负载EPZ6438牛血清白蛋白-壳聚糖纳米粒抑制骨肉瘤的效应

背景:骨肉瘤肿瘤干细胞激活最显著的转录因子是EZH2,据报道沉默EZH2可以抑制骨肉瘤细胞生长。研究证实,牛血清白蛋白-壳聚糖纳米粒是一种具有优异生物相容性和生物降解性的药物传递载体,且白蛋白载体可提供靶向肿瘤的药物递送功能。目的:探讨负载EPZ6438(EZH2抑制剂)血清白蛋白-壳聚糖纳米粒抑制骨肉瘤的效应及机制。方法:①制备未负载与负载EPZ6438的血清白蛋白-壳聚糖纳米粒,检测载EPZ6438血清白蛋白-壳聚糖纳米粒的药物包载率及药物释放率。②将MG-63细胞分4组培养,分别加入PBS(对照组)、血清白蛋白-壳聚糖纳米粒浸提液(空白纳米粒组)、EPZ6438溶液(游离药物组)及负载EPZ6438的血清白蛋白-壳聚糖纳米粒浸提液(载药纳米粒组),培养3 d后,利用流式细胞仪检测细胞凋亡、RT-PCR法检测细胞caspase3 mRNA的表达。③取12只裸鼠,通过腋下注射MG-63细胞悬液建立皮下荷瘤小鼠模型,造模成功后随机分4组干预,分别向肿瘤组织内注射生理盐水(对照组)、血清白蛋白-壳聚糖纳米粒溶液(空白纳米粒组)、EPZ6438溶液(游离药物组)及负载EPZ6438的血清白蛋白-壳聚糖纳米粒溶液(载药纳米粒组),每组3只。注射7 d后,观察肿瘤体积及肿瘤组织冰冻切片TUNEL染色。结果与结论:①载药纳米粒的药物包载率约为8.8%,该纳米粒在纯水中具有良好的药物释放效果,24 h药物释放量为(34.72±1.93)μg,72 h为(48.58±1.10)μg,120 h为(49.18±1.24)μg,168 h(50.25±1.13)μg,药物释放在120 h到达平台期,释放率约为97.9%;②与MG-63细胞培养3 d后,对照组、空白纳米粒组细胞凋亡率低于游离药物组、载药纳米粒组(P<0.001),caspase3 mRNA的表达低于游离药物组、载药纳米粒组(P<0.0001);③注射7 d后,载药纳米粒组裸鼠肿瘤体积小其他3组(P<0.05),肿瘤组织TUNEL染色阳性细胞比率高于其他3组(P<0.0001);④结果显示,负载EPZ6438的血清白蛋白-壳聚糖纳米粒可通过诱导肿瘤细胞的凋亡来抑制骨肉瘤生长。

聚乳酸-羟基乙酸共聚物对牛血清蛋白微囊化和微球表征

目的:利用不同配比聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA),采用双乳化法,将异硫氰酸荧光素标记的牛血清白蛋白(BSA-FITC)包封制成微球;考察PLGA共聚物比例和相对分子质量对微球平均粒径、包封效率和释放方式的影响。方法:将异硫氰酸荧光素标记的牛血清蛋白溶解在乙酸乙酯中,超声波频率28 kHz,功率40 W,超声波作用时间5 min,以形成水/油乳液;将初级乳液快速转移到含聚乙烯醇的水性介质,通过两次乳化处理后,得到微球;计算产品收率、封装效率、微球粒度分布和释放量。结果:异硫氰酸荧光素标记的牛血清白蛋白包埋在聚乳酸-羟基乙酸共聚物微球中,当共聚物聚乳酸与羟基乙酸质量比为75∶25(MW 40~75 kDa)时,具有最高的产品收率和封装效率,分别为51.04%和100%;通过十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析异硫氰酸荧光素标记的牛血清白蛋白释放结果,释放量低于25%。结论:PLGA可作为生物药品的包封材料。

荧光法测定四种肾上腺素药物与牛血清白蛋白的相互作用

运用荧光光谱法研究生理pH条件下四种肾上腺素药物与牛血清白蛋白(BSA)在不同温度下的相互作用。固定BSA浓度,梯度变化药物浓度,混合溶液分别在25℃及37℃水浴中温浴2h后进行荧光强度测定,运用Stern-Volmer方程及改进的双对数方程求出不同温度下药物与BSA的结合常数(K)和结合位点数(n)。结果表明,四种肾上腺素药物均与BSA形成结合物,对BSA荧光猝灭机制均为静态猝灭;不同温度下与BSA的K值顺序为硫酸沙丁胺醇>重酒石酸去甲肾上腺素>酒石酸美托洛尔>盐酸肾上腺素,37℃时的结合常数(K)和结合位点数(n)均大于25℃时的结果;热力学参数表明四种肾上腺素药物与BSA之间的结合均为自发过程,与BSA分子间主要作用力类型为疏水作用力。分子对接结果和实验结果符合较好。

