪肝病等口腔外疾病有着重要联系。牙龈卟啉单胞菌及其产物可通过血行途径和肠道途径等多种途径促进非酒精性脂肪肝病的发展,本文就相关作用途径及可能机制作一综述。

检测牙龈卟啉单胞菌胶体金试纸条的制备与应用

目的制备简单、快速检测唾液P.gingivalis的胶体金试纸条。方法采用识别P.gingivalis不同表位的单抗E10、G3建立双抗夹心ELISA体系,鉴定双抗夹心ELISA识别P.gingivalis的特异性及敏感性。利用单抗E10、G3制备胶体金试纸条,检测胶体金试纸条识别P.gingivalis的特异性。应用胶体金试纸条与实时定量PCR检测受试者唾液P.gingivalis并比较二者检测P.gingivalis的差异。结果单抗E10、G3建立双抗夹心ELISA体系可特异性识别P.gingivalis,识别敏感性≥5×10^(7)CFU/mL。单抗E10和G3制备的胶体金试纸条特异性识别P.gingivalis。胶体金试纸条与实时定量PCR分别检测受试者唾液P.gingivalis,试纸条与PCR检测对牙周炎的检出效果无统计学差异,检测P.gingivalis的细菌数量无统计学差异。胶体金试纸条检测唾液P.gingivalis,牙周炎组、牙周健康组阳性率分别为40%、10%。结论制备出检测P.gingivalis的胶体金试纸条,可特异性检测P.gingivalis,具有检测唾液中P.gingivalis的潜力。

放射治疗对食管鳞癌患者口腔牙龈卟啉单胞菌的清除作用

目的检测食管鳞癌患者放疗前、中、后口腔牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)的变化,探讨放射治疗对口腔Pg的清除作用。方法30例经病理证实的食管鳞癌患者,采用Elekta-precise计划系统制定适形调强放疗计划,处方剂量为50~50.4 Gy/25~28次,放疗前、中、后每周1次收集患者口腔拭子(每人6份,共180份),用qPCR法进行Pg定量检测。统计学数据采用秩和检验分析。结果30例食管鳞癌患者初始口腔Pg检测结果为:60%(18/30)为阴性,40%(12/30)为阳性,其中12例阳性患者在放疗结束后83.33%(10/12)转为阴性,16.67%(2/12)仍为阳性(2例未转阴患者口腔Pg量较放疗前明显减少(P<0.05)。结论食管鳞癌患者在接受食管肿瘤部位放射治疗过程中,口腔Pg可被同时清除或减少。

牙龈卟啉单胞菌外膜囊泡在口腔疾病中的作用及其机制的研究进展

牙龈卟啉单胞菌是一种与慢性牙周炎密切相关的革兰阴性球杆菌,其产生的外膜囊泡作为一种特殊的毒力因子在口腔疾病的致病中发挥着重要的作用。外膜囊泡是细菌释放的纳米级球状结构,主要由细菌的外膜和周质成分组成。外膜囊泡被释放到环境中后参与了口腔中多种细菌的共聚集和生物膜的形成,并将毒力因子输送到机体的各个组织器官中。本文主要探讨牙龈卟啉单胞菌外膜囊泡毒力蛋白质在常见口腔疾病中与宿主的相互作用及其机制,旨在为后续相关研究提供参考。

