实时生物分子相互作用分析技术用于链霉亲和素-生物素化抗体的层层组装研究

使用生物分子相互作用分析 ( Biomolecular interaction analysis,BIA)技术实时监测了在链霉亲和素表面层层组装亲和素 -生物素化抗体多层膜的过程 ,结果表明 ,通过链霉亲和素与生物素之间的强亲和作用 ,能够在表面形成均一的多层膜 ,并用实时 BIA技术求得了每层蛋白质的表面浓度 .对于生物素化抗体 ,单层吸附表面浓度为 1 .32 ng/mm2 ;对于链霉亲和素 ,单层吸附表面浓度为 2 .93ng/mm2 .

SPR技术分析生物分子相互作用的研究方法

生物分子的活性功能是通过分子之间的相互作用来实现的,了解这种相互作用的关系对生命科学的研究及揭示生命发生发展的基本机制具有着重要的意义。基于表面等离子共振(SPR)的分析分子相互作用(BIA)的技术是新型的生物传感技术,其无需标、能实时跟踪检测生物分子间结合、解离的整个过程,通过分析传感图谱获取分子相互作用的模式和动力学常数等方面的信息。SPR是研究生物分子相互作用的强有力工具,SPR技术已被广泛应用于生命科学领域的研究,并且显示出广阔的应用前景。概述了SPR技术原理、分析方法及其评述了其存在的问题。

基于SPR原理的生物分子相互作用光强法检测技术

本文简述了表面等离子体共振(Surface Plasmon Resonance,简称SPR)原理、激发表面等离子体共振的条件和共振发生时反射光的光强变化，对角度扫描法和波长扫描法进行了分析。接着，基于角度扫描的光强检测，以半导体激光器为光源，建立了生物分子相互作用检测实验装置，并在模拟分析的基础上以蓖麻毒素与其单克隆抗体为样本进行了实验。实验表明，实验系统结构简单，可以实时监测生物分子间的相互作用过程，对样本无需进行标记，操作简便。

双偏振干涉测量技术研究生物分子相互作用:基于功能化脱氧核酸实时无标检测小分子

实时无标监测生物分子连接过程对理解生化过程具有重要的意义。当前，表面等离子体共振技术（SPR）被广泛地应用于监测这一过程，然而．常规的SPR仅能提供分子之间相互作用时分子层质量变化．并且只能直接检测分子量大于1000的分子。近来，

生物分子相互作用技术检测黄曲霉毒素B_1

建立一种利用生物分子相互作用技术检测饲料中黄曲霉毒素B_1的方法。将黄曲霉毒素B_1抗体固化在芯片上,样品经甲醇-水提取、稀释后通过固化黄曲霉毒素B_1抗体的芯片,从而测定样品中的黄曲霉毒素B_1含量。方法检出限为1μg/kg,检测限为2μg/kg,回收率为67.0%-90.1%,相对标准偏差为6.57%-7.81%。该方法检测灵敏度高、检测时间短、操作简便易行。

利用ForteBio OctetRed多通道生物分子相互作用系统非标记实时检测小分子和蛋白质结合的动力学常数

测定评价小分子和治疗靶点蛋白结合的亲和力在药物开发和先导化合物优化过程中很重要。我们使用一种新的无需标记的方法来检测碳酸酐酶和一些小分子抑制物（〈500Daltons）结合的动力学常数，包括速率常数和亲和常数。ForteBio的OctetRED系统检测生物分子相互作用时不需要标记，八通道同时检测，待检测的样品可以放在96孔板中。该系统检测时基于生物膜层反射光干涉技术（BioLayer Interferomelry），简单地说，光纤制成的生物传感器（Biosensor）底端覆盖了生物分子相容层，可以用来固定相互作用分子中的一个，形成生物膜层，当具有一定带宽的可见光入射生物膜层时，根据薄膜干涉的简化模型和光线反射折射定律，入射光线在生物膜层表面被分成两部分，形成第一部分反射光．进入生物层的透射部分在生物层的第二个界面产生反射，形成第二部分反射光。光束垂直入射时，两部分反射光形成干涉波，被光谱仪所检测。相互作用发生时，生物层厚度增加，反射光干涉光谱曲线整体向波长增加方向移动。分子结合或解离时，都会导致干涉曲线的漂移，这种变化可以被实时监测。

