东北大黑鳃金龟幼虫高毒力球孢白僵菌菌株的筛选及应用

为了筛选到针对靶标害虫东北大黑鳃金龟幼虫高毒力球孢白僵菌菌株,通过室内生物测定,明确球孢白僵菌Bb QCGZL-1对东北大黑鳃金龟幼虫的致病力,并与其他药剂进行防效对比;同时通过盆栽试验测定了球孢白僵菌BbQCGZL-1在不同农作物上对东北大黑鳃金龟幼虫的防治效果。球孢白僵菌BbQCGZL-1在施药14d时校正死亡率达到75%以上,高于其他供试菌株;施药7d时LC50为1.21×10^(7)cfu/mL,当菌悬液浓度为1.0×10^(8)cfu/mL时,LT_(50)为8.82 d;室内生测试验和室外盆栽试验结果表明,在东北地区利用球孢白僵菌防治东北大黑鳃金龟幼虫时,球孢白僵菌Bb QCGZL-1与商品化的微生物源药剂在防治效果上无显著差异。球孢白僵菌BbQCGZL-1可作为防治东北大黑鳃金龟幼虫的有效微生物源药剂。

球孢白僵菌病毒BbCV2的流行及其遗传多样性

球孢白僵菌Beauveria bassian是一种重要的虫生真菌,广泛用于害虫生物防治,毒力退化一直是制约其应用的重要因素。真菌病毒能够影响寄主真菌毒力。为明确一株能够降低寄主毒力的产黄青霉科病毒Beauveria bassiana chrysovirus2(BbCV2)真菌病毒在田间球孢白僵菌种群中流行性规律,本试验收集了来源于吉林省7个不同地点采集的寄主为亚洲玉米螟Ostrinia furnacalis的球孢白僵菌菌株,通过dsRNA提取和PCR验证BbCV2的感染情况,并进行遗传多样性分析。结果表明,不同采集地的球孢白僵菌均检测到dsRNA病毒感染,尤其是BbCV2在吉林省内分布广泛,菌株带毒率为70%~100%。对BbCV2依赖RNA的RNA聚合酶基因(RdRp)进行遗传多样性分析发现,该病毒不同分离物间RdRp的核苷酸序列和氨基酸序列高度保守,相似度高达99.78%和99.98%,该病毒遗传相对稳定,并且其分布和遗传进化与地理位置无关。由此可见,BbCV2的流行是自然发生的,可能是造成球孢白僵菌田间毒力退化的重要因素,并且球孢白僵菌对该病毒适应性较强,对病毒的遗传选择压力不明显。

球孢白僵菌对榛实象成虫毒力及解毒酶的影响

为探究球孢白僵菌(Beauveria bassiana)对榛实象(Curculio dieckamanni)的毒力和体内解毒酶系的影响,采用喷雾法测定球孢白僵菌对榛实象成虫的室内毒杀效果,并测定亚致死质量浓度(10%致死质量浓度(LC_(10))、30%致死质量浓度(LC_(30))和半致死质量浓度(LC_(50)))球孢白僵菌处理后,榛实象的质量、存活率及解毒酶活力。结果表明:球孢白僵菌处理72 h时,对榛实象成虫的LC_(10)、LC_(30)和LC_(50)分别为3.105、5.080、7.144 g·L^(-1)。不同亚致死质量浓度球孢白僵菌能显著降低榛实象成虫的质量和存活率(P<0.05)。与对照相比,球孢白僵菌对榛实象成虫体内解毒酶系的影响表现为,羧酸酯酶(CarE)整体随处理时间的延长先下降后上升再下降;谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)表现为各质量浓度随处理时间延长先下降后上升再下降;对多功能氧化酶(MFO)表现为诱导作用。亚致死质量浓度的球孢白僵菌显著影响了榛实象成虫的生物学特性及体内部分解毒酶活性。

