甲基-β-环糊精载胆固醇对GV期猪卵母细胞冻融后体外成熟及其受精能力的影响

本实验旨在探究甲基-β-环糊精载胆固醇(CLC)对GV期猪卵母细胞冻融后体外成熟培养后成熟率、凋亡蛋白表达、透明带硬化时间及精-卵结合能力的影响。采用0(对照)、0.5、5、10 mg/mL CLC进行处理,共4组,采用Western blot方法分析GV期猪卵母细胞冻融体外成熟培养后凋亡蛋白的表达量。通过Hoechst染色方法检测不同组别的精卵结合能力。结果表明:5 mg/mL CLC处理组GV期冻融的猪卵母细胞体外成熟率高于对照组和0.5 mg/mL CLC处理组(P<0.05),但与10 mg/mL CLC处理组相比差异不显著;与对照组和0.5 mg/mL处理组相比,5 mg/mL CLC处理组显著降低了GV期冻融的猪卵母细胞体外成熟培养后Cleaved Caspase-3蛋白表达量(P<0.05),但与10 mg/mL CLC处理组差异不显著;与对照组和0.5、10 mg/mL CLC处理组相比,5 mg/mL CLC处理组减少了GV期冻融的猪卵母细胞体外成熟培养后透明带硬化时间(P<0.05);与对照组和0.5、10 mg/mL处理组相比,5 mg/mL CLC处理组提高了GV期冻融的猪卵母细胞体外成熟培养后精-卵结合能力(P<0.05)。综上表明,在玻璃化冷冻液中添加5 mg/mL CLC可显著减少GV期猪卵母细胞在冷冻保存过程中受到的低温损伤。

α-环糊精与α,β-亚乙基双十六烷基二甲基溴化铵的相互作用

为了研究不同类型的环湖精作为主体对包合不同客体的影响,采用表面张力法分别测定了25℃、35℃和45℃温度下的双子表面活性剂α,β-亚乙基双十六烷基二甲基溴化铵(C16-C2-C16)溶液的临界胶束浓度(0.428~0.470mmol/L),并计算了该体系形成胶束的热力学参数,研究了C16-C2-C16与α-环糊精(α-CD)的包结作用。结果表明,C16-C2-C16溶液形成胶束的过程是熵驱动的自发过程;包结物的包结比为2:1或4:1,即体系中存在着两种不同包结比的包合物;根据包结过程的热力学参数,该过程为放热的自发过程及熵增过程。

静电纺丝紫苏醛/甲基-β-环糊精包合物纳米纤维的制备与表征

为提高紫苏醛(PA)的热稳定性和水溶性,扩展其应用,以甲基-β-环糊精(MβCD)为主体分子,PA为客体分子,通过静电纺丝技术制备了PA/MβCD包合物(PA/MβCD-IC)纳米纤维(PA/MβCD-IC-NF)。采用SEM、1HNMR、XRD、TGA、FTIR和分子模拟对PA/MβCD-IC-NF进行了表征和分析,测试了其相溶解度,评价了其抗氧化活性和抑菌性能。结果表明,PA已被成功地包裹在MβCD空腔中,形成PA/MβCD包合物;PA/MβCD-IC-NF为非晶体结构,直径分布较均匀且表面光滑,平均直径为(134±60)nm。质量浓度为12 g/L的PA/MβCD-IC-NF(2 cm×2 cm)在1 s内可完全溶解。与PA相比,PA/MβCD-IC-NF中PA的热稳定性和水溶性都显著提高。PA/MβCD-IC-NF的抗氧化活性明显高于PA,对大肠杆菌与金黄色葡萄球菌的抑制率分别为96.2%±0.1%和94.0%±0.3%。

羧甲基纤维素/β-环糊精皮克林乳液荷载肉桂精油的稳定性及抗菌性分析

以羧甲基纤维素(CMC)和β-环糊精(β-CD)为乳化稳定剂,山茶油和肉桂精油为油相,采用高速剪切法制得皮克林乳液。通过微观结构观察和粒径测试研究CMC质量浓度对乳液稳定性的影响,并分析不同体积比肉桂精油与山茶油对乳液稳定性和抗菌性的影响。结果表明:较高CMC质量浓度(>35g/L),所制备的山茶油皮克林乳液具有较好的稳定性,其微米级液滴可均匀分布于水相中;肉桂精油与山茶油体积比为3:1、1:3和1:5的皮克林乳液具有较好的储存稳定性;荷载肉桂精油的皮克林乳液能够抑制大肠杆菌生长,当山茶油占比较高时,抑菌能力在前期衰退较慢。

