牛膝多糖对雏鸡免疫功能的影响

文章旨在研究牛膝多糖对雏鸡免疫功能的影响。试验将120只1日龄雏鸡随机分为4组,每组3个重复,每个重复10只鸡(公母各半)。在常规饲料中分别添加200、150、100、0 mg/kg牛膝多糖。所用雏鸡连续饲喂至30日龄,每组取10只进行取样。计算动物机体免疫器官指数,MTT检测T细胞增殖活性,Griess检测巨噬细胞释放NO能力,ELISA检测血清总IgG水平。结果表明,在雏鸡饲料中添加中剂量(150 mg/kg)的牛膝多糖能显著提高雏鸡免疫器官指数、T细胞增殖活性、巨噬细胞释放NO能力和血清总IgG水平(P<0.05)。结论:牛膝多糖在一定程度上对雏鸡的免疫功能具有增强作用,从而提高机体抗病能力,饲料中牛膝多糖最适添加量为150 mg/kg。

牛膝多糖的生物学功能及在动物生产中的应用研究进展

牛膝多糖是从牛膝根中提取所得的水溶性果聚糖,主要由葡萄糖、甘露糖和果糖3种单糖组成。牛膝多糖具有提高机体免疫、增强机体抗氧化能力和维护肠道菌群平衡等多种生物学功能,在畜禽生产中具有较高的应用研究价值。文章介绍了牛膝多糖的化学结构及提取工艺,总结了牛膝多糖的生物学功能,分析其在动物生产中的应用研究进展,为牛膝多糖在动物生产中的进一步推广与应用提供参考。

牛膝多糖抗肿瘤研究进展

随着全球工业化进程加快,人们生活水平提高,环境污染加剧,肿瘤的发病率呈不断上升的趋势。肿瘤分为良性和恶性两种,其中恶性肿瘤不仅降低患者的生活质量,而且威胁其生命安全,甚至导致死亡。随着对牛膝多糖药理作用及作用机制的研究,越来越多的证据表明,牛膝多糖可通过调控肿瘤微环境、发挥免疫调节作用及改善机体的血液流变性,以抑制肿瘤细胞的生长,达到抗肿瘤的作用。该文对牛膝多糖的抗肿瘤作用、免疫调节作用、改善机体的血液流变性等相关研究进行综述,以期对肿瘤治疗及药物研发提供新的思路。

牛膝多糖硫酸酯的合成及其抗病毒活性

从中药牛膝中提取得到的一种新多糖化合物一牛膝多糖，用不同的硫酸化试剂合成牛膝多糖硫酸酯。研究了最佳反应条件，其产物水溶性好，呈中性，最高产率达８２．１１％，取代度（Ｄｓ）···达到三以上，硫含量达２１％以上。根据牛膝多糖的分子结构，多糖分子中的羟基已最大限度地被酯化。体外抗病毒试验初步表明牛膝多糖硫酸酯有很强的抑制乙型肝炎病毒ＨＢｓＡｇ和ＨＢｅＡｇ的活性，对Ｉ型单纯性疱疹病毒也有明显的抑制力。

牛膝多糖对人胸腔巨噬细胞的激活作用

目的：研究牛膝多糖对巨噬细胞的激活作用。方法：０３１２ 、０６２５ 、１２５０ 、２５００ 和５０００ ｍｇｍｌ 牛膝多糖对体外培养的人胸腔巨噬细胞进行诱导培养２４ ｈ ，用全自动生化分析仪测定胸腔巨噬细胞内乳酸脱氢酶与酸性磷酸酶活性，用放射免疫分析法测定胸腔巨噬细胞内肿瘤坏死因子α与白细胞介素６ 的含量。结果：牛膝多糖能上调胸腔巨噬细胞内乳酸脱氢酶和酸性磷酸酶活性，并能显著诱导胸腔巨噬细胞表达肿瘤坏死因子α和白细胞介素６ ，而且对肿瘤坏死因子α的诱导表达具有显著的剂量效应。结论：牛膝多糖可诱导巨噬细胞表达细胞因子，并对巨噬细胞具有激活作用。

