玛咖灵芝片缓解小鼠体力疲劳的研究

研究玛咖灵芝片对改善小鼠体力劳动过度的疲倦状态,增加体力和身体机能的作用.本次实验采用清洁级雄性ICR小鼠作为动物模型,以体重为划分依据随机分组,包括低、中、高剂量组和阴性对照组4组.其中低、中、高剂量组分别给予剂量为0.38、0.75、2.25 g/kg·bw的玛咖灵芝片药剂进行灌胃;阴性对照组为20 mL/kg·bw的蒸馏水灌胃.每天给药1次,共给药30 d.实验期间,小鼠每日进行负重游泳实验,与此同时,使用比色法对血清中尿素、肝糖原和血乳酸的含量进行检测.比色法检测结果显示,与阴性对照组相比较,玛咖灵芝片不同剂量组的小鼠负重游泳的时间明显延长(P<0.05).另外,玛咖灵芝片不同剂量组的小鼠负重游泳后,其血浆尿素浓度均明显低于阴性对照组(P<0.05),肝脏糖原含量均显著高于阴性对照组(P<0.05),血乳酸浓度均显著低于阴性对照组(P<0.05).玛咖灵芝片可通过提高肝糖原含量和阻止血乳酸堆积的方式有效改善小鼠体力劳动过度的疲倦状态,增加体力和身体机能.

油菜花粉玛咖咀嚼片的制备及槲皮素和山奈酚的含量测定

目的:探究油菜花粉玛咖咀嚼片的制备工艺及槲皮素和山奈酚含量测定的方法。方法:通过湿法制粒工艺,制备油菜花粉玛咖咀嚼片;采用高效液相色谱(HPLC)法对油菜花粉玛咖咀嚼片中槲皮素和山奈酚的含量进行测定,色谱柱为ODS-C_(18)柱,流动相为甲醇-水,进行等度洗脱,体积流量为1.0 mL/min;柱温为35℃,检测波长为370 nm,进样量为5μL。结果:油菜花粉玛咖咀嚼片的制备工艺为油菜花粉∶玛咖提取物粉末∶填充剂=1∶1∶2,填充剂(微晶纤维素:木糖醇:乳糖=6∶4∶3)。所得咀嚼片表面光洁、甜度适中且质量稳定可控。槲皮素和山奈酚的线性范围分别为2.29~45.83μg/mL、3.75~75μg/mL,相关系数(r)分别为0.9996和0.9992;平均加样回收率分别为99.79%和101.02%,RSD分别为3.33%和2.56%。结论:油菜花粉玛咖咀嚼片制备工艺稳定可行,槲皮素和山奈酚含量测定方法准确可靠,可用于该咀嚼片的质量控制。

玛咖黑芥子酶的酶学性质及加工稳定性

新鲜玛咖块茎中的黑芥子酶经提取、透析、凝胶过滤层析纯化后,对其酶学性质、酶动力学参数以及干燥加工前、后玛咖中的黑芥子酶酶活力及其酶解产物异硫氰酸苄酯(BITC)的变化进行研究。凝胶渗透色谱测得纯化后的玛咖黑芥子酶的分子质量为190.9 ku。酶学性质研究结果显示:该酶的最适温度40℃,最适pH 7.0,金属离子Fe^(3+)、Cu^(2+)、Al^(3+)、Mg^(2+)、Zn^(2+)、Ba^(2+)对其有显著的抑制作用。采用Lineweaver-Burk法测得玛咖黑芥子酶的动力学参数Vmax=0.2383(μmol/L)/min,Km=0.1425 mmol/L。玛咖鲜果中的黑芥子酶酶活力为0.7256 U/g,BITC含量为3.3190 mg/g。将玛咖鲜果样品切片后分别在温度为50,60,70,80℃下干燥处理,结果显示:随着干燥温度的上升,玛咖干片样品中的黑芥子酶酶活力显著下降,BITC含量呈下降趋势。本研究完善了玛咖黑芥子酶的理论研究,并提出采用60℃以上温度对玛咖进行干燥处理可有效抑制黑芥子酶酶活力,为玛咖的加工利用提供了参考。

