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猪链球菌2型在感染兔体内的分布及其致病性研究
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作者 董妮华 陈小珺 +11 位作者 李昱昊 孙卿 陈梦莉 周黎笋 付宁宁 邵东华 刘珂 李宗杰 邱亚峰 李蓓蓓 魏建超 马志永 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第5期33-38,共6页
猪链球菌(Streptococcus suis,SS)是一种重要的人畜共患病原体,猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)1954年首次在英国分离鉴定,在我国和其他养猪业发达的国家已多次流行,已成为危害我国养猪业和公共卫生安全的一个重要传染病。... 猪链球菌(Streptococcus suis,SS)是一种重要的人畜共患病原体,猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)1954年首次在英国分离鉴定,在我国和其他养猪业发达的国家已多次流行,已成为危害我国养猪业和公共卫生安全的一个重要传染病。本研究用SS2-ZY05719株按10^(9)、10^(8)、10^(6)CFU腹腔注射途径人工感染健康的新西兰兔,3种剂量均可引起发病并死亡,新西兰兔临床症状明显,感染组平均体温升高1℃~2℃。同时分析了SS2在兔体各组织中的分布,结果显示,高剂量感染组出现明显的临床症状且快速死亡,感染剂量与发病程度有正相关性,对各试验组新西兰兔内脏组织进行检测发现,SS2主要集中在心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和脑等组织中,不同组织器官中的细菌载量也存在着一定的差异,本文研究了SS2感染新西兰兔后的临床症状和各组织载菌量,为猪链球菌的防治及致病机理研究提供参考。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 细菌载量 致病性 新西兰兔 动物模
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猪链球菌2型的主要毒力因子与先天性免疫逃逸机制
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作者 胡云皓 佟仁冬 +4 位作者 辛凌翔 刘燕 王豪杰 郝力力 朱良全 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2024年第10期98-105,共8页
猪链球菌(SS)是一种重要的猪病病原体,能引起猪的高热、脑膜炎、败血症、关节炎和神经症状等。该菌有33个血清型,其中猪链球菌2型(SS2)流行最广、致病性最强,且存在感染人的风险,是一种重要的人兽共患病原菌,严重危害养猪业和公共卫生... 猪链球菌(SS)是一种重要的猪病病原体,能引起猪的高热、脑膜炎、败血症、关节炎和神经症状等。该菌有33个血清型,其中猪链球菌2型(SS2)流行最广、致病性最强,且存在感染人的风险,是一种重要的人兽共患病原菌,严重危害养猪业和公共卫生安全。目前已发现百余种SS2毒力因子,包括荚膜多糖、溶菌酶释放蛋白、溶血素、烯醇化酶、核酸酶、菌毛蛋白、H因子、透明质酸裂解酶、表面蛋白、超氧化物歧化酶和其他代谢和调节因子等。这些毒力因子不仅与致病性密切相关,还在细菌的定殖、入侵、传播和免疫逃逸过程发挥重要作用。先天性免疫应答是病原微生物入侵机体的第一道防线,可以非特异性识别并清除病原微生物。然而,SS2已经进化出多种逃避宿主防御的机制,如逃脱中性粒细胞胞外陷阱、逃逸补体反应、侵袭中枢神经系统、逃逸活性氧的杀伤作用、促进肽聚糖的N-脱乙酰化和逃逸自噬等。目前,SS2的防控多依赖于抗菌药物和疫苗免疫,了解SS2的免疫逃避机制对开发高效的疫苗和靶向药物具有重要意义。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 毒力因子 逃逸 先天性免疫
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优化培养基组分提高猪链球菌2型NT15B菌株活菌数的研究
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作者 马林丽 徐国强 +3 位作者 张秋萍 车巧林 史劲松 许正宏 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第7期2776-2786,共11页