虾青素立体异构体与牛血清白蛋白的相互作用

该论文采用多光谱、表面等离子共振和分子对接,研究虾青素(Astaxanthin,AST)立体异构体与牛血清白蛋白(Bovine Serum Albumin,BSA)的相互作用机制。研究发现,AST异构体均结合于BSA亚结构域ⅡA和ⅢA的交界处,并且对蛋白质的构象没有明显影响。AST异构体对BSA具有相似的结合亲和力(左旋AST 4.17×10^(-7)mol/L,右旋AST 3.91×10^(-7)mol/L)和结合动力学(慢结合、慢解离),然而在较高浓度下(0.35~1.78μmol/L)左旋AST的最高结合响应值均高于右旋AST。此外,左旋和右旋AST与BSA相互作用的焓变△H分别为-175.09和-149.42 kJ/mol,熵变△S分别为-502.72和-417.65 J/(mol·K),负值的△H和△S表明AST-BSA发生结合的主要相互作用力是氢键和范德华力。分子对接显示左旋AST与Lys504、Thr190残基形成键长为2.0Å、2.7Å的氢键,而右旋AST与Arg435残基形成键长为2.9Å的氢键。这项研究有助于阐明AST立体异构体与BSA的结合机制,并为AST异构体在血液循环中潜在的药代动力学提供重要的理论指导信息。

谷氨酸对亮蓝与牛血清白蛋白作用机制影响的光谱学研究

为了了解谷氨酸(Glu)对食品添加剂亮蓝(BB)与载体蛋白之间结合机制的影响,本文从结合作用力、结合距离、结合位点,以及蛋白质构象变化等方面研究了Glu存在时BB与牛血清白蛋白(BSA)之间的相互作用机制。实验结果表明,BB通过静态猝灭的方式猝灭BSA的内源荧光,但在Glu存在下,BB对BSA的荧光猝灭常数由(8.31±0.52)×10^(4)L·mol^(-1)减小至(5.43±0.04)×10^(4)L·mol^(-1),结合常数由(1.35±0.04)×10^(5)L·mol^(-1)减小至(3.81±0.20)×10^(4)L·mol^(-1)(313 K),即Glu削弱了BB与BSA的结合。此外,Glu还会缩短BB与BSA之间的结合距离(由3.49±0.02 nm变为3.45±0.04 nm),减小BB对BSA二级结构的改变(α-螺旋含量由36.09%±0.01%变为42.14%±0.01%([BSA-Glu]-BB为1:20:1)),即Glu在一定程度上阻止了BB对BSA构象的干扰。

多光谱法研究啶虫脒与牛血清白蛋白的相互作用

啶虫脒(acetamiprid,ACE)是一种广泛使用的新烟碱类杀虫剂,其在环境介质中的残留积累,对哺乳动物产生神经毒性作用,成为一种备受关注的环境污染物。为清晰认识啶虫咪在生物体中的作用过程,本研究利用荧光、紫外可见光(UV-vis)、圆二色光谱法及分子对接技术,探究了ACE和牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)的相互作用机制。结果表明:在不同温度下,BSA和ACE的荧光猝灭机制主要为静态猝灭,能够形成基态复合物,且存在至少1个结合位点;热力学研究表明,二者结合过程中的吉布斯自由能(ΔG)为负值,说明ACE与BSA的结合是一个自发过程;焓(ΔH)和熵(ΔS)为负值,表明ACE与BSA相互作用的驱动力是氢键或范德华力;通过荧光光谱法和UV-vis光谱法算出结合距离小于7 nm,表明ACE与BSA之间能发生非辐射能量转移;同步荧光光谱显示ACE对BSA的构象产生影响,主要是对其中酪氨酸残基的影响更为显著;圆二色光谱结果显示ACE使BSA的构象发生一定变化,增加了α-螺旋结构的稳定性和蛋白整体的有序性,使蛋白质的微环境比其天然状态更具疏水性。综上所述,ACE与BSA在环境介质和生物体中能够自发结合,形成稳定的基态复合物,且结合后会影响BSA的结构。本研究为探究ACE在生物体中的致毒过程提供了基础数据。