新外来中药玛咖对甲状腺功能调节作用和安全性实验研究

目的:探究新外来中药玛咖对正常大鼠和甲状腺肿大鼠甲状腺功能的调节作用,并观察其安全性。方法:采用Wistar雌性大鼠探究玛咖对甲状腺肿大鼠甲状腺功能调节作用和安全性,随机数字表法随机分为对照组、模型组、阳性药组、玛咖高剂量组、玛咖低剂量组。通过灌胃丙硫氧嘧啶(PTU)4周复制甲状腺肿模型,同时阳性药组,玛咖高、低剂量组分别给予相应药物。观察各组大鼠甲状腺组织病理形态,甲状腺系数,甲状腺激素合成、调控等相关指标;观察大鼠肝、肾组织形态和肝肾功能相关指标。采用Wistar雌性大鼠探究玛咖对正常大鼠甲状腺功能的调节作用,随机分为对照组和4个不同剂量的玛咖组。除对照组外,其余4组分别给予相应药物。统计甲状腺系数,测定大鼠甲状腺激素合成、调控等相关指标。结果:与模型组比较,玛咖组大鼠的体质量升高(P<0.05),T_(3)、T_(4)、FT_(3)、FT_(4)、TRH、Tg、TPO、TSHR水平升高(P<0.05),TSH水平降低(P<0.05),GLB水平升高(P<0.05),TP、ALB水平以及A/G降低(P<0.05),GPT、GOT、Urea和Cr差异无统计学意义(P>0.05),甲状腺系数、甲状腺和肝肾组织形态无明显差异。玛咖对正常大鼠体质量、甲状腺系数、T_(3)、T_(4)、FT_(3)、FT_(4)、TSH、TRH、Tg、TPO和TSHR水平无影响(P>0.05)。结论:玛咖对甲状腺肿异常状态的甲状腺功能减退具有一定的治疗作用,对正常大鼠的甲状腺功能没有不良影响,且未发现玛咖对甲状腺肿大鼠的安全性问题。

玛咖及多种植物提取物体外功效作用研究

为探索玛咖、青梅、松花粉等植物提取物在维持皮肤弹性方面的作用,通过对基质金属蛋白酶抑制率的研究,判断植物提取物维持皮肤弹性的能力,为抗皱产品开发提供实验依据。并通过划痕实验研究玛咖等植物提取物对表皮细胞游走的作用,结果表明:玛咖提取物具有良好的维持皮肤水润弹性和修复细胞损伤的作用,可应用于抗皱产品的开发。

玛咖体内免疫调节活性机制研究

探讨环磷酰胺建立合适的免疫抑制动物模型,用于评估功能性食品的免疫调节作用。采用免疫抑制小鼠模型,从免疫活性、抗氧化活性两个方面研究玛咖水提物的体内免疫调节和抗氧化作用,为明确玛咖免疫调节作用的有效成分及机制提供参考。结果表明,玛咖水提物对正常机体无毒副作用,且在一定程度上具有增强免疫功能的效用,特别是对有免疫缺陷的小鼠影响更明显。玛咖水提物能增强免疫抑制小鼠血清和胸腺的抗氧化能力。玛咖水提物给药组大部分抗氧化酶活力都强于模型组,表明玛咖多糖对免疫缺陷小鼠抗氧化功能的提高与其对小鼠体内抗氧化酶水平的影响有一定的关系。玛咖多糖能够恢复免疫抑制小鼠血清中免疫球蛋白IgM、IgG的分泌。

玛咖加工工艺探究

采用多种干燥设备和技术条件研究玛咖最佳干燥工艺,探究合理高效的玛咖干燥方法,评估不同干燥品的营养素指标,优化玛咖热浸提工艺。考察不同产地、海拔、采收期和品种对玛咖品质的影响。结果表明,烘箱热风干燥条件下,温度越高玛咖失水速率越快,完全干燥所需时间越短。完整玛咖干燥时间较长,且干燥程度不如切片。自然晒干成本低但周期长,受环境影响大,不利于药材标准化生产。冻干能最大程度保持玛咖外观和色泽,对制作成包装食品直接食用很有发展潜力。不同玛咖干粉样品的各种营养素含量有差异,各种干燥工艺条件均较温和且干燥温度条件差异不大,温度主要影响干燥失水速率,对品质影响不大。

峨边玛咖营养成分及其玛咖烯和玛咖酰胺指纹图谱研究

本文研究了四川峨边彝族自治县2200~2800 m海拔山区引种玛咖的营养成分和标志活性物质玛咖烯及玛咖酰胺的HPLC指纹图谱。结果表明,峨边玛咖含24.20%蛋白质、18.40%总氨基酸（其中3.86%精氨酸）、42.80%总糖、1.36%脂肪,并含各种矿物元素（其中1.14%钾）。峨边玛咖的玛咖烯和玛咖酰胺HPLC指纹图谱与秘鲁玛咖的一致。本研究提示在低于秘鲁原产地1000多米海拔山区可以引种玛咖并且可以有良好品质。

