甘遂不同炮制品中二萜类成分的变化研究

目的比较甘遂炮制前后各炮制品中二萜类成分甘遂萜酯B和甘遂萜酯A含有量的变化,以期揭示上述成分与甘遂醋炙减毒作用的关联性。方法采用HPLC法测定甘遂各炮制品中二萜类成分甘遂萜酯A、甘遂萜酯B,以X TerreRP C18色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm)为固定相;流动相为甲醇(A)-水(B)二元梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,检测波长235 nm,柱温38℃。结果假白榄烷型二萜类成分甘遂萜酯A和甘遂萜酯B经炮制后均有所降低,其质量分数高低顺序为生品>清炒品>醋润品>醋炙品。结论甘遂醋炙前后甘遂萜酯A与甘遂萜酯B的含有量变化与甘遂醋炙减毒有一定的关联性。

甘遂治疗肾性水肿探析

《医学衷中参西录》中记载“甘遂三钱之力,远胜于大黄六两之力也”。昔日,仲景立大陷胸汤和大陷胸丸治疗结胸、十枣汤治疗悬饮,三方均有甘遂,更有大黄甘遂汤和甘遂半夏汤分别针对水血俱结和水饮不除之症。民国张锡纯传承,论其性猛烈走窜,以攻决为用,为下水之圣药,并立方赭遂攻结汤治疗肠结。时至当代,医者多畏其毒性,用者寥寥。浙江省名中医程锦国主任中医师,勤求古训治肾病,擅用甘遂消水肿。

基于“通阳不在温,而在利二便”理论应用甘遂大枣散辨治心力衰竭合并胸腔积液经验

心力衰竭(心衰)合并胸腔积液与水饮代谢异常密不可分,水饮内停导致的“阳郁”是本病发病之核心。基于叶天士所提出的“祛邪通阳”思路,引申为“通阳不在温,而在利二便”的治疗思路,以“利二便、通六腑、解阳郁”为法,应用“十枣汤”改良方“甘遂大枣散”引水饮从膀胱、魄门而出,斡旋气机、升降有序,使“阳郁”得解,实现“通阳”,治疗本病安全有效。

甘遂炮制前后HPLC指纹图谱及主要成分含量变化研究

目的建立甘遂炮制前后(生甘遂、醋甘遂)的HPLC指纹图谱,并对大戟二烯醇进行定量分析,为甘遂质量控制及炮制提供参考。方法采用HPLC法建立生甘遂和醋甘遂的HPLC指纹图谱。通过相似度评价对甘遂炮制前后指纹图谱进行分析,并对大戟二烯醇进行含量测定。结果建立了甘遂炮制前后的HPLC指纹图谱,生甘遂和醋甘遂分别确定了14个和12个共有峰,与各自对照指纹图谱的相似度均大于0.950。大戟二烯醇在生甘遂和醋甘遂中的质量分数分别为0.249%和0.222%。甘遂HPLC指纹图谱在炮制前后发生了显著变化,共有峰减少3个,新增加1个,大戟二烯醇的含量显著降低。结论建立的HPLC指纹图谱对甘遂及其炮制品的质量控制及整体性评价具有重要意义,能够为甘遂的炮制及药理研究提供参考。

生甘遂与制甘遂中的二萜类成分甘遂大戟萜酯D的含量研究

目的:建立甘遂中甘遂大戟萜酯D的含量测定方法,并比较生甘遂和醋甘遂中甘遂大戟萜酯D的含量差异。方法:样品以甲醇为提取溶剂,超声处理后,以HPLC法分析。采用菲罗门lunarC18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)色谱柱分离,柱温40℃,以乙腈-水(70:30)为流动相,流速1.0mL·min-1;检测波长235nm。结果:甘遂大戟萜酯D线性范围分别为0.216～8.64μg(r=0.9999),平均加样回收率为103.5%(n=9);44批次甘遂中,甘遂大戟萜酯D的含量为0.008%～0.036%。结论:该方法准确、可靠,具有良好的重复性和稳定性,可用于甘遂大戟萜酯D的定量分析。

