甘氨胆酸对小鼠免疫功能的影响

目的:观察甘氨胆酸(Glycocholic acid,GCA)对正常及免疫抑制小鼠免疫功能的影响。方法:应用环磷酰胺或环孢菌素A所致的免疫抑制模型;采用ELISA及比色法观察了GCA对体液免疫的影响,碳廓清法测定了GCA对单核巨噬细胞的吞噬功能的影响,迟发型皮肤变态反应法观察了GCA对二硝基氯苯丙酮溶液所致小鼠迟发型皮肤过敏反应的影响,并测定了血清中IL-2、TNF-α的含量。采用流式细胞术检测了GCA对小鼠外周血T细胞亚群CD4、CD8比例的影响。结果:GCA能够显著增强正常及抑制小鼠的IgMI、gG的含量;增加外周血中T淋巴细胞CD4比例,使CD4+/CD8+比值提高;显著抑制迟发型皮肤变态反应的发生,并增加IL-2及TNF-α的含量。结论:GCA能够显著提高非特异性免疫功能;显著增强机体的体液免疫能力;显著抑制迟发型变态反应,增强正常及CsA抑制小鼠CD4+百分率、CD4+/CD8+比值,GCA具有调节机体免疫功能的作用。

HPLC-ELSD用于羊胆粉中胆酸及甘氨胆酸的测定研究

目的研究建立准确度高、重复性好的测定羊胆粉中胆酸和甘氨胆酸的方法。方法采用高效液相色谱仪与蒸发光散射检测器联用技术对羊胆粉进行测定。色谱条件：色谱柱Wondasil C18（4.6mm×250mm,5μm）;柱温25℃;流速1.0mL·min-1;ELSD检测器氮气流速2.3L·min-1,漂移管温度110℃;流动相A为0.2%甲酸溶液,流动相B为乙腈,梯度洗脱（0-7min,5%B;7-15min,5%→80%B）。结果同时测定了羊胆粉中的胆酸和甘氨胆酸含量,胆酸和甘氨胆酸进样量分别在0.163-0.817μg和0.160-0.801μg之间线性关系良好,平均回收率（n=6）分别为103.2%（RSD=1.7%）和101.2%（RSD=1.3%）。结论该法操作简便,测定准确,可用于羊胆粉的质量评价与控制。

固相萃取-反相高效液相色谱法测定大鼠血清中的甘氨胆酸

通过建立血清中甘氨胆酸浓度的测定方法，旨在为观察甘氨胆酸在大鼠血清中浓度的变化规律做试验依据，为开发有价值的动物源性药物做前期探索。试验采用固相萃取一反相高效液相色谱法（SPE—HPLC），色谱柱为Waters Xterra RP18（150mm×4．6mm．5μm），流动相为乙腈-KH2PO4溶液，检测波长213nm，柱温30℃，进样体积10μL。结果在0．15625～10．0μg／mL范围内甘氨胆酸浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程Y=39579X＋57823，R^2=0．9984；以信噪比S／N=3为标准，最低检测浓度为0．02μg／mL，平均回收率98．49％；日内RSD0．52％～2．00％，日间RSD0．74％～4．98％。该方法具有简便、稳定、灵敏、准确、实用等特点，适用于血清中甘氨胆酸含量的测定分析。

羊胆汁中甘氨胆酸提取工艺研究

[目的]开展从羊胆汁中提取、分离和纯化甘氨胆酸的工艺研究。[方法]采用除蛋白、除色素、回收乙醇、盐析、萃取等生物化学方法,从羊胆汁中分离提取甘氨胆酸。采用了吸附色谱法和薄层层析色谱法分离纯化和鉴定了甘氨胆酸。[结果]结果表明,该研究方法所提取的GCA纯度达97.3%。[结论]首次建立了从羊胆汁中提取甘氨胆酸的技术路线,为临床用药的进一步开发奠定了基础。