牛膝多糖对草鱼免疫和抗氧化功能的影响

为探讨在饲料中添加牛膝多糖(ABP)对草鱼免疫和抗氧化功能的影响,选取平均体重(88.13±0.76)g的健康草鱼375尾,随机分成5个处理,即基础饲料组、0.05%、0.10%、0.20%、0.40%ABP添加组,每个处理3个重复,每个重复25尾鱼,饲养65 d。结果表明,在饲料中添加ABP对草鱼头肾体指数影响不显著(P>0.05),对脾体指数影响显著(P<0.05),与对照组相比,0.05%、0.10%、0.20%和0.40%添加组脾体指数分别增加6.29%(P>0.05)、28.00%(P<0.05)、9.14%(P>0.05)和13.14%(P>0.05);血液中NBT阳性细胞数随着ABP添加量的增加呈增加的趋势,但各组间差异不显著(P>0.05);在饲料中添加ABP对草鱼血清白蛋白、白介素-1(IL-1)、白介素-6(IL-6)含量和过氧化氢酶活影响不显著(P>0.05),显著影响草鱼血清总蛋白(TP)、碱性磷酸酶(AKP)、酸性磷酸酶(ACP)、溶菌酶(LZM)、α-肿瘤坏死因子(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)含量(P<0.05)。与对照组相比,0.40%添加组的TP和AKP分别增加24.64%(P<0.05)和33.56%(P<0.05);0.20%、0.40%添加组的LZM活力分别增加34.97%(P<0.05)和31.21%(P<0.05),SOD活力分别增加27.28%(P<0.05)和22.41%(P<0.05);饲料中随着ABP添加剂量的增加,各组血清ACP活性先增加后缓慢下降,MDA含量先下降后上升。与对照组相比,0.20%、0.40%添加组ACP活性分别增加15.33%(P<0.05)和11.10%(P<0.05),0.05%、0.10%、0.20%及0.40%添加组MDA含量分别下降11.97%(P>0.05)、21.33%(P<0.05)、32.37%(P<0.05)和2.53%(P>0.05)。饲料中随着ABP添加量的增加,各组草鱼血清TNF-α含量变化规律不明显,但与对照组相比,0.20%添加组TNF-α含量显著增加(P<0.05)。综上所述,在草鱼基础日粮中添加适量牛膝多糖可以提高草鱼的免疫和抗氧化能力,建议添加量为0.20%。

牛膝多糖研究进展

牛膝多糖是从中药牛膝的干燥根里分离得到的果聚糖,相对分子质量小,水溶性好,易被人体吸收,具有广谱的免疫调节活性。牛膝多糖经结构修饰(硫酸酯化,磷酸酯化,羧甲基化,羟甲基化)后得到的一系列的多糖衍生物显示出更高的活性或新的生理活性,具有广阔的药物开发及应用前景。现对牛膝多糖的结构、分离、药理活性、及其衍生化修饰等方面的最新研究进展进行综述。

川牛膝多糖的分离、纯化及单糖组成

采用水提醇沉法提取川牛膝多糖粗品GPC,经685弱碱阴离子交换柱层析和Bio-Gel P2凝胶柱层析进一步纯化,得到川牛膝多糖RCP(refined Cyathula officinalis Kuan polysaccharide).紫外扫描、高效液相色谱、聚丙烯酰胺盘状凝胶电泳证明RCP为均一组分.质谱图显示RCP的分子量(Mr)主要分布在1000～2200.薄层正交试验确定了RCP完全水解的最优条件.薄层层析及高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)技术揭示,RCP单糖组成为D-果糖和D-葡萄糖.