基于网络药理学探讨大黄-甘遂药对治疗急性胰腺炎的作用机制

目的:基于网络药理学分析大黄-甘遂药对治疗急性胰腺炎(AP)的作用机制。方法:从中药系统药理数据库和分析平台(TCMSP)中检索大黄、甘遂,获取主要活性成分;从化合物靶标预测(SwissTargetPrediction)数据库、TCMSP中获取主要活性成分治疗AP的作用靶点;从人类基因数据库(GeneCards)、在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)获取AP的疾病靶点;通过DAVID数据库进行基因本体论(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析。结果:获取大黄-甘遂药对治疗AP的主要活性成分7个,核心作用靶点19个,涉及的通路主要包括TNF、MAPK、PI3K-Akt、NOD样受体、VEGF、Toll样受体信号通路。结论:大黄-甘遂药对治疗AP具有多靶点、多信号通路的作用机制,可能通过抗炎、抗氧化活性、反向调节细胞凋亡及调节胰腺分泌等途径治疗AP。

大承气汤联合甘遂对急性胰腺炎的护理效果

目的探讨大承气汤联合甘遂在急性胰腺炎(AP)护理中的效果。方法54例AP患者随机分为两组。对照组给予大承气汤灌肠,观察组给予大承气汤灌肠联合甘遂末口服。比较两组的干预效果。结果观察组的总有效率高于对照组,干预后的WBC计数低于对照组,腹痛缓解时间及胃肠功能恢复时间均短于对照组,CSQ-8评分高于对照组(P<0.05)。结论大承气汤联合甘遂应用于AP护理中具有良好的效果,利于缩短患者的症状改善时间,减轻炎性反应,提高患者满意度。

基于水负荷模型的醋炙前后甘遂的泻水逐饮功效研究

通过建立水负荷动物模型,研究醋炙前后甘遂泻水逐饮功效的改变,从而为甘遂临床治疗腹水疾病提供理论依据。采用代谢笼法,大鼠腹腔注射5 mL生理盐水,同时灌胃给予5 mL生理盐水造成水负荷模型,观察生、醋甘遂对水负荷大鼠在0~2h、2~4 h、4~6h以及6h的总尿量的影响,检测血清中Na^(+)、K^(+)水平,肝脏中AQP9、肾脏中AQP2水平以及肾脏、十二指肠组织形态学观察。与空白组比较,水负荷模型组的大鼠尿量显著增高,肾脏指数、肝AQP9和肾AQP2水平也显著增加;与模型组比较,生甘遂高剂量(SH)可显著升高水负荷模型大鼠的4~6 h尿量和6 h总尿量;醋甘遂高剂量(CH)对2~4 h、4~6 h尿量有显著增加,表现为自水负荷2 h后即有持续利尿作用,且越到后期利尿作用越强。此外,SH组对肾脏球囊间隙增宽和管壁增厚有明显的改善,对十二指肠壁上皮血管扩张充血明显增加;CH组对肠壁化脓液渗出明显减少,且醋甘遂低剂量(CL)组形态与阳对药组极为相似。生、醋甘遂组对水负荷模型大鼠均有显著的利尿作用,后者效果更为持久缓慢。初步判断甘遂可能通过调控水负荷大鼠肾脏中水通道蛋白的下调而影响分泌相关体液,使水重吸收受到抑制,从而有助于发挥排尿作用。在考虑到生、醋甘遂逐水功效相近,对肠壁及肾脏组织副作用更低的角度,推荐临床应用醋炙甘遂。

甘遂神枢三里灸联合双功调肠丸治疗慢性便秘的疗效观察

慢性便秘是临床常见疾病,也是肛肠科疑难病,常持续六个月以上,其影响因素多而杂,临床表现为排便困难、出头梗阻和(或)排便次数减少、无便意感、粪便干硬,或多种症状兼备。长期便秘易导致胃肠功能紊乱,可引起或加重肛门直肠疾病,如痔疮、肛裂、脓肿。