两种代谢法荧光标记牙龈卟啉单胞菌及其在活体成像中的效果比较

目的探讨两种代谢法荧光探针对牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)的影响,并比较两种荧光探针标记的Pg在小动物活体成像中的应用效果。方法本研究通过单位伦理委员会审查及单位实验生物医学伦理委员会实验动物福利伦理分会批准。Pg通过生物正交反应整合四酰化N-叠氮基乙酰半乳糖胺(N-azidoacetylgalactosamine,Ac4GalNAz),再通过点击化学反应实现了Cy5-二苯并环辛炔(Cy5-Dibenzocyclooctyne,Cy5-DBCO)、Cy7-DBCO标记。根据细菌不同标记状态进行分组:Pg组(对照,未经荧光标记的Pg)、Cy5-Pg组(Cy5-DBCO标记的Pg)、Cy7-Pg组(Cy7-DBCO标记的Pg)。细菌活死染色试剂盒检测Pg、Cy5-Pg、Cy7-Pg的活性;Pg、Cy5-Pg、Cy7-Pg分别刺激人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblast,HGF)后检测HGF白介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-8的mRNA水平和HGF增殖能力;与大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)共培养检测荧光标记的Pg的稳定性;用小动物活体成像系统(in vivo imaging system,IVIS)检测系列浓度梯度的Cy5-Pg、Cy7-Pg的荧光强度。最后,将Cy5-Pg、Cy7-Pg分别经口灌饲给C57BL/6J小鼠,IVIS分别检测Cy5或Cy7信号强度,计算信噪比。结果代谢法可以被应用于活的Pg的荧光标记,Cy5、Cy7标记Pg的最佳浓度分别为20μmol/L、30μmol/L。Pg、Cy5-Pg、Cy7-Pg中活死细菌所占面积比值分别为1.86、1.85、1.88(F=0.318,P>0.05)。Cy5-Pg、Cy7-Pg、Pg刺激HGF 6 h后,HGF的IL-6、IL-8 mRNA水平分别比Ctrl组(无细菌刺激组)升高了7.86、7.46、6.56倍(IL-6,F=40.886,P<0.001)和12.43、13.03、13.71倍(IL-8,F=18.781,P<0.01),3个实验组间无明显差异(P>0.05)。Cy5-Pg、Cy7-Pg、Pg以不同MOI(multiplicity of infection)刺激HGF,与Ctrl组(无细菌刺激组)相比,HGF的增殖能力均显著下降(MOI=10~4∶1,F=153.52,P<0.001;MOI=10~5∶1,F=331.21,P<0.001;MOI=10~6∶1,F=533.65,P<0.001),3个实验组间差异无统计学意义(P>0.05)。Cy5-Pg或Cy7-Pg与E.coli共培养的24 h内,仅有非常少的E.coli被标记上荧光,且3 h内荧光强度几乎无衰减。Cy5-Pg、Cy7-Pg的荧光强度与浓度呈正线性相关(R2=0.97)。Cy5-Pg或Cy7-Pg灌饲至小鼠体内后,在1 h、3 h时,Cy7-Pg在小鼠腹部成像的信噪比分别为Cy5-Pg的4.24倍(t=6.893,P<0.01)、3.77倍(t=4.407,P<0.05);Cy7-Pg在分离出的胃肠道内成像的信噪比为Cy5-Pg的5.19倍(t=4.418,P<0.05)。结论代谢法荧光标记不影响Pg的活性、免疫调节能力和毒性。在小动物活体成像中Cy7具有比Cy5更好的成像效果,为研究牙周炎和全身疾病的联系提供了实验基础。

牙龈卟啉单胞菌对口腔鳞状细胞癌化疗耐药行为的影响

目的:研究口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)肿瘤中牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)对OSCC化疗治疗过程中化疗耐药性的影响。方法:使用原位免疫杂交的方法检测67例OSCC患者肿瘤组织中P.gingivalis的含量,使用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK8)实验检测OSCC细胞在P.gingivalis感染后化疗药物的细胞毒性作用,使用Western blot实验检测OSCC细胞在P.gingivalis感染后耐药蛋白的表达。结果:OSCC上皮组织中P.gingivalis含量比非肿瘤区域上皮组织中P.gingivalis含量高,P.gingivalis的感染降低了化疗药物紫杉醇对OSCC细胞的杀伤作用(P<0.05),在P.gingivalis感染后耐药蛋白P-糖蛋白在肿瘤细胞中的表达显著提高。结论:OSCC患者肿瘤组织中P.gingivalis含量较高,可能与OSCC化疗耐药相关。

灌胃牙龈卟啉单胞菌对2型糖尿病小鼠结肠机械屏障及免疫屏障影响的研究

背景牙龈卟啉单胞菌(Pg.)是牙周炎的主要致病菌,研究发现Pg.能够通过口腔-肠道途径对2型糖尿病(T2DM)在内的全身疾病产生影响,而其具体机制尚不完全明确。目的探究Pg.是否通过改变肠道机械屏障及免疫屏障对T2DM产生影响。方法40只SPF级小鼠,随机挑选24只构建T2DM模型,建模成功小鼠中挑选16只分为模型组(DM组,n=8)和模型+Pg.组(PD组,n=8),其余16只小鼠分为空白对照组(N组,n=8)和Pg.组(n=8)。建模后观察小鼠体质量和空腹血糖(FPG),第5周进行口服葡萄糖耐量试验(OGTT),绘制OGTT曲线并计算曲线下面积(AUC)。第7周起Pg.组和PD组灌饲Pg.菌液,连续灌饲5周。采用酶联免疫吸附测定脂多糖(LPS),实时荧光定量PCR检测结肠紧密连接蛋白及炎症因子,苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠结肠组织病变。采用Pearson相关性或Spearman秩相关分析探究小鼠FPG与结肠紧密连接蛋白mRNA表达及血清LPS含量的关系。结果灌胃前第2~6周DM组体质量高于N组、Pg.组,PD组体质量高于N组,第3~6周PD组体质量高于Pg.组(P<0.05)。第9~11周N组、Pg.组体质量高于DM组、PD组,第11周PD组体质量低于DM组(P<0.05)。第3~6周PD组FPG高于N组、Pg.组,第4~6周DM组高于N组、Pg.组(P<0.05)。第7~11周Pg.组FPG低于DM组、PD组,PD组高于N组,第10、11周PD组高于Pg.组(P<0.05)。DM组AUC高于N组、Pg.组,PD组高于N组、DM组、Pg.组,PD组LPS高于N组、DM组(P<0.05)。PD组紧密连接蛋白1(ZO-1)低于N组,DM组闭合蛋白低于N组,PD组闭合蛋白低于N组、DM组、Pg.组,PD组白介素(IL)-17A低于N组、Pg.组,N组IL-10高于DM组、Pg.组、PD组,PD组肿瘤坏死因子α高于N组、DM组、Pg.组,Pg.组、PD组Toll样受体4高于N组(P<0.05)。相关性分析结果表明,FPG与LPS呈正相关,与闭合蛋白、ZO-1呈负相关(P<0.05)。病理结果显示Pg.组和DM组固有层可见结缔组织增生,伴淋巴细胞灶性浸润,PD组固有层伴淋巴细胞灶性浸润。结论Pg.可能通过破坏肠道机械屏障及免疫屏障导致LPS入血,加重T2DM小鼠糖代谢紊乱。