两亲荧光芘衍生物与牛血清白蛋白的相互作用

为了获得水溶性芘衍生物与血清白蛋白的结合特性,研究了两亲芘衍生物(C_(12)PDA)与牛血清白蛋白(BSA)在中性缓冲溶液中的相互作用。首先,通过吸收和荧光光谱研究了C_(12)PDA与BSA的相互作用。结果表明,C_(12)PDA对BSA的荧光猝灭属于静态猝灭,疏水作用是两者之间的主要作用力。进一步利用同步荧光、三维荧光、圆二色光谱及分子对接模拟计算方法,研究了C_(12)PDA对BSA构象的影响以及结合方式。结果表明,C_(12)PDA与BSA的多个氨酸残基存在分子间氢键等相互作用,C_(12)PDA使BSA的α-螺旋结构含量减少。

谷胱甘肽对丁基化羟基甲苯与牛血清白蛋白作用机制影响的光谱研究

丁基化羟基甲苯(BHT)是一种合成酚类抗氧化剂,也是一种潜在的内分泌干扰物。采用荧光光谱法、紫外光谱法和时间分辨荧光光谱法等表征方法,研究了BHT与牛血清白蛋白(BSA)的结合机制,以及谷胱甘肽(GSH)对二者相互作用的影响。BHT主要通过疏水作用与BSA形成较为稳定的复合物(K b=1.11×10^(4) L/mol),并改变了BSA的二级结构。但GSH会改变BHT与BSA的作用力类型,降低BHT与BSA的结合常数(K b=2.11×10^(3) L/mol),抑制BHT与BSA的结合,增大二者的结合距离,并且在一定程度上削弱BHT对BSA二级结构的改变。不过,BHT对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH自由基)的清除能力不受GSH共存的影响。

小牛血去蛋白提取物眼用凝胶联合玻璃酸钠滴眼液治疗白内障术后干眼的效果观察——评《糖尿病相关眼部病变》

《糖尿病相关眼部病变》由张新媛、肖新华编著,人民卫生出版社出版,ISBN:9787117326308。本书立足现代医学视角,对眼部常见疾病类型进行了介绍。白内障是一种危害眼部健康的疾病,临床上主要以手术、药物2种治疗方法为主,白内障术是眼科常见手术,干眼症是白内障术后常见不适症,患者可表现为眼睛干涩发红、畏光畏风、视物疲劳等,虽大多可逐渐缓解,但是自主缓解周期较长,且对患者的日常用眼造成严重影响。小牛血去蛋白提取物眼用凝胶联合玻璃酸钠滴眼液成为临床上备受欢迎的治疗方案。本书评主要根据《糖尿病相关眼部病变》提及的相关内容进行研读,结合实际临床经验,浅析小牛血去蛋白提取物眼用凝胶联合玻璃酸钠滴眼液治疗白内障术后干眼的方法及疗效。

小牛血去蛋白提取物滴眼液配合角膜塑形镜对青少年低中度近视患者视力矫正及角膜的影响

目的 观察小牛血去蛋白提取物滴眼液配合角膜塑形镜对青少年低中度近视患者视力矫正及角膜的影响。方法 选取2020年7月—2022年6月广州市花都区人民医院收治的青少年低中度近视患者80例(160眼),依照简单随机化法分为观察组和对照组,各40例(各80眼)。所有患者均予夜戴式角膜塑形用硬性透气接触镜矫正视力,观察组在对照组基础上联用小牛血去蛋白提取物滴眼液滴眼,所有患者均治疗3个月。比较2组患者治疗前及治疗1、3个月时视力情况[裸眼视力(logMAR)、等效球镜度]、角膜功能[角膜曲率、中央角膜厚度、角膜表面规则指数(SRI)]、泪膜功能[客观散射指数(OSI)、泪膜脂质层厚度(LLT)、泪膜破裂时间(BUT)]、角膜上皮着染率变化,以及并发症发生情况。结果 治疗1、3个月时,2组logMAR、角膜曲率、中央角膜厚度、LLT及BUT均较治疗前降低或减少,等效球镜度、SRI、OSI较治疗前均上升(P<0.01),治疗3个月时2组OSI、LLT及BUT组间差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01);治疗1个月时角膜上皮着染等级差异不显著(P>0.05);治疗3个月时观察组角膜上皮着染等级优于同期对照组(Z=2.304,P=0.021);观察组与对照组并发症总发生率(11.25%vs.18.75%)比较差异无统计学意义(χ^(2)=1.974,P=0.160)。结论 小牛血去蛋白提取物滴眼液配合角膜塑形镜对青少年低中度近视患者视力矫正无不良影响,利于维持泪膜稳定,减少角膜上皮损伤,且安全性良好。

