原始生殖细胞的发育调控及环境雌激素对其毒性效应的研究进展

随着环境雌激素(environmental estrogens,EEs)在人体样本尤其是孕早期人体样本中频繁被检出,对于EEs的生殖健康风险研究开始关注其对原始生殖细胞(primordial germ cells,PGCs)发生和迁移的影响。PGCs是生殖细胞的前体细胞,经过特化、迁移、分化后生成精子或卵子,作为高等生物体生命延续的载体,其遗传稳定性对人体生殖健康至关重要。本文以小鼠及斑马鱼为例总结了PGCs发育过程及其关键调控因子,讨论了雌激素在PGCs发育中的作用及其调控方式,在此基础上综述了EEs对PGCs的毒性效应及其分子机制的研究进展。了解EEs对PGCs的毒性效应及分子机制研究进展,将为EEs的人体生殖健康风险评估提供更为精准的科学依据。

活性污泥中噬菌体的环境雌激素降解功能研究

环境雌激素(EEs)随污水排入自然水体,具有较大的生态环境风险和人体健康风险。采用宏基因组测序技术对普通活性污泥和双酚A(BPA)、邻苯二甲酸二丁酯(DBP)、壬基酚(NP)富集污泥中的噬菌体基因组进行分析发现,普通活性污泥和EEs富集污泥中可以鉴定的噬菌体均以管病毒科(Siphoviridae)、肌病毒科(Myoviridae)和足病毒科(Podoviridae)为主,但是不同污泥的噬菌体相对丰度组成存在显著差异。通过对噬菌体基因组进行功能基因注释发现,BPA富集污泥和NP富集污泥中管病毒科噬菌体分别有编码苯酚单加氧酶和脱氢酶的基因,有助于芳香族有机物矿化去除。噬菌体的细菌宿主分析发现,噬菌体广泛寄生于各类细菌,但主要是BPA富集污泥中有编码羟基化功能的苯酚单加氧酶基因的管病毒科噬菌体具有BPA降解功能,即具有重要的潜在辅助代谢EEs功能。

福州市内河野生鱼体中8种环境雌激素污染调查分析

为更好的评价福州市内河治理后的生态环境,在福州市首次开展主要内河野生鱼体内8种环境雌激素残留监测。以光明港、晋安河、白马河和凤坂河4条福州主要内河水系为调研对象,共布设11个调查站位,在2021年12月和2022年6月分别采集样本,共采集21份,并参照DB37/T1778-2011进行检测。结果表明,在布置的11个调查站位上均检出了环境雌激素,分别是双酚A和雌三醇,双酚A的含量在N.D.~2.67μg/kg之间,雌三醇的含量在N.D.~8.35μg/kg之间,其它项目均未检出。说明福州市内河水质存在一定的环境雌激素污染,建议进一步加强生态环境治理。

基于泡腾辅助脂肪酸形态转化的悬浮固化-分散液液微萃取测定水样中环境雌激素

本研究建立脂肪酸形态转化液液微萃取技术并结合高效液相色谱对湖水和河水中雌酮、己烯雌酚和己烷雌酚这3种环境雌激素(EEs)进行了测定.利用脂肪酸可在亲水-疏水形态间转换的特点,对5种中链脂肪酸筛选得到辛酸作为萃取剂,同时根据其低温固化的特点,利用漂浮液滴固化微萃取技术进行测定.通过实验设计优化最优萃取条件为:H_(2)SO_(4)(98%)体积238μL、Na_(2)CO_(3)(2 mol·L^(-1))体积413μL、脂肪酸体积144μL和涡旋时间3.3 min.最优萃取条件下检测,定量限范围0.110-0.201μg·L^(-1),回收率范围89.0%—101.5%.本方法具有简便快捷,检测限低,回收率高,绿色环保等优点,适用于多种环境水体中EEs的快速定性及定量分析.

环境雌激素生态影响的研究进展

There are currently 80 types of ecoestrogen proved,which can cause reproductive malfunction,cancer,malformation and abnormal behavior of animals and human beings while some ecoestrogen can interfere with more than one endocrine system or change the sex ratio and life cycle of certain animals.Some trace ecoestrogen can be accumulated to a concentration level hundreds of million times higher than that in the environment.The injury of ecoestrogen could be different according to differences of genetics,time and geology.Compared with synthetic ecoestrogen,phytoestrogen can reduce the risk of reproductive cancers.