【目的】以猪链球菌2型NT15B菌株为研究对象,通过优化发酵培养基组分提高菌株活菌数,降低生产成本,为猪链球菌2型NT15B菌株的高密度培养及猪链球菌病疫苗的大规模生产和推广提供参考。【方法】试验以培养的猪链球菌2型NT15B菌株最高活... 【目的】以猪链球菌2型NT15B菌株为研究对象,通过优化发酵培养基组分提高菌株活菌数,降低生产成本,为猪链球菌2型NT15B菌株的高密度培养及猪链球菌病疫苗的大规模生产和推广提供参考。【方法】试验以培养的猪链球菌2型NT15B菌株最高活菌数为筛选指标,通过单因素试验筛选菌株发酵培养基中碳源、氮源(有机氮源和无机氮源)、无机盐金属离子、磷酸缓冲液的最佳组分及浓度,并根据单因素筛选结果选择碳源浓度、有机氮源总浓度、有机氮源比例、磷酸盐缓冲液浓度4个因素各3个水平设计正交试验,并进一步进行多因素的筛选与验证。【结果】猪链球菌2型NT15B菌株发酵培养基最优条件为6.0 g/L蔗糖、1.0 g/L尿素、10 g/L酵母提取物YE7与20 g/L酵母蛋白胨Nucel 887混合氮源,1.0 g/L NaCl、9.58 g/L K_(2)HPO_(4)·3H_(2)O、1.09 g/L KH_(2)PO_(4)、1 mmol/L MgSO_(4)·7H_(2)O、0.3 g/L L-抗坏血酸。采用此最优组合,摇瓶培养猪链球菌2型NT15B活菌数最高达80.83×10^(8)CFU/mL,较优化前提高256.08%。【结论】优化后的培养基能有效提高猪链球菌2型NT15B菌株活菌数,降低了生产成本,为发酵罐水平的优化提供参考。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 活菌数 培养基组分 优化
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基于响应面分析的高抗原活性猪链球菌2型疫苗培养基的研制与效果评价研究 被引量:1
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作者 苗森 牛得权 +5 位作者 张阳阳 刘翔 蒋富凤 张菊梅 万强 吴清平 《饲料研究》 CAS 北大核心 2024年第1期86-92,共7页
试验旨在研制具有高抗原活性的猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)疫苗培养基。研究以SS2 CVCC60615株为试验对象,通过单因素试验、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验和响应面分析得到SS2疫苗培养基。培养基发酵验证结果显示,... 试验旨在研制具有高抗原活性的猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)疫苗培养基。研究以SS2 CVCC60615株为试验对象,通过单因素试验、Plackett-Burman试验、最陡爬坡试验和响应面分析得到SS2疫苗培养基。培养基发酵验证结果显示,SS2疫苗培养基菌液最大活菌数为1.09×10^(9) CFU/mL,是TSB培养基最大活菌数的2.41倍。测定SS2不同时间点的抗原活性发现,在SS2发酵培养过程中当活菌数达到最大值后的1~3 h内细菌的抗原活性最高。小鼠感染试验表明,SS2抗原活性最高时制备的灭活疫苗与商品化灭活疫苗相比具有更高的免疫球蛋白G(IgG)抗体效价和疫苗保护率。研究表明,采用研制得到的高抗原活性SS2疫苗培养基制备的灭活疫苗具有IgG抗体效价高、免疫保护力强的优点。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 响应面分析 高抗原活性 疫苗培养基
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致脑膜炎猪链球菌2型的分子分型鉴定及其生物学特性
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作者 李芃绪 李世景 +11 位作者 孙骏 项维 赵苗苗 侯天牧 李华明 广敏 陈瑞格 徐梦然 吴晓敏 姜合祥 雷连成 张付贤 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期1192-1207,共16页
旨在了解猪源致脑膜炎猪链球菌2型的分子分型和致病性及其生物学特性。本研究从患病猪的脑组织中分离到1株猪链球菌PX0923,通过电镜观察、16S rRNA基因测序、多重PCR、PCR-RFLP和多位点序列分析(MLST)等方法对其进行血清型和分子分型鉴... 旨在了解猪源致脑膜炎猪链球菌2型的分子分型和致病性及其生物学特性。本研究从患病猪的脑组织中分离到1株猪链球菌PX0923,通过电镜观察、16S rRNA基因测序、多重PCR、PCR-RFLP和多位点序列分析(MLST)等方法对其进行血清型和分子分型鉴定,毒力基因、生物被膜形成能力、耐药基因检测、小鼠感染试验、抗生素和中药药敏试验分析分离株PX0923的致病性和药物敏感性。结果表明,分离菌株PX0923为革兰阳性菌,电镜下可见连续排列成链状的卵圆形菌体;PCR和16S rRNA基因系统发育树分析确定其属于猪链球菌2型;序列分型为ST7,与ST1型猪链球菌聚为一支;携带epf+/mrp+/sly+/gapdh+/fbps+/orf2+/sao+7种毒力基因,呈现α型溶血活性;感染小鼠可导致小鼠肺、脾和肝等多个器官不同程度的病变,出现了小鼠脑膜炎等与病猪类似的临床症状;半数致死量(LD50)为1.08×10^(9)CFU/小鼠,提示PX0923可引起小鼠脑膜炎。