特发性无精子症和严重少精子症患者DAZ基因缺失的分析

目的 评估特发性无精子症和严重少精子症患者Y染色体上DAZ基因缺失的发生情况。方法 采用聚合酶链反应技术 (PCR)扩增 33例特发性无精子症和严重少精子症患者DAZ基因中的 4个序列标记位点SY15 4、SY2 5 4、SY2 5 5和SY15 5。 5 0例生育男性为阳性对照组 ,5例女性为阴性对照组。结果 33例特发性无精子症和严重少精子症患者DAZ基因缺失率为 15 2 % ,其中 2 6例特发性无精子症患者有 4例缺失 (15 4 % ) ,1例染色体核型为 4 7,XXY ;7例特发性严重少精子症患者中有 1例缺失 (14 3% )。 4个序列标记位点在阳性对照组中均有条带扩增 ,在阴性对照组中未见条带扩增。结论 特发性无精子症和严重少精子症患者均存在DAZ基因缺失 ,特发性无精子症患者缺失率高于特发性严重少精子症患者 ,与国外报道相一致。聚合酶链反应扩增DAZ基因位点是筛选Y染色体缺失的有效方法。

精浆游离MicroRNA 34-b在特发性少精子症及无精子症中的表达和临床应用

目的研究游离Micro RNA 34-b（mi R-34b）在特发性少精子症和特发性无精子症患者精浆中的表达及诊断价值。方法收集特发性少精子症、特发性无精子症和同期因女方因素不孕前来检查的生育力评估正常的健康男性精液各20份,采用实时荧光定量PCR检测精浆游离mi R-34b的相对含量,通过方差分析统计各组间的差异,并对精浆游离mi R-34b在特发性少精子症和特发性无精子症中的诊断价值进行ROC曲线分析。结果正常对照组、特发性少精子症组和特发性无精子症组三组间精浆mi R-34b表达量差异有高度统计学意义（F=21.44,P〈0.01）,与正常对照组相比,特发性少精子症组和特发性无精子症组精浆mi R-34b表达量显著降低,差异有高度统计学意义（P均〈0.01）,但特发性少精子症组与特发性无精子症组间精浆mi R-34b相对含量差异无统计学意义（P=0.31）。ROC曲线显示mi R-34能够较好的区分特发性少精子症组与健康对照组以及特发性无精子症组与健康对照组曲线下面积分别为（AUC）为0.85（95%CI,0.73~0.97）、0.90（95%CI,0.80~0.99）。结论 mi R-34b在特发性少精子症和特发性无精子症患者精浆中明显降低,并对特发性少精子症和特发性无精症子症显示出一定的诊断价值。

特发性少精子症和无精子症与Pygo2基因蛋白编码区SNPs的相关性

男性不育常伴随精子数量减少。Pygo2基因在染色质重塑的伸长精细胞中表达,其功能受损会导致精子形成阻滞和精子生成减少而引发不育。文章旨在检测引起人特发性少精子症和无精子症的Pygo2基因突变。从77例正常生育力男性和195例特发性少精子症和无精子症患者静脉血提取DNA,采用聚合酶链式反应-测序方法对Pygo2基因3个蛋白质编码区进行测序对比,非同义单核苷酸多态性(Single nucleotide polymorphisms,SNPs)位点分别用SIFT、Polyphen-2和Mutation Taster软件进行诱发蛋白质结构和表型改变的检测和分析。结果表明,195例患者中,178例(30例轻度或中度少精子症,57例重度少精子症和91例无精子症)基因序列分析报告完好,无精子症中3例患者分别在2个位点(rs61758740,rs141722381)发生了非同义突变SNPs,重度少精子症中1例患者在位点rs61758741发生了非同义突变,3个突变位点在SNPs基因数据库都已有报道,轻度或中度少精子症患者以及正常生育力男性中不存在SNPs。rs61758740可使PYGO2蛋白第141位蛋氨酸(M)变为异亮氨酸(I),rs61758741使PYGO2蛋白第261位碱性赖氨酸(K)变为酸性谷氨酸(E),rs141722381使PYGO2蛋白第240位亲水侧链天冬酰胺(N)变为疏水侧链异亮氨酸(I)。软件分析表明,在所发现的3个SNP非同义突变位点中,rs141722381引起的单个氨基酸改变会导致PYGO2蛋白空间结构破坏和诱发相关疾病。因此,Pygo2基因蛋白质编码序列区SNPs可能是特发性少精子症和无精子症的诱发因素之一,导致男性不育。