预酶解对玛咖蛋白胃肠消化及免疫调节活性的影响

为探究不同蛋白酶预酶解对玛咖蛋白胃肠消化程度及消化产物免疫调节活性的影响,该研究选用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶以及复合蛋白酶分别对玛咖蛋白进行预酶解,再经模拟胃肠消化得到五组消化产物。利用TNBS法、福林酚法等测定消化产物的得率、水解度、可溶性肽含量及游离氨基酸含量,再以小鼠巨噬细胞RAW 264.7为模型探究消化产物的免疫调节活性。结果表明,经五种蛋白酶的预酶解,玛咖蛋白消化产物的水解度、可溶性肽含量和游离氨基酸含量分别提高了35%、5%~16%及37%~92%,且消化产物促进巨噬细胞分泌TNF-α的作用无明显降低。经菠萝蛋白酶预酶解得到的消化产物的免疫调节活性最高,该消化产物含有15154条分子量小于3000 u的肽段;在经活性评分及分子对接预测的与TLR2和TLR4受体存在相互作用最强的10个肽段中,NPYPFFGFSI的免疫调节活性最高;HOMO分析结果表明该肽的活性位点位于酪氨酸上。上述结果表明预酶解可在不影响玛咖蛋白免疫调节活性的条件下提高玛咖蛋白的可消化性。

新资源食品玛咖中功能成分的UPLC-MS/MS研究

玛咖于2011年在我国获批为新资源食品,并已有大量引种。玛咖的主要功能成分为一类长链结构的不饱和脂肪酸或脂肪酰胺类物质——玛咖烯及玛咖酰胺。以云南丽江产玛咖原料作为研究对象,通过液质联用(UPLC-MS/MS)技术对其中的玛咖烯及玛咖酰胺成分进行分析鉴定,发现6个新的化学成分。

低海拔引种栽培玛咖主要有效成分分析

为给低海拔地区栽培玛咖的开发和推广提供参考依据,以引种栽培基地湖南省湘西自治州不同海拔样地的玛咖为材料,采用醇浸取法和高效液相色谱法,对其生物碱、玛咖酰胺和玛咖烯等主要有效成分进行了测定与分析。测定结果表明：其总生物碱含量为0.707%~2.376%;玛咖酰胺含量为0.083 8%~0.529 2%,玛咖烯含量为0.008 3%~0.070 6%,玛咖酰胺＋玛咖烯含量为0.099 7%~0.537 6%。分析结果表明：湘西低海拔地区栽培的玛咖其主要有效成分含量与秘鲁原产地的相当,说明海拔高度对玛咖有效成分含量无显著影响。文中因此认为,玛咖可以在低海拔地区大量推广栽培。

玛咖不同提取物对人体精子功能的影响

目的:研究不同提取工艺得到的不同玛咖提取物对精子功能的影响。方法:选取20名不孕男性精液,通过非连续密度梯度法制备精子悬液,将碱溶酸沉法、大孔吸附树脂吸附-解析法与水提法提取的玛咖中不同成分作用于精子悬液,通过计算机辅助精子分析系统(CASA)分析其对精子功能的影响。结果:代表精子活力参数的PR(前向运动精子)、PR-A(快速直线运动精子)和PR-B(中等前向运动精子),在玛咖水提物浓度为0.1 g/m L时,精子活力最佳,分别比对照组高54.67%(p<0.05)、52.74%(p<0.05)、58.15%(p<0.05);代表精子运动功能的参数在玛咖水提物浓度为0.1 g/m L时运动功能最佳,其中STR(直线速度与平均路径速度比值)、LIN(直线速度与曲线速度比值)、分别比对照组高1.61%(p<0.05)、13.32%(p<0.05)。结论:玛咖水提物在适宜的浓度下对精子的刺激作用使其活力达到高峰,能最大限度保持精子的高活动性及保证精子质量。

