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珠磨法破碎小球藻提取类胡萝卜素的动力学及能量消耗分析 被引量:1
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作者 陆孔泳 谢友坪 +2 位作者 赵旭蕊 贺诗欣 陈剑锋 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第11期102-108,共7页
采用珠磨法破碎小球藻冷冻干燥藻和湿藻细胞,以叶绿素释放量为指标评价细胞破碎程度,分析其细胞破碎过程的动力学情况,同时结合能量消耗情况分析细胞破碎程度对类胡萝卜素提取效果的影响。结果表明:一级动力学方程可较好地拟合小球藻细... 采用珠磨法破碎小球藻冷冻干燥藻和湿藻细胞,以叶绿素释放量为指标评价细胞破碎程度,分析其细胞破碎过程的动力学情况,同时结合能量消耗情况分析细胞破碎程度对类胡萝卜素提取效果的影响。结果表明:一级动力学方程可较好地拟合小球藻细胞珠磨破碎过程。在类胡萝卜素提取过程中,将冷冻干燥藻和湿藻细胞的破碎率分别控制在70%和90%时,其最佳的类胡萝卜素提取量可分别达6.38 mg/g和6.26 mg/g。通过破碎过程的能量消耗分析,发现湿藻细胞破碎过程消耗的能量要高于冷冻干燥藻;冷冻干燥藻细胞质量浓度在40~160 g/L时,只要输入相同的比能量消耗,均可达到较为一致的细胞破碎率及类胡萝卜素提取效果;而湿藻细胞质量浓度在80 g/L时,可在较低的比能量消耗情况下达到较高的细胞破碎率及类胡萝卜素提取量。本实验结果可为小球藻的细胞破碎过程及其有效成分的开发利用提供一定的理论参考和实验依据。 展开更多
关键词 小球藻 珠磨法 动力学分析 比能量消耗 类胡萝卜素 细胞破碎
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实时荧光定量PCR检测不同结核标本及其联合玻璃珠磨菌法检测的价值
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作者 张鑫 周辰刚 《临床和实验医学杂志》 2024年第6期637-641,共5页
目的研究实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)与玻璃珠磨菌法联合用于不同结核标本检测中的价值。方法以回顾性分析为法,收集并分析2021年1月至2022年6月在上海交通大学医学院附属仁济医院住院与门诊诊治的疑似结核病患者1200份不同临... 目的研究实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)与玻璃珠磨菌法联合用于不同结核标本检测中的价值。方法以回顾性分析为法,收集并分析2021年1月至2022年6月在上海交通大学医学院附属仁济医院住院与门诊诊治的疑似结核病患者1200份不同临床标本的qRT-PCR测定结果,其中血液样本469份,胸腔积液标本322份,心包积液标本16份,尿液标本25份,气管(支气管)肺泡灌洗液标本8份,腹腔积液标本34份,脑脊液标本143份,脓液标本31份,痰液标本152份;同时,对41份痰液标本予以玻璃珠振荡磨菌前后qRT-PCR定量检测效果分析。结果1200份不同结核标本的总检测阳性率为15.83%(190/1200),其中检出率最高的为气管(支气管)肺泡灌洗液标本,占比为37.50%(3/8),且门诊患者阳性率最高,占比为40.00%(2/5);脓液标本检出率第二,占比为35.48%(11/31),且住院患者阳性率最高,占比为38.46%(10/26);痰液标本检出率第三,占比为30.26%(46/152)。41份痰液标本经玻璃珠磨菌处理5 min之后,qRT-PCR检测核酸浓度明显高于处理前,差异有统计学意义(P<0.05);其中,14份痰液标本提升了菌株数量级,且11份含菌量为10^(2)拷贝/mL痰液标本于振荡研磨处理之后,7份痰液标本提升至了10^(3)拷贝/mL菌量数量级,磨菌处理后阳性检出率明显高于磨菌处理前,差异有统计学意义(P<0.05)。结论气管(支气管)肺泡灌洗液标本、脓液标本、痰液标本检测中qRT-PCR的检出率较高,而qRT-PCR在其他结核标本检测中的检出率较低,qRT-PCR联合玻璃珠磨菌法检测可有效提升临床结核标本阳性检出率。 展开更多