睾丸穿刺活检对特发性非梗阻性无精子症患者显微取精成功率的影响

目的:探讨特发性非梗阻性无精子症患者中,睾丸穿刺活检对显微取精成功率的预测作用。方法:回顾性分析了从2014年1月至2017年8月在北京大学第三医院生殖医学中心接受显微取精术的特发性非梗阻性无精子症患者的临床资料,并对是否行诊断性穿刺活检、以及不同穿刺活检结果患者的精子获得率进行分析,探讨睾丸穿刺活检结果对显微取精成功率的预测作用。结果:共237例接受显微取精术的特发性非梗阻性无精子症患者入选研究,总体的精子获得率为25.7%。未行诊断性睾丸穿刺活检的103例患者与行诊断性睾丸穿刺活检的134例患者精子获得率分别为26.2%和25.4%,两组间比较差异没有统计学意义(P>0.05);两组睾丸体积和血清卵泡刺激素水平分别为(4.3±1.4)m L vs.(8.5±2.4)m L和(36.1±5.2)IU/L vs.(26.1±3.5)IU/L,组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。在睾丸穿刺活检的患者中,术中镜检及术后病理均偶见少量精子患者的精子获得率为100.0%(7/7),术中镜检或术后病理可见精子的患者,精子获得率为47.2%(17/36),术中镜检及术后病理均未见精子的患者,精子获得率为11.0%(10/91),3组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:睾丸体积较小的特发性非梗阻性无精子症患者仍有一定机会通过显微取精术发现精子;睾丸穿刺活检结果(包括术中镜检及术后病理能否发现精子)对后期进行显微镜下睾丸切开取精有一定的预测作用,其中术中镜检及术后病理均未见精子的患者,显微取精术找到精子的概率较低。

miR-141-5p在特发性少精子症和无精子症中的表达及临床意义

目的探讨精浆miR-141-5p在特发性少精子症和无精子症中的表达及临床意义。方法选择特发性少精症37例,特发性无精症29例,另选同期因女方因素不孕前来检查的生育力评估正常的健康男性30例作为对照组。比较各组精浆miR-141-5p表达的差异,并绘制ROC曲线评价miR-141-5p在诊断特发性少精子症和无精子症中的临床价值。精子浓度及活力用计算机辅助精子分析系统,精子存活率用低渗膨胀实验,精子形态用Diff-Quick法;精浆miR-141-5p的表达采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR),以U6snRNA作为内参,采用相对定量2-Ct法。结果各组精子浓度有显著性差异(P<0.05),其他各质量参数差异均无统计学意义(均P>0.05)。各组间精浆miR-141-5p表达差异有统计学意义(P<0.05),特发性无精症>特发性少精症>正常对照组(均P<0.05)。精浆miR-141-5p诊断特发性无精症的最佳截断值为4.93,曲线下面积、敏感度和特异性分别为0.920、93.1%和76.7%;特发性少精症的最佳截断值为5.36,曲线下面积、敏感度和特异性分别为0.879、96.3%和72.9%。结论精浆miR-141-5p表达与不育症精子数量有关,其对临床诊断特发性少精症和特发性无精症有一定的应用价值。

FSH治疗特发性非梗阻性无精子症的疗效分析(附15例报告)

目的探讨FSH制剂治疗特发性非梗阻性无精子症患者的疗效及安全性,为患者的治疗提供临床参考。方法回顾性分析2016年6月至2017年6月于我院生殖中心就诊的15例特发性非梗阻性无精子症患者的临床资料。所有患者给予注射用尿促卵泡素每3天1次,每次75U肌肉注射,疗程6个月;治疗期间每2个月复查精液常规及血清FSH水平。观察分析治疗效果。结果 15例患者治疗结束后均无明显不适主诉及不良反应。治疗后3例患者精液检查中发现精子,ICSI助孕后2例患者妻子获得临床妊娠并生育健康婴儿。其余12例患者治疗后行睾丸显微取精手术,其中6例患者查到精子,ICSI助孕后2例患者妻子获得临床妊娠;6例患者未查到精子且病理结果为唯支持细胞综合征。结论注射用尿促卵泡素可以改善特发性非梗阻性无精子症患者的睾丸生精功能,治疗后部分患者精液可检出精子,还可以提高睾丸显微取精的精子获得率。