牛血中β2-糖蛋白的提取纯化及免疫原性研究

【目的】为β2GPI的获得增加一个新的途径,提高牛血的利用效益,减少牛血资源浪费。【方法】牛血清经HClO_(4)沉淀、Heparin Sepharose CL-6B亲和层析及分子筛等方法纯化获得目的蛋白β2GPI。利用凝胶电泳技术对提取的Bβ2GPI进行了纯度鉴定和分析,然后采用ELISA技术对Bβ2GPI的免疫原性进行了评估。【结果】试验表明提取纯化的Bβ2GPI纯度约为95%,其反应性与β2GPI标准品相同。【结论】从牛血中成功提取纯化β2GPI,且所获得的蛋白具有较高纯度和良好的免疫原性。

光谱法结合分子对接技术研究柠檬苦素与牛血清白蛋白的相互作用

为研究柠檬苦素(Limonin,LM)与牛血清白蛋白(Bovine serum albumin,BSA)相互作用,本文采用紫外光谱法、荧光光谱法及分子对接技术研究LM与BSA的相互作用机制。结果表明:LM能有效淬灭BSA的内源荧光,其淬灭类型为静态淬灭;两者发生相互作用可形成1个结合位点,分子间作用力主要为氢键和范德华力,该相互作用过程为自发反应;紫外光谱及同步荧光光谱表明,LM与BSA发生相互作用后,可以增加BSA上酪氨酸(Tyr)、色氨酸(Trp)残基微环境的疏水性;通过竞争位点实验及分子对接,发现LM与BSA的结合位点在siteⅠ附近,LM可以与BSA上的Trp-213形成氢键,与Tyr-340/451等残基之间存在范德华力。

光谱法与计算机辅助研究α-西柏三烯二醇与牛血清白蛋白的相互作用

α-西柏三烯二醇具有抗菌、抗肿瘤和神经保护等广泛生物活性,研究其与牛血清白蛋白(BSA)相互作用,有助于了解α-西柏三烯二醇在体内的转运、分布以及消除等信息。本研究通过紫外吸收光谱、荧光光谱、圆二色谱、分子对接模拟、分子动力学模拟等方法,在分子水平上研究了BSA与α-西柏三烯二醇在体外生理条件下的相互作用。结果表明,BSA与α-西柏三烯二醇发生了明显相互作用,且在293、303和310 K三个温度条件下,荧光淬灭常数KSV值和结合常数Kb值随着温度升高逐渐降低,α-西柏三烯二醇与BSA通过静态猝灭机制发生相互作用,三个不同温度下两者结合位点数n≈1,在BSA上只存在一个α-西柏三烯二醇的特异性结合位点;BSA与α-西柏三烯二醇的结合是自发进行的(ΔG<0),氢键和范德华力为主要驱动力(ΔH<0和ΔS<0);在Sudlow位点I处α-西柏三烯二醇与BSA发生结合;BSA与α-西柏三烯二醇结合导致其构象也会发生改变。本研究结果提供了α-西柏三烯二醇与BSA相互作用的基本信息,这将有助于进一步了解α-西柏三烯二醇的药代动力学特性。

1,8-二川芎嗪基大黄酸与牛血清白蛋白相互作用研究

本文采用紫外光谱法、荧光光谱法、圆二色谱法、电化学分析法和分子对接技术,对1,8-二川芎嗪基大黄酸(DBR)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用机制进行了研究。结果表明DBR和BSA间存在强相互作用,在温度290、300、310 K时,两者间的结合常数Ka的数量级达10^(5),结合位点数为1.1,表明两者之间有着较强的相互作用并形成1∶1复合物;Kq两者的猝灭常数值分别为5.5924×10^(12)、4.9853×10^(12)、4.1665×10^(12)L·mol^(-1)·s^(-1),推测猝灭方式为静态猝灭。根据F9rster的非辐射能量转移机制求算出给体与受体间的结合距离r=4.8 nm、能量转移效率E=0.5793,推测两者之间存在非辐射能量转移;通过计算该体系的热力学参数得到ΔH<0,ΔS<0,ΔG<0,表明二者作用力类型为氢键和范德华力。另外,随着DBR的加入BSA的构象发生了改变,BSA的α-螺旋结构从60.55%减少到58.5%;电化学分析法表明两者形成了非电活性的超分子化合物;分子对接模拟结果推测出DBR分子进入了BSA分子的疏水腔内,其结合位置位于domainⅠA亚域。