分离菌株对庆大霉素、卡那霉素、新霉素、阿米卡星等12种药物耐药,携带耐药基因:aadA1和bla-TEM,对中药全蝎和三七敏感。本研究分离到猪源猪链球菌PX0923为血清2型,MLST分型为ST7,其携带多种毒力基因和耐药基因,感染小鼠可引起脑膜炎等多组织损伤;对多种抗生素和中药全蝎、三七敏感。研究结果为猪链球菌的流行和溯源分析提供了分子生物学基础,对致脑膜炎猪链球菌感染的防控提供参考依据。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 分子分 ST7 生物学特性 耐药性 中药
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猪链球菌2型核糖核酸酶Ⅲ的克隆表达及催化特性分析
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作者 孙文 张永毅 +4 位作者 陆畅 朱德文 尹媛媛 徐泉明 陈叶 《畜牧与兽医》 CAS 北大核心 2024年第1期46-55,共10页
为了研究猪链球菌2型(SS2)核糖核酸酶Ⅲ(RNaseⅢ)的催化特性,利用大肠杆菌BL21(DE3)异源表达猪链球菌2型RNaseⅢ(SS-RNaseⅢ)并通过镍柱亲和层析的方法分离纯化。异源表达研究显示,重组蛋白RNaseⅢ大部分为可溶性表达;催化特性研究显示,... 为了研究猪链球菌2型(SS2)核糖核酸酶Ⅲ(RNaseⅢ)的催化特性,利用大肠杆菌BL21(DE3)异源表达猪链球菌2型RNaseⅢ(SS-RNaseⅢ)并通过镍柱亲和层析的方法分离纯化。异源表达研究显示,重组蛋白RNaseⅢ大部分为可溶性表达;催化特性研究显示,RNaseⅢ主要依赖Mg^(2+)或Mn^(2+)发挥催化功能,并在不同离子浓度和pH值环境下具有不同的催化活性;底物特异性研究显示,RNaseⅢ特异性切割长度为30 bp的双链RNA,同时对内源性的rnc mRNA和5S rRNA具有良好的特异性。上述结果表明,相较于其他细菌RNaseⅢ,SS-RNaseⅢ具有独特的催化特性,为深入理解RNaseⅢ如何介导SS2致病机制奠定了基础。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 核糖核酸酶Ⅲ 原核表达 催化特性
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广东省东莞市屠宰场猪群猪链球菌2型感染及环境污染状况调查 被引量:2
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作者 杨振波 刘庆辉 +2 位作者 胡毅军 陈世文 李永福 《中国动物检疫》 CAS 2023年第7期36-39,68,共5页
为了解屠宰环节猪群猪链球菌2型感染及环境污染情况,评估屠宰环节猪链球菌2型传播风险,在广东省东莞市所有的10个生猪屠宰场采集570份猪扁桃体、1200份环境拭子样品,以及120份猪胴体和120份猪内脏表面拭子样品,采用荧光PCR方法进行猪链... 为了解屠宰环节猪群猪链球菌2型感染及环境污染情况,评估屠宰环节猪链球菌2型传播风险,在广东省东莞市所有的10个生猪屠宰场采集570份猪扁桃体、1200份环境拭子样品,以及120份猪胴体和120份猪内脏表面拭子样品,采用荧光PCR方法进行猪链球菌2型核酸检测。结果显示:猪扁桃体样品的猪链球菌2型阳性率为0.88%;屠宰环境拭子样品的阳性率为3.17%,其中待宰区为3.50%,屠宰区为8.50%,分割区为4.00%,屠宰工具为3.00%;在车间出入口的猪胴体和猪内脏表面拭子样品中检出猪链球菌2型阳性,其中猪胴体阳性率为0.83%,猪内脏阳性率为4.17%。结果表明,东莞市屠宰场猪群中存在猪链球菌2型感染,猪群携带的病原对屠宰加工环境以及屠宰加工产品可造成不同程度的污染。因而屠宰场存在传播猪链球菌2型的风险,需要加强对屠宰场环境及屠宰用具的清洗消毒以及相关职业人群的自身防护教育。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 屠宰场 荧光PCR 环境污染 东莞
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基于网络药理学探讨黄芩提取物防治猪链球菌2型感染的作用机制 被引量:1
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作者 刘佳丽 闫普普 +7 位作者 刘恋 朱君 夏瑾瑾 黄永熙 白若男 郭利伟 刘国平 杨小林 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2023年第12期5170-5185,共16页