固相萃取-气相色谱/质谱联用法同时检测水体中9种环境雌激素

建立了固相萃取-气质联用法(SPE-GC-MS)测定水体中9种环境雌激素:雌酮(E1)、17b-雌二醇(E2)、雌三醇(E3)、4-辛基酚(OP)、4-壬基酚(NP)、双酚A(BPA)、己烯雌酚(DES)、美雌醇(EE3ME)和17a-炔雌醇(EE2)的检测方法,优化了萃取和衍生化反应条件,实验结果表明:HLB柱回收率较高,衍生化反应的温度为75℃,衍生时间为90 min;本方法对9种环境雌激素的加标回收率为60.5%～126.7%,对应的相对标准偏差为0.8%～11.1%,方法检出限为1.08～8.60 ng/L,并将本方法应用于实际环境水样的检测。

环境雌激素重组酵母测评系统的建立

目的通过检测重组酵母中报告基因的表达产物来反映环境雌激素通过雌激素受体介导而产生的拟雌激素作用。方法用乙酸锂法将本实验室已构建成功的全长人雌激素受体酵母表达载体pGAD_hER和雌激素效应元件(ERE)调控的酵母报告载体 pLacZi_2ERE导入酵母细胞中 ,得到重组酵母YM_ADER_ERE。结果与对照DMSO相比 ,加入17β_雌二醇(E2)后YM_ADER_ERE中报告基因lacZ的表达产物 β_半乳糖苷酶活性显著升高。用终浓度为10-15～10-7mol/L的E2 进行实验 ,E2 在YM_ADER_ERE中最大效应EAmax 为94 31U ,EC50 为0 34nmol/L。结论重组酵母中报告基因的表达是雌激素配体依赖的 ,符合环境雌激素测评系统的设计思想和要求 。

柱前荧光衍生-高效液相色谱法测定尿和血清中的环境雌激素

建立了同时测定人尿和血清中环境雌激素双酚A、4-壬基酚、17 α-乙炔基雌二醇及内源性雌激素雌三醇、17 α-雌二醇和17β-雌二醇的对硝基苯甲酰氯柱前荧光衍生-高效液相色谱测定方法.尿样经酸水解、固相萃取柱浓缩、净化分离;血清样品经乙腈沉淀蛋白后,用乙醚萃取游离态雌激素,N2气流挥干、在无水条件下,雌激素与对硝基苯甲酰氯反应生成荧光产物,用高效液相色谱法定量.检出限为2.7～8.3μg/L;加标回收率尿样为78.0%～102.5%,血清样为72.6%～98.6%;方法精密度为1.29%～4.52%.应用本法对20份尿样和10份血清样进行了测定,结果满意.

固相萃取-衍生化气相色谱/质谱法测定制药厂污水中的环境雌激素

采用固相萃取-衍生化气相色谱/质谱法(GC/MS)测定某制药厂污水中的雌酮(E1)、雌二醇(E2)、雌三醇(E3)和乙炔基雌二醇(EE2)4种雌激素化合物。样品经固相萃取柱萃取富集及双(三甲基硅烷基)三氟乙酰胺(1%三甲基氯硅烷)(BSTFA(1%TMCS))衍生化后进行GC/MS分析。该法对4种目标物的检出限为1.8～4.7ng/L,相对标准偏差为2.3%～9.1%(n=8)。目标化合物的加标回收率为(94.0±2.9)%～(101±3.8)%,说明该方法能较好地应用于污水中雌激素化合物的定量检测。通过对某制药厂污水中的雌激素进行定量分析,发现污水中乙炔基雌二醇和雌酮质量浓度分别达396.6和39.9ng/L;经过传统的厌氧兼氧好氧生物处理后,污水中的环境雌激素的去除率仅为35%～40%,说明传统的污水处理工艺对去除污水中雌激素效果并不明显,需要改进。

环境雌激素双酚A的生殖毒理研究

目的 探讨双酚 A的雄性生殖毒理学机制。方法 通过口服染毒 ,采用组织化学和免疫组织化学分析双酚A对成年 SD大鼠曲细精管细胞的形态结构、波形蛋白及 p5 3表达的影响。结果 实验表明 ,两周染毒后 0 .5 %双酚 A引起生精细胞与支持细胞发生分离 ,排列紊乱 ,从基底膜脱落入管腔 ,支持细胞和生精细胞核染色质凝聚成絮状 ;生精细胞和间质细胞 p5 3表达增强 4倍 ;支持细胞波形蛋白消失。结论 双酚 A引起的支持细胞与生精细胞分离是其生殖毒性的重要机制之一 ,这一病理过程可能与支持细胞的波形蛋白消失和支持细胞及生精细胞 p5 3表达改变有关 ;间质细胞 p5