牙龈卟啉单胞菌上调CCL20的表达对口腔鳞状细胞表型的影响

目的 探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.g)通过诱导CCL20的表达对人口腔鳞状细胞癌(Oral squamous cell carcinoma, OSCC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响,进一步明确CCL20对口腔癌细胞表型的影响。方法 收集2021-2023年就诊于本院颌面肿瘤外科44例患者的临床资料、外周血和OSCC组织标本,另收集22例健康志愿者外周血作为对照组。通过免疫组化和ELISA检测人口腔鳞癌组织和血清中CCL20的表达。通过体外培养人口腔鳞状细胞癌CAL27和SCC25细胞,建立细胞细菌共培养模型,采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测CAL27、SCC25细胞和P.g组中CCL20表达情况;运用CCK-8、划痕和Transwell实验检测P.g和CCL20对各组细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响。结果 人口腔鳞状细胞癌组织中CCL20的表达显著高于癌旁组织(P<0.05);与control组相比,感染P.g的CAL27和SCC25细胞中CCL20的mRNA和蛋白水平明显上调(P<0.05)。在P.g感染下,CAL27和SCC25细胞的增殖、迁移和侵袭能力均得到增强(P<0.05),而阻断CCL20表达后,P.g对口腔癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力减弱(P<0.05)。结论 P.g通过上调CAL27和SCC25细胞中CCL20的表达来促进口腔鳞癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力。

河南食管鳞癌高低发区口腔健康和牙龈卟啉单胞菌感染状况比较

目的比较分析河南食管鳞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)高发区和低发区无症状人群中口腔卫生和牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)感染特征,为ESCC病因学预防提供理论依据。方法选择河南ESCC高发区1388个和毗邻低发区486个无症状当地居民,通过面对面的问询方式收集人口学特征并评估口腔健康状况,采集口腔拭子和外周血样本,实时定量PCR检测Pg,比较分析ESCC高发区和低发区口腔健康状况和Pg感染特征,Logistic回归分析口腔Pg丰度对口腔健康不良的影响。结果河南ESCC高发区无症状研究对象中度和重度牙龈出血、牙齿缺失>17颗、每天刷牙多于1次、Pg感染等百分比高于低发区研究对象,口腔Pg丰度与不良口腔健康指征显著相关,并显著增加ESCC高发区研究对象牙结石、牙龈出血和牙齿缺失的发生风险。结论河南ESCC高发区无症状居民口腔卫生不良和Pg感染率显著高于紧邻的低发区人群,且口腔高丰度Pg显著增加口腔卫生不良指征的发生风险,为ESCC高发区易感人群食管癌病因预防提供了理论依据。

牙龈卟啉单胞菌调节小胶质细胞炎症小体表达促进神经炎症的机制研究

目的探讨牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)的代谢产物通过激活炎症小体(NOD-,LRR-and pyrin domain-containing protein 3,NLRP3)促进神经炎症反应的作用及机制。方法使用P.gingivalis上清处理小胶质细胞HMC3,采用CCK8、实时荧光定量PCR、Western Blot等方法分别检测P.gingivalis上清对小胶质细胞HMC3的细胞活力、细胞NLRP3信号通路激活以及线粒体功能验证。结果P.gingivalis上清在5%时,显著激活小胶质细胞HMC3的NLRP3,增加相关凋亡相关斑点样蛋白(apoptosis-associated spotlike protein containing a CARD,ASC)、胱天蛋白酶1(Caspase1)、炎症因子(IL-1β)(P<0.05);且线粒体功能相关蛋白表达和线粒体膜电位降低。加入NLRP3的抑制剂(MCC950)后,10nM MCC950显著增强细胞活力,抑制相关胱天蛋白酶1(Caspase1)、凋亡相关斑点样蛋白(ASC)、炎症因子(IL-1β)(P<0.05)的表达;同时恢复了线粒体功能。结论P.gingivalis通过激活NLRP3促进小胶质细胞炎症反应发生,其机制可能与线粒体功能有关。