α-甲基苯乙烯马来酸酐共聚物微球固载β-环糊精的制备及应用

以α-甲基苯乙烯和马来酸酐为共聚物单体,二乙烯基苯为交联剂,通过自稳定沉淀聚合制备交联α-甲基苯乙烯马来酸酐共聚物微球(PAMSM);用对甲苯磺酰氯对β-环糊精(β-CD)进行单磺酰化得到单-6-对甲苯磺酰基-β-环糊精(mono-6-OTs-β-CD),其与过量的1,2-丙二氨反应制备得到1,2-丙二胺基-β-环糊精(PDM-β-CD);通过PDM-β-CD的伯氨与PAMSM的酸酐开环酰胺化反应,将β-CD固载在PAMSM上制备微球β-CD-PDM-PAMSM。采用傅里叶红外光谱(FTIR)、扫描电子显微镜(SEM)、元素分析对β-CD-PDM-PAMSM的结构、表面形貌和组成进行表征。结果表明,β-CD-PDM-PAMSM具有良好的球形度,平均粒径在1.08μm;β-CD固载率高,通过元素分析计算得β-CD固载率为53.1%。将PAMSM、β-CD-PDM-PAMSM、水解PAMSM(H-PAMSM)和水解β-CDPDM-PAMSM(H-β-CD-PDM-PAMSM)作为吸附剂,研究其对亚甲基蓝溶液(MB)的吸附性能。研究表明,PAMSM对MB的吸附能力为25.3mg/g,β-CD-PDM-PAMSM对MB的吸附能力比PAMSM提高了615.8%,水解后的H-β-CD-PDM-PAMSM和H-PAMSM对MB的吸附能力较PAMSM分别提高了1043.5%和860.8%。

蕲艾油-β-环糊精包合物膜剂的制备及工艺优化

为了提高挥发油在制剂中的生物利用度,采用β-环糊精对挥发油进行包合,再以羧甲基纤维素钠作为成膜材料,考察蕲艾油-β-环糊精包合物膜的最佳工艺.用饱和水溶液法制备蕲艾油-β-环糊精包合物,以外观评价、膜性质、脱模性能和贴肤度作为表征评价指标,通过正交试验考察蕲艾油用量、β-环糊精用量、羧甲基纤维素钠浓度以及甘油用量对成膜工艺的影响.结果:蕲艾油-β-环糊精包合物膜最佳成膜工艺为:蕲艾油用量为1.5 mL、β-环糊精用量为10 g、羧甲基纤维素钠∶去离子水为1∶20(W/V,g·mL^(-1))、甘油用量为6 mL,用去离子水定容至100 mL.结论:优选得到的成膜工艺简单、稳定、可行,为该剂型的后续开发奠定基础.

HMG-CoA还原酶ScrFI基因多态性对高胆固醇血症和AI的影响:一个中老年人群的横断面研究

目的:探讨3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMG-CoA还原酶)的基因多态性对高胆固醇血症和动脉粥样硬化指数(AI)的影响。方法:检测南京市常住汉族174名中老年人血总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),计算AI;使用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测HMG-CoA还原酶ScrFI基因多态性。结果:高胆固醇血症患者87例(高胆固醇组),男21例,女性66,平均年龄(63.59±8.37)岁;胆固醇正常87例(正常组),男21例,女66例,平均年龄(62.92±7.60)岁。高胆固醇组AA基因型频率为25.10%,Aa基因型频率为55.31%,aa基因型频率为19.59%;正常组AA基因型频率为18.39%,Aa基因型频率为52.87%,aa基因型频率为28.74%;高胆固醇组的a等位基因频率为55.17%,高于正常组的47.13%,但差异无统计学意义(P>0.05),AA基因型人群的血HDL-C水平显著高于Aa和aa基因型人群(P<0.05);胆固醇正常组AA基因型人群的AI显著低于aa型基因人群(P<0.05);两组人群的AI随突变型杂合子和突变型纯合子的发生逐渐升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论:HMG-CoA还原酶ScrFI基因多态性可能是高胆固醇血症发生的遗传易感因素之一;HMG-CoA还原酶ScrFI基因突变可能会影响HMG-COA还原酶的活性,降低对胆固醇的抑制作用,增加总胆固醇和LDL-C的合成,较暴露于同样环境中的基因非突变型人群发生高胆固醇血症和动脉粥样硬化的风险可能会增高。

