瑞香素调节STING/TBK1/IRF3信号通路对脓毒症大鼠免疫炎症反应的影响

目的探究瑞香素调节STING/TBK1/IRF3信号通路对脓毒症大鼠免疫炎症反应的影响。方法选用80只雄性Sprague Dawley(SD)大鼠,将大鼠随机分为4组,假手术组20只;其余60只按照盲肠结扎穿刺法(CLP)构建脓毒症小鼠模型,腹腔注射不同剂量瑞香素,分为无瑞香素模型组(0 mg/kg)、低剂量组(2.5 mg/kg)、高剂量组(5 mg/kg),每组20只;模型组及假手术组腹腔注射等量0.1%DMSO。观察CLP建模后的各组大鼠存活率。收集肺、肾、肝和脾组织进行病理组织学分析。ELISA检测大鼠血清炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β),流式细胞术检测外周血中的T淋巴细胞亚群,Western blotting检测STING/TBK1/IRF3信号通路蛋白表达变化。结果与假手术组相比,模型组大鼠生存率降低(P<0.05),各个脏器组织损伤明显,血清炎症因子(TNF-α、IL-6、IL-1β)水平上升(P<0.05),外周血CD4^(+)比例、CD4^(+)/CD8^(+)比值均降低(P<0.05),CD8^(+)比例、Th1/Th2比值均升高(P<0.05),STING、p-TBK1/TBK1、p-IRF3/IRF3蛋白表达均下调(P<0.05)。与模型组相比,瑞香素高剂量组提高了大鼠生存率(P<0.05),各脏器组织损伤明显减轻,血清炎症因子水平降低(P<0.05),外周血CD4^(+)比例、CD4^(+)/CD8^(+)比值升高(P<0.05),CD8^(+)比例、Th1/Th2比值降低(P<0.05),STING、p-TBK1/TBK1、p-IRF3/IRF3蛋白表达升高(P<0.05)。结论瑞香素可通过调节STING/TBK1/IRF3信号通路,改善脓毒症大鼠免疫炎症反应。

瑞香素调控DJ-1表达对子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的影响

目的探讨中药活性成分瑞香素调控DJ-1表达对子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡的影响。方法以子宫内膜癌Ishikawa细胞为研究对象,CCK-8法分析瑞香素对Ishikawa细胞增殖的影响,qRT-PCR检测瑞香素对Ishikawa细胞DJ-1 mRNA表达,流式细胞术检测瑞香素对Ishikawa细胞凋亡的影响。结果不同浓度瑞香素处理Ishikawa细胞后,细胞增殖抑制率较对照组明显增加,且呈现时间-浓度依赖性,瑞香素处理Ishikawa细胞48 h,抑制率IC50值为78μmol/L;与对照组相比,78μmol/L瑞香素处理Ishikawa细胞48 h,其DJ-1mRNA表达量明显降低(P<0.05),同时早期凋亡率(P<0.01)和晚期凋亡率(P<0.05)均明显升高。结论瑞香素可通过降调DJ-1的表达促进子宫内膜癌Ishikawa细胞凋亡,并呈剂量依赖关系。

瑞香素体外联合抗生素抗MRSA的研究

目的了解瑞香素单独或联合抗生素体外抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)能力,为中药或联合抗生素治疗该菌的感染提供依据。方法收集MRSA标准株及5株临床MRSA;检测瑞香素抗MRSA标准株及临床菌株菌株的MIC值,棋盘法观察瑞香素分别联合苯唑西林、红霉素、庆大霉素、克林霉素和左氧氟沙星联合对MRSA的作用MIC值。结果瑞香素对所有MRSA菌株的MIC值为128μg/mL,参照CLSI2022,所有菌株对青霉素、庆大霉素、克林霉素、苯唑西林和红霉素耐药,左氧氟沙星仅对USA300敏感,无万古霉素和利奈唑胺耐药株。瑞香素与左氧氟沙星有协同作用,与庆大霉素、克林霉素有相加作用,与苯唑西林、红霉素为拮抗作用。结论瑞香素具有抗MRSA能力,对左氧氟沙星、庆大霉素和克林霉素具有协同或相加作用,联合抗菌中能降低这些抗生素的MIC值,从而降低细菌耐药性的产生。

