畜禽组织中甲氧苄啶和氟苯尼考的同时免疫层析检测方法研究

针对动物源性食品中甲氧苄啶(TMP)和氟苯尼考(FF)复配使用残留的问题,以乳胶微球作为示踪信号探针,建立了同时检测鸡肉和猪肉样品中甲氧苄啶和氟苯尼考的乳胶微球侧流免疫层析方法(LMs-LFIA)。基于特异性单克隆抗体7E6和SF15,通过逐步优化策略考察了探针制备条件、试纸条工作缓冲液以及样品垫处理液缓冲体系等对LMs-LFIA性能的影响。结果表明:在优化条件下,所建立的LMs-LFIA对鸡肉和猪肉样品中甲氧苄啶和氟苯尼考的可视化检出限分别为8 ng/g和12 ng/g,检测时间为8 min,且与甲氧苄啶和氟苯尼考的结构及功能类似物无明显交叉反应,方法特异性良好。所建方法对鸡、猪肉盲样的检测结果与超高效液相色谱-串联质谱(UPLC-MS/MS)仪器确证方法一致,适用于畜禽组织样本中甲氧苄啶和氟苯尼考残留的同时检测。

铜绿假单胞菌 prtN 突变引起甲氧苄啶耐药

耐药铜绿假单胞菌(PAO1)在临床感染过程中造成非常棘手的问题,研究其耐药机制有助于临床的治疗。研究结果表明,相对于野生型,ΔprtN表现出明显的甲氧苄啶(Tmp)抗性。为了了解其抗性出现的机理,测定了Tmp作用靶点folA的表达情况。相比于PAO1,folA在ΔprtN中的表达并未升高,反而有所下降。进一步研究发现,PrtN调控的S型绿脓杆菌素基因和prtN的双突变体对Tmp的抗性稍有降低,而脂多糖缺陷菌株ΔwbpL对Tmp的抗性略有升高。在ΔprtN中活性氧(ROS)相关基因(oxyR,katA,ahpC)的表达水平、生物被膜及外排泵相关抗生素抗性检测结果都显示与野生型无显著性差异。综上,prtN基因突变引起的Tmp抗性可能是通过PrtN调控S型绿脓杆菌素及脂多糖相关靶标作用的结果。

碳包覆中空磁性微球活化过硫酸盐降解水中甲氧苄啶

采用溶剂热合成法制备碳包覆铁酸锰中空磁性微球(CHM-MnFe_(2)O_(4)),通过SEM、TEM、XRD、VSM、FTIR、BET/BJH、XPS方法对其表观形貌进行分析,并将其应用于活化过硫酸盐(PMS)降解水中的甲氧苄啶(TMP),以高效液相色谱法对TMP的降解效率进行评估.经条件优化得出,在pH=7.0、PMS浓度为1.0 mmol·L^(−1)的条件下,投加0.10 g·L^(−1)的CHM-MnFe_(2)O_(4)纳米材料可在60 min内完全降解10.0 mg·L^(−1)的TMP.考察了无机阴离子和腐殖酸对TMP降解过程的影响:Cl−对TMP的降解具有双重作用,低浓度抑制高浓度促进;HCO_(3)−、HPO_(4)^(2−)和腐殖酸(HA)均具有一定抑制作用.通过自由基猝灭实验发现降解体系受到自由基·OH、SO_(4)^(−)·和非自由基1O_(2)的影响.循环实验和金属溶出实验证明CHM-MnFe_(2)O_(4)纳米材料具有良好的循环利用性能.