关键词 实时荧光定量聚合酶链式反应 玻璃 结核分枝杆菌 检测
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4种酵母基因组提取方法的比较 被引量:29
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作者 赵宏宇 李珺 +2 位作者 赵玥 王馨 蔡禄 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第9期170-173,共4页
为获得简便高效的提取酵母基因组DNA的方法,分别采用溶菌酶法、蜗牛酶过夜处理法、蜗牛酶反复冻融法和珠磨法处理酵母细胞,在荧光倒置显微镜下观察、比较细胞的破壁情况,提取基因组后利用紫外分光光度计测定样品中DNA的浓度和纯度以及... 为获得简便高效的提取酵母基因组DNA的方法,分别采用溶菌酶法、蜗牛酶过夜处理法、蜗牛酶反复冻融法和珠磨法处理酵母细胞,在荧光倒置显微镜下观察、比较细胞的破壁情况,提取基因组后利用紫外分光光度计测定样品中DNA的浓度和纯度以及琼脂糖凝胶电泳和PCR扩增检测基因组DNA的质量。结果表明,除溶菌酶法外,其他3种方法均能提取出高质量的酵母基因组DNA。珠磨法提取酵母基因组具有质量高、成本低、时间短且操作简单的优点。 展开更多
关键词 酵母 基因组 珠磨法 蜗牛酶 溶菌酶
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犊牛盲肠微生物总DNA的提取方法
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作者 于萍 王加启 +4 位作者 卜登攀 邓露芳 刘开朗 魏宏阳 周凌云 《乳业科学与技术》 2009年第1期14-16,共3页
采用反复冻融法、玻璃珠法和超声波+反复珠磨的方法提取犊牛盲肠的微生物总DNA,并对以上三种方法进行比较,从中确定最佳的方法,以实现普通实验条件下成功提取符合PCR扩增要求的DNA。经紫外分光光度分析表明,超声波+反复珠磨的方法所得的... 采用反复冻融法、玻璃珠法和超声波+反复珠磨的方法提取犊牛盲肠的微生物总DNA,并对以上三种方法进行比较,从中确定最佳的方法,以实现普通实验条件下成功提取符合PCR扩增要求的DNA。经紫外分光光度分析表明,超声波+反复珠磨的方法所得的DNA的A_(260)/A_(280)的比值为1.81,0.8%琼脂糖凝胶电泳结果显示,所提DNA片段分子量大于20 kb,适于酶解和PCR扩增要求。以提取的DNA样品为模板,利用细菌通用引物,对其16S rDNA进行PCR扩增,获得了1.7 kb大小特异性很好的预期条带。这是研究犊牛盲肠微生物的关键一步。 展开更多
关键词 犊牛盲肠微生物 细菌总DNA PCR扩增 超声波细胞破碎 反复珠磨法
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叶绿素a测定方法的改进 被引量:1
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作者 李伟明 《现代盐化工》 2021年第5期39-40,共2页
对《水质叶绿素a的测定分光光度法》(HJ 897—2017)中叶绿素a的试样制备方法进行改进,并对实际水样进行检测方法比对分析,证明改进后的方法满足环境监测分析要求,且简化了制备过程、缩短了分析测定时间。
关键词 叶绿素A 试样制备方 改进 超声波 珠磨法 国标
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乙醇发酵中酿酒酵母辅酶NAD^+及NADH测定方法 被引量:6
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作者 李骆冰 王永红 +2 位作者 庄英萍 储炬 张嗣良 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期287-294,共8页