一株侵染松墨天牛幼虫的球孢白僵菌的分离鉴定

于2023年,对采自武夷山国家公园的松墨天牛(Monochamus alternatus)幼虫僵虫的寄生真菌进行分离培养,获得1株虫生真菌(BbWYZ-06),利用形态学观察和系统发育分析对该菌株进行鉴定,并测定该菌株的生物学特性以及对松墨天牛幼虫的致病性。结果表明,菌株BbWYZ-06的培养特征与白僵菌属球孢白僵菌较为一致,基于核糖体内转录间隔区(internal transcribed spacers, ITS)和RNA聚合酶Ⅱ的第2亚基(the second largest subunit of the nuclear RNA polymerase enzymeⅡ,RPB2)序列构建系统发育树,该菌株与球孢白僵菌(Beauveria bassiana)聚在同一分支,因此将菌株BbWYZ-06鉴定为球孢白僵菌。在25℃下,菌株BbWYZ-06在PDA培养基上的菌落生长速率为(2.54±0.25) mm·d^(-1),培养第15天时的产孢量为(2.11±0.23)×10^(8)个·cm^(-2)。菌株BbWYZ-06对松墨天牛幼虫具有较强的致病性,孢子悬浮液为1.0×10^(7)个·mL^(-1)时,松墨天牛幼虫第7天累计死亡率达93%,LT50值为3.95 d,在松墨天牛生物防治中具有良好的应用潜力。

三种药剂与球孢白僵菌对高粱蚜虫的协同控制作用

为评价烟碱类杀虫剂与球孢白僵菌的协同关系,明确吡虫啉、噻虫嗪、呋虫胺与白僵菌的相容性及二者复配对高粱蚜虫的杀虫效果,本研究利用生物活性测定方法,分别测定不同浓度的球孢白僵菌(菌株GZGY-1-3)和三种化学农药对高粱蚜虫的致死率。结果表明,不同浓度(1.6×10^(5)~1×10^(9)孢子/mL)的球孢白僵菌对蚜虫的校正死亡率为34.22%~89.90%。三种化学农药对高粱蚜虫的杀虫效果由高到低为吡虫啉,呋虫胺,噻虫嗪。通过化学农药和球孢白僵菌的复配,研究农药浓度和复配时间对球孢白僵菌孢子萌发率的影响,评价二者的相容性。结果表明,农药浓度越大,处理时间越长,对孢子萌发影响越大。用推荐农药剂量的1/8和1/10浓度处理后,菌药相容性较好,孢子萌发率均在90%以上。基于前期试验结果,测定菌药联合对蚜虫的杀虫效果。结果表明,菌药复配后的共毒系数均大于80,其对高粱蚜虫的致死率明显增高,表现为相加或者增效作用,其中,球孢白僵菌(4×10^(7)孢子/m L)与呋虫胺复配毒力最强,致死率达97.67%,共毒系数为135.37。因此,球孢白僵菌与三种烟碱类化学农药复配,当化学农药浓度稀释8倍以上,混合处理时间不超过4 h,二者的兼容性较好。球孢白僵菌(4×10^(7)孢子/m L)与呋虫胺复配效果最佳。

球孢白僵菌侵染长林小蠹的致病性及侵染显微观察

【目的】筛选球孢白僵菌并探究其对长林小蠹幼虫和成虫的致病性,以及分析球孢白僵菌对长林小蠹幼虫和成虫的侵染过程。【方法】1)通过形态学鉴定和分子生物学鉴定确定所筛选菌株的品系;2)利用Excel2016软件计算累计校正死亡率,SPSS 26.0软件进行方差分析,并计算毒力回归方程式和LC50;3)利用扫描电镜观察球孢白僵菌侵染长林小蠹幼虫和成虫的过程。【结果】1)经鉴定,从长林小蠹僵虫虫体上分离纯化得到的是4株不同的球孢白僵菌(编号分别为Bbz1、Bbz2、Bbz3和Bbz4);2)对长林小蠹幼虫和成虫进行毒力测定,4株球孢白僵菌对长林小蠹幼虫和成虫毒力并不相同,其中,菌株Bbz4对幼虫的毒杀效果最好,接种7 d后,1×10^(8)孢子/m L浓度的孢子悬浮液对长林小蠹幼虫致死率达到100%,LC50为3.68×10^(5)孢子/m L,对成虫毒杀效果最好的是菌株Bbz1,接种7 d后,1×10^(8)孢子/m L浓度的孢子悬浮液对长林小蠹成虫致死率达到100%,LC_(50)为3.27×10^(6)孢子/m L;3)使用菌株Bbz4和菌株Bbz1对长林小蠹幼虫和成虫的侵染进行超微结构观察发现,在接种0~12 h时,菌株分生孢子接触并附着在长林小蠹体表;接种18 h时,发现孢子萌发并产生芽管;接种36 h时,发现有菌丝向内穿透体壁的现象出现;接种72 h时,菌丝伸出体外;接种96~120 h时,整个虫体被菌丝覆盖。【结论】确定了从长林小蠹僵虫虫体上分离到的是4株不同球孢白僵菌,其中菌株Bbz4和Bbz1分别对长林小蠹幼虫和成虫致病性最强,并确定接种后不同时间节点上白僵菌的侵染进程。