特发性精液质量异常的诊断与治疗

特发性精液质量异常包括特发性少、弱、畸形精子症、特发性无精子症以及特发性精液液化异常。导致特发性精液质量异常的可能原因包括年龄、附属性腺的非炎症性功能改变、感染因素、基因异常、精子线粒体改变、环境污染物的影响和细微的激素改变等。诊断特发性少、弱、畸形精子症和无精子症需要经过全面的病史询问、体格检查、精液分析、生殖激素检查、遗传学检查、免疫学检查等以排除已知的可能病因。特发性少弱畸形精子症的治疗包括使用克罗米芬、他莫西芬、重组FSH、安特尔、锌硒宝、左卡尼汀、重组生长激素、己酮可可碱等西药类、中成药以及中西医结合治疗等;特发性无精子症可在使用促精子生成药的基础上使用辅助生殖技术治疗;特发性精液液化异常主要通过中医药、中西医结合和体外处理技术治疗。随着诊断技术的发展,有望建立更加特异的精液质量异常的治疗措施和降低特发性精液质量异常的发生率。

显微镜下睾丸切开取精术在非梗阻性无精子症治疗中的临床应用新进展

非梗阻性无精子症（non-obstructive azoospermia,NOA）约占无精子症人群的60%,是由于各种不同原因导致的睾丸生精功能障碍,约有一半的患者无法明确病因,是男性生殖医学临床中的常见病和疑难病。得益于体外受精-胚胎移植技术的发展,尤其是卵泡内单精子注射技术的出现,理论上只需要一颗成熟的精子,胚胎试验室专家便可以通过卵泡内单精子注射技术进行体外受精,实现NOA患者孕育具有自己生物学后代的愿望。

200例无精子症流程化诊疗体会

目的:对无精子症流程化诊疗方式的效果进行分析讨论。方法:选择我院2011年9月-2013年9月间200例无精子症患者,所有患者均采用流程化治疗,并对患者的治疗效果进行分析。结果:71例梗阻患者10例接受手术治疗,其中有5例患者在治疗后3个月发现精液中存在精子;另有5例患者在治疗后半年发现精液中存在精子;其余61例患者均放弃手术直接要求辅助生殖技术(ART)助孕,行经皮附睾精子抽吸术/经皮睾丸精子抽取术—卵胞浆内单精子注射技术(PESA/TESE-ICSI)。129例特发性无精子症患者有113例接受药物治疗,其中有74例患者在治疗后三个月睾丸体积增大,血清卵泡生成激素(FSH)水平增高;7例患者治疗后3个月精液中发现精子;7例患者坚持治疗半年后精液中发现精子。32例患者选择供精人工授精(AID)他精法助孕,1例治疗中失访。结论:梗阻性无精子症患者可采用手术或辅助生殖进行治疗,特发性无精子症患者应该进行系统的药物治疗,并对患者进行一定时间段的观察,若治疗无效则考虑AID疗法等。

红白皂龙汤治疗男科疾病举隅

目的:介绍红白皂龙汤在男科疾病治疗中的应用。方法:采用红白皂龙汤治疗特发性无精子症、功能性不射精、睾丸痛、阴茎痛。结果:红白皂龙汤对男科疾病有较好的临床疗效。结论:红白皂龙汤可以治疗多种男科疾病。

双侧输精管缺如等三种不育患者CFTR基因突变筛查

目的探讨国人先天性双侧输精管缺如(CBAVD)、特发性少精子症(idiopathic oligospermia,IO)及特发性无精子症(idiopathic azoospermia,IA)患者CFTR基因有无突变,从而为患者行辅助生殖胚胎种植前是否需行常规的遗传学诊断提供依据。方法运用银染聚合酶链-单链构象多态性技术对25例CBAVD,40例IO,25例IA患者周围静脉血白细胞DNA的CFTR基因的2、3、4、5、7A、8、9、10、11、12、13A、14a、14b、15B1、9B、20、21、23共18个外显子进行检测。结果上述患者CFTR基因的18个外显子均未发现异常单链条带或位移。结论本组所检测的CFTR基因突变与国人精子发生尚无明确的相关性,国人在实施辅助生殖胚胎种植前是否需常规行CFTR基因突变检测有待进一步研究。

性轴激素LH、FSH、T水平测定对Klinefelter’s综合征的诊断意义

目的 测定 117例Klinefelter综合征 (Klinefelter’ssyndrome ,KS) ,37例特发性低促性腺激素性腺机能减退症(idiopathichypogonadotrapichypogonadism ,IHH) ,10 7例唯支持细胞综合征 (sertoli-cell-onlysyndrome ,SCOS) ,30例特发性无精子症 (idiopathicazoospermia ,IA) ,4 0例特发性少精子症 (idiopathicoligospermia ,IO)患者的性轴激素值 ,分析各疾病的LH、FSH、T值的差别 ,探索通过性轴激素测定诊断KS综合征的方法。方法 应用放免分析法测定血清性轴激素水平 ;外周血淋巴细胞用 16 4 0培养基常规培养 ,制片 ,作染色体核型分析。结果 通过测定血清LH、FSH、T值诊断KS ,敏感性为94 .87% ,特异性为 95 .79%。