牛膝多糖对断奶仔猪抗菌肽Protegrin-1 mRNA表达的影响

本文旨在探讨牛膝多糖(ABPS)对断奶仔猪抗菌肽Protegrin-1(PG-1)mRNA表达的影响。试验采用单因子设计,按照日粮处理因素不同,设对照组、抗生素组、0.05%、0.10%和0.15%牛膝多糖组,共5个处理。选用28日龄杜长大仔猪160头,随机分入5个处理,每个处理4个重复,每个重复8头猪(公母各半)。采用半定量RT-PCR法,以18SrRNA为内标,检测PG-1mRNA相对表达量。结果表明:日粮中添加牛膝多糖均不同程度地促进断奶仔猪骨髓抗菌肽PG-1mRNA的表达。与对照组相比,0.05%、0.10%和0.15%牛膝多糖组分别使断奶仔猪PG-1mRNA的相对表达量增加14.9%(P>0.05)、36.4%(P<0.05)和7.3%(P<0.05);与抗生素组相比,其PG-1mRNA的相对表达量分别增加7.8%(P>0.05)、27.9%(P>0.05)和19.4%(P>0.05)。即牛膝多糖能显著促进断奶仔猪骨髓抗菌肽PG-1mRNA表达,且日粮中以0.10%添加量为适宜。

牛膝多糖对小鼠骨髓来源树突状细胞抗肿瘤能力的影响

目的:研究牛膝多糖对小鼠骨髓来源树突状细胞(DC)抗肿瘤能力的影响。方法:正常小鼠骨髓来源单个核细胞通过粒细胞-巨噬细胞刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)体外诱导生成DC,细胞培养第3天加入3种质量浓度的牛膝多糖(200、300和400mg/L),第5天负载EC9706细胞制备的冻融抗原,流式细胞术检测DC表面CD86和CD11a的表达和成熟情况。提取培养第8天的DC和T淋巴细胞再混合培养3d,流式细胞术检测T淋巴细胞的增殖分化情况及DC诱导的细胞毒T淋巴细胞(CTL)对EC9706细胞的杀伤活性。以上均以生理盐水培养作为对照组,各组均设4个复孔。结果:与生理盐水组相比,低中剂量牛膝多糖在有异源性抗原负载的情况下能够促进小鼠骨髓来源DC的分化、成熟及表面标记CD86(F=9.788,P=0.012)、CD11a(F=10.220,P=0.016)的表达,增加DC致敏的T淋巴细胞增殖指数(F=9.807,P=0.012),DC诱导的CTL对EC9706细胞的杀伤活性增强(F=9.923,P=0.015),且在一定范围内存在量效关系。400mg/L的牛膝多糖可使这些方面的效应明显降低。结论:适当质量浓度的牛膝多糖能够提高DC的抗原递呈能力,进而提高DC的抗肿瘤作用。

枸杞多糖、牛膝多糖对H_2O_2诱导2BS细胞衰老的影响

目的:研究枸杞多糖(LBP)和牛膝多糖(ABP)对H2O2诱导2BS细胞衰老模型的影响。方法:应用MTT法测定细胞的增殖活性,检测衰老相关β半乳糖苷酶(SA—β—gal)染色情况,采用硫巴比妥酸(TBA)反应比色法测定细胞的丙二醛(MDA)水平,通过紫外分光光度法检测细胞的单胺氧化酶-B(MAO-B)活性,利用试剂盒检测细胞的超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果:经H2O2处理后细胞形态出现衰老样改变,LBP和ABP均能提高经100μmol·L-1H2O2处理的2BS细胞的存活率,降低细胞的SA—β—gal染色阳性率以及MDA水平,抑制细胞的MAO-B活性,增强SOD活力。结论:以亚致死量H2O2处理年轻2BS细胞可以建立细胞衰老模型。LBP和ABP能够改善H2O2诱导的衰老模型细胞的某些表型,这可能与其抗氧化作用有关。

川牛膝多糖的体内免疫活性研究

目的:研究川牛膝多糖的免疫学活性。方法:通过正常小鼠淋巴细胞转化、迟发型变态反应、抗体生成细胞检测、碳粒廓清、腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞、NK细胞活性测定等实验对川牛膝多糖的免疫学活性进行研究,并研究了其对由环磷酰胺(Cy)引起的小鼠白细胞数下降的影响。结果:川牛膝多糖能增强正常小鼠迟发型变态反应和NK细胞活性,提高小鼠碳粒廓清速率、抗体生成细胞数量和腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞百分率,且随多糖浓度增高而增强;川牛膝多糖还能显著改善由Cy导致的白细胞数减少。但其对脾淋巴细胞转化率无促进作用。结论:川牛膝多糖能够增强正常小鼠特异性免疫和非特异性免疫功能,并对Cy具有一定的减毒作用。