甲氧苄啶纳米抗体噬菌体展示文库的构建及初步筛选

【目的】构建甲氧苄啶(trimethoprim,TMP)纳米抗体(nanobody,Nb)噬菌体展示文库,制备TMP高亲和力纳米抗体,为TMP免疫分析方法的建立提供新型抗体材料。【方法】通过活性酯酶法将TMP半抗原Hapten B与牛血清白蛋白(BSA)、钥孔血蓝蛋白(KLH)偶联制备2种免疫原,Hapten A和Hapten B与卵清白蛋白(OVA)偶联制备2种包被原。采用磺胺增效剂类药物单克隆抗体5C4,通过间接ELISA方法验证免疫原和包被原偶联效果。将免疫原与弗氏佐剂混合,先后对羊驼进行基础免疫和加强免疫,监测每次免疫后羊驼抗血清效价及对TMP的亲和力,选取效价及TMP亲和力最高的外周血作为纳米抗体基因来源,构建噬菌体展示文库。分离羊驼外周血总淋巴细胞,扩增重链抗体可变区纳米抗体基因(VHH),插入噬菌粒,电击转化大肠杆菌XL1-Blue感受态细胞构建初始噬菌体纳米抗体展示文库。经辅助噬菌体救援,采用同源包被原浓度梯度递减包被、酸洗脱、TMP浓度梯度递减洗脱筛选策略筛选TMP高亲和力噬菌体并测序,原核表达纳米抗体,通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定纳米抗体融合蛋白。【结果】间接ELISA检测结果显示,2种免疫原与2种包被原在稀释18000倍时D 450 nm值仍高于1.25。免疫原Hapten B-BSA 5次免疫后羊驼抗血清效价为1∶88000,对TMP的半数抑制浓度(IC 50)为12.21μg/L,但Hapten B-KLH 4次免疫后羊驼抗血清效价为1∶11000,对TMP的IC 50为30.56μg/L。以Hapten B-BSA五免后羊驼外周血为纳米抗体基因来源构建噬菌体展示文库,初始库容量为6.08×10^(7) CFU/mL,目的片段插入率为96%,噬菌体展示文库多样性良好。经4轮筛选后,获得3株TMP高亲和力噬菌体,测序分析后获得1株TMP高亲和力纳米抗体及序列。SDS-PAGE和Western blotting鉴定融合蛋白大小约为17 ku,蛋白含量80%以上。【结论】本研究成功构建TMP纳米抗体噬菌体展示文库,获得1株TMP高亲和力纳米抗体。研究结果为磺胺增效剂类药物纳米抗体的制备提供了理论依据和技术支持,为兽药等小分子新型识别材料的制备提供了新的思路。

UPLC-MS/MS快速检测蛋及再制蛋中13种磺胺及甲氧苄啶

建立UPLC-MS/MS法快速检测鲜蛋及再制蛋中13种磺胺类药物和甲氧苄啶残留的方法。样品经乙腈提取后,无水硫酸钠净化,氮气吹干复溶,正己烷除脂后得供试品。13种磺胺类药物和甲氧苄啶在0.5~50 ng/mL范围内相关系数r均高于0.9960,线性关系良好。方法检出限为0.2μg/kg,在添加水平2、5、10μg/kg时,回收率在76.6%~112.7%之间,相对标准偏差(n=6)均在7%以内。使用该方法检测100批鲜蛋和25批再制蛋,其中7批鲜蛋检出磺胺间甲氧嘧啶、甲氧苄啶、磺胺甲唑、磺胺喹啉,2批再制蛋检出磺胺间甲氧嘧啶和甲氧苄啶,含量范围为2.0~688.8μg/kg。该方法简便快速、准确可靠、灵敏度高、抗干扰力强,适用于鲜蛋和再制蛋中磺胺类药物和甲氧苄啶的快速检测。

高效液相色谱法测定复方磺胺嘧啶粉(水产用)中磺胺嘧啶和甲氧苄啶含量

建立同时测定复方磺胺嘧啶粉(水产用)中磺胺嘧啶和甲氧苄啶含量的HPLC方法。采用C18色谱柱进行分离,以水-乙腈-三乙胺(799∶200∶1)(pH 5.9)为流动相,检测波长为240 nm,进样量为10μL。结果显示,磺胺嘧啶和甲氧苄啶分别在25~400μg/mL和5~80μg/mL浓度范围内线性关系良好(R^(2)=1),回收率在97.83%~101.95%范围内,RSD在0.3%~1.2%范围内,精密度、稳定性和耐用性RSD均小于2.0%。结果表明,该方法快速、准确、环保,可用于测定该制剂中2种主药的含量,并能有效提升该制剂的质量标准和控制水平。