羟基磷灰石-β-环糊精复合微球的合成与性能

羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA)是一种应用较为广泛的载药材料,将HA与相关材料复合制成载药微球可较好缓解药物突释现象.本研究以十二烷基磺酸钠(sodium dodecyl sulfonate,SDS)和脯氨酸(proline,Pro)作为模板剂,通过水热沉淀法合成碳酸钙微球,再通过水热法以离子交换方式将具有空腔结构的HA与β-环糊精(β-cyclodextrin,β-CD)进行复合,探究合成条件变化对微球的形貌影响,成功制备出形貌良好、分散性好、性能优良的HA-β-CD复合微球,使用X射线衍射、扫描电子显微镜和紫外可见分光度计等测试方法对所制备样品进行分析和表征,再以姜黄素作为负载药物进行载药性能测试,对载药量和包封率两个主要指标进行对比分析,同时对HA-β-CD微球在体外药物释放实验中的表现进行分析探究.结果表明,当β-CD质量分数在20%~30%、水热反应时间为6 h时,所制得的HA-β-CD复合微球的形貌良好,分散性好,复合微球的粒径主要分布在6.4~13.9μm,粒径大小均匀且具有空腔结构.载药性能测试结果表明,β-环糊精的掺入可以有效提升复合微球的药物包封效率和载药量,当β-环糊精质量分数为30%时,复合微球的载药量达到5.03%±0.37%,包封率达到37.67%±1.37%.药物体外释放性能测试结果显示,合成的HA-β-CD复合微球能明显缓解传统HA载药微球的突释现象,延长药物作用时间,具备良好的缓释性能.同时,对载药微球的形成机理及细胞毒性进行分析探讨,结果表明,HA-β-CD载药复合微球通过HA、β-CD及药物三者包合形成,可实现药物延迟释放,明显改善载药微球的缓释性能,且测试结果证明,HA-β-CD复合微球对细胞增殖几乎没有毒性.制备的HA-β-CD复合微球改善了纯HA载药微球易突释、载药量低和作用时间短等问题,具备良好的医用价值和应用潜力.

依折麦布与羧甲基-β-环糊精包合物的制备表征及增溶研究

依折麦布(ezetimibe,EZT)是一种选择性肠道胆固醇抑制剂,然而水溶性差限制了其应用.包合物的制备可以有效提高药物的水溶性,通过饱和水溶液法制备了EZT的羧甲基-β-环糊精包合物,并通过冷冻干燥法得到最终的粉末状包合物.核磁共振、扫描电子显微镜、傅里叶红外光谱和X-射线粉末衍射等结果证实了包合物的成功制备,相溶解度法表明羧甲基-β-环糊精与EZT结合比为1∶1,二者的结合常数为187 M-1,增溶倍数为412倍.溶出实验结果表明包合物的制备明显提高了药物的体外溶出度.

胆固醇-β-环糊精包合物释放胆固醇最佳工艺条件的研究

通过单因素实验研究了胆固醇-β-环糊精包合物释放胆固醇的最佳工艺条件,并通过重复的实验得以验证。结果表明,在pH为9.5,时间为1h,乙醇浓度为99.7%时,包合物的胆固醇释放率达到98.23%。

接枝β-环糊精米糠纤维脱除猪油中的胆固醇

采用接枝β-环糊精米糠纤维脱除猪油中的胆固醇,根据单因素试验结果,初步得到了脱除猪油中胆固醇的最佳工艺条件为:反应时间120min,加水量40%(猪油质量),反应温度50℃,接枝β-环糊精米糠纤维的添加量8%。在该条件下,猪油中胆固醇的含量可从539.8mg/kg降低到72.1mg/kg,脱除率达到86.6%。比较了接枝β-环糊精米糠纤维、普通米糠纤维、β-环糊精对猪油中胆固醇的脱除效果。发现在一定反应条件下,接枝β-环糊精米糠纤维的脱除效果最佳。回收后的接枝β-环糊精米糠纤维在重复使用5次后,对胆固醇的脱除率仅降低了13.4%。