气相色谱质谱法测定尿及河底泥中的环境雌激素

报道了尿及河底泥中环境雌激素(壬基酚、双酚A、己烯雌酚、17α 乙炔基雌二醇)和内源性雌激素(17α 雌二醇、17β 雌二醇、雌三醇、雌酮)的气相色谱 质谱(GC MS)测定法。尿样经盐酸溶液水解后用固相萃取(SPE)柱浓缩净化,底泥样品用甲醇 乙酸乙酯萃取。被测组分经五氟丙酸酐(PFPA)衍生化后用GC MS进行定性定量检测。该法测定的峰面积的日内相对标准偏差为1 22%～5 55%,检出限为0 05～1 27μg/L(或μg/kg)。被测组分的加标回收率除尿样中17α 乙炔基雌二醇和己烯雌酚分别为25 4%和71 0%外,其余为86 7%～111 2%。

酚类环境雌激素的分析研究进展

环境中分布或残留的化学物质对人类和野生动物的内分泌系统的不良影响已引起广泛关注。在已发现的数十种环境内分泌干扰物中 ,壬基苯酚、辛基苯酚、双酚A和 2 ,4 二氯酚等以其相似的结构特征和类雌激素活性逐渐被划分为一类新的分析研究对象 ,称为酚类环境雌激素。本文综述了这些物质的主要来源和分布及其分析测定方法的研究进展 ,重点评述了一些新的分析技术如基体固相分散萃取法 (MSPD)、分子印迹聚合物法 (MIP)、荧光分子传感法 (FMS)和生物识别 化学分析联用法等在上述物质的分析测定中的应用。比较了GC MS和LC MS等测试手段用于分析此类物质的优势和各自的局限性 ,并展望了这一领域未来的研究发展趋势。本文引用文献共 5

顶空衍生固相微萃取-气相色谱质谱法测定聚碳酸酯树脂中的环境雌激素

建立了固相微萃取-气相色谱质谱联用测定聚碳酸酯树脂中环境雌激素4-枯基苯酚和双酚A的分析方法。优化了固相微萃取纤维、萃取温度和时间、解吸时间、搅拌速度、pH等萃取条件及衍生化温度和时间、衍生化方式等衍生化条件,并对样品浸泡时间、浸泡温度等进行了研究。方法的线性范围为0.05μg/L^1 mg/L,4-枯基苯酚和双酚A的检出限分别为50 ng/L和0.5 ng/L,相对标准偏差(RSD,n=5)分别为5.2%和1.6%,平均回收率(n=3)在90.50%~107.3%之间,该方法简单、快速、灵敏。

地表水和自来水中环境雌激素活性物质的检测

目的了解我国地表水和自来水的环境雌激素污染情况。方法应用本实验室构建的基因重组酵母检测系统,对用H103大孔吸附树脂吸附的水样富集物进行环境雌激素活性检测。结果本次所检测的50%的地表水样和25%的自来水样检出环境雌激素活性物质,一些水源水活性较高,其水样富集物有显著的剂量-效应关系,仅100ml水样富集物即呈现阳性反应。结论我国的一些地表水中已受到环境雌激素类物质的污染,而现行的城市自来水处理系统不能有效地去除水源水中环境雌激素活性物质,致使城市自来水中也含有环境雌激素活性物质。

环境雌激素生物效应的作用机制研究进展

环境雌激素(environmental estrogens,EEs)种类繁多,来源多样且分布广泛,大量工业添加剂、食品添加剂和农药类物质已被证实具有雌激素活性。EEs对人体生殖、神经、免疫等系统的生物毒性已经引起了公众的普遍关注。近年来的研究表明,EEs不仅结合雌激素核受体(nuclear estrogen receptor,n ER),还可以活化雌激素膜受体(membrane estrogen receptor,m ER),干扰正常的雌激素信号通路。本文总结了EEs通过n ER、m ER介导的多种雌激素基因组和非基因组信号途径及其产生的生物学效应,综述了在其毒理学作用机理基础上发展的环境样品的雌激素活性评估和EEs混合物的联合作用研究,以期为该类污染物的筛查、风险评估和进一步的机制研究提供参考。