球孢白僵菌利用D-PPA合成D-HPPA的发酵条件优化

为了提高球孢白僵菌(Beauveria bassiana)利用R-(+)-2-苯氧基丙酸(D-PPA)合成R-(+)-2-(4-羟基苯氧基)丙酸(D-HPPA)的能力,在单因素试验的基础上,通过Plackett-Burman设计和Box-Behnken中心组合设计优化球孢白僵菌生物合成D-HPPA的液态发酵条件。结果表明,当D-PPA初始添加浓度为40 g/L时,液态发酵最优条件为葡萄糖38.70 g/L、蚕蛹粉15 g/L、FeCl_(2)1.0 g/L、接种量15%(V/V)、pH 6.6及发酵温度28℃时,D-HPPA的产量为(25.10±0.43)g/L,D-HPPA的产率为57.24%±0.97%,比优化前提高了159%。

继代培养球孢白僵菌对斜纹夜蛾幼虫毒力和产孢量的影响及菌株复壮研究

【目的】明确球孢白僵菌(Beauveria bassiana)在连续继代培养过程中对斜纹夜蛾(Spodoptera litura)二龄幼虫毒力、产孢量的影响,并进行菌种复壮研究,为进一步利用球孢白僵菌对斜纹夜蛾的生物防治提供参考。【方法】将球孢白僵菌SCAUJH19继代培养10代,得到F_(1)~F_(10)代菌株并测定产孢量。采用浸虫法分别用F_(1)~F_(10)代菌株处理斜纹夜蛾二龄幼虫,测定其对斜纹夜蛾二龄幼虫的毒力;建立模型分析球孢白僵菌继代培养代数、毒力与产孢量的关系及毒力退化规律。采用活虫复壮法对F_(4)、F_(6)、F_(8)、F_(10)代菌株进行复壮,比较复壮前后对斜纹夜蛾二龄幼虫的毒力效果,并测定产孢量。【结果】球孢白僵菌F_(1)~F_(5)代菌株对二龄斜纹夜蛾幼虫毒力无显著差异,处理7 d时校正死亡率为42.44%~45.22%,而F_(6)、F_(8)、F_(10)代菌株对二龄斜纹夜蛾幼虫的校正死亡率分别降至37.00%、22.94%、12.17%。F_(1)~F_(5)代菌株产孢量为9.65~10.43×10^(8)CFU/mL,F_(6)、F_(8)、F_(10)代菌株产孢量分别降至7.62×10^(8)、5.14×10^(8)、4.69×10^(8)CFU/mL。建立模型发现,菌株继代培养到F_(5)代后,产孢量随培养代数呈现指数下降,且产孢量与毒力存在一定的正相关关系,继代培养代数较少的菌株产孢量较高,对斜纹夜蛾二龄幼虫的致病力较强。通过活虫复壮法对F_(4)、F_(6)、F_(8)、F_(10)代菌株进行复壮后,菌株对斜纹夜蛾二龄幼虫的校正死亡率均>50%,且均高于原始菌株的最高致死率,复壮后菌株的产孢量均高于复壮前的产孢量。【结论】球孢白僵菌在继代培养4~5代后,产孢量逐代下降,对斜纹夜蛾二龄幼虫的毒力也逐代降低,需进行菌种复壮;采用活虫复壮法可将继代后的球孢白僵菌恢复或提高至原有特性;同一菌株的产孢量可作为评价其毒力的参考指标。