小牛血去蛋白提取物眼用凝胶治疗糖尿病白内障术后干眼临床研究——评《实用糖尿病治疗学》

《实用糖尿病治疗学》由肖新华主编,科学出版社出版,ISBN:9787030687005。糖尿病患者由于糖尿病时血糖高,控制较差,导致晶状体内葡萄糖增高,渗透压改变,影响水分吸收而导致晶状体混浊所致。而小牛血去蛋白提取物中含有丰富的生物活性物质,这些物质在眼科领域展现出了独特的疗效。对于糖尿病患者而言,小牛血去蛋白提取物可能成为一种潜在的治疗选择,以缓解晶状体混浊带来的视觉问题。

小牛血去蛋白提取物眼用凝胶治疗LASIK术后干眼症疗效分析——评《糖尿病相关眼部病变》

《糖尿病相关眼部病变》由张新媛、肖新华主编,人民卫生出版社出版,ISBN:9787117326308。干眼症作为一种常见的眼部疾病,尤其在LASIK手术后更易发生。其症状包括眼部干涩、疼痛、视力模糊等,严重影响了患者的生命质量。因此,寻求一种有效治疗干眼症的方法成为了眼科医学领域的重要研究方向。近年来,小牛血去蛋白提取物眼用凝胶在干眼症治疗中的应用逐渐受到关注。这种药物含有多种生长因子和活性物质,能够促进角膜上皮细胞的再生和修复,同时还能够增强眼部泪液的分泌,从而改善干眼症状。

小牛血去蛋白提取物眼用凝胶治疗糖尿病视网膜病变全视网膜光凝术后干眼——评《糖尿病相关眼部病变》

《糖尿病相关眼部病变》由张新媛、肖新华主编,人民卫生出版社出版,ISBN:9787117326308。眼科临床上,视网膜病变是糖尿病主要眼部并发症,全视网膜光凝术是治疗糖尿病视网膜病变的主流手术,属于一种眼底激光治疗方式,对于降低视网膜的耗氧。

氮掺杂碳量子点与牛血清白蛋白相互作用的研究

采用光谱法研究了掺氮碳量子点(N-CQDs)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用机理。光谱分析表明,N-CQDs能有效猝灭BSA的内源性荧光,属于静态猝灭机制。N-CQDs的加入导致色氨酸残基微环境的疏水性降低,继而引起BSA的构象产生变化。N-CQDs与BSA可能是以1∶1的比例相互结合形成了稳定的复合物。结合热力学参数进行分析,N-CQDs与BSA相互结合的作用力主要为静电吸引力,反应为自发进行。同步荧光光谱也表明,N-CQDs与BSA的结合改变了BSA的构象。此研究数据可为进一步了解N-CQDs纳米颗粒在生物体内的应用提供参考。

掺氮碳量子点与牛血清白蛋白相互作用机制研究

当碳纳米材料进入生物体的血液中时,与血浆中的血清白蛋白相互作用可能会导致蛋白质的构象改变,从而影响其生物活性。利用荧光光谱、紫外吸收光谱、三维荧光光谱法研究掺氮碳量子点(N-CQDs)与牛血清白蛋白(BSA)的相互作用机制。结果表明,N-CQDs能够有效猝灭BSA内部荧光,符合静态猝灭机制。N-CQDs与BSA能够自发性结合,其结合作用力主要是静电吸引力。N-CQDs的加入导致色氨酸和酪氨酸残基微环境发生变化,继而改变了BSA的分子构象。该研究可为N-CQDs在体内的进一步应用提供参考依据。

小牛血去蛋白提取物眼用凝胶联合右旋糖酐羟丙甲纤维素滴眼液治疗干眼症的效果观察

目的观察小牛血去蛋白提取物眼用凝胶联合右旋糖酐羟丙甲纤维素滴眼液治疗干眼症的临床效果。方法将80例干眼症患者随机分为参照组(40例)和联合组(40例)。参照组采用右旋糖酐羟丙甲纤维素滴眼液治疗,联合组采用小牛血去蛋白提取物眼用凝胶联合右旋糖酐羟丙甲纤维素滴眼液治疗,均连续治疗2周。比较两组的临床疗效、泪膜稳定性指标及不良反应发生情况。结果联合组治疗总有效率为95.00%,高于参照组的80.00%(P<0.05)。治疗2周后,联合组BUT长于对照组,SIt值高于参照组,FL评分低于参照组(P<0.05)。治疗期间两组不良反应发生率比较无统计学差异(P>0.05)。结论小牛血去蛋白提取物眼用凝胶联合右旋糖酐羟丙甲纤维素滴眼液治疗干眼症可明显提升临床疗效,增强患者的泪膜稳定性,且安全可靠。