瑞香素对胃癌细胞的抑制作用及其机制

目的探讨瑞香素(Dap)对胃癌细胞的抑制作用及其机制。方法通过MTT实验检测浓度为0、30、60、90、120、150μmol/L的Dap处理胃癌AGS细胞48 h后对细胞存活率的影响。将AGS细胞分为A~E组,分别用0、30、60、90、120、150μmol/L的Dap培养48 h,通过光镜和结晶紫染色观察各组细胞数量和细胞形态的变化情况。DCF染色评估Dap对A~D组AGS细胞内活性氧(ROS)水平的影响。JC-1染色评估Dap对A~D组AGS细胞内线粒体膜电位(MMP)水平的影响。采用Western blot实验检测A~D组AGS细胞内LC3和P62蛋白的表达水平。通过Ad-mCherry-GFP-LC3B染色检测AGS细胞内自噬流的变化。结果Dap以浓度依赖性的方式显著抑制AGS细胞的存活率(F=321.50,t=12.44~34.77,P<0.05),处理48 h时AGS细胞的IC 50约为90μmol/L。Dap处理48 h后,随Dap浓度的增加,A~E组AGS细胞数量逐渐减少,扭曲和皱缩形状的AGS细胞逐渐增多。随着Dap浓度的升高,A~D组AGS细胞内ROS水平逐渐增高。C和D组AGS细胞中JC-1绿色/红色荧光强度比值显著高于A组(F=10.92,t=3.09、4.96,P<0.05)。Western blot实验结果表明,B~D组与A组相比,细胞内LC3B/LC3A比值显著增高(F=36.46,t=3.17~9.78,P<0.05),P62的表达也显著升高(F=109.90,t=12.38~16.78,P<0.05)。Ad-mCherry-GFP-LC3B染色发现,Dap可抑制自噬小体与溶酶体的融合,导致自噬流阻断。结论Dap能够抑制胃癌细胞的增殖,其作用机制可能与诱导胃癌细胞内ROS大量产生以及阻断自噬流有关。

瑞香素调节Shh/Gli1信号通路对乳腺癌增殖、凋亡和化疗敏感性的影响

目的探究瑞香素调节音猬因子(Shh)/胶质细胞瘤转录因子1(Gli1)信号通路对乳腺癌增殖、凋亡和化疗敏感性的影响。方法将人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞分为对照组、瑞香素组(40μmol/L瑞香素)、GANT61组(10μmol/L GANT61)、瑞香素+GANT61组(40μmol/L瑞香素和10μmol/L GANT61);CCK-8实验检测MDA-MB-231细胞增殖;划痕试验检测MDA-MB-231细胞迁移情况;在上述各分组细胞中加入1 mg/L阿霉素(Dox)处理48 h后CCK-8实验检测细胞化疗敏感性;流式细胞术检测MDA-MB-231细胞凋亡情况;Western blot检测MDA-MB-231细胞Shh/Gli1通路及凋亡相关蛋白表达水平。结果与0μmol/L比较,随着瑞香素的剂量增加MDA-MB-231细胞存活率显著降低(P<0.05),而与40μmol/L比较,50μmol/L瑞香素处理MDA-MB-231细胞存活率无差异(P>0.05),因此选择40μmol/L瑞香素作为后续实验的干预条件;与对照组比较,瑞香素组和GANT61组OD450值、划痕愈合率以及Gli1、Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05),Bax蛋白表达、细胞凋亡率和Dox化疗敏感性显著升高(P<0.05);与瑞香素组比较,瑞香素+GANT61组OD450值、划痕愈合率以及Gli1、Bcl-2蛋白表达显著降低(P<0.05),Bax蛋白表达、细胞凋亡率和Dox化疗敏感性显著升高(P<0.05)。结论瑞香素可能通过抑制Shh/Gli1信号通路来抑制乳腺癌细胞增殖,诱导细胞凋亡以及提高化疗敏感性。