甘氨胆酸抗炎作用的研究

目的:研究甘氨胆酸的抗炎作用。方法:采用小鼠耳廓肿胀法、皮内染料渗出法、甲醛和琼脂所致大鼠足跖肿胀法以及棉球肉芽肿胀法,观察甘氨胆酸的急慢性炎症反应。结果:高、低剂量的甘氨胆酸对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀和小鼠皮肤毛细血管通透性,棉球所致小鼠肉芽肿,甲醛所致大鼠足跖肿胀以及琼脂所致大鼠足跖肿胀均有显著抑制作用。结论:甘氨胆酸对急性和慢性炎症均有显著的抑制作用。

牛羊胆汁中甘氨胆酸提取纯化工艺研究

采用盐析、萃取、柱层析等生物化学方法,从牛、羊胆汁中提取出了有效成分甘氨胆酸,并采用薄层层析法及薄层扫描法进行定量、定性检测,测得甘氨胆酸的纯度可达98%以上,牛羊胆汁甘氨胆酸的回收率分别为64%和62%。

天然甘氨胆酸和牛磺胆酸的提取研究

[目的]建立从牛羊胆汁中分离提纯天然甘氨胆酸和牛磺胆酸的工艺。[方法]采用盐析、萃取、脱水等生物化学方法和柱层析正交试验筛选天然甘氨胆酸和牛磺胆酸的最佳提取工艺。[结果]在流动相为氯仿和正丁醇，洗脱比例为3：2，装样量为3000ml胆汁粗提物，洗脱速度为6～10ml／s时提取量最大。所得产品经薄层层析法、红外光谱扫描法证实为甘氨胆酸和牛磺胆酸。经薄层扫描法测定含量，甘氨胆酸和牛磺胆酸平均纯度分别达98．4％和98．6％；提取方法平均回收率分别为63．7％和67．8％。该提取方法稳定可行，具有原材料丰富、价廉，产品纯度高、活性强等优点，适宜对天然甘氨胆酸和牛磺胆酸进行分离提制。[结论]建立了适宜对天然甘氨胆酸和牛磺胆酸进行分离提制的提取工艺。为甘氨胆酸和牛磺胆酸的工业化生产奠定了基础。

血清甘氨胆酸测定对肝硬化患者预后的评价

本文报告50例肝硬化患者SCG含量的临床意义.结果表明,SCG测定诊断肝硬化的阳性率为92％,明显高于SGPT(53％)及ADA(78.6％)的阳性率.Child-pugh肝功能分级中A、B、C级SCG值分别为10.14±6.03,23.55±11.27和54.66±24.47μmol/L(P<0.01).相关分析表明,SCG与血清白蛋白含量呈负相关(r=-0.5018.P<0.01),与胆红素含量呈正相关(r=0.6964,P<0.01).并发肝性脑病和原发性肝癌者及死亡病例,其SCG升高更为明显.我们认为肝硬化患者SCG值大于40μmol/L预示病情危重,预后不良.

简便的^(13)C标记甘氨胆酸的合成方法

该文"一锅煮"合成13C标记甘氨胆酸。即以氯甲酸异丁酯为活化试剂,甘氨酸-1-13C和胆酸直接缩合制备甘氨胆酸-甘氨酰基-1-13C,合成产品使用HPLC、LC-MS和1HNMR等进行分析。优化的合成条件为:n(氯甲酸异丁酯)∶n(胆酸)∶n(甘氨酸)∶n(三乙胺)=1∶1∶1∶1,反应温度10℃,反应时间1 h,13C标记甘氨胆酸收率82.4%(以甘氨酸-1-13C计),13C丰度达99.1%atom13C,光学纯度99.2%,w(甘氨胆酸-甘氨酰基-1-13C)=97.7%。