球孢白僵菌对中蜂外勤蜂慢性毒性测定

球孢白僵菌广泛应用于农林害虫防治,中蜂外出采集活动时可能会接触到球孢白僵菌。为了探明球孢白僵菌对中蜂外勤蜂的影响。配制含不同浓度(10~5、10~6、10~7孢子/mL)的球孢白僵菌分生孢子,在室内30℃、60%RH条件下测试对中蜂外勤蜂的慢性毒性。结果表明,中蜂外勤蜂接触球孢白僵菌(10~5、10~6、10~7孢子/mL)14天后,三组的校正死亡率分别为36.4%、68.2%、100%,生存率显著低于对照组,呈剂量毒性效应关系,说明球孢白僵菌对中蜂外勤工蜂的触杀毒性强。而取食10~5、10~6、10~7孢子/mL孢子糖液的工蜂生存曲线与剂量无对应关系,说明外勤蜂食入白僵菌孢子后无明显毒性。建议在球孢白僵菌施用期间,宜避开中蜂养殖区或开花的蜜粉源,或蜂群转场,以减少对中蜂的触杀毒害。

球孢白僵菌对烟蚜的毒力及食蚜瘿蚊的安全性评价

球孢白僵菌和食蚜瘿蚊均是控制烟蚜的重要生物防治技术,为及时明确球孢白僵菌对烟蚜的毒力及对天敌昆虫食蚜瘿蚊的影响。本研究采用浸渍法,在室内开展不同浓度球孢白僵菌分生孢子液对烟蚜(3龄若蚜)的毒力,以及对食蚜瘿蚊(3龄初幼虫)的致死率、化蛹率和羽化率以及雌雄比的影响。结果表明,接种1.60×10^(8)个/mL的球孢白僵菌后烟蚜的7 d累积校正死亡率最高,达92%;LC_(50)和LC_(90)分别为3.14×10^(4)个/mL和1.05×10^(8)个/mL,LT_(50)和LT_(90)分别为3.60 d和6.39 d。球孢白僵菌1.60×10^(8)个/mL浓度对食蚜瘿蚊3龄幼虫7 d的累积校正死亡率最高,为42.42%;lg(LC_(50))以及lg(LC_(90))分别为9.427和22.545,LT_(50)和LT_(90)分别为7.64 d和14.38 d;食蚜瘿蚊的化蛹率和羽化率分别为(75.00±2.04)%和(81.25±3.75)%,雌雄比值为1.092∶1,除化蛹率、羽化率与对照组有显著差异外,雌雄比无显著差异。综上所述,球孢白僵菌1.60×10^(8)个/mL浓度可与食蚜瘿蚊联合防控烟蚜。

金龟子绿僵菌CQMa421和球孢白僵菌ZJU435对红火蚁毒力及聚硅氧烷的增效作用研究

为探索红火蚁Solenopsis invicta的生物防治方法,本文系统评估了金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae CQMa421和球孢白僵菌Beauveria bassiana ZJU435对红火蚁的毒力以及聚硅氧烷对其的增效作用,并评估了两株虫生真菌对红火蚁的田间防治效果。结果显示,以处理第10天时的死亡率计算,金龟子绿僵菌CQMa421对红火蚁工蚁的致死中浓度LC_(50)为9.16×106孢子/mL;以8×10^(8)孢子/mL的死亡率计算,其对红火蚁工蚁的致死中时LT_(50)为3.534 d。以处理第10天时的死亡率计算,球孢白僵菌ZJU435对红火蚁工蚁的致死中浓度LC_(50)为1.5×10^(5)孢子/mL;以1×10^(9)孢子/mL的死亡率计算,其对红火蚁工蚁的致死中时LT_(50)为0.218 d。混入0.5μL/mL及以上浓度的聚硅氧烷可显著提高低浓度金龟子绿僵菌CQMa421及球孢白僵菌ZJU435对红火蚁毒力。田间试验结果显示,混入0.5μL/mL聚硅氧烷的3.2×10^(7)孢子/mL金龟子绿僵菌CQMa421和4×10^(7)孢子/mL球孢白僵菌ZJU435对红火蚁的综合防效分别为83.99%和90.44%,低于商品制剂0.1%茚虫威饵剂的综合防效93.89%。研究结果表明,金龟子绿僵菌CQMa421和球孢白僵菌ZJU435对红火蚁具有较高毒力,在红火蚁生物防治中具有较高开发潜力。