瑞香素调节缺氧诱导因子-1α/血管内皮生长因子信号通路对胫骨骨折大鼠骨痂形成和血管生成的影响实验研究

目的:探究瑞香素对胫骨骨折大鼠骨痂形成、血管生成及缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)/血管内皮生长因子(VEGF)信号通路的影响。方法:构建胫骨骨折大鼠模型,将120只胫骨骨折大鼠随机分成模型组、瑞香素低剂量组(30 mg/kg)、瑞香素中剂量组(60 mg/kg)、瑞香素高剂量组(90 mg/kg)剂量组、瑞香素高剂量+HIF-1α抑制剂YC-1组(90 mg/kg瑞香素+10 mg/kg YC-1),每组24只。另取24只正常大鼠仅暴露胫骨,穿入克氏针,不切断胫骨,设为假手术组。各组大鼠进行相应给药干预8周。X射线观察骨痂形成情况,并计算骨痂体积。微计算机断层扫描(Micro-CT)分析骨折折断处骨痂组织和假手术组相同部位骨组织骨体积分数(BV/TV)、骨小梁数量(Tb.N)、骨小梁厚度(Tb.Th)和骨密度(BMD)。HE染色观察胫骨骨折处骨组织及假手术组大鼠相同部位骨组织形态学变化,并计算新生血管数量及血管面积。酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中碱性磷酸酶(ALP)、骨钙素(OCN)水平。蛋白印迹实验检测胫骨骨折处骨痂组织及假手术组骨膜组织HIF-1α和VEGF蛋白表达。结果:与假手术组比较,模型组胫骨骨组织破坏严重,骨小梁稀疏紊乱,成骨细胞数量明显减少,BV/TV、Tb.N、Tb.Th、BMD、新生血管数量及血管面积、HIF-1α和VEGF蛋白表达水平降低,ALP、OCN水平升高(均P<0.05)。与模型组比较,瑞香素低、中、高剂量组骨组织中骨痂依次增多,骨小梁生成增加且排列有序,毛细血管逐渐丰富,聚集的成骨细胞数量依次增加,骨组织破坏减轻,骨痂体积、BV/TV、Tb.N、Tb.Th、BMD、新生血管数量及血管面积、ALP、OCN、HIF-1α和VEGF蛋白表达水平依次升高(均P<0.05)。与瑞香素高剂量组比较,瑞香素高剂量+YC-1组骨痂、骨小梁生成、毛细血管、成骨细胞数量减少,骨组织破坏加重,骨痂体积、BV/TV、Tb.N、Tb.Th、BMD、新生血管数量及血管面积、ALP、OCN、HIF-1α和VEGF蛋白表达水平降低(均P<0.05)。结论:瑞香素可能通过激活HIF-1α/VEGF信号通路促进胫骨骨折大鼠骨痂形成、血管生成,从而加速骨愈合。

瑞香素激活Keap1/NRF2通路减轻小鼠肝脏缺血再灌注损伤的实验研究

目的:探讨瑞香素对小鼠肝脏缺血再灌注损伤(IRI)的保护作用及机制。方法:构建小鼠70%肝脏IRI模型,将小鼠随机分为假手术组(Sham组)、瑞香素组(Dap组)、缺血再灌注组(IRI组)、缺血再灌注+瑞香素组(IRI+Dap组),每组8只。Sham组和IRI组小鼠腹腔注射0.9%氯化钠溶液,Dap组和IRI+Dap组小鼠肝脏缺血前1 h腹腔注射Dap(1.5 mg/kg)。IRI术后12 h处死小鼠收集标本,检测血清转氨酶及炎症因子的表达水平,取肝组织行苏木紫-伊红(HE)染色观察肝组织病理损伤,通过免疫荧光检测肝组织炎症因子的表达,通过ELISA检测肝组织氧化应激相关因子表达,通过蛋白印迹实验检测肝组织NRF2/HO-1通路相关蛋白的表达。结果:和IRI组小鼠相比,IRI+Dap组小鼠肝脏IRI 12 h后,血清中ALT、AST、TNFα、CCL2的表达显著降低,肝组织坏死面积显著减小,肝组织中CD11b、Ly6g阳性炎症细胞浸润属相显著减少,肝组织中MDA水平显著降低、SOD、GSH水平显著升高,同时肝组织中Keap1表达显著降低、HO-1、p-NRF2表达显著升高。结论:瑞香素能够显著抑制小鼠肝脏IRI后的炎症和氧化应激。瑞香素对肝脏IRI的保护作用可能是通过激活Keap1-NRF2通路实现。