乙醇发酵过程中酿酒酵母细胞辅酶NAD+和NADH质量分数及其比例反映了胞内的氧化还原状态和细胞代谢活性,具有重要的生理意义。作者主要研究了加热萃取、珠磨破碎、反复冻融破碎3种方法对乙醇发酵过程酿酒酵母细胞辅酶NAD+和NADH提取和测... 乙醇发酵过程中酿酒酵母细胞辅酶NAD+和NADH质量分数及其比例反映了胞内的氧化还原状态和细胞代谢活性,具有重要的生理意义。作者主要研究了加热萃取、珠磨破碎、反复冻融破碎3种方法对乙醇发酵过程酿酒酵母细胞辅酶NAD+和NADH提取和测定的影响,提出基于珠磨破碎、辅以加酸或碱并加热的萃取模式,以及合适的酶循环反应体系,从而建立了高效的胞内NAD+和NADH检测方法。 展开更多
关键词 酿酒酵母 NAD+/NADH 破碎 酶循环
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黑果花楸果实多酚提取工艺的研究 被引量:9
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作者 杨苑艺 李晶莹 +2 位作者 吴佳琳 高玉梅 杜春艳 《森林工程》 2015年第5期24-29,90,共7页
黑果花楸是一种具有很高营养价值和药用价值的小浆果树种,其果实中富含的多酚物质更是具有抗心血管病、抗肿瘤、抗氧化等生理活性,具有很高的开发价值。为了更好的开发利用黑果花楸,本研究以产自俄罗斯的黑果花楸果实为材料,采用珠磨法... 黑果花楸是一种具有很高营养价值和药用价值的小浆果树种,其果实中富含的多酚物质更是具有抗心血管病、抗肿瘤、抗氧化等生理活性,具有很高的开发价值。为了更好的开发利用黑果花楸,本研究以产自俄罗斯的黑果花楸果实为材料,采用珠磨法提取其体内的多酚物质,以多酚得率为指标设计6组单因素试验,根据6组单因素试验结果选取对多酚得率影响最大的3个因素,响应面法优化提取条件,最终得到最佳提取条件为:液料比为63.20 m L/g,时间为2.11h,珠填充量为61.65%,在此条件下,多酚得率理论上为27.29 mg/g,对其进行验证试验结果多酚得率为27.27 mg/g,误差为0.02%,证明试验结果可靠。本研究为黑果花楸果实多酚的提取工艺提供了参考,为黑果花楸的进一步开发利用提供了新思路及理论依据。 展开更多
关键词 黑果花楸 多酚 提取 珠磨法
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一种莱茵衣藻启动子功能检测系统的构建 被引量:1
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作者 王潮岗 黄惠珠 +2 位作者 孙海珊 胡章立 雷安平 《深圳大学学报(理工版)》 CAS 北大核心 2012年第6期534-540,共7页
选用莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)作为检测微藻启动子功能的生物系统,以pSP124质粒为基础,雨生红球藻β-胡萝卜素酮化酶基因bkt1的启动子片段(450 base pair,记作450 bp)为间隔序列,引入两个Eam 1105Ⅰ限制性内切酶位点,构建莱... 选用莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)作为检测微藻启动子功能的生物系统,以pSP124质粒为基础,雨生红球藻β-胡萝卜素酮化酶基因bkt1的启动子片段(450 base pair,记作450 bp)为间隔序列,引入两个Eam 1105Ⅰ限制性内切酶位点,构建莱茵衣藻启动子功能检测T载体.将聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)获得的1 986 bp的bkt1启动子片段直接克隆到T载体上,通过"珠磨法"转化到莱茵衣藻CC-849中,经Zeomycin筛选获得了TranB-0.45和TranBle转基因藻,而1 986 bp的bkt1启动子无转化子,原因可能是其含有负调控元件.PCR结果显示,ble可稳定存在于转基因藻中,bkt1启动子的450bp片段具有启动子活性,能正确表达BLE蛋白.该研究表明,莱茵衣藻和pB-0.45T载体所组成的检测系统可用于藻类启动子研究,为启动子功能的研究提供了一条新途径. 展开更多