球孢白僵菌Bb-Gq对苹掌舟蛾的致病性测定及应用研究

本研究利用分离自松果梢斑螟幼虫的球孢白僵菌Bb-Gq菌株,采用喷施法对苹掌舟蛾的致病性以及田间防治效果进行测定。结果表明:球孢白僵菌Bb-Gq菌株对苹掌舟蛾有较强的致病性,第1 d时,各浓度累积校正死亡率的差异性均不显著,随接种时间的延长显著性逐渐提高,第7 d时,孢悬液浓度为1×10^(8)、1×10^(7)孢子/mL与1×10^(4)、1×10^(5)、1×10^(6)孢子/mL累积校正死亡率的差异性显著。随接种时间的延长,Bb-Gq菌株对苹掌舟蛾3~7 d的致死中浓度(LC_(50))分别为2.51×1012、7.25×10^(7)、2.43×10^(5)、5.17×10^(3)和2.32×10^(3)孢子/mL,1×10^(4)~1×10^(8)孢子/mL浓度范围内的致死中时间(LT_(50))分别为5.62、4.93、4.63、4.16和3.97 d。田间防治实验结果表明:施药7 d后,平均虫口密度为5.0头/枝,施药14 d后,平均虫口密度为0头/枝,虫口平均减退率达到100%。

不同温度下球孢白僵菌菌株YG-JCFL2对家蚕的侵染效果研究

为了研究不同温度下球孢白僵菌菌株对家蚕的侵染效果的影响,分别设置20℃、23℃、26℃、29℃和32℃共5个温度梯度,气候箱的其余饲养条件为RH95%±5%、光周期8L:16D,接种家蚕幼虫的孢子悬浮液浓度为1×10^(7)cfu·mL^(-1),测定5个温度下球孢白僵菌对家蚕4龄幼虫的致病效果的影响。结果表明:20℃、23℃、26℃、29℃和32℃共5个温度梯度的累积校正死亡率分别为61.97%、76.41%、79.79%、70.77%、51.27%;致死中时间(LT_(50))分别为6.677d、6.026d、5.838d、6.313d、6.969d。在设置的温度范围内,球孢白僵菌对家蚕的累积致死率最高、致死中时间(LT_(50))最短的温度为26℃。

球孢白僵菌BbFZ51菌株对松墨天牛幼虫致病力分析

为科学评价球孢白僵菌BbFZ51菌株对松墨天牛幼虫的致病力,通过不同浓度白僵菌BbFZ01菌株孢悬液接种3龄松墨天牛幼虫,使用时间-剂量-死亡率模型(TDM模型)分析白僵菌侵染的剂量效应和时间效应。结果显示,供试各浓度(1.0×10^(9)、1.0×10^(8)、1.0×10^(7)、1.0×10^(6)、1.0×10^(5)孢子·mL^(-1))孢悬液处理后的天牛幼虫均逐渐发病死亡,但不同浓度处理的幼虫死亡速度存在显著差异,随着孢子浓度的升高,天牛幼虫的累计死亡率增速显著加快。1.0×10^(9)、1.0×10^(8)、1.0×10^(7)孢子·mL^(-1)的累计死亡率分别在接种第7、8、9 d时达到100%;而1.0×10^(6)、1.0×10^(5)孢子·mL^(-1)的致死速度相对较慢,在接种11 d后的累计死亡率分别为100%、97%。运用时间-剂量-死亡率模型对试验结果进行建模和分析,并利用该模型估算出球孢白僵菌BbFZ51菌株对松墨天牛天牛幼虫的致死剂量与致死时间;随着接种后时间延长,白僵菌对天牛幼虫的半数致死剂量(LD50)和90%致死剂量(LD90)逐渐降低,表明剂量效应逐渐增强,接种第4 d、第5 d、第6 d、第7 d的半致死剂量对数值(LD50)分别为6.149、5.154、4.242、3.433;随着孢子浓度的升高,半数致死时间(LT50)和90%致死时间(LT90)显著缩短,表明时间效应逐渐增强,当孢子悬浮液浓度为1.0×10^(7)、1.0×10^(8)和1.0×10^(9)孢子·mL^(-1)时,LT50分别为3.338 d、2.492 d、1.829 d,说明白僵菌BbFZ01菌株对松墨天牛幼虫具有较强的致病力,具有进一步作为其生防资源的潜力。