广东眼镜蛇蛇胆的鉴别及质量控制的研究Ⅳ：广东眼镜蛇蛇胆中牛磺酸、甘氨酸、牛磺胆酸和甘氨胆酸的测定

本文采用日立８３５－５０型氨基酸自动分析仪测定比较了广东眼镜蛇蛇胆及牛、猪、兔、鸡胆中牛磺酸、甘氨酸和其他氨基酸的成分与含量，并间接测定了牛磺胆酸与甘氨胆酸的含量和比值。结果表明广东眼镜蛇蛇胆中牛磺酸（６．６６７ｇ／１００ｇ干重）与牛磺胆酸（２７．４７ｇ／１００ｇ干重）的含量最高，而甘氨酸（０．５９８ｇ／１００ｇ干重）与甘氨胆酸（３．７０ｇ／１００ｇ干重）的含量最低，其他氨基酸的含量甚微。实验结果为蛇胆的真伪鉴别及内在质量控制提供了有实用价值的科学依据，同时也提供了一个准确、灵敏、微量的测定方法。

甘氨胆酸在大鼠血清中的药动学研究

考察甘氨胆酸在大鼠血清中的药代动力学特征。采用固相萃取-反相高效液相色谱法测定了给药后不同时间大鼠血清中甘氨胆酸含量，并做了方法学考察。结果显示在0．15625～10．0μg/mL范围内甘氨胆酸浓度与峰面积呈良好的线性关系，回归方程Y=39579X＋57823，R^2=0．9984；平均回收率98．49％；日内RSD0．52％～2．00％，日间RSD0．74％～4．98％；血清药时曲线符合一级吸收二室模型，药动学方程：C=41．17e^-1.256t＋84．7e^-0.491t～125．87e^-0.667t。结果表明，该方法适用于血清中甘氨胆酸含量的分析，并首次得到了有关药动学数据；甘氨胆酸口服给药后，在大鼠体内吸收快，消除较缓慢，在体内能保持较长时间的药物浓度，有利于其临床药理作用的发挥。

乙肝病毒携带者血清甘氨胆酸的变化

血清甘氨胆酸是一项比谷丙转氨酶灵敏度高，出现早，恢复慢的肝功指标，对肝实质损害有较高的诊断价值。对70例带乙肝病毒5y以上的乙肝病毒携带者进行空腹血清甘氨胆酸的测定，并与带乙肝病毒者5年以下的患者和正常人为对照，结果表明，5y以上的乙肝病毒携带组的血清甘氨胆酸浓度明显高于对照组（P＜0．01），有显著性差异，而正常人与5y以下的乙肝病毒携带组之间无明显差异（P＞0．05）。认为带乙肝病毒时间长的患者可能会引起肝损害。

甘氨胆酸的研究概况

文章主要介绍了甘氨胆酸的理化性质,体内的合成代谢过程等;甘氨胆酸的检测及意义;分析了甘氨胆酸的应用前景。此为今后进一步开展甘氨胆酸的研究提供线索。

甘氨胆酸对小鼠体外脾淋巴细胞凋亡的影响

本研究旨在探索不同浓度的甘氨胆酸(Glycocholic acid,GCA)对小鼠体外脾淋巴细胞凋亡的影响。在0.02μg/ml,0.035μg/ml,0.07μg/ml,0.21μg/ml,1.05μg/mL不同浓度的GCA作用下,应用倒置显微镜观察了体外脾淋巴细胞的核形态,采用琼脂糖凝胶电泳法检测了脾淋巴细胞的DNA片段,采用流式细胞仪测定了脾淋巴细胞凋亡早期磷脂酰丝氨酸外翻百分率;采用分光光度法测定了凋亡细胞氧化还原反应活性——GSH的含量;通过ELISA法检测了Caspase-3和Caspase-9的活性。结果:GCA能够使脾淋巴细胞细胞产生核固缩和凋亡小体;显著引起脾淋巴细胞DNA片段化(P<0.05),极显著的诱导脾淋巴细胞磷脂酰丝氨酸外翻(P<0.01);显著降低GSH的含量(P<0.05);显著提高Caspase-9和Caspase-3的活性(P<0.05)。结论:GCA具有显著的提高小鼠体外脾淋巴细胞凋亡的作用(P<0.05)。

甘氨胆酸钠的合成工艺改进

甘氨胆酸酸钠合成工艺改进。以混合酸酐法合成甘氨胆酸,即以氯甲酸乙酯为活化试剂,胆酸经过活化后与甘氨酸反应得到甘氨胆酸。分离后再加等当量氢氧化钠制成甘氨胆酸钠。获得高产率高纯度的甘氨胆酸钠,工艺适合工业化生产。