高效液相色谱法同时测定复方磺胺二甲嘧啶钠可溶性粉中磺胺二甲嘧啶钠和甲氧苄啶的含量

建立高效液相色谱法同时测定复方磺胺二甲嘧啶钠可溶性粉中磺胺二甲嘧啶钠和甲氧苄啶的方法。采用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以水-乙腈-三乙胺(799∶200∶1)(用冰醋酸调节pH值至5.9)为流动相,流速1.0 mL/min,柱温30℃,检测波长为240 nm。结果显示,磺胺二甲嘧啶钠和甲氧苄啶2种成分线性关系良好(r>0.999),平均加样回收率分别为99.81%和9925%,精密度、稳定性和耐用性试验的变异系数均小于2.0%,符合方法学要求。该方法简便、稳定、准确,可用于复方磺胺二甲嘧啶钠可溶性粉的质量控制。

甲氧苄啶增溶技术研究

本文首先测定了甲氧苄啶在水中的溶解度,然后采用表面活性剂增溶、β环糊精包合、固体分散体等药剂学常用增溶技术对甲氧苄啶开展了溶解度提升研究。实验结果显示,甲氧苄啶在水中的溶解性为0.31 mg/mL,使用表面活性剂增溶、β环糊精包合、固体分散体三种增溶技术后,甲氧苄啶在水中的最高溶解度分别为0.37 mg/mL、7.06μg/mL和3.3 mg/mL。通过三种药物制剂技术的对比说明,固体分散体制备的最优方法为溶剂法,最优载体为聚维酮K30,最优冷冻时间为2小时,制得甲氧苄啶固体分散体溶液甲氧苄啶的浓度可以达到3.3 mg/mL,与自身溶解度0.31 mg/mL相比,浓度达到甲氧苄啶普通水溶液的10.64倍,有效提高了甲氧苄啶在水中的溶解性。

加拿大更新磺胺甲噁唑甲氧苄啶复方制剂产品专论警告噬血细胞性淋巴组织细胞增生症的风险

近日,加拿大卫生部网站发布信息,称已经更新或即将更新磺胺甲噁唑甲氧苄啶复方制剂的注射剂和口服制剂产品专论,对专论中的警告和注意事项、不良反应、患者用药信息部分进行修订,以包括噬血细胞性淋巴组织细胞增生症(HLH)的风险。HLT是一种罕见但具有侵袭性且危及生命的疾病,表现为大量白细胞在体内积聚并损伤器官和破坏其他血细胞。

HPLC法检测化妆品中磺胺嘧啶和甲氧苄啶的研究

方法色谱条件是以phenomenex Gemini C18柱(5μm,4.6 mm×250 mm)分离,以乙腈-0.3%醋酸铵溶液(15∶85,V/V)为流动相,流速为1.0 mL·min^(-1),二极管阵列检测器检测波长为240 nm。方法标准曲线相关系数均在0.999以上,线性关系良好。方法回收率在91%~104%之间。阳性样品的精密度及稳定性结果的相对标准偏差均在4%以内,稳定性较好。方法操作简单,具有较高的灵敏度、准确度,可用于同时定性与定量测定化妆品中两种抗生素磺胺嘧啶与甲氧苄啶。

甲氧苄啶药物在肿瘤治疗中的应用及机制研究进展

探究甲氧苄啶药物在肿瘤治疗中的应用及机制。方法 选取2021年1月-2022年1月之间在本院治疗的50例肿瘤患者,其中对照组25例,观察组25例,对照组采用常规疗法进行治疗,观察组采用甲氧苄啶进行治疗,对比两组患者两组治疗前后t淋巴细胞亚群、NK细胞抗肿瘤活性测定结果以及不良反应发生情况。结果 观察组t淋巴细胞亚群、NK细胞抗肿瘤活性以及不良反应发生情况显著高于对照组,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 甲氧苄啶药物在肿瘤治疗中的应用效果较好,值得大力推广。