【目的】探索黄芩提取物防治猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)感染的潜在作用机制。【方法】利用GEO数据库收集SS2感染不同细胞的转录组数据,通过GEO2R在线软件筛选差异表达基因,并利用STRING数据库与Cytoscape v3.8.2软件... 【目的】探索黄芩提取物防治猪链球菌2型(Streptococcus suis type 2,SS2)感染的潜在作用机制。【方法】利用GEO数据库收集SS2感染不同细胞的转录组数据,通过GEO2R在线软件筛选差异表达基因,并利用STRING数据库与Cytoscape v3.8.2软件构建蛋白互作(PPI)网络并进行拓扑分析,通过GO功能和KEGG通路富集分析筛选SS2感染机体后核心蛋白、生物功能和信号转导途径变化。采用液相色谱质谱联用(LC-MS)分析并鉴定黄芩提取物的组成成分,利用Swiss ADME和SwissTargetPredication数据库筛选黄芩提取物的活性成分并预测其作用靶点;运用网络药理学方法将疾病靶点与黄芩提取物有效成分作用靶点相结合,进一步明确黄芩提取物抗SS2感染机制。通过分子对接和实时荧光定量PCR方法验证网络药理学预测结果的可行性。【结果】GEO数据库的2组基因芯片共鉴定出1308个SS2感染差异表达基因,PPI分析筛选出核心基因70个,GO功能富集分析显示显著富集条目主要涉及细胞因子介导的信号通路和对细胞因子刺激的反应等,KEGG通路富集分析涉及TNF、PI3K-Akt、JAK-STAT等信号转导途径。黄芩提取物共包括31个有效成分,包括汉黄芩素和黄芩苷等,其可能影响VEGFA、TNF和PPARG等核心靶点,涉及炎症反应、细胞凋亡和促进血管新生等多个生物功能和信号通路。分子对接结果显示,黄芩提取物中汉黄芩素和黄芩苷与TNF、PPARG和VEGFA有较好的结合能。实时荧光定量PCR结果显示,SS2感染后猪肺泡巨噬细胞(PAMs)细胞中CA9、PPARG、JUN、SCD、JAK3和VEGFA基因mRNA水平均显著上调(P<0.05),黄芩提取物干预后,上述基因mRNA表达水平均显著下降(P<0.05)。【结论】SS2感染机体后涉及细胞因子介导的生物过程、TNF等信号通路发生变化,黄芩提取物有效成分可能通过AMPK、PI3K-Akt、GFR、TNF等信号通路共同参与机体凋亡调控、炎症反应、血管生成等生物过程从而抗SS2感染。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 黄芩提取物 液质联用 网络药理学 分子对接
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低浓度阿奇霉素对猪链球菌2型蛋白表达、荚膜多糖与药物敏感性的影响 被引量:1
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作者 杨艳北 许晶 +5 位作者 刘婉萍 陶艾妮 冯育林 孙勇 王闯 刘建 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第2期757-765,共9页
本研究通过探索低浓度阿奇霉素对猪链球菌2型蛋白表达、荚膜多糖与药物敏感性的影响,为进一步研究环境中低浓度抗生素对微生物的影响奠定基础。用低浓度阿奇霉素处理猪链球菌2型,利用蛋白质组学iTRAQ技术,筛选关键差异表达蛋白。同时测... 本研究通过探索低浓度阿奇霉素对猪链球菌2型蛋白表达、荚膜多糖与药物敏感性的影响,为进一步研究环境中低浓度抗生素对微生物的影响奠定基础。用低浓度阿奇霉素处理猪链球菌2型,利用蛋白质组学iTRAQ技术,筛选关键差异表达蛋白。同时测定猪链球菌2型的荚膜多糖含量和药物敏感性。结果显示,共鉴定到差异表达蛋白174个,占总鉴定蛋白的11.6%,多数差异表达蛋白参与催化和代谢过程,属于膜蛋白,其中,3个荚膜多糖蛋白、9个ABC转运蛋白、1个50 S核糖体蛋白、1个核糖体RNA甲基转移酶、1个DNA回旋酶上调表达;8个荚膜多糖蛋白、4个50S核糖体蛋白、4个30S核糖体蛋白、1个核糖体RNA甲基转移酶、1个DNA聚合酶IV下调表达。用低浓度阿奇霉素处理猪链球菌2型,发现其对多种抗生素的敏感性降低,存活下来的菌株,恢复正常培养后,药物敏感性恢复。用低浓度阿奇霉素处理猪链球菌2型,荚膜多糖含量也未发生大幅度变化。猪链球菌2型通过改变自身蛋白质组的表达量,以适应低浓度阿奇霉素的选择压力。与低浓度阿奇霉素共存时,猪链球菌2型开启外排泵系统,会增加细菌产生多重耐药的风险。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 阿奇霉素 荚膜多糖 药物敏感性
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四川某猪场猪链球菌2型菌株的分离鉴定与耐药性分析
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作者 张孟思 陈斌 +3 位作者 刘珈均 张毅 阳爱国 邵靓 《四川畜牧兽医》 2023年第7期32-34,37,共4页