瑞香素调节AMPK/mTOR信号通路对IL-1β诱导的关节软骨细胞自噬和凋亡的影响

目的探究瑞香素(DAP)调节腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)信号通路对白介素-1β(IL-1β)诱导的关节软骨细胞自噬和凋亡的影响。方法将大鼠关节软骨细胞随机分为对照组(Control组,空白培养基处理)、模型组(Model组,10 ng/ml IL-1β)、低浓度DAP组(DAP-L组,10 ng/ml IL-1β+30 mg/L DAP)、高浓度DAP组(DAP-H组,10 ng/ml IL-1β+60 mg/L DAP)、高浓度DAP+AMPK抑制剂Compound C组(DAP-H+CC组,10 ng/ml IL-1β+60 mg/L DAP+10μmol/L CC)。CCK-8法检测细胞增殖能力。ELISA法测定细胞上清液肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平。流式细胞术测定细胞凋亡率。实时荧光定量PCR检测细胞中AMPK、mTOR mRNA的表达。Western Blot法检测细胞中AMPK/mTOR信号通路相关蛋白、凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax、自噬相关蛋白Beclin-1、LC3的表达。单丹磺酰戊二胺(MDC)荧光染色观察细胞自噬。结果与Control组比较,Model组关节软骨细胞OD_(450)值(48、72 h)、AMPK mRNA表达和蛋白磷酸化水平、Bcl-2、Beclin-1、LC3Ⅱ/Ⅰ蛋白表达、MDC阳性细胞比例显著下降(P<0.05),细胞凋亡率、炎性因子TNF-α、IL-6水平、mTOR mRNA表达和蛋白磷酸化水平、Bax蛋白表达显著上升(P<0.05)。与Model组比较,DAP-H组关节软骨细胞相关指标变化与上述相反(P<0.05)。Compound C减弱了DAP对IL-1β诱导的关节软骨细胞自噬的促进作用,促进了细胞凋亡。结论DAP可能通过激活AMPK/mTOR信号通路促进IL-1β诱导的关节软骨细胞自噬,抑制细胞凋亡。

西瑞香素通过介导巨噬细胞向M2极化对鼻咽癌大鼠线粒体通路的影响

目的探究西瑞香素通过介导巨噬细胞向M2极化对鼻咽癌大鼠线粒体通路的影响。方法选取40只SPF级SD雄性大鼠,随机分为正常(N)组、模型(M)组、盐酸千金藤碱(C)组、西瑞香素(W)组,每组10只,对M、C、W组采用腋部皮下注射诱癌剂进行鼻咽癌建模,N组不建立该模型,建模成功后,对C组灌胃15 mg/kg的盐酸千金藤碱,对W组灌胃24 mg/kg的西瑞香素,N组、M组同期给予灌胃同体积生理盐水,将体外培养后的巨噬细胞分为两组,加入磷酸盐缓冲液记为A组,加入西瑞香素记为B组。苏木素-伊红(HE)染色法检测鼻咽组织病理形态,RT-聚合酶链反应(PCR)法检测线粒体通路相关指标,采用末端脱氧核苷酸标记法(TUNEL)检测细胞凋亡,Western印迹法检测肝组织巨噬细胞中CD68、CD163蛋白表达。结果N组鼻咽组织细胞层次清晰且大小均匀,排列整齐;M组细胞层次变多,细胞形态及排列均不整齐,可见多细胞核且染色明显变深,出现大量鳞状上皮增生及炎性细胞浸润,而C、W组症状明显改善,且W组比C组改善明显。与N组比较,M组细胞凋亡明显降低(P<0.05);与M组比较,C、W组细胞凋亡率均明显升高,但与C组相比,W组细胞凋亡率显著升高(P<0.05)。与N组比较,M组鼻咽组织中Bcl-2 mRNA表达显著升高,Bax、Cyto-C mRNA表达显著降低(P<0.05);与M组比较,C、W组鼻咽组织中Bcl-2 mRNA表达显著降低,Bax、Cyto-C mRNA表达明显升高(P<0.05),且W组比C组变化显著。与N组比较,M组鼻咽组织巨噬细胞中CD68蛋白表达显著降低,CD163蛋白表达显著升高(P<0.05);与M组比较,C、W组鼻咽组织巨噬细胞中CD68蛋白表达显著升高,CD163蛋白表达显著降低(P<0.05),且W组比C组变化显著;与A组相比,B组CD68蛋白表达显著增加,CD163蛋白表达显著降低(P<0.05)。结论西瑞香素可影响大鼠线粒体通路表达,促进鼻咽癌细胞凋亡,其作用机制可能与抑制巨噬细胞向M2极化有关。