不同卵黄成分、大豆卵磷脂及β-环糊精胆固醇对马精子冷冻效果的影响

本研究旨在比较添加不同浓度的卵黄成分(全卵黄(EY)、卵黄浆蛋白(EYP)、低密度脂蛋白(LDL)及水溶性卵黄蛋白(livetin))、大豆卵磷脂(SL)及β-环糊精胆固醇(CLC)对马精子冷冻效果的影响。选择4匹成年英纯血种公马进行采精,试验1:以INRA82+3.5%的混合抗冻剂作为基础冷冻液,添加0、2%、4%和8%浓度的EY、LDL、EYP或水溶性卵黄蛋白;试验2:以4%全卵黄组为对照,添加1%、2%和4%SL;试验3:在INRA82+3.5%的混合抗冻剂+4%EY基础液中添加0、0.75、1.5和3mg/mL浓度的CLC。结果显示,EYP、LDL及水溶性卵黄蛋白3种卵黄组分均对马精子冷冻具有显著保护作用(P<0.05),但不同卵黄组分之间及与EY组相比保护效果无显著差异(P>0.05);添加低浓度(1%)的SL精子冻融后活力与对照组(4%EY组)相比无显著差异(P>0.05),但添加高浓度SL组(2%和4%)冻融后精子TM、PM及RAP值均显著低于对照组(P<0.05);添加不同浓度的CLC解冻后精子活力与未添加组无显著差异(P>0.05)。研究结果表明,卵黄中EYP、LDL和水溶性卵黄蛋白均对精子保护有效,保护效果与EY无显著差异;1%SL可获得与卵黄相似的保护效果;在含有卵黄的基础冷冻液中添加CLC未能提高精子冻后活力。

β-环糊精脱除蛋黄中胆固醇的研究

研究了β-环状糊精(β-CD)包合法脱除鸡蛋蛋黄中胆固醇,应用DX7Trial对试验数据进行分析并建立了数学模型,得出了胆固醇脱除的最佳工艺为:pH10.5,加热温度50.18℃,搅拌时间10.94min,n(β-CD):n (蛋黄液中胆固醇)=4.11:1,在此条件下,胆固醇脱除率为92.23%,产品中胆固醇含量为0.7536mg/g。

响应面法优化β-环糊精脱除鸭蛋黄油脂胆固醇工艺条件

为了获得β-环糊精脱除鸭蛋黄油脂胆固醇的最佳工艺条件,选用五因素五水平的中心组合设计,以水油比(W:O)、β-环糊精与油之比(β-CD:O)、时间、温度、搅拌速度为影响因素,以胆固醇脱除率、蛋黄油脂回收率为响应值,建立了回归模型。结果表明:温度、W:O与时间、时间与搅拌速度的交互效应对两响应值都有显著影响(P<0.01);W:O与β-CD:O、W:O与温度、时间与温度的交互效应虽对胆固醇脱除率影响不显著(P>0.05),但对油脂回收率有显著影响(P<0.01)。利用渴求函数的响应曲面图、等高线图优化两响应,确定了最佳工艺条件:W:O=1.45(V/m),β-CD:O=0.30(m/m),时间21.83 min,温度10℃,搅拌速度975.83 r/min。在此条件下,预测的渴求值为0.752,胆固醇脱除率为72.48%,油脂回收率为68.05%,并验证了回归模型的有效性。

β-环糊精脱除猪油中胆固醇的研究

本实验利用三因素二次正交旋转设计,研究了搅拌温度、搅拌时间和β-环糊精添加量对β-环糊精包埋法脱除猪油胆固醇效果的影响,建立了各因素与胆固醇脱除率的回归方程,筛选出了较理想的胆固醇脱除条件,即:搅拌时间90min、搅拌温度45℃和β-环糊精添加量8.5%。在这三个因素中,β-环糊精添加量为主要影响因素,而搅拌时间的影响较小。

基于避蚊胺/β-环糊精/O-羧甲基壳聚糖亲水性纳米胶囊载药及缓释性能研究

为了改善避蚊胺(diethyltoluamide,以下简称DEET)在水中的溶解度,首先采用饱和溶液法制备了避蚊胺/β-环糊精(diethyltoluamide/β-cyclodextrin,以下简称DEET/β-CD)包合物,其结构通过差示扫描量热仪(DSC)和X-射线衍射仪(XRD)表征;再采用离子交联法,以氯化钙为交联剂,制备了避蚊胺/β-环糊精/O-羧甲基壳聚糖(diethyltoluamide/β-cyclodextrin/Ocarboxymethyl chitosan,以下简称DEET/β-CD/O-CMC)亲水性纳米胶囊,用紫外-可见分光光度计(UV)、激光粒度分析仪和扫描电子显微镜(SEM)考察其理化性质;最后,考察包合物和纳米胶囊的缓释性能。结果表明:DEET与β-CD以物质的量之比1:1进行了包合,β-CD的加入使DEET的溶解度增加约27倍,该纳米胶囊的包封率为(79.93±2.08)%,载药量为(12.11±0.09)%,纳米胶囊呈椭圆形,平均粒径为(230.50±11.34)nm,Zeta电位为(–19.08±0.99)m V,PDI为0.055。在Tris-HCl(p H=7.4)缓冲液中释放试验显示,DEET/β-CD/O-CMC亲水性纳米胶囊比DEET/β-CD包合物有更好的缓释性能,24 h累积释放率分别为27.04%和38.10%。