本研究采集某发病猪场的环境及病猪样品,通过细菌分离纯化、PCR鉴定为猪链球菌2型致病菌株,随后用纸片扩散法测定该菌株的耐药性,结果显示对青霉素类、头孢类(头孢噻呋)、喹诺酮类、糖肽类、氨基糖苷类、多肽类最为敏感,对头孢类(头孢西... 本研究采集某发病猪场的环境及病猪样品,通过细菌分离纯化、PCR鉴定为猪链球菌2型致病菌株,随后用纸片扩散法测定该菌株的耐药性,结果显示对青霉素类、头孢类(头孢噻呋)、喹诺酮类、糖肽类、氨基糖苷类、多肽类最为敏感,对头孢类(头孢西丁)、氯霉素类较为敏感,对磺胺类、碳青霉烯类(亚胺培南)、四环素类、大环内酯类耐药。选取敏感的10种药物进行最小抑菌浓度(MIC)值测定,结果显示:阿莫西林的MIC为8μg/mL,苯唑西林、头孢噻呋、氧氟沙星、万古霉素和庆大霉素的MIC为4μg/mL,恩诺沙星和恩拉霉素的MIC为1μg/mL。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 分离鉴定 药敏试验 耐药性
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猪链球菌2型四川株与江苏株对SPF猪的致病性 被引量:11
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作者 崔立 朱建国 +4 位作者 华修国 王姝优 钱华冬 陆承平 吴忠亮 《上海交通大学学报(农业科学版)》 2006年第1期54-57,共4页
以SPF巴马小型猪为实验动物,分别用猪链球菌2型四川分离株以及江苏分离株进行攻击,通过临床症状观察、病理解剖检查、病原分离鉴定以及病原组织分布检测等,比较二者的致病性。结果表明:四川株攻击猪40 h后出现神经症状,关节肿大和全身... 以SPF巴马小型猪为实验动物,分别用猪链球菌2型四川分离株以及江苏分离株进行攻击,通过临床症状观察、病理解剖检查、病原分离鉴定以及病原组织分布检测等,比较二者的致病性。结果表明:四川株攻击猪40 h后出现神经症状,关节肿大和全身出血等不很明显;病程为6 ̄7 d,而江苏株攻毒后18 h即出现神经症状,20 h即有死亡者,关节肿大和全身出血明显。死后病理解剖观察可见,四川株猪主要表现为肺淤血、肿大以及脑水肿,而未见败血症的变化,全身性出血不明显;而江苏株猪除了肺淤血、肿大以及脑水肿外,出现明显的败血症变化。均分离到与攻击相同的细菌,细菌溶血特性不明显,革兰氏阳性染色典型。细菌在组织中分布不同菌株也有一定的差异。 展开更多
关键词 猪链球菌2型四川分离株 猪链球菌2型江苏分离株 致病性 SPF巴马小 动物模
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检测猪链球菌2型的溶菌酶释放蛋白(MRP)的PCR方法的建立 被引量:23
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作者 倪艳秀 何孔旺 +4 位作者 王继春 何家惠 还红华 陆承平 姚火春 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期20-22,共3页
根据猪链球菌 2型的mrp基因自行设计和合成了一对可扩增长度为 885bp目的片段的引物 ,成功地建立了检测溶菌酶释放蛋白 (MRP)的PCR方法。用XbaⅠ内切酶进行酶切 ,获得了与预期一致的 5 78bp和 30 7bp的 2个片段。并进行了PCR的特异性试... 根据猪链球菌 2型的mrp基因自行设计和合成了一对可扩增长度为 885bp目的片段的引物 ,成功地建立了检测溶菌酶释放蛋白 (MRP)的PCR方法。用XbaⅠ内切酶进行酶切 ,获得了与预期一致的 5 78bp和 30 7bp的 2个片段。并进行了PCR的特异性试验和敏感性试验。对马链球菌兽疫亚种、猪丹毒杆菌、猪肺疫巴氏杆菌和猪肺炎支原体的PCR检测结果均呈阴性 ;检测的敏感度可达 10 0个细菌。另外 ,对 9株从病猪体内分离的猪链球菌 2型菌株进行了检测 ,8株呈阳性 ;对 15份正常屠宰猪扁桃体分离物的检测结果是 1份为阳性。结果表明此法特异性和敏感性均很高 ,可作为MRP快速诊断和流行病学调查的手段。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 溶菌酶释放蛋白 PCR 检测方法
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广东省猪链球菌2型菌株毒力基因及分子分型分析 被引量:18
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作者 陈经雕 刘美真 +3 位作者 柯碧霞 谭海玲 李柏生 柯昌文 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期986-990,共5页