关键词 基因工程 T载体 莱茵衣藻 启动子功能 检测系统 珠磨法 克隆
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海洋活性酵母YS-185破壁技术的研究 被引量:2
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作者 郝建华 王跃军 +1 位作者 刘均忠 孙谧 《湖南农业科学》 2011年第10期89-91,共3页
采用酸碱法、珠磨法、酶溶法对海洋活性酵母YS-185进行破壁,并对其破壁的结果做了分析比较。结果表明:经酸碱法处理后的细胞破壁不明显,细胞基本保持原形态;珠磨法破碎程度较高,效果较好,但此种方法只适用于实验室规模的细胞破碎,且后... 采用酸碱法、珠磨法、酶溶法对海洋活性酵母YS-185进行破壁,并对其破壁的结果做了分析比较。结果表明:经酸碱法处理后的细胞破壁不明显,细胞基本保持原形态;珠磨法破碎程度较高,效果较好,但此种方法只适用于实验室规模的细胞破碎,且后处理工作复杂;酶溶法破壁率可达80%左右,效果较理想,在大规模生产中可以推广。 展开更多
关键词 海洋酵母 破壁技术 酸碱 珠磨法 酶溶
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衣藻的核基因组转化及外源基因转录分析 被引量:4
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作者 王双辉 刘芮均 兰利琼 《四川大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期695-699,共5页
通过珠磨法将衣藻表达载体pSP108转入到莱茵衣藻细胞壁缺陷型CC-400藻株中,经抗性筛选及PCR鉴定,获得了24个转化藻株.在抗性基因ble编码序列的中间部位和末端部位分别设计两对不同的探针引物,运用实时荧光定量PCR对转基因藻株进行外源... 通过珠磨法将衣藻表达载体pSP108转入到莱茵衣藻细胞壁缺陷型CC-400藻株中,经抗性筛选及PCR鉴定,获得了24个转化藻株.在抗性基因ble编码序列的中间部位和末端部位分别设计两对不同的探针引物,运用实时荧光定量PCR对转基因藻株进行外源基因转录水平的分析.结果发现:不同转化藻株外源基因的转录水平有明显差异;同一转化藻株两对探针引物,外源基因的转录水平也存在差异.说明莱茵衣藻在转化过程中,外源基因整合到基因组上的片段数量及片段长度和完整性具有不确定性. 展开更多
关键词 莱茵衣藻 珠磨法 外源基因ble 转录分析
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瘤胃细菌DNA提取方法的研究与优化 被引量:5
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作者 王国泽 唐仁勇 +3 位作者 左福元 郭秀兰 陈康 毛景欣 《黑龙江畜牧兽医(下半月)》 北大核心 2016年第8期125-128,共4页
为优化出可获得完整瘤胃细菌总DNA的方法,以满足分子生物学研究需要,试验采用3种DNA提取方法对瘤胃细菌DNA进行提取并对提取效果进行了比较。结果表明:细菌基因组试剂盒法提取的DNA其OD_(260)/OD_(280)值在1.8以上,电泳无杂带,DNA的提... 为优化出可获得完整瘤胃细菌总DNA的方法,以满足分子生物学研究需要,试验采用3种DNA提取方法对瘤胃细菌DNA进行提取并对提取效果进行了比较。结果表明:细菌基因组试剂盒法提取的DNA其OD_(260)/OD_(280)值在1.8以上,电泳无杂带,DNA的提取效果最佳,PCR扩增效果较好;珠磨-CTAB法提取的DNA其OD_(260)/OD_(280)值在1.8以上,电泳结果存在少量杂带;水煮法提取的DNA其OD_(260)/OD_(280)值在2.0以上,无电泳条带,DNA严重降解。推荐采用细菌基因组DNA试剂盒法和珠磨-CTAB法对瘤胃细菌进行DNA提取。 展开更多
关键词 瘤胃细菌 DNA提取方 细菌基因组DNA试剂盒 -CTAB 水煮
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