牛膝多糖对抗原诱导的肥大细胞活化的影响

目的观察牛膝多糖(achyranthes bidentata polysaccha-rides,ABPS)对肥大细胞活化脱颗粒的影响。方法运用大鼠被动皮肤过敏反应(PCA)实验,用比色测定法检测ABPS在体内对肥大细胞(MC)影响;体外实验将ABPS分为高、中、低3个剂量组,然后分别将其加入抗原致敏的RBL-2H3细胞中(大鼠嗜碱性粒细胞白血病细胞,国际公认的MC研究模型细胞),观察ABPS对RBL-2H3细胞脱颗粒的影响。结果ABPS能明显抑制大鼠PCA、RBL-2H3细胞脱颗粒,并能抑制RBL-2H3细胞释放组胺、肿瘤坏死因子α及白细胞介素4;抑制RBL-2H3细胞中Akt和p38的磷酸化。结论ABPS的抗过敏作用与抑制肥大细胞的脱颗粒及炎性物质释放有关;ABPS抑制肥大细胞的活化与抑制Akt和p38的活性相关。

牛膝多糖对仔猪肠道微生物及小肠黏膜形态的影响

选用28日龄、体重相近(8.898±0.742)kg,健康的DLY(杜洛克×长白×大白)断奶仔猪160头,随机分为5个组,采取单因子试验设计,对照组、试验Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ组分别饲喂添加0,0.01%抗生素,0.05%牛膝多糖、0.1%牛膝多糖、0.15%牛膝多糖的试验日粮,试验期28 d.每个处理4个重复,每个重复8头猪.结果表明:试验组在抑制肠道大肠杆菌和促进肠道双歧杆菌、乳酸杆菌的增殖效果明显好于对照组(P<0.05或P<0.01);牛膝多糖试验组在抑制肠道大肠杆菌和促进肠道有益菌方面达到或显著好于添加抗生素试验组;随着牛膝多糖添加量的增加,其抑制肠道大肠杆菌和促进肠道有益菌的效果逐渐提高,Ⅱ和Ⅳ组之间差异显著或极显著(P>0.05,P<0.05或P<0.01).各试验组之间的十二指肠段上皮细胞层厚度无显著性差异;试验Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ组随着牛膝多糖添加量的增加,回肠段和空肠段的上皮细胞层厚度增加,显著或极显著大于对照组和试验Ⅰ组(P<0.05或P<0.01);与对照组相比,试验Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ组显著增加肠绒毛高度和降低隐窝深度(P<0.05或P<0.01);试验Ⅱ,Ⅲ,Ⅳ组在增加十二指肠段肠绒毛高度和降低隐窝深度方面明显好于试验Ⅰ组(P<0.05或P<0.01);各试验组回肠和空肠的隐窝深度之间没有显著性差异;试验Ⅲ和Ⅳ组间小肠黏膜形态没有显著性差异.

牛膝多糖对仔猪淋巴细胞增殖作用和细胞因子分泌量的影响

本文旨在研究牛膝多糖（ABP）对仔猪淋巴细胞增殖作用和细胞因子分泌量的影响，探讨ABP免疫调节作用机制。选用128头28日龄的杜长大（杜洛克X长白X大白，Duroc×Landrace×Yorkshire）断奶仔猪，随机分为4个处理，每个处理4个重复，每个重复8头猪。对照组饲喂基础日粮，Ⅰ～Ⅲ组为试验组，分别饲喂在基础日粮中添加ABP500、1000、1500mg／kg的试验日粮。试验第14和28天每个处理随机选取4头仔猪进行前腔静脉采血，测定仔猪外周血淋巴细胞转化率和血清中细胞因子TNF、IL-1β、IL-2、IL-6的含量。结果表明：与对照组相比，试验第14和28天时Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组的淋巴细胞sI值分别提高了8．04％（P〉0．05）和11．32％（P〈0．01）、24．11％（P〈0．01）和19．81％（P〈0．01）、69．64％（P〈O．01）和43．40％（P〈0．01），各试验组之间的SI值差异显著或极显著（P〈0．05或P〈0．01）。与试验第14天相比，各试验组第28天的SI值均呈现下降趋势。试验第14天时，Ⅱ、Ⅲ组细胞因子TNF、IL-1β、IL-2和IL-6含量极显著高于对照组（P〈0．01），Ⅰ组的TNF和IL-2含量显著高于对照组（P〈0．05），但IL．1p和IL．6含量与对照组相比没有显著性差异（P〉0．05）；试验第28天时，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组TNF、IL-1β、IL-6含量显著或极显著高于对照组（P〈0．05或P〈0．01），UI组IL-2含量显著高于对照组（P〈0．05），但Ⅰ、Ⅱ组IL-2含量与对照组没有显著性差异（P〉O．05）。与试验第14天相比，各试验组第28天的TNF和IL-1β含量有增加的趋势，IL-2和IL-6含量有降低的趋势。各试验组之间以Ⅲ组的淋巴细胞转化率和细胞因子的含量增加效果显著。以上结果表明：ABP可促进仔猪血清淋巴细胞转化率和细胞因子TNF、IL-1β、IL-2、IL-6的分泌量。