植保无人机喷施球孢白僵菌制剂防治水稻二化螟飞行参数筛选

为筛选出适合植保无人机喷施球孢白僵菌制剂防治水稻二化螟的最佳飞行参数,本文利用大疆公司T20型植保无人机喷施球孢白僵菌制剂,探索不同飞行参数(飞行高度、飞行速度)对球孢白僵菌制剂沉积量(单位面积内球孢白僵菌孢子沉积个数)的影响,对筛选出的最优飞行参数进行田间试验并调查防治效果。飞行高度和飞行速度两个因素分别对单位面积内球孢白僵菌制剂沉积量存在显著影响,其中飞行高度因素对其影响更为显著,但两者之间的交互作用对其影响不显著;当飞行高度为1.5 m、飞行速度为3.0 m/s~5.0 m/s时,球孢白僵菌制剂沉积量高于其他处理;当飞行高度为1.5 m、飞行速度为5.0 m/s时,田间防治水稻二化螟的防治效果可达到75.34%。通过本研究,确定了植保无人机喷施球孢白僵菌制剂防治水稻二化螟的最佳飞行参数为飞行高度1.5m,飞行速度5.0m/s,水稻二化螟的田间防治效果可达75.34%以上。由此可见,利用植保无人机喷施球孢白僵菌制剂防治水稻二化螟的防治效果明显,具有大面积推广应用的价值。

华北大黑鳃金龟致病球孢白僵菌JCF的鉴定和致病力测定

【目的】华北大黑鳃金龟Holotrichia oblita是花生等多种农作物、果林及苗圃的重要害虫,长期以来主要以化学防治为主。本研究测定了球孢白僵菌Beauveria bassiana菌株JCF对华北大黑鳃金龟幼虫和成虫的致病力,为华北大黑鳃金龟的生物防治提供真菌资源。【方法】对罹患病害的华北大黑鳃金龟虫尸上的寄生真菌进行分离及回接试验,分离纯化出致病菌株JCF;利用光学显微镜观察菌株形态学特征,PCR扩增JCF的rDNA-ITS序列并测序,构建JCF系统发育树对菌株进行分子鉴定;采用浸渍法和田间模拟试验测定其对华北大黑鳃金龟成虫和幼虫的致病力。【结果】JCF菌株菌落初期为白色绒状,后期变为黄色或浅黄色絮状,背面无色。产孢细胞呈瓶状簇生于分生孢子梗上,分生孢子梗呈穗状,着生在营养菌丝上;分生孢子单生,透明,近球形,直径(2.0~3.5)μm×(1.5~2.0)μm。rDNA-ITS序列分子鉴定表明菌株JCF为球孢白僵菌。这一球孢白僵菌菌株JCF对华北大黑鳃金龟成虫的致死中浓度(medium lethal concentration,LC_(50))值为2.124×10^(7)孢子/mL,用其2×10^(8),1×10^(8)和5×10^(7)孢子/mL孢悬液处理华北大黑鳃金龟成虫时,致死中时(medium lethal time,LT_(50))值分别为6.267,6.852和7.455 d;球孢白僵菌JCF菌株对华北大黑鳃金龟1,2和3龄幼虫的LC_(50)值分别为5.47×10^(6),1.59×10^(8),2.50×10^(8)孢子/mL;1×10^(8)孢子/mL浓度下,球孢白僵菌JCF菌株对华北大黑鳃金龟1和2龄幼虫的LT_(50)值分别为8.6和18.6 d;5×10^(8)孢子/mL浓度下,球孢白僵菌JCF菌株对华北大黑鳃金龟2和3龄幼虫的LT_(50)值分别为10.3和13.2 d。田间模拟试验2×10^(8)孢子/mL球孢白僵菌JCF孢悬液对华北大黑鳃金龟成虫和幼虫同样表现出良好的致病效果。【结论】球孢白僵菌菌株JCF对华北大黑鳃金龟成虫和幼虫均有较高致病力,为开发白僵菌制剂防治金龟科害虫提供了新的菌种资源,对生物防治金龟科害虫具有潜在的应用价值。