HPLC法同时测定复方磺胺间甲氧嘧啶注射液中磺胺间甲氧嘧啶钠和甲氧苄啶含量

利用高效液相色谱法(HPLC)同时测定复方磺胺间甲氧嘧啶钠注射液中磺胺间甲氧嘧啶钠和甲氧苄啶的含量。采用C18柱(5μm,4.6 mm×250.0 mm),以乙腈∶0.1%磷酸溶液(20∶80,V/V)为流动相,检测波长230 nm,柱温30℃,流速1.0 mL/min。结果表明,磺胺间甲氧嘧啶在5.00~200.00μg/mL浓度范围内与峰面积线性关系良好(R2=0.9996),平均回收率为99.49%,RSD为0.18%;甲氧苄啶在1.00~50.00μg/mL浓度范围内与峰面积线性关系良好(R2=0.9997),平均回收率为99.02%,RSD为0.60%。本方法简单快捷,精密度好,可用于控制复方磺胺间甲氧嘧啶钠注射液中磺胺间甲氧嘧啶钠和甲氧苄啶的含量。

玉米芯对磺胺甲恶唑和甲氧苄啶的吸附效果及机制

为探究农业废物是否能吸附去除抗生素以及不同抗生素之间是否存在相互作用,通过对玉米芯的理化特征分析、傅里叶红外光谱分析、吸附动力学和吸附等温线分析,研究了玉米芯对磺胺甲恶唑(SMX)和甲氧苄啶(TMP)的吸附效果及机制。结果表明:在只含有单一抗生素(初始浓度为10 mg/L)、温度为25℃、玉米芯浓度为25 g/L的体系中,玉米芯对SMX和TMP吸附量分别为131.18和358.75 mg/kg;在同时含有SMX和TMP的体系中(初始浓度均为10 mg/L),玉米芯对其的吸附量分别为131.02和358.74 mg/kg,SMX和TMP之间为非交互吸附过程。在2种体系中,SMX和TMP的吸附均较好地符合准二级反应动力学方程,Langmuir和Freundlich等温线较好地拟合了SMX的吸附过程,而Freundlich等温线对TMP的拟合效果较好。SMX吸附主要为静电作用、π-π堆积作用,且以静电作用为主;TMP吸附主要通过疏水分配、π-π堆积作用和氢键作用。

中空磁性微球活化过一硫酸盐降解水中甲氧苄啶的研究

采用溶剂热法制备了铁酸锰(MnFe_(2)O_(4))中空磁性微球(HM-MnFe_(2)O_(4)),利用SEM、TEM、XRD、VSM、XPS、BET/BJH方法对材料进行表观和形貌分析,并将其应用于活化过一硫酸盐(PMS)降解水中的甲氧苄啶(Trimethoprim,TMP),通过高效液相色谱法对降解效率进行评估。结果表明,在pH为9.0、PMS浓度为3.0 mmol/L的条件下,投加0.20 g/L的HM-MnFe_(2)O_(4)纳米材料可在120 min内完全降解10.0 mg/L的TMP。同时,考察了阴阳离子对TMP降解过程的影响,Cl^(-)对TMP的降解有促进作用,HCO^(-)_(3)、Cu^(2+)和腐殖酸(HA)均具有一定的抑制作用。通过自由基猝灭实验发现降解体系受到·OH、O^(-)_(2)·的自由基和^(1)O_(2)的非自由基影响。循环实验证明HM-MnFe_(2)O_(4)纳米材料具有良好的循环利用性能。

UV和UV/过氧化物降解甲氧苄啶和恩诺沙星动力学

针对地表水中磺胺类抗生素和喹诺酮类抗菌药物被频繁检出这一问题,以磺胺类抗生素甲氧苄啶(TMP)和喹诺酮类抗菌药物恩诺沙星(EFX)为目标物,对比分析了单独紫外(UV)、紫外/过氧单硫酸盐(UV/PMS)、紫外/过氧二硫酸盐(UV/PDS)和紫外/过氧化氢(UV/H_(2)O_(2))在不同水体背景条件下的除污染效率与降解动力学,进一步计算不同pH条件下TMP和EFX的光分解量子产率。结果表明:TMP和EFX紫外光分解的假一级速率常数k_(0)随pH增加而增加,且EFX光分解的k_(0)显著大于TMP。在pH 3.0、7.0和11.0条件下,计算得到TMP和EFX的量子产率ϕ(λ=254 nm)分别为0.0010、0.0013、0.0036和0.0053、0.0511、0.0645。过氧化物的加入增加了TMP和EFX的降解速率,且对自身光分解慢的TMP影响更为显著。超纯水背景条件下,在pH 3.0和7.0时,UV/PDS对TMP和EFX降解的k_(0)最大,而在pH 11.0时,UV/PMS体系的k_(0)最大。自来水背景条件下,UV/PMS和UV/PDS对TMP的降解速率相近,大于UV/H_(2)O_(2);对于EFX的降解,UV/PDS效果最好。地表水背景条件下,3种氧化体系对TMP降解效率相差不大,UV/H_(2)O_(2)去除最佳;而对EFX的降解,UV/PDS的降解速率最快。