0.53%瑞香素乳油诱导烟草抗青枯病的效果

为明确0.53%瑞香素乳油对烟草青枯病的防效和防病机制,通过室内盆栽试验、酶活性测定和田间试验,分析0.53%瑞香素乳油对烟草青枯防控效果及叶片防御酶酶活性.室内结果表明,与0.1%S-诱抗素水剂、5%氨基寡糖素水剂、0.01%芸苔素内酯乳油相比,0.53%瑞香素乳油能够有效减少烟草青枯病的发生,在接种后第10 d,诱导抗性效果依然高达71.66%.瑞香素可显著提高烟叶PPO酶、CAT酶和SOD酶活性,其酶活性分别在10 min、12 h和24 h达到最大值,其值分别为169.02 U/g,145.42 U/g和111.51 U/g.田间试验结果显示,0.53%瑞香素乳油能够促进烟株生长,而且在病害发生高峰期(8月7日),0.53%瑞香素乳油能够有效诱导烟草对青枯病的抗性,相对防效达到44.33%,优于商品类抗性诱导剂.以上结果表明,0.53%瑞香素乳油可作为一种新型的植物源抗性诱导剂,为烟草青枯病的绿色防控提供理论支撑.

瑞香素通过抑制PI3K/AKT通路触发内质网应激抑制胃癌细胞活性

目的 探讨瑞香素(Daphnetin)对胃癌细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法 将胃癌细胞HGC-27随机分为对照、低剂量(5μg/mL瑞香素)、中剂量(10μg/mL瑞香素)、高剂量(25μg/mL瑞香素)和高剂量+740Y-P(25μg/mL瑞香素+30μmol/L PI3K/Akt信号通路激活剂740Y-P)5组,药物处理48 h后分别采用CCK-8法、EdU实验、流式细胞术、TUNEL实验、蛋白免疫印记法检测细胞增殖、凋亡及相关蛋白表达水平。结果 瑞香素可剂量依赖性抑制HGC-27细胞增殖,诱导HGC-27细胞凋亡,增加内质网相关蛋白CHOP、ATF4、p-PERK、p-EIF2α的表达,降低p-PI3K、p-AKT蛋白表达水平;此外PI3K/Akt信号通路激活剂740Y-P可逆转瑞香素对HGC-27细胞增殖的抑制,并逆转瑞香素对HGC-27细胞内质网应激相关蛋白表达的促进作用。结论 瑞香素可能通过抑制PI3K/AKT信号通路触发内质网应激抑制细胞增殖,并诱导细胞凋亡而发挥其对胃癌的抑制作用。

瑞香狼毒中的一个新双香豆素——异西瑞香素B(英文)

目的:研究瑞香狼毒的化学成分。方法:采用硅胶柱层析的方法分离和纯化化合物,根据理化性质和波谱方法鉴定化合物结构。结果:从瑞香狼毒中分离得到两个双香豆素类化合物:7-羟基-5,6-二甲氧基-3-[(2-羰基-2H-1-苯骈吡喃-7)氧取代]-2H-1-苯骈吡喃-2-酮,命名为异西瑞香素B(1)和西瑞香素(2)。结论:化合物1为新化合物。