有机肥与氮磷钾配施对玛咖产量和质量的影响

探讨有机肥与氮磷钾配施对玛咖品质和产量的影响,为优质玛咖种植及合理施肥提供参考依据。以玛咖优良品种“乌蒙黑玛咖”为材料,田间试验设置6个处理:CK、M(有机肥)、F1(常规施肥)、F1+M、F2(50%常规施肥)、F2+M。施肥显著提高玛咖地上部和根农艺性状、产量和品质。在8—9月以促进地上部生长为主,而在10月以加快玛咖根生长为主;玛咖前期生长对磷钾需求较高,而对氮的需求在整个生育期都高;施肥显著提高玛咖酰胺类化合物、玛咖烯、芥子油苷类化合物和灰分的含量,其中F1+M处理在酰胺类化合物、玛咖烯和灰分含量上均表现出最高,分别为192.79、7.93和3.97 mg/100 g,而芥子油苷类化合物含量则在F1处理最高,为2.47 mg/100 g;所有施肥处理中表现为F1+M处理产量最高,为11708 kg/hm^(2)。试验结果表明,F1+M处理下,即每公顷施用化肥N 120 kg、P_(2)O_(5)90 kg、K_(2)O 120 kg,同时配施精制有机肥7500 kg,可使玛咖产量和品质达到最佳。

玛咖中芥子油苷的研究进展:以苄基芥子油苷为例

玛咖(“Lepidium meyenii Walp.”)原产于秘鲁,具有增强生育力、缓解更年期综合征、缓解体力疲劳等多种功效。自引入中国以来,玛咖曾一度风靡于功能性食品市场。玛咖中含有多种活性成分,包括芥子油苷、玛咖烯、玛咖酰胺等,其中的标志性功能成分苄基芥子油苷(benzylglucosinolate,BG)更是成为了研究的热点。本文以BG为例主要介绍了玛咖中芥子油苷的分离纯化方式、检测技术、稳定性以及生理活性的研究现状,通过比较几种常用的检测方法得出液相色谱-质谱法(HPLC-MS)是定性和定量检测芥子油苷的较优技术,并指出影响芥子油苷的稳定性的最主要因素是黑芥子酶的作用,故阐明玛咖中黑芥子酶和芥子油苷间的相互作用关系对玛咖的精深加工利用具有重要的理论指导意义,这也为玛咖中芥子油苷类物质的进一步研究提供借鉴和方向。

玛咖脂溶性成分的GC-MS指纹图谱的构建及溯源

采用超声辅助法和气相色谱-质谱联用法对7个不同产地的玛咖的脂溶性成分进行了提取检测.计算了91种脂溶性成分中15个特征成分异氰酸苄酯、苯乙腈、苯乙酸、3-甲氧基苯乙腈、2-苯基乙酰胺、N-乙酰苄胺、棕榈酸甲酯、2-甲基-4-苯甲氧基吡啶氮氧化物、亚油酸甲酯、(Z,Z)-9,12-十八烯酸苄酯、十八烷-9,12,15-三烯酸苄酯、芥酸酰胺、N-苄基-(9Z,12Z)-十八碳二烯酰胺、N-苄基十六烷酰胺和(9Z)-N-苄基-9-十八碳烯酰胺的相对含量;通过对获得的数据进行比对分析,构建了玛咖的指纹图谱.采用主成分分析法提取得到3-甲氧基苯乙腈、亚油酸甲酯和N-苄基十六烷酰胺3个主要成分,它们总累计百分比达到88.947%.根据玛咖中三种主要的脂溶性成分的相对含量采用主成分分析法清晰的区分了7个产地的玛咖.

玛咖多糖对D-半乳糖衰老模型小鼠生殖器官的保护作用

目的:探讨玛咖多糖(MP)对D-半乳糖(D-gal)引起的衰老模型小鼠生殖器官损伤的保护作用。方法:将50只无特定病原体(SPF)级雄性癌症研究所(ICR)小鼠按体质量采用简单随机化(Simple Randomization)法分为空白组,模型组,MP低剂量组、MP中剂量组、MP高剂量组,每组10只。除空白组给予生理盐水外,其余组连续8周每天颈背部注射D-gal 500 mg/kg造模。MP低剂量组、MP中剂量组和MP高剂量组从造模起分别按75 mg/kg、150 mg/kg和300 mg/kg剂量连续8周每日灌胃MP。用透射电镜观察小鼠附睾组织形态,测定睾丸组织中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛和单胺氧化酶(MAO)活力,并用实时聚合酶链式反应(PCR)检测附睾超氧化物歧化酶2(SOD 2)、过氧化氢酶表达情况,蛋白质免疫印迹法检测沉默信息调节因子1/P53信号通路中沉默信息调节因子1和P53蛋白的表达情况。结果:48 d后,MP各剂量组小鼠体质量增长高于模型组小鼠,差异有统计学意义(P<0.05);MP中剂量组睾丸指数和附睾指数较模型组升高(P<0.05)。与模型组比较,高剂量组小鼠睾丸组织中GSH-Px活力升高,丙二醛含量、MAO活力均下降(P<0.05);与模型组比较,MP高剂量组小鼠睾丸组织SOD 2、CAT在基因水平的表达增强;与模型组比较,MP各剂量组睾丸组织中沉默信息调节因子1在蛋白水平的表达均升高,P53在蛋白水平的表达均下降(P<0.05或P<0.01)。结论:MP可通过提高GSH-Px活力及SOD 2、CAT抗氧化酶在基因水平的表达,降低丙二醛、MAO活力,对沉默信息调节因子1/P53蛋白信号通路的调控作用,从而保护小鼠生殖器官。