基于表面等离子共振原理的生物分子相互作用仪的介绍

生物学中,分子活性功能是通过相互作用实现的,包括识别、运输、调控等,故生物分子间相互作用的探索研究在现代生命科学领域中具有重大的意义。基于表面等离子共振原理的生物分子相互作用仪广泛用在小分子、多肽、蛋白质、核酸等相互作用检测方面,具有非常广阔的应用前景。本文对生物分子相互作用仪的结构、技术特点、基本操作、应用等方面进行了综述。

SPR双分差动干涉成像生物分子相互作用分析仪

药物筛选和蛋白质组学研究需要高灵敏度和高通量的生物分子相互作用分析仪。该文提出了表面等离子体共振(surface plasmon resonance,SPR)双分差动干涉成像方法和折射率相关因子(refractive index related factor,RIRF)的概念,研制了一种新的分析仪。从传感表面反射的光经过1/2波片、成像透镜和偏振分束镜后分成正交的2束,分别承载同一时刻传感表面的光强互补的2幅干涉图像,投射在2台CCD上,连续同时采集图像并处理后得到反映传感面上折射率变化的RIRF分布图,可解析出生物分子相互作用的特征信息。性能测试结果表明:分析仪动态范围约为0.015折射率单位(refractive index unit,RIU),灵敏度为57.15RIRF/RIU,检测分辨率约为8.5×10-6RIU,检测通量高于100,测量重复性优于95%。该分析仪的阵列生物分子相互作用检测结果和Biacore仪器的检测结果有平行性。

应用CurveExpert求解生物分子相互作用的化学模型参数

本文首先建立了生物分子相互作用的准一级动力学模型,然后根据由表面等离子共振仪检测蛋白A和球蛋白IgG相互作用所获得的数据,应用CurveExpert软件强大的曲线拟合功能,对蛋白A和球蛋白IgG的结合和解离过程分别进行了曲线拟合分析,获得了它们相互作用的k_a、k_d、K_A和K_D等动力学及亲和力参数。拟合结果表明,蛋白A和球蛋白IgG的相互作用过程符合准一级动力学数学模型,相关性较好,与Origin软件相比,能够自动进行迭代计算,简化了计算步骤和时间。

生物膜干涉技术在生物分子间相互作用检测中的应用

生物膜干涉技术可以实现生物分子之间相互作用的实时分析检测,广泛应用于高校科研实验室的药物开发过程,是一种非标记的、实时监测的先进技术。本文结合生物分子相互作用分析系统的技术原理和实际使用情况,详尽叙述了其在生物分子间相互作用检测的方法和应用,旨在为相关领域的科研工作者提供实验帮助和参考。

基于SPR干涉成像的生物分子相互作用检测方法

蛋白质组学研究和药物开发迫切需要高通量、高精度、无标记且实时检测技术。该文提出了一种基于干涉成像的表面等离子共振(SPR)生物分子相互作用检测方法,在入射光的p和s偏振分量之间分别附加90°和-90°位相差,采集对应的干涉图像,并利用所采集的2帧图像,计算出反映传感面折射率分布的信号。循环采集能够实时获得生物反应进行时传感表面发生的折射率分布变化。这种方法在克服光源非均匀性影响的同时,还抑制了光强漂移引起的测量误差,达到了高精度。实验结果表明:干涉成像的图像一致性好,系统的折射率分辨率达到了2×10-6RIU(refractive index unit),动态检测区间大于0.005 RIU。在此基础上,检测了兔IgG和羊抗兔IgG的相互作用,结果表明表面等离子体共振干涉成像系统适于高通量检测,完善后有可能成为一种蛋白质组学研究和药物开发的强有力工具。

生物分子相互作用动力学的表面等离子体共振研究方法

表面等离子体共振及其成像方法以其免标记、可实时动态原位跟踪反应过程而在生物分子相互作用动力学及其常数测定研究中凸显优势,近年来这方面的研究进展迅速,但缺乏必要的总结归纳。为此,本文就这一主题所涉及的关键研究方法与应用进展作简要的归纳分析并展望了该领域的发展前景。

原子力显微镜在生物分子间相互作用力的研究

近年来原子力显微镜在测量生物分子间的相互作用力方面取得显著的进步。本文综述原子力显微镜原理以及在生物分子间相互作用方面的研究,为人们理解分子的识别进程,提供一个新的研究方法。