甘遂醋炙前后对脾淋巴细胞活力和腹腔巨噬细胞释放NO的量效关系比较研究

目的比较甘遂醋炙前后对脾淋巴细胞活力和腹腔巨噬细胞释放NO的量效关系,初步探讨甘遂醋炙减毒机制。方法采用MTT法分析脾淋巴细胞活力和Griess法分析大鼠腹腔巨噬细胞NO释放情况,比较甘遂生品、清炒品、醋润品和醋炙品的致炎毒性及量效关系比较。结果在9.5～4750 mg·L-1浓度范围内,甘遂生品组与阴性对照组比较,能够促进脾淋巴细胞增殖和腹腔巨噬细胞NO的释放(P<0.01),药物作用呈现一定的量效关系;甘遂清炒组、醋润组和醋炙组与甘遂生品组比较,均能抑制脾淋巴细胞增殖和腹腔巨噬细胞NO释放(P<0.05),其抑制顺序为醋炙品>醋润品>清炒品,且抑制作用呈现一定的量效关系。结论在9.5～4 750 mg·L-1浓度范围内,甘遂清炒品、醋润品和醋炙品均能降低甘遂的致炎毒性,且降低毒性作用呈现一定的量效关系,并提示在甘遂醋炙过程中加热和醋润两个炮制程序能够起到降低甘遂致炎毒性的协同作用,从而为探讨甘遂醋炙减毒机制提供了一定的依据。

甘遂炮制前后各部位刺激性和泻下作用研究

目的比较生甘遂和醋甘遂各极性部位的刺激性和泻下作用。方法以家兔皮肤刺激和眼刺激的评分标准为依据,观察各受试物组的刺激性。以黑色炭末为指示剂,以正常小鼠首次排黑便时间和数量为指标,观察各受试物组的泻下作用。结果与对照组相比,生品乙酸乙酯部位和二萜部位具有明显刺激性,醋制后刺激性显著下降,生品石油醚部位有轻度刺激,醋制后稍有下降,正丁醇部位刺激性不明显。甘遂各部位组均能缩短小鼠第一次排黑便时间,使排黑便粒数增加。其中生品石油醚和二萜部位,与对照组相比具有极显著性差异(P<0.01),生品乙酸乙酯部位与对照组相比具有显著性差异(P<0.05),醋制后各组作用皆有所降低。结论甘遂的刺激性成分主要集中在乙酸乙酯和二萜部位,泻下成分主要集中在石油醚和二萜部位,炮制后作用均显著下降。

甘遂和醋甘遂醇提物及其不同极性部位的药效和毒性研究

目的考察甘遂和醋甘遂乙醇提取物及其不同极性部位的泻下作用和毒性。方法采用炭末推进法进行肠推进试验,观察甘遂和醋甘遂醇提物及其石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位和水部位对小鼠小肠推进和肠水分吸收的影响;急性毒性试验采用改良寇氏法测定其半数致死量(LD50)。结果与对照组相比,甘遂、醋甘遂醇提物、石油醚部位、乙酸乙酯部位可明显促进小肠推进运动。但与生品比较,醋制后各组墨汁推进率皆有所降低,泻下作用有所缓和;甘遂醋制后醇提物毒性下降4倍左右,石油醚部位毒性下降1倍左右,乙酸乙酯部位毒性下降4倍左右,而正丁醇部位和水部位无毒。结论甘遂醋制后泻下作用减弱,毒性显著降低。甘遂的石油醚部位和乙酸乙酯部位既是其药效学部位,又是其毒性部位。