不同产地玛咖中酰胺含量分析

建立玛咖酰胺测定方法,测定不同产地玛咖切片中玛咖酰胺含量。采用HPLC法,色谱条件为Sepax Sapphire C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）流动相：乙腈（A）-0.05%磷酸水溶液（B）,梯度洗脱：0-15 min,90%-95%A;15-50 min,95%A。检测波长208 nm,体积流量1.0 m L/min,柱温30℃。酰胺1、酰胺2、酰胺3分别在0.88-132μg/m L、0.85-128μg/m L、0.96-144μg/m L线性关系良好。酰胺1、酰胺2平均回收率分别为99.21%（RSD=1.64%）、98.59%（RSD=1.75%）。不同产地玛咖中玛咖酰胺含量差别较大,建立可靠、准确、重复性好的检测方法,有利于评价不同产地玛咖的质量。

云南玛咖中功能性成分的分析研究

研究云南栽培玛咖(Lepidium meyenii Walpers)的功能性成分。采用经典的植物化学研究方法硅胶色谱柱法对云南玛咖进行分离纯化,通过红外光谱、核磁共振光谱、质谱及色谱的相关数据及结合文献进行分析研究。从玛咖中分离鉴定了3个化合物,分别为β-谷甾醇(β-sitosterol)、n-苄基十六烷酰胺(N-benzylhexadecanamide)、蔗糖(Sucrose);从玛咖提取物中分析确定含有5个玛咖酰胺、2个咪唑生物碱和2个芥子油苷化合物。

不同干燥方式对玛咖品质的影响

采用自然晾干、热风干燥、真空干燥3种干燥方式分别对新鲜黄色、紫色、黑色玛咖进行干燥,研究不同干燥方式对玛咖外观、营养品质以及玛咖酰胺的影响。结果表明,不同干燥方式对玛咖的外观、营养品质及玛咖酰胺含量均有显著影响。3种干燥方式中,对玛咖外形影响最小的是自然晾干,而真空干燥和热风干燥产品的色泽优于自然晾干;蛋白质、VC和粗脂肪含量以真空干燥最高,总糖含量以热风干燥最高,真空干燥和热风干燥能显著降低营养成分的损失(P<0.05);不同干燥方式下,玛咖酰胺总量及主要组分甲氧-氮苄基-亚油酰胺、氮苄基-亚麻酰胺、甲氧-氮苄基-亚麻酰胺和甲氧-氮苄基-十六烷酰胺的含量由高到低为:自然晾干>热风干燥>真空干燥。自然晾干方式下玛咖酰胺总量最高,而热风干燥和真空干燥省时且营养品质好。

云南玛咖地上部分氨基酸含量的测定

为进一步开发利用玛咖的地上部分资源,通过盐酸水解结合高效液相色谱仪分析,采用模糊隶属函数法对玛咖地上部分的氨基酸进行定性和定量分析。结果表明:玛咖地上部分至少含17种氨基酸,氨基酸总量为玛咖地上部分的28.67%。其中,有7种人体必需氨基酸,E/T达44.68%,E/N为80.77%。玛咖地上部分人体必需氨基酸的构成比例基本符合世界卫生组织食品法典委员会(FAO/WHO)的理想模式标准。玛咖地上部分还含有丰富的味觉氨基酸及特殊药效氨基酸,其中,鲜味氨基酸总量达5.45%,甜味氨基酸含量为4.3%,芳香族氨基酸含量达3.15%,精氨酸含量达2.81%。模糊隶属函数法对玛咖地上部分氨基酸营养价值的综合评价结果为最好,营养及保健价值高,值得开发与利用。