瑞香素及其衍生物对2型糖尿病大鼠血液流变学影响的实验研究

目的:研究瑞香素及其衍生物对2型糖尿病血液流变学的影响。方法:采用高脂饮食结合小剂量应用链脲佐菌素(30mg·kg-1)建立实验性2型糖尿病(2型DM)大鼠模型。通过对大鼠血小板聚集率、全血黏度(高切、中切、低切)指标的检测,观察瑞香素及其衍生物对血液流变学影响。结果:与模型组比较,瑞香素组(0.5g·kg-1)、消渴丸组(3.0g·kg-1)及联合给药组(3.5g·kg-1)均能抑制ADP诱导的血小板聚集(P<0.01、P<0.05),瑞香素(0.5g·kg-1)、瑞香素衍生物(1.0g·kg-1、0.5g·kg-1)、消渴丸(3.0g·kg-1)及联合给药(3.5g·kg-1)均能降低全血黏度低切(P<0.05,P<0.01,P<0.001)。结论:瑞香素及其衍生物可明显改善2型DM大鼠血液流变学的异常。

瑞香素及其衍生物对2型糖尿病大鼠微循环影响的实验研究

目的:研究瑞香素及其衍生物对2型糖尿病微循环的影响。方法:采用高脂饮食结合小剂量应用链脲佐菌素(30 mg/kg)建立实验性2型糖尿病(2型DM)大鼠模型。通过对大鼠血糖值、体外血栓及肠系膜微动、静脉血流速度、血管管径的检测,镜下观察肠系膜微血管血流运动的状态,观察瑞香素及其衍生物对微循环影响。结果:与模型组比较,消渴丸(3.0 g/kg)组、联合给药(3.5 g/kg)组均能降低血糖(P<0.05,P<0.01);而瑞香素(0.5 g/kg)组、瑞香素衍生物(1.0 g/kg、0.5 g/kg、0.25 g/kg)组对血糖有降低趋势,但无统计学意义(P>0.05);瑞香素(0.5 g/kg)、瑞香素衍生物(1.0 g/kg、0.5 g/kg)、消渴丸(3.0 g/kg)及联合给药(3.5 g/kg)均能抑制血栓形成长度明显缩短(P<0.05,P<0.01)、血栓湿重减轻(P<0.05,P<0.001)及血流速度明显加快(P<0.05、P<0.01)、微血管管径均明显增大(P<0.05);糖尿病模型组大鼠微动、静脉可观察到线粒流;各给药组大鼠微动、静脉的流速多为线流,少数可见线粒流。结论瑞香素及其衍生物可明显改善2型DM大鼠微循环障碍。

金边瑞香鲜花中瑞香素的超临界萃取及条件的优化

目的 :研究超临界CO2 流体萃取 (SFE)法萃取金边瑞香鲜花中有效成份之一瑞香素的最佳条件。方法 :采用均匀设计方法。以萃取压力、萃取温度、解析压力、解析温度 4个因素为考察条件 ,每个因素设 7个水平进行实验。结果 :在SFE中最佳萃取条件为 :萃取压力 2 0MPa ,萃取温度 39℃ ,解析压力 8MPa ,解析温度 36℃。结论 :本法是一种简便、高选择性、高效率地萃取金边瑞香鲜花有效成份的方法。

瑞香素及其铜（Ⅱ）、锌（Ⅱ）配合物对超氧自由基的清除作用

以健康人血红细胞及细胞膜为实验材料，利用核黄素－蛋氨酸光照体系产生Ｏ＿２，考察了瑞香素及其铜（Ⅱ）、锌（Ⅱ）配合物对ｏ＿２的清除作用，以铜（Ⅱ）配合物活性最高。ＳＯＤ、瑞香素及其铜（Ⅱ）、锌（Ⅱ）配合物对膜中过氧化脂质的产生均有一定的抑制作用。其中以ＳＯＤ活性最高。