甘遂与甘草合用对甘遂毒性成分甘遂萜酯A、甘遂萜酯B代谢的影响

目的研究甘遂与甘草合用对甘遂中毒性成分甘遂萜酯A(Kansuinine A,KA)和甘遂萜酯B(Kansuinine B,KB)代谢的影响。方法将正常对照组、甘草组、甘遂与甘草合用组大鼠给予相应药物处理10 d后,制备肝微粒体。将甘遂的毒性成分KA、KB与各组肝微粒体进行体外共孵育,测定孵育后体系中KA、KB的浓度,用于评价KA、KB的代谢情况。另取正常大鼠肝微粒体,分别加入CYP3A4、CYP2D6、CYP2C9、CYP1A2、CYP2C19的抑制剂红霉素、盐酸苯海拉明、苯溴马隆、西咪替丁和氟康唑,与KA、KB进行体外共孵育,检测孵育后体系中KA、KB的浓度,阐明参与KA、KB代谢的CYP酶亚型。取正常大鼠肝微粒体,分别加入甘草酸与甘草次酸,与KA、KB体外共孵育,测定孵育后体系中KA、KB的浓度,评价甘草酸与甘草次酸对KA、KB代谢的影响。结果甘遂与甘草合用组微粒体中KA、KB的含量明显高于正常对照组和甘遂组,表明甘遂与甘草合用使甘遂中毒性成分KA、KB的代谢受到抑制。与红霉素、盐酸苯海拉明、苯溴马隆、西咪替丁和氟康唑共孵育的微粒体中KA、KB的含量均明显高于空白对照组,表明CYP3A4、CYP2D6、CYP2C9、CYP1A2、CYP2C19均参与了KA、KB的代谢。与甘草酸和甘草次酸共孵育,体系中KA、KB的浓度明显高于空白对照组。CYP3A4、CYP2D6、CYP2C9、CYP1A2表明甘草酸和甘草次酸能够抑制KA、KB的代谢。结论 CYP2C19均可能参与了甘遂毒性成分KA、KB的代谢,甘遂与甘草合用能够抑制CYP3A4、CYP2D6、CYP2C9、CYP1A2及CYP2C19的活性,而使KA、KB的代谢减慢,产生蓄积;另外,甘草中主要成分甘草酸和甘草次酸能够抑制KA、KB的代谢,这可能是甘遂与甘草合用毒性增加的原因之一。

反药甘遂甘草配伍治疗肝硬化腹水的临床研究

目的:观察反药甘遂甘草配伍治疗肝硬化腹水的临床疗效及对主要生化指标、细胞因子、血浆内皮素(ET)、心钠素(ANP)等指标的影响。方法:将30例患者随机分为2组。2组均给予常规基础治疗和支持疗法,治疗组16例予甘遂甘草胶囊治疗,对照组14例予甘遂胶囊治疗。2组疗程均为2-4周。结果:好转率治疗组为87.5%,对照组为71.4%,2组比较,差异无显著性意义(P>0.05)。治疗后2组血小板(BPC)、ET、血浆白蛋白(Alb)均明显增加,与治疗前比较,差异有显著性或非常显著性意义(P<0.05,P<0.01)。治疗组治疗后凝血酶原时间(PT)缩短,与治疗前比较,差异有显著性意义(P<0.05)。治疗组BPC、ET、PT 与对照组治疗后比较,差异有显著性意义(P<0.05)。结论:反药甘遂甘草配伍治疗肝硬化腹水有明显的近期疗效,其对ET、BPC、PT等指标的影响与单用甘遂比较有统计学意义,能延缓肝硬化病情的进程,减少肝硬化患者并发出血的概率。

生甘遂及其炮制品中2种三萜成分的含量研究

目的应用反相高效液相色谱法比较生甘遂和醋甘遂中大戟二烯醇及表大戟二烯醇的含量差异。方法样品以乙酸乙酯为提取溶剂,超声处理后,蒸干,加甲醇溶解,以HPLC法分析。采用Agilent C8色谱柱分离,柱温:30℃;以乙腈-水(95∶5)为流动相,流速:1.0mL.min-1;检测波长:210nm。结果考察了44份甘遂及其炮制品中的大戟二烯醇和表大戟二烯醇的含量情况。结论生甘遂及其炮制品醋甘遂中的三萜成分以大戟二烯醇及表大戟二烯醇为主,甘遂及醋甘遂中大戟二烯醇(Ⅰ)和表大戟二烯醇(Ⅱ)的含量消长变化有一定规律,二者之比(Ⅰ/Ⅱ)约为3∶1,可以只测定大戟二烯醇的含量来控制甘遂及其炮制品的质量。

