目的探讨理气活血滴丸对体外低流体剪切力加载的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响。方法选取清洁级健康雄性SD大鼠40只,随机分成模型组及理气活血滴丸低、中、高剂量组共4组,每组各10只。理气活血滴丸低、中、高剂量组分别予43.75,87.5,175mg...目的探讨理气活血滴丸对体外低流体剪切力加载的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响。方法选取清洁级健康雄性SD大鼠40只,随机分成模型组及理气活血滴丸低、中、高剂量组共4组,每组各10只。理气活血滴丸低、中、高剂量组分别予43.75,87.5,175mg·kg-1·d-1理气活血滴丸,每12h灌胃1次;模型组予0.9%生理盐水10ml/(kg·d),每12h灌胃一次。所有大鼠连续给药96h。并于最末1次给药后1h经腹主动脉取血,常规制作药物血清。体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分为空白组、模型组、理气活血滴丸低、中、高剂量组共5组,除空白组外,其余各组分别予以含对应组别药物血清的培养基培养48h后,均以低流体剪切力(4dynes/cm2)加载24h。利用EdU检测法检测不同组别HUVECs增殖时DNA渗入水平。利用TUNEL法检测不同组别HUVECs的凋亡情况。Western blotting法检测不同组别HUVECs中Yes相关蛋白(YAP)、含PDZ结合序列的转录活化共因子(TAZ)、JNK1/2应激活化蛋白激酶(stress activated protein kinase,SAPK),以及天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)的表达情况。结果与模型组比较,理气活血滴丸低、中、高剂量组细胞的凋亡率及YAP、TAZ、JNK1/2和Caspase-3蛋白表达水较低,细胞增殖率及Bcl-2蛋白表达量增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论理气活血滴丸能抑制低流体剪切力加载的HUVECs的凋亡,其作用可能与下调相关力学-生物信号通路相关蛋白YAP、TAZ、JNK1/2和凋亡相关因子Caspase-3表达,以及上调Bcl-2表达有关。展开更多
文摘目的探讨理气活血滴丸对体外低流体剪切力加载的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响。方法选取清洁级健康雄性SD大鼠40只,随机分成模型组及理气活血滴丸低、中、高剂量组共4组,每组各10只。理气活血滴丸低、中、高剂量组分别予43.75,87.5,175mg·kg-1·d-1理气活血滴丸,每12h灌胃1次;模型组予0.9%生理盐水10ml/(kg·d),每12h灌胃一次。所有大鼠连续给药96h。并于最末1次给药后1h经腹主动脉取血,常规制作药物血清。体外培养的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分为空白组、模型组、理气活血滴丸低、中、高剂量组共5组,除空白组外,其余各组分别予以含对应组别药物血清的培养基培养48h后,均以低流体剪切力(4dynes/cm2)加载24h。利用EdU检测法检测不同组别HUVECs增殖时DNA渗入水平。利用TUNEL法检测不同组别HUVECs的凋亡情况。Western blotting法检测不同组别HUVECs中Yes相关蛋白(YAP)、含PDZ结合序列的转录活化共因子(TAZ)、JNK1/2应激活化蛋白激酶(stress activated protein kinase,SAPK),以及天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)的表达情况。结果与模型组比较,理气活血滴丸低、中、高剂量组细胞的凋亡率及YAP、TAZ、JNK1/2和Caspase-3蛋白表达水较低,细胞增殖率及Bcl-2蛋白表达量增高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论理气活血滴丸能抑制低流体剪切力加载的HUVECs的凋亡,其作用可能与下调相关力学-生物信号通路相关蛋白YAP、TAZ、JNK1/2和凋亡相关因子Caspase-3表达,以及上调Bcl-2表达有关。