高黎贡山不同海拔地区的球孢白僵菌对紫外辐射的耐受性

将来源于高黎贡山不同海拔地区(170~3100 m)的29个球孢白僵菌菌株的分生孢子用相同强度的紫外光辐射处理,用稀释涂布法计算存活的孢子数量,根据处理前后的孢子数计算各菌株的孢子存活率和紫外致死率,分析球孢白僵菌的紫外耐逆性与生境海拔间的关系,筛选紫外耐逆性较强的优良菌株。结果表明,紫外光处理后,所有菌株的孢子存活率都受到了抑制,不同菌株受紫外线影响的差异较大。菌株的孢子存活率与生境海拔呈低度正相关,低、中、高三种海拔生境的菌株对紫外线耐逆性存在显著差异,海拔高的菌株紫外线耐逆性相对较强;筛选到四株对紫外耐逆性较好的菌株(中海拔菌株BUB-1500和高海拔菌株BUB-2200、BUB-2500、BUB-3100),其中菌株BUB-2200的耐逆性最好(孢子存活率83.3%)。

球孢白僵菌对鸡皮刺螨临床应用效果观察

鸡皮刺螨是中小型蛋鸡场常见的一种体外寄生虫,以往养殖户都采用有机磷农药或其他兽药进行防控,对人畜有一定的毒副作用。为验证球孢白僵菌对鸡皮刺螨的临床应用效果,对患病鸡群分别采用球孢白僵菌和辛硫磷进行杀虫效果对比试验。结果A组(球孢白僵菌组)用药后5 d、10 d、15 d和20 d时螨虫减少率分别为59.6%、74.1%、76.6%和82.7%,B组(辛硫磷组)用药后5 d、10 d、15 d、20 d时螨虫减少率分别为86.8%、85.2%、85.4%和75.1%,两组在用药后10 d、15 d、20 d时螨虫减少对比无明显差异。结果显示球孢白僵菌对鸡皮刺螨具有较好驱杀效果。

不同基质和培养时间对球孢白僵菌孢子耐逆性研究

球孢白僵菌孢子是应用最广泛的真菌杀虫剂关键因子,为了解不同培养基和培养时间对球孢白僵菌孢子抗逆能力的影响,从采集自全国不同温区30株球孢白僵菌菌株中筛选出5株生长快、产孢量大的菌株——RCEF5609、RCEF5746、RCEF5688、RCEF6200和RCEF6857。采用营养丰富度不同的常用培养基(PDA、SDAY和MEA)和不同培养时间两个方面研究菌株耐热和抗紫外性,并分析相关基因转录水平上的变化。结果表明,菌株RCEF6200和RCEF5688分生孢子发芽率最高,抗逆性最强,RCEF5609孢子萌发率最低,抗逆性最弱;营养贫瘠的PDA较营养丰富的SDAY和MEA产生的孢子更有利于耐热和抗紫外,培养7 d的分生孢子抗逆性更强。进一步分析抗逆性最强的菌株RCEF6200和抗逆性最弱的菌株RCEF5609抗逆基因转录水平,结果显示,菌株RCEF6200和RCEF5609逆境胁迫后与对照组相比,在PDA培养基上和7 d的培养条件下,较其他处理中耐热性和抗紫外线相关基因表达水平呈不同程度增加,可见抗逆相关基因转录分析结果进一步验证上述结果。研究为生产抗逆性强的球孢白僵菌菌剂提供一定理论基础。

一株球孢白僵菌的分离鉴定及其对茶丽纹象甲幼虫的室内致病力测定

茶丽纹象甲是我国茶园重要的食叶害虫之一,目前以化学农药防治为主,亟需开发绿色生态环保的防控技术。为筛选出可防治茶丽纹象甲的生防菌株,本研究从田间采集了自然感病致死的茶丽纹象甲幼虫僵虫并分离出一株虫生真菌菌株。形态学特征和分子系统进化关系分析显示该菌株为球孢白僵菌Beauveria bassiana,命名为Maure 1.1。在自然化蛹和羽化温度(22℃)条件下,茶丽纹象甲幼虫在接种1×10^(5)~1×10^(8)个孢子/m L的球孢白僵菌菌株Maure 1.1孢子液后,其感病死亡率随接种后观察时间的延长而增加。其中,用最大浓度孢子通过浸虫和拌土法处理11 d时,茶丽纹象甲幼虫的累计校正死亡率分别为76.67%和73.33%,LC_(50)分别为2.00×10^(3)和1.11×10^(3)个孢子/mL,LT_(50)分别为7.87和7.84 d。上述结果表明,球孢白僵菌Maure 1.1对茶丽纹象甲幼虫具有致病活力,可作为茶丽纹象甲生物防治的候选菌株。