了哥王中西瑞香素的提取分离及抗肿瘤作用研究

研究西瑞香素(daphnoretin)的体外抗肿瘤作用。采用溶剂提取法、硅胶柱层析、重结晶法从中药了哥王中分离西瑞香素并用薄层色谱法和高效液相色谱法测定纯度。应用MTT法观察不同浓度的西瑞香素对体外培养的人肺腺癌细胞AGZY-83-a、人喉癌细胞Hep2和人肝癌细胞HepG2的抑制作用。采用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察细胞形态的变化并检测细胞内钙离子浓度。经紫外光谱、质谱和核磁共振光谱确定提取分离西瑞香素的结构,其纯度为99.75%。西瑞香素对体外培养的人肺腺癌细胞AGZY-83-a、人喉癌细胞Hep2和人肝癌细胞HepG2均有明显抑制作用,且呈浓度依赖性。其对上述三种肿瘤细胞的半数抑制浓度IC50值分别为8·73、9.71和31.34μg/mL。激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测结果表明应用西瑞香素处理肿瘤细胞72h后,细胞内钙离子浓度显著升高(P<0.05)。西瑞香素体外对人肺腺癌细胞AGZY-83-a、人喉癌细胞Hep2和人肝癌细胞HepG2均有明显抑制作用,机制可能与细胞内钙超载有关。

西瑞香素对肺癌A549细胞侵袭及迁移能力的影响

目的探讨西瑞香素对肺癌A549细胞侵袭及迁移能力的影响。方法通过Transwell小室分析西瑞香素对肺癌A549细胞侵袭能力的影响;划痕实验检测西瑞香素对肺癌A549细胞迁移能力的影响;Western blotting检测西瑞香素作用于A549细胞后MMP-2、MMP-9侵袭相关蛋白的表达。结果 Transwell小室实验结果提示,西瑞香素对A549细胞侵袭能力有抑制作用;划痕实验结果提示,西瑞香素对A549细胞迁移能力有抑制作用;Western blotting结果提示,西瑞香素抑制MMP-2、MMP-9侵袭相关蛋白的表达。随着药物浓度增加,MMP-2、MMP-9表达减少,具有剂量依赖性。结论西瑞香素对A549细胞体外侵袭及迁移有抑制作用,这种作用与抑制MMP-2、MMP-9表达有关。

瑞香素对HMGB1释放及HMGB1诱发的炎症反应的双重抑制作用

目的探讨瑞香素对高迁移率族蛋白1(HMGB1)释放及其诱发炎症反应的双重抑制作用。方法 RAW264.7细胞常规培养,不同浓度的瑞香素单独或联合脂多糖(LPS)作用细胞不同的时间,ELISA检测晚期炎症因子HMGB1的释放;Western blot检测JAK1/2、STAT1的磷酸化。THP-1细胞常规培养,不同浓度的瑞香素单独或联合rh HMGB1刺激细胞不同的时间,ELISA检测炎症因子TNF-α,IL-6,PGE2的释放;NO检测试剂盒检测NO水平;Western blot检测i NOS、COX-2的表达及p38、ERK、JNK的磷酸化水平。结果瑞香素浓度依赖性的下调HMGB1的释放,抑制rh HMGB1诱导的i NOS、COX-2的表达及TNF-α,IL-6,PGE2、NO的释放。WB结果显示,瑞香素显著下调脂多糖诱导的JAK-STAT1信号磷酸化,但对rh HMGB1诱导的MAPKs磷酸化无明显抑制作用。结论瑞香素能够抑制HMGB1释放及其诱发的炎症反应,而且瑞香素可能通过抑制JAK-STAT1信号途径减弱HMGB1的释放。

瑞香素的抗溶血和抗膜脂质过氧化作用

目的：研究瑞香素的抗溶血与抗红细胞膜脂质过氧化作用。方法：用常规的溶血毒性体外检测法及高效液相层析定量测定脂质过氧化产物法，检测不同浓度瑞香素对伯氨喹（ＰＱ）溶血毒代谢产物５，６－二羟基８－氨基喹啉（ＡＱＤ）诱发溶血与红细胞膜脂质过氧化的抑制率。结果：１０至８０μｍｏｌ／Ｌ瑞香素对ＡＱＤ溶血毒性与红细胞膜脂质过氧化的抑制率分别为３３．０％－６９．２％和１１．９％－５８．２％，且呈一定的剂量－反应关系。结论：瑞香素具有抗溶血与抗红细胞膜脂质过氧化作用。