目的掌握广东地区猪链球菌2型菌株毒力因子及分子分型情况,为诊断、治疗和制定防控措施提供科学依据。方法选取荚膜多糖(cps2J)、溶菌酶释放蛋白(mrp)、溶血素(sly)、谷氨酸脱氢酶(gdh)、胞外因子(ef)等5个猪链球菌2型主要毒力基因,分... 目的掌握广东地区猪链球菌2型菌株毒力因子及分子分型情况,为诊断、治疗和制定防控措施提供科学依据。方法选取荚膜多糖(cps2J)、溶菌酶释放蛋白(mrp)、溶血素(sly)、谷氨酸脱氢酶(gdh)、胞外因子(ef)等5个猪链球菌2型主要毒力基因,分别设计引物对分离自病人、病猪的22株猪链球菌2型菌株进行PCR检测,并对菌株进行MLST分型分析。结果 22株菌分为5种毒力基因型,其中cps2J+/mrp+/sly+/gdh+/ef+型别为病人及病猪菌株所共有,cps2J+/mrp+/sly-/gdh-/ef+、cps2J+/mrp+/sly-/gdh+/ef+为病人菌株所特有,cps2J+/mrp-/sly+/gdh+/ef+、cps2J+/mrp-/sly-/gdh+/ef-为病猪菌株所特有;MLST分型结果显示,22株分为ST1、ST7和ST28三个型别,其中ST1、ST7型为病人和病猪菌株所共有,均同属于ST1克隆复合物,ST28型为病猪所特有。结论广东地区病人、病猪的猪链球菌2型菌株毒力基因型及MLST分子分型均呈现多样化,且部分型别为两者所共有,为阐明猪传染给人提供了直接的证据。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 毒力基因 PCR 分子分
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猪链球菌2型昆明鼠动物病理模型的建立 被引量:19
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作者 刘国平 梁雄燕 +6 位作者 李江华 杨小林 程太平 金升藻 唐登华 吴斌 陈焕春 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期795-798,共4页
为研究猪链球菌2型的病原特性、致病机理及对其疫苗与救治药物效果评价提供平台,选用20~25 g健康昆明鼠,以猪链球菌2型山东株为病原,以腹腔注射为感染途径,对猪链球菌2型昆明鼠病理模型进行了探讨(试验随机分为5组,每组10只)。结果表明... 为研究猪链球菌2型的病原特性、致病机理及对其疫苗与救治药物效果评价提供平台,选用20~25 g健康昆明鼠,以猪链球菌2型山东株为病原,以腹腔注射为感染途径,对猪链球菌2型昆明鼠病理模型进行了探讨(试验随机分为5组,每组10只)。结果表明,感染鼠能表现出典型的临床症状及病理变化,具有较好的重复性,且临床症状及病理变化与本动物猪类似。剖检后从脑、肺,以及胸腔、腹腔和心包积液中都可以分离出猪链球菌2型,分离菌株生物学特性与攻毒菌株一致。按Reed-Munch法计算此菌株对昆明鼠的半数致死量为7×108cfu。感染后2周的血清平均抗体水平为1∶64。这说明昆明鼠能够很好地用作猪链球菌2型的动物病理模型。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 昆明鼠 病理模 致病性 免疫原性
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猪链球菌2型谷氨酸脱氢酶基因的克隆表达及酶活性测定 被引量:17
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作者 赵华梅 潘秀珍 +3 位作者 王长军 郭恒彬 李先富 唐家琪 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期22-25,共4页
目的克隆表达猪链球菌谷氨酸脱氢酶(GDH),并测定其酶活性。方法设计引物采用PCR法自海安病人分离株Habb基因组扩增GDH的编码基因gdh,进行序列分析;构建重组表达质粒pGEX4T-2-gdh,转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达,PAGE检测;通过亲和层... 目的克隆表达猪链球菌谷氨酸脱氢酶(GDH),并测定其酶活性。方法设计引物采用PCR法自海安病人分离株Habb基因组扩增GDH的编码基因gdh,进行序列分析;构建重组表达质粒pGEX4T-2-gdh,转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达,PAGE检测;通过亲和层析纯化,获得融合蛋白GST-GDH,用凝血酶剪切去除GST,获得完整的GDH纯化蛋白后测定其酶活性。结果PCR法自猪链球菌菌株Habb基因组扩增出约1.3kb的目的片段;序列分析显示猪链球菌的GDH具有GDH蛋白家族I的典型保守序列;体外构建筛选原核表达质粒pGEX4T-2-gdh,诱导重组体,表达的蛋白经PAGE初步测定其相对分子质量(Mr)约为71×103;用凝血酶酶切去除融合蛋白中的GST标签后得到的蛋白相对分子质量为45×103;GDH活性测定显示猪链球菌GDH利用α-酮戊二酸做底物,用NADPH做辅酶催化氨的同化和谷氨酸的合成。结论克隆并表达出猪链球菌GDH;猪链球菌GDH属于GDH蛋白家族I,是NADP(H)-特异性GDH。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 谷氨酸脱氢酶 GDH家族I NADP(H)一特异性GDH