2013生物分子相互作用平行分析技术专题研讨会在伊春举办

由中国生物工程学会主办、伯乐生命医学产品（上海）有限公司支持的“2013生物分子相互作用平行分析技术专题研讨会”近日在黑龙江省伊春市召开。会议邀请国内外生物分子相互作用平行分析技术和应用领域的高水平专家，共同探讨治疗用单克隆抗体药物发现、靶向药物研发与验证、生物大分子相互作用结构表征和疫苗研发等领域的应用。会议安排了“组学、作用组学到细胞生物学”、“大分子药物研发及SPR技术”、“生物大分子和核酸相互作用的研究”、“生物制药的QC技术及SPR应用”、“Novel applications of ProteOn XPR36 system in protein-protein, lipid-protein and DNA- protein interaction analysis＂, ＂A small molecule ligand for the cellular prion protein inhibits the NEUROToxicity of amyloid 13 oligomers＂ 等专题报告。

生物表面化学及分子间相互作用研究——表面等离子体激元共振(SPR)在生物表面化学中的应用

SPR检测是一种光学技术,在生物表面化学及研究生物分子相互作用方面得到广泛应用。文章主要综述SPR对分子相互作用的研究现状,阐述与评价SPR在生物化学中的应用,并对其应用前景进行分析。

剪切流动法研究表面固定化配基与目标分子的相互作用力

基于剪切流动腔技术,以微球作为受力载体,设计了一套可用于研究表面固定化配基与目标分子特异性相互作用力的实验和分析方法,并以人免疫球蛋白G(humanIgG)和羊抗人免疫球蛋白G(goatanti-humanIgG)分别作为模型配基和模型目标分子进行了研究.基于平面Poiseuille层流模型设计了流场参数,以数值计算结果验证了设计的合理性.使用牛血清白蛋白(BSA)作为非特异性对照,判断微球与基片表面的结合力来自配基和目标分子的生物特异性相互作用,并由进一步的目标分子灭活对比实验确认了这一结论.实验观察到微球与基片表面的结合力受到配基面密度的影响,说明发生结合的是多对而非单对蛋白质分子.将95%的微球被剥离时对应的壁面剪切率设定为临界剪切率,由大量实验结果拟合得到了临界剪切率与配基面密度间的定量关系.在受力分析模型中,考虑到多分子的结合,以及分子键位置不同造成的力臂长度的差异,最终计算得到单对配基与目标分子的平均结合力约为342pN.

蛋白质与脂质相互作用的研究技术

蛋白质与脂质的相互作用是细胞内多种生命现象的基础之一,两者相互作用的研究方法以及相互作用的机制都是当前生物化学研究的热点之一。该文介绍两者相互作用的不同研究方法,并比较了各种方法的优缺点和适用范围。

表面等离子体共振技术在分子生物学中的应用

表面等离子体共振 (SPR)技术可以实时、原位地测定生物分子间的相互作用而无需任何标记 ,可以连续监测吸附和解离过程 ,并可以进行多组分复合物的相互作用的研究。SPR技术在DNA的复制和转录、DNA的修复、核酸与药物的作用以及肽库和抗体库的筛选等分子生物学领域的应用研究取得了令人瞩目的进展 ,显示了常规技术无法比拟的优越性。

横向塞曼激光器在生物分子检测中的应用研究

首先简述了表面等离子体共振原理、激发表面等离子体共振的条件和产生共振时反射光的相位变化 ,再对横向塞曼激光器的应用进行了分析。接着 ,基于相位检测 ,以横向塞曼激光器为光源 ,建立了生物分子相互作用检测实验装置 ,并以蓖麻毒素和羊抗小鼠抗体为样本进行了实验。实验表明 :检测灵敏度高 ;在整个光路中 ,P光与S光完全重合 ,满足共光路原则 ,对空气折射率和其它各种扰动具有很好的自适应性 ,检测稳定性好 ;激光稳频精度可达 3.5× 10 - 10 ,与光强检测法相比 ,检测可靠性更高。

基于微流控芯片电泳的生物分子间相互作用研究

用合适的手段表征生物分子的相互作用对于深刻理解生命过程的本质以及进行医药开发都具有重要意义。将微流控芯片和毛细管电泳相结合的微流控芯片电泳技术具有快速、高效、高通量、样品用量少和易于整合等诸多优势。本文对近年来进行生物分子间相互作用结合常数测定以及结合动力学研究的微流控芯片电泳分离模式、分析方法和芯片检测方法分别做了介绍;简单对比了微流控芯片技术和微阵列生物芯片生物分子间相互作用研究技术;最后分析了微流控芯片技术目前的不足,并对其未来的发展进行了展望。