电导率法研究β-环糊精与烷基三甲基溴化铵的包结作用

在298.2 K下,用电导率法测定了β-环糊精(β-CD)分别与十二烷基三甲基溴化铵(C_(12)TABr)、十六烷基三甲基溴化铵(C_(16)TABr)在水溶液中的相互作用。结果表明,包结反应平衡所需时间在常温下2 min内即可完成;β-CD与两种表面活性剂均能形成结合比为2∶1的包结物,进而用非线性拟合法计算出包结物的结合常数分别为1.8×10^(6)L2·mol^(-2)和5.1×10^(6)L2·mol^(-2);对应的吉布斯自由能分别为-36 kJ·mol^(-1)和-38 kJ·mol^(-1)。另外,通过测量不同温度下β-CD与C_(12)TABr包结物的结合常数和热力学参数发现整个包结过程是熵焓共同驱动的过程,温度越高,越有利于β-CD与C_(12)TABr形成包结物。

甲基-β-环糊精通过限制脂质代谢抑制横纹肌肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭

目的探讨抑制脂质合成对人骨骼横纹肌肉瘤细胞的影响及其分子机制。方法采用肿瘤基因表达数据库检查人骨骼肌细胞(HSMC)和人骨骼横纹肌肉瘤细胞脂质合成相关基因固醇调节元件结合蛋白1(SREBP1)和角鲨烯环氧化酶(SQLE)mRNA表达水平并通过qRT-PCR验证。通过细胞增殖实验选出脂质抑制剂甲基-β-环糊精(mβCD)的细胞处理浓度。分别将3株人骨骼横纹肌肉瘤细胞(RD、SJCRH30和A673)作为对照组,1 mmol/L mβCD处理的三株人骨骼横纹肌肉瘤细胞分别作为实验组。平板克隆实验、软琼脂集落形成实验、细胞迁移及侵袭实验和裸鼠成瘤实验检测对照组和mβCD处理组人骨骼横纹肌肉瘤细胞增殖、迁移、侵袭和肿瘤生长的变化。通过脂质组学及三酰甘油(TG)分析探究mβCD抑制人骨骼横纹肌肉瘤细胞恶性的分子机制。结果相对于HSMC,人骨骼横纹肌肉瘤细胞脂质合成相关基因SREBP1、SQLE表达增高(P<0.001);与对照组相比,mβCD组人骨骼横纹肌肉瘤细胞的增殖、平板克隆、迁移侵袭和集落形成能力减弱(P<0.05);裸鼠肿瘤体积和肿瘤质量增加也减少(P<0.05);脂质组学和TG试剂盒检测结果发现,与对照组相比,mβCD组TG含量降低(P<0.01)。结论mβCD可能通过降低TG等脂质代谢过程从而抑制人骨骼横纹肌肉瘤细胞的增殖、迁移和侵袭等恶性生物学行为。

β-环糊精脱除海洋鱼油中的胆固醇的工艺优化

研究了β-环糊精在不同条件下对海洋鱼油中胆固醇脱除率和油脂回收率的影响。结果表明,将油重质量分数6%的β-环糊精与油重70%的介质水混合,添加至海洋鱼油中,经40℃混合反应90 min后,4 000 r/min离心10 min,胆固醇的脱除率为56.64%,油脂回收率为70.12%。达到卫生部对胆固醇营养标签中低胆固醇(≤20 mg/100 g固体;≤10 mg/100 mL液体)的要求的最优条件为:β-CD添加量6%,加水量70%,反应时间为90 min,温度为40℃,回收β-CD,循环2次,胆固醇脱除率可达90.95%,最终产品的胆固醇含量低于10 mg/100 mL。

胆固醇-β-环糊精包合物释放胆固醇最佳工艺条件的研究

本文通过单因素实验研究了胆固醇-β-环糊精包合物释放胆固醇的最佳工艺条件,并通过重复的实验得以验证。结果表明,在pH值为9.5,时间为1h,乙醇浓度为99.7%时,包合物的胆固醇释放率达到99.7%。