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四川资阳地区猪链球菌2型检测及其特性比较研究 被引量:11
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作者 刘军 石谦 +6 位作者 孙洋 张东 尹铁勇 郭学军 高宏伟 涂长春 冯书章 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第12期1095-1099,共5页
目的对从四川省资阳及附近猪链球菌2型感染疫区采集的病料进行病原菌分离和特性比较研究。方法首先利用病原菌分离技术、多重定性PCR检测和荧光定量PCR检测技术进行病原菌的分离和鉴定;然后选取5株主要疫点代表菌株与1株国外参考菌株进... 目的对从四川省资阳及附近猪链球菌2型感染疫区采集的病料进行病原菌分离和特性比较研究。方法首先利用病原菌分离技术、多重定性PCR检测和荧光定量PCR检测技术进行病原菌的分离和鉴定;然后选取5株主要疫点代表菌株与1株国外参考菌株进行细菌药敏试验和实验动物腹腔接种感染试验;此外还对猪链球菌2型分离株基因组中的溶原性噬菌体进行了初步研究。结果(1)从采集的病料中分离到11株猪链球菌2型菌,都具有胞外因子(EF)和溶菌酶释放蛋白(MRP)两个特征性毒力因子;(2)6株试验菌株对氨苄青霉素、先锋必素、头胞克肟、乙酰螺旋霉素、万古霉素、复方新诺明和利福平等7种抗生素高度敏感。与国外参考菌株相比,资阳分离株具有链霉素抗性;(3)试验菌株对BALB/c鼠均具有一定的毒力,但毒力程度上有差异。资阳分离株449-1和国外参考株6#对鼠具有相同的强致死性(3/3死亡),资阳458分离株致死性较弱(0/3死亡),其它菌株具有中等强度的致死性。利用449-1、458和6#分离株进行家兔感染实验,各菌株均可引起家兔感染发病,死亡率分别是1/2、2/2和2/2;(4)国内首次获得了猪链球菌2型流行菌株匿藏着溶原性噬菌体的证据,该噬菌体与细菌毒力和适应性的关系有待深入研究。结论通过对资阳及附近地区猪链球菌2型分离株与国外分离株特性的比较研究,明确了流行菌株间在毒力和药物敏感性上存在着差异,细菌毒力差异表现为对动物种属的嗜性,并筛选出了猪链球菌病防治的可选择性药物。为进一步研究猪链球菌2型菌株的致病机理以及猪链球菌病的防治奠定了基础。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 PCR 药物敏感性 致病性
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猪链球菌2型和9型广东分离株的病原特性 被引量:18
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作者 余炜烈 李春玲 +1 位作者 王贵平 陆承平 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期650-654,共5页
2005年夏秋季从广东地区9例病猪中分离到2株猪源链球菌,均呈链球菌的特征形态,α溶血,生化试验结果相似,且都不与A^G链球菌群特异性血清发生凝集。经PCR及测序鉴定,一株为猪链球菌2型,另一株为猪链球菌9型。2型分离株的3个毒力基因均为... 2005年夏秋季从广东地区9例病猪中分离到2株猪源链球菌,均呈链球菌的特征形态,α溶血,生化试验结果相似,且都不与A^G链球菌群特异性血清发生凝集。经PCR及测序鉴定,一株为猪链球菌2型,另一株为猪链球菌9型。2型分离株的3个毒力基因均为阳性(sly+epf+mrp+),但对小鼠的毒力较低,2/10小鼠在接种细菌后第6~15 d发病致死,细菌在小鼠中的带菌时间至少15 d;9型分离株3个毒力因子均阴性(sly-epf-mrp-),但对小鼠有较强毒力,9/10小鼠在接种细菌后5 d内发病死亡,对小鼠的半数致死量为1.70×106CFU。表明广东地区致病性猪链球菌不仅存在2型,而且还有9型。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 猪链球菌9 病原特性 PCR
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Taqman-MGB双重探针PCR技术检测含89K毒力岛猪链球菌2型 被引量:9
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作者 朱水荣 王志刚 +4 位作者 杨婷婷 金大智 张政 徐宝祥 姚萍萍 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期434-438,共5页