牛膝多糖体外诱导人T细胞表达IFN-γ和IL-4蛋白的机制探讨

目的 :探讨牛膝多糖免疫调节作用的机制。方法 :使用牛膝多糖在不同浓度或在不同时间内对人T细胞进行体外诱导培养 ,用ELISA方法测定培养上清液的IFN γ及IL 4的蛋白表达情况。结果 :①人T细胞受不同浓度ABPS刺激时 ,IFN γ分泌水平随ABPS浓度递增 ,在 4 0 0 μg ml时 ,IFN γ表达量最高 (P <0 0 5 ) ,而IL 4的分泌始终处于低水平 (P >0 0 5 )。②人T细胞在ABPS刺激不同时间后 ,IFN γ分泌水平逐步增高 ,在 4 8小时时与其他各时间点比较 ,有非常显著的差异 (P <0 0 0 1) ,而IL 4的分泌始终处于低水平 (P >0 0 5 )。结论 :①ABPS能诱导人T细胞分泌IFN γ ,该作用呈时间、剂量依赖性变化 ,而抑制IL 4的分泌。②在蛋白表达水平上证实ABPS能够促进Th1类细胞因子的分泌 ,而抑制Th2类细胞因子的分泌。

牛膝多糖对脂多糖免疫应激仔猪血液生化指标和白细胞分类计数的影响

试验旨在探讨牛膝多糖(ABPS)对脂多糖(LPS)刺激的断奶仔猪血液生化指标和白细胞分类计数的影响。选用48头(28±3)d、体重(8.45±0.14)kg的杜洛克×长白×大白断奶仔猪,采用2×2因子设计,两个因子分别为不同日粮处理(0或500mg/kgABPS)和免疫应激(注射LPS或生理盐水)。试验期28d。在第14天和第21天,每日粮组的一半猪注射100μg/kgBW的LPS,另一半注射生理盐水作对照。注射后3h,采血测定血液生化指标,并进行白细胞分类计数。结果表明:LPS刺激提高了第14天和第21天血清中碱性磷酸酶、谷草转氨酶(GOT)的活性及谷草转氨酶与谷丙转氨酶的比值(P<0.05),并降低了第21天血清总蛋白和白蛋白的含量(P<0.05);ABPS提高了第14天血清总蛋白和球蛋白的含量(P<0.05)。在第14天,LPS刺激降低了白细胞、淋巴细胞、单核细胞和中性粒细胞的含量及单核细胞比例(P<0.001)。在第21天,LPS刺激降低了白细胞、淋巴细胞的含量及比例,而提高了中性粒细胞比例(P<0.001)。ABPS提高了白细胞(14d:P<0.10)和中性粒细胞(14d:P<0.05;21d:P<0.05)的含量及中性粒细胞比例(14d:P<0.05;21d:P<0.10),降低了淋巴细胞比例(14d:P<0.05;21d:P<0.10)。结果提示,LPS可引起仔猪血液生化指标和白细胞分类计数发生显著变化,ABPS在一定程度可缓解上述现象,表现出一定的改善免疫和缓解炎症的作用。