不同产地甘遂和醋甘遂饮片的性状和显微鉴别比较

[目的]探索甘遂和醋甘遂饮片的快速鉴定方法。[方法]采用性状及显微鉴别的方法对不同产地甘遂和醋甘遂的饮片性状与粉末显微特征进行了比较。[结果]山西产甘遂多为细长圆柱状,且纤维性较强,陕西产多为粗短连珠状;山西产甘遂乳汁管和纤维较多,厚壁细胞壁微木化,而淀粉粒明显少于陕西产甘遂;醋甘遂饮片较生甘遂颜色深,可见焦斑;醋甘遂粉末中的木栓细胞、导管及纤维的颜色深于生品。[结论]该研究对于鉴别区分不同产地的甘遂和醋甘遂饮片具有一定的价值。

甘遂炮制前后不同极性部位泻下作用的药效研究

目的考察生甘遂和醋甘遂乙醇提取物及其不同极性部位的泻下作用。方法采用墨汁推进法测定大鼠胃肠推进率,观察生甘遂和醋甘遂醇提物萃取的石油醚部位、乙酸乙酯部位、氯仿部位、乙醇部位和水部位对小鼠小肠推进和肠水分吸收的影响。结果与阴性对照组比较,生甘遂、醋甘遂的石油醚部位、氯仿部位、乙酸乙酯部位小肠推进率均有显著性差异,可明显促进小肠推进运动。但与生品比较,醋制后各组墨汁推进率皆有所降低,泻下作用有所缓和。结论甘遂醋制后泻下作用减弱。

甘遂炮制前后不同提取部位急性毒理实验

目的考察生甘遂和醋甘遂乙醇提取物不同提取部位的毒性。方法采用急性毒性实验法,测定LD50,并用BLISS法计算。结果与生甘遂醇提物相比,醋甘遂醇提物石油醚部位和氯仿部位毒性均有下降,乙酸乙酯部位下降3倍多。结论甘遂经醋制后毒性显著降低。

甘遂炮制前后多糖含量研究

目的:对甘遂生品及醋炙品的多糖含量进行研究。方法:以葡萄糖为对照品,采用苯酚-硫酸比色法测定甘遂生品及醋炙品多糖含量。结果:甘遂生品多糖和醋炙品多糖含量分别为0.17%(RSD=2.17%,n=3),0.31%(RSD=1.13%,n=3)。结论:该方法简便,准确,可用于甘遂及其炮制品多糖含量的研究。

甘遂配伍甘草对大鼠肝脏CYP2E1表达及活性的影响

目的 通过检测细胞色素氧化酶CYP2E1的表达和活性变化,从分子水平探讨中药配伍禁忌“十八反”理论中甘遂配伍甘草的药理机制。方法 利用RT PCR检测大鼠肝脏CYP2E1mRNA水平;通过Westernblot检测大鼠肝脏CYP2E1蛋白表达;采用高效液相色谱(HPLC)法测定CYP2E1酶活性。结果 甘遂组、甘草组和甘遂甘草配伍组均明显诱导大鼠肝脏CYP2E1的表达与活性上升,并发现甘草组和甘遂甘草配伍组对CYP2E1活性的诱导作用显著高于甘遂组。结论 甘遂可能通过诱导肝脏CYP2E1的表达与活性上升,促使其所含的前致癌物质和前毒物转化成为致癌物和毒物,导致对机体的毒性作用;甘遂甘草配伍使用时,甘草对CYP2E1活性的诱导能力更强,故而甘草可促进甘遂所含前致癌物质和前毒物转化成为致癌物和毒物的过程,并导致对机体毒性作用的增强,从而表现出“十八反”中药物配伍禁忌的特征。