2例男性不育的遗传因素探讨

男性不育是指婚后同居1年以上未采取任何避孕措施而女方未怀孕，发生率为10％左右。人们对常见的男性不育因素比较熟悉，而对特发性无精子症和少、弱、畸型精子症的病因认识不够。近年来通过采用细胞和分子生物学技术发现，这类患者的病因往往是基因突变和染色体畸变，包括染色体数量异常而影响性腺导致不育。这种疾病的发生率正逐年上升。我中心男性生殖科在20032007年收治的716例男性不育症患者中，其中2例由于染色体畸变而不能生育。现报道典型病例如下，并对其遗传因素加以讨论。

2种类型非梗阻性无精子症患者行显微睾丸取精术联合辅助生殖技术助孕结局分析

目的比较特发性非梗阻性无精子症(idiopathic non-obstructive azoospermia, iNOA)、纯合型克氏综合征患者行显微镜下睾丸取精术(microdissection testicular sperm extraction, micro-TESE),配偶同周期行卵胞质内单精子显微注射技术(intracytoplasmic sperm injection, ICSI)助孕的妊娠结局。方法 iNOA患者41例为iNOA组,纯合型克氏综合征患者42例为克氏综合征组,均行micro-TESE成功获取精子。2组患者配偶同周期取卵行ICSI助孕。比较2组患者年龄、体质量指数、双侧睾丸体积及血清卵泡刺激素、黄体生成素、总睾酮水平;比较2组配偶年龄、体质量指数、基础窦卵泡数及血清抗苗勒管激素、卵泡刺激素、黄体生成素、总睾酮水平;比较2组患者手术时间、有活动精子比率;比较2组妊娠结局及配偶双原核率、卵裂率、胚胎种植率、临床妊娠率。结果 2组患者年龄、体质量指数,配偶年龄、体质量指数、基础窦卵泡数及血清抗苗勒管激素、卵泡刺激素、黄体生成素、总睾酮水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。克氏综合征组患者左、右侧睾丸体积[(1.45±0.77)、(1.36±0.53)mL]均小于iNOA组[(6.78±4.05)、(7.15±3.91)mL](P<0.05),血清卵泡刺激素[(40.13±17.07)u/L]、黄体生成素[(21.31±7.60)u/L]水平均高于iNOA组[(21.16±14.93)、(10.77±7.54)u/L](P<0.05),血清总睾酮水平[(2.42±1.28)nmol/L]低于iNOA组[(3.44±2.10)nmol/L](P<0.05)。克氏综合征组患者手术时间[(69.0±16.9)min]短于iNOA组[(82.0±23.8)min](P<0.05),有活动精子比率(16.7%)与iNOA组(9.8%)比较差异无统计学意义(P>0.05)。克氏综合征组活产率(68.4%)高于iNOA组(44.4%)(P<0.05),配偶双原核率(62.9%)、卵裂率(94.0%)、胚胎种植率(60.3%)、临床妊娠率(76.3%)、早期流产率(10.3%)与iNOA组(63.7%、92.5%、47.6%、63.9%、13.0%)比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论 iNOA与克氏综合征患者采用micro-TESE,配偶同周期行ICSI助孕均可获得亲生子代,克氏综合征患者活产率较高。

河南汉族人群男性不育与Y染色体缺失相关性分析

目的探讨男性特发性无精子症和少精子症与Y染色体无精子症因子(AZF)微缺失的关系。方法采用聚合酶链反应技术对208例特发无精子症与少精子症患者和183例正常男性及10例正常女性Y染色体上AZF基因(STS)上的3个位点SY86、SY127、SY254及内参基因SRY、ZFY进行检测。结果 208例无精子症与少精子症患者中共检出Y染色体微缺失25例,缺失率为12.02%。其中48例无精症患者中发现10例(20.8%),160例少精症患者中发现15例(9.38%)。183例正常男性未检测出微缺失,10例正常女性仅有ZFY片段。结论 AZF缺失是特发性无精子症和少精子症造成男性不育的重要原因之一,对无精子症和少精子症患者有必要进Y染色体微缺失的常规检测。