肝炎后肝硬化病人血清甘氨胆酸测定的临床意义

目的探讨肝炎后肝硬化病人血清甘氨胆酸（ＣＧ）值对肝硬化进展和预后的临床意义。方法１１３例肝炎后肝硬化患者按Ｃｈｉｌｄ分级，分为Ａ，Ｂ，Ｃ三组，采用放免法测ＣＧ值，各组数据经正态性检验呈非正态分布，故应用ＳＡＳ软件进行多样本秩和检验和相关统计。结果血清ＣＧ值随Ｃｈｉｌｄ分级加重呈递增现象，各组血清ＣＧ值之间有非常显著性差异（χ２＝４８．９０２０，Ｐ＜０．０００１）；血清ＣＧ与白蛋白呈负相关（ｒ＝－０．４７３６，Ｐ＜０．０００１），与总胆红素和凝血酶原时间呈正相关（ｒ＝０．４１７６，Ｐ＜０．０００１和ｒ＝０．３５１８，Ｐ＜０．００１）。结论血ＣＧ可作为一个估计肝硬化进展和预后的敏感指标，其敏感性较白蛋白。

甘氨胆酸对伤寒肝损伤的诊断价值

1995年3月～1997年8月,我们检测43例伤寒患者血清甘氨胆酸(SCG)含量,同时测定了血清丙氨酸转氨酶(ALT)活性作比较分析。藉以了解SCG对伤寒肝损伤的诊断价值。 对象与方法 一、病例选择 收住我院并经确诊的伤寒患者43例中,男26例,女17例;年龄7～46岁,平均30.86岁,随机抽取血清标本备检。 二、检测方法 以RIA法检测SCG含量和以Kar-

血清甘氨胆酸检测在肝损伤中的应用价值

甘氨胆酸（cholyglycine,CG）是胆汁酸的主要成分之一,是胆酸与甘氨酸在肝内合成的结合胆酸复合物。在正常情况下肝脏能有效地摄取CG,溢入体循环中者不足1%,因而外周血中CG浓度甚微,空腹血清CG（serum cholyglycine,sCG）低于2.50 mg/L。当肝细胞受损或胆汁郁滞时肝对CG摄取和排泄功能发生障碍导致sCG量增高。因此sCG测定是评价肝细胞功能及其肝胆系物质循环功能的敏感指标之一。

胆类中药体内代谢产物甘氨胆酸硫酸盐同分异构体的区分

目的:通过在线能量分辨质谱法(Online ER-MS)快速区分胆类中药在体内的代谢产物甘氨胆酸硫酸盐同分异构体。方法:采用高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS)采集3个甘氨胆酸硫酸盐异构体甘氨熊去氧胆酸-3-磺酸盐(GUDCA-3-S)、甘氨鹅去氧胆酸-3-磺酸盐(GCDCA-3-S)、甘氨去氧胆酸-3-磺酸盐(GDCA-3-S)的高分辨多级质谱信息,推导质谱裂解途径并归属各碎片离子,构建候选离子对m/z 528.3→528.3、528.3→448.3、528.3→404.3、528.3→386.3、528.3→330.2、528.3→97.0和528.3→74.0,每个候选离子对进一步衍生1组拟离子对(PITs),对应1组在–5~–180 eV梯度变化(步长为1 eV)的碰撞能;通过Online ER-MS采集所有拟离子对质谱响应,采用高斯曲线拟合每一组拟离子对的响应值,构建裂解曲线组,进而在同分异构体间比较同一离子对的裂解曲线。结果:3个同分异构体的MS1和MS2基本一致,难以区分。各组拟离子对的响应值均呈现高斯分布。同一化合物的不同候选离子对呈现出不同的裂解曲线,同分异构体的相同离子对的裂解曲线也存在差异。结论:利用Online ER-MS可以实现甘氨胆酸硫酸盐同分异构体的快速、有效区分,为胆类中药体内药效物质和作用机制的阐明提供参考。