目的建立同时检测猪链球菌(Streptococcus suis,SS)种特异性16S rRNA及其89K毒力岛基因的SS2中国毒力株双重荧光定量PCR方法。方法利用SS种特异性16S rRNA和89K毒力岛基因的特异性序列设计引物和MGB探针。优化荧光定量PCR反应条件和反... 目的建立同时检测猪链球菌(Streptococcus suis,SS)种特异性16S rRNA及其89K毒力岛基因的SS2中国毒力株双重荧光定量PCR方法。方法利用SS种特异性16S rRNA和89K毒力岛基因的特异性序列设计引物和MGB探针。优化荧光定量PCR反应条件和反应体系,并对21株猪链球菌2型(Streptococcus suis serotype 2,SS2)、18株其它链球菌、9株葡萄球菌、5株其它菌株进行检测,验证该方法的特异性、敏感性、重复性。结果该技术的种特异性16S rRNA及其89K毒力岛两基因检测灵敏度分别为6个拷贝/反应(或12cfu/mL)及27拷贝/反应(或58cfu/mL);重复性实验,变异系数为0.30%~2.11%;从菌株核酸的提取至检测完成仅需2h左右。用该方法对有关菌株进行考核,21株SS2菌检测结果均为SS种特异性16S rRNA基因阳性,其中15株含有89K毒力岛的SS2菌株的89K毒力岛基因检测均阳性;而非SS菌株的16S rRNA和89K毒力岛基因检测结果均为阴性。对49份呼吸道咽拭子、血液应急样本等进行实际考核,有2份血液样本16S rRNA基因阳性,其中1份血液样本89K毒力岛基因阳性。结论本次建立的Taq Man-MGB双重探针荧光定量PCR方法特异、快速、敏感,可特异性鉴定SS2中国毒力株(含有89K毒力岛),区分SS与非SS菌以及是否含有89K毒力岛基因,该方法的建立将有益于目前针对猪链球菌2型中国毒力株快速定量检测,以及疑似猪链球菌病患者病原的早期甄别、猪链暴发疫情调查及猪群暴发或带菌调查与评估等。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 双重荧光定量PCR MGB探针 16S RDNA基因 89K毒力岛
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猪链球菌2型四川分离株猪体回归试验 被引量:13
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作者 王君玮 王志亮 +7 位作者 赵永刚 赵云玲 郑东霞 王伟伟 王涛 刘华雷 陈义平 王珊 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期508-511,共4页
选用35~38日龄的健康断奶仔猪21头,分3组,用2005四川分离株SSsc0501分别经静脉、肌肉注射和口服3种途径感染,进行猪体回归试验。肌肉注射组(含菌0.6×10^8个/mL)16h开始出现症状,至36h全部死亡,发病率、病死率均为100%... 选用35~38日龄的健康断奶仔猪21头,分3组,用2005四川分离株SSsc0501分别经静脉、肌肉注射和口服3种途径感染,进行猪体回归试验。肌肉注射组(含菌0.6×10^8个/mL)16h开始出现症状,至36h全部死亡,发病率、病死率均为100%;静脉注射组(含菌0.2×10^8个/mL)25h开始出现症状,48h内全部死亡,发病率和病死率均为100%;口服攻毒组(含菌2×10^8个/mL)90h后开始有发病症状,第9天有1头死亡,发病率75%,病死率33%。从感染病死猪的肝脏、脾脏、肾脏、心血、大脑、脑脊液、淋巴结、肺脏和关节液中均分离到链球菌,经鉴定为试验攻毒的目的菌,表明猪体能够很好地用于猪链球菌2型动物感染模型,同时说明该菌侵害器官广泛,为进一步探讨该病的综合防制提供了重要技术依据。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 回归试验 PCR试验 毒力因子
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猪链球菌2型上海分离株的病原特性鉴定 被引量:10
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作者 张苏华 王永康 +3 位作者 刘佩红 沈素芳 沈莉萍 王建 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期265-269,共5页
1997年底上海地区分离到一株猪链球菌 2型 ,结合培养特性、生化特性、血清定型及动物试验等对其进行了鉴定。其形态、染色及培养基本符合链球菌的特点 ,具有 β溶血。生化试验结果不稳定。用国际通用的链球菌A_G乳胶分型诊断液检测分离... 1997年底上海地区分离到一株猪链球菌 2型 ,结合培养特性、生化特性、血清定型及动物试验等对其进行了鉴定。其形态、染色及培养基本符合链球菌的特点 ,具有 β溶血。生化试验结果不稳定。用国际通用的链球菌A_G乳胶分型诊断液检测分离株 ,不在其检测范围。但能凝集猪链球菌 2型标准阳性血清。人工接种 4日龄乳鼠和猪有致病性。本试验对上海地区首次分离的猪链球菌 2型菌株进行了病原特性鉴定 ,证实猪链球菌 2型在上海存在 ,为今后防治猪链球菌病提供了可靠的科学依据。 展开更多
关键词 猪链球菌2型 分离 鉴定 病原特性
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