环境雌激素对生殖和发育毒性的分子机理

大量动物实验表明环境雌激素具有生殖和 或发育毒性 ,但其作用机制非常复杂 ,尤其在分子机理方面目前不甚明了。本文从信号通路、基因表达。

固相萃取-超高效液相色谱-高分辨质谱法快速测定食用油中4种酚类环境雌激素残留

建立了固相萃取-超高效液相色谱-高分辨质谱(SPE-UPLC-HRMS)快速测定食用油中4种痕量酚类环境雌激素(双酚S(BPS)、双酚F(BPF)、双酚A(BPA)和4-壬基酚(4-NP))的分析方法。食用油样品经乙腈涡旋提取和SLC玻璃固相萃取小柱净化后,以0.05%(v/v)三乙醇胺和甲醇溶液为流动相进行梯度洗脱,采用Waters ACQUITY UPLC HSS T3色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.8μm)进行分离,在电喷雾离子源负离子模式(ESI-)和选择性离子监测(SIM)模式下进行检测,内标法定量。4种目标物在各自的范围内有良好的线性关系,相关系数(r)>0.999。方法的检出限(LOD,S/N=3)和定量限(LOD,S/N=10)分别为0.03~0.11μg/kg和0.10~0.36μg/kg。在1.0、10.0和80.0μg/kg 3个加标水平下,4种目标物的加标回收率为86.3%~96.1%,相对标准偏差(RSD)为2.2%~8.8%(n=6)。基质效应实验表明方法在低、中、高3个浓度水平下均无明显的基质干扰。该法简便、快速,能用于食用油中双酚S、双酚F、双酚A和4-壬基酚残留的快速检测。

长江(南京段)环境雌激素的污染特征

利用固相萃取技术和重组基因酵母检测了长江(南京段)四个典型断面环境雌激素污染状况。结果表明,除秦淮新河断面外,江心洲断面、三汊河断面和大桥断面均有环境雌激素的检出,雌二醇当量分别为0.38、0.24和0.45ng·L-1。与国内外地表水环境雌激素检测结果相比,长江(南京段)典型断面雌激素活性水平为较低至中等。对江心洲断面和大桥断面,甲醇洗脱组分的雌激素活性最大,其次为丙酮洗脱组分,二氯甲烷洗脱组分的雌激素活性最小;对三汊河断面,丙酮洗脱组分的雌激素活性最大,其次为二氯甲烷洗脱组分,甲醇洗脱组分的雌激素活性最小。这可能是污水来源不同所致,生活污水导致大量极性雌激素污染物的输入,而工业污水则主要引入了中等至弱极性雌激素污染物。三个雌激素活性阳性检出断面主要活性洗脱组分的雌激素活性均大于混合样的雌激素活性,这可能是由于样品混合后各种结构上不同的污染物之间的交互作用掩盖了实际的雌激素活性。

基于碳纳米管的固相萃取-分散液液微萃取测定水中多种痕量环境雌激素

建立了基于碳纳米管的固相萃取-分散液液微萃取/上浮溶剂固化-高效液相色谱/荧光法测定水体中痕量雌激素雌三醇(E3)、双酚A(BPA)、17α-乙炔基雌二醇(EE2)及17β-雌二醇(E2)的方法.利用中心复合实验设计分别对固相萃取和分散液液微萃取条件进行了优化,通过响应曲面法得到的最佳萃取条件为碳纳米管用量30 mg,水样体积210 mL,流速2.0 mL/min,萃取剂(十二醇)体积50μL,分散剂(甲醇)体积0.2mL以及不添加盐.在优化的实验条件下,E3,BPA,EE2和E2测定的线性范围分别为0.05～100,0.05～100,0.05～50和0.05～50μg/L,相关系数为0.9993～0.9999,检出限分别为48.4,3.3,8.1和6.0 ng/L.对不同加标浓度(0.40和4.00μg/L)的实验室自来水、排水沟污水及市售矿泉水3种实际水样进行了分析:E3,BPA,EE2和E2的加标回收率依次为107.5%～120.8%,92.5%～108.3%,103.5%～121.0%和102.5%～132.5%,相对偏差分别为2.47%～13.28%,1.73%～11.94%,1.72%～8.36%和3.54%～11.95%,富集因子平均值分别为461,1075,2074和949.实际水样分析结果表明,本方法可用于不同基质水样中雌激素的测定.与其它方法相比,本方法虽然固相萃取时间长及水样量大,但检出限低、富集因子高、操作简便及费用低,仍可作为一种可普及的水中痕量雌激素检测方法.