牛膝多糖对血鹦鹉部分非特异性免疫与脂类代谢指标的影响

为研究牛膝多糖对血鹦鹉部分非特异性免疫与脂类代谢指标的影响,以初始体质量为(48.0±3.5)g的血鹦鹉Cichlasoma citrinellum♂×C.synspilum♀为试验对象,配制脂肪水平分别为8%、14%的基础饲料和高脂饲料,并在高脂饲料中添加质量分数分别为0(对照)、0.05%、0.10%、0.20%、0.40%的牛膝多糖作为饲料添加剂,试验共分为6个处理组(基础饲料组、对照组和A^D试验组),每个处理组设3个平行,每个平行放25尾血鹦鹉,用基础饲料及5种试验饲料分别投喂6组试验鱼,养殖周期为28 d,分别于试验开始后第7、14、21、28天取样测定并进行分析。结果表明:随着牛膝多糖添加量的增加,血鹦鹉肝脏超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、溶菌酶(LZM)活力显著提高(P<0.05),丙二醛(MDA)含量显著降低(P<0.05);随着牛膝多糖添加量的增加,血清中谷丙转氨酶(ALT)活力呈降低趋势,且在添加量为0.20%时与对照组有显著性差异(P<0.05),而谷草转氨酶(AST)活力则无显著性变化(P>0.05);随着牛膝多糖添加量的增加,血糖(Glu)含量显著降低(P<0.05),而甘油三酯(TG)和总胆固醇(CHOL)含量变化不明显(P>0.05),肝脏脂蛋白脂酶(LPL)和脂肪酸合成酶(FAS)活力也未出现显著变化(P>0.05)。研究表明,饲料中使用牛膝多糖作为添加剂,可提高血鹦鹉肝脏抗氧化能力与LZM活力,同时起到降血糖的作用,建议牛膝多糖添加量为0.40%,并连续投喂14 d。

改良硫酸蒽酮比色法测定牛膝多糖的含量

目的：改进牛膝多糖制剂的含量测定方法。方法：通过不同反应温度对牛膝多糖吸收峰的影响试验，优选其晟佳反应条件和测定波长。结果：反应温度的变化会引起多糖吸收峰位置的漂移，故以室温下反应最稳妥，测定波长为620nm。改良方法的加样回收率为99．53％。RSD=1．51％(n=6)。结论：该法操作简便。重现性好，结果准确。

牛膝多糖对幼年哮喘大鼠气道壁嗜酸性粒细胞和肥大细胞的影响

目的观察幼年哮喘大鼠气道壁嗜酸性粒细胞(EOS)及肥大细胞(MC)的变化并探讨牛膝多糖(ABPS)对其的影响。方法清洁级♂SD大鼠50只,随机分为5组:哮喘组(A)、正常对照组(C)、牛膝多糖(ABPS)治疗组(T1、T2、T3),每组10只。采用鸡卵清蛋白(OVA)复制幼年大鼠哮喘模型。将动物处死后取肺组织,石蜡切片,HE及甲苯氨蓝染色,镜下观察EOS及MC数量、MC脱颗粒等情况,TUNEL法检测气道壁EOS的凋亡情况。结果①哮喘组(A)气道壁炎症细胞总数和EOS数为最多(EOS的百分率达73.4%±8.5%),ABPS治疗组T1、T3明显减少(EOS的百分率为56.1%±19.3%、57.3%±18.2%),与A组相比差异有显著性(P<0.05),T2组亦有减少,但与A组比较差异无显著性;②A组EOS凋亡率为5.3%±2.2%,而C组为15.9%±2.4%(P<0.01)。用药T1、T3组EOS凋亡率分别为8.7%±2.9%、9.8%±2.2%,与A组相比差异均有显著性(P<0.05);③ABPS治疗组T1、T3的MC数量,脱颗粒百分率均低于哮喘组,与A组相比差异均有显著性(P<0.05),药物(ABPS)抑制率(T1、T2、T3)分别是26.7%、11.8%和35.3%。结论哮喘大鼠气道壁EOS和MC明显增多,牛膝多糖能减少哮喘大鼠气道EOS和MC的数量,促进EOS的凋亡,抑制MC颗粒的释放,从而达到治疗哮喘作用。