气相色谱法测定甲氧苄啶原料药中的6种残留溶剂

目的建立甲氧苄啶原料药中6种有机溶剂残留的检测方法。方法采用Agilent DB-WAX(30 m×0.32 mm,0.5μm)毛细管色谱柱和氢离子火焰化检测器(FID)检测器测定硫酸二甲酯、丙烯腈、N,N-二甲基甲酰胺和二甲亚砜;采用Agilen HP-5毛细管色谱柱和FID检测器检测二甲胺;采用Agilent DB-1毛细管色谱柱和氮磷检测器(NPD)检测苯胺。结果6种溶剂在各自浓度范围内线性良好(r=0.9995~0.9999,n=6);最低检出限范围为52~210 ng/ml,定量限范围为156~440 ng/ml,定量限精密度良好;高中低3种浓度加样回收试验平均回收率范围为98.12%~101.33%,RSD为0.79%~2.63%。结论此法合理、准确可行,灵敏度高,专属性强,适用于甲氧苄啶合成过程中有机溶剂残留的检查控制。

甲氧苄啶与环糊精的研究分析

甲氧苄啶是广谱、高效、低毒的抗菌药和杀菌剂,优良的甲氧苄啶可以治疗畜禽细菌感染等疾病,但较强的疏水性使甲氧苄啶溶出速率低、生物利用率小,限制临床应用范围。而环糊精是一种新型药用辅料,可以做载体。大量研究证实,采取饱和水溶液法、搅拌法等制备方法进行包合时,在水溶液中,环糊精亲脂腔体中的水分子形成氢键的倾向得不到充分满足。因此,整个分子或药物脂质体部分可以取代环糊精体中水分子,从而降低系统能量形成包合物,能显著增加药物的溶解度或溶出速率、提高药物生物利用度和疗效,具有广阔的发展前景。

加拿大警示磺胺甲唑和甲氧苄啶复方制剂的噬血细胞性淋巴组织细胞增生症的潜在风险

2023年6月27日,加拿大卫生部网站发布信息,警示含磺胺甲唑和甲氧苄啶的复方制剂的噬血细胞性淋巴组织细胞增生症(HLH)的潜在安全性问题。HLH是一种罕见但具有侵袭性且危及生命的疾病,大量白细胞在体内积聚并损伤器官和破坏其他血细胞。磺胺甲唑和甲氧苄啶复方制剂1973年在加拿大获批上市,是一种需处方的抗生素,用于治疗各种细菌感染,如尿路感染、呼吸道感染和胃肠道感染。加拿大卫生部审查了磺胺甲唑和甲氧苄啶复方制剂的HLH潜在风险。此次安全性审查是由欧洲药品管理局对含磺胺甲唑和甲氧苄啶的复方制剂的说明书进行更新引发的。

甲氧苄啶处理研究进展

甲氧苄啶在临床医疗和兽医畜牧业都得到广泛的应用,而在农业中则是作为一种有效的除草剂。随着其使用的普及,环境中农药的污染残留问题受到了环境科学家的广泛关注,特别是其对水源的污染可能给饮用水带来潜在风险。研究表明,由于其难以生物降解,甲氧苄啶很容易在生态系统中积累,对水生生物产生不利影响,有时甚至导致慢性毒性。鉴于这些负面影响,文章对甲氧苄啶的环境分布与影响、处理技术进行深入研究,旨在找到减少其对环境危害的方法,以供参考。

不同萃取法测定鸡蛋中甲氧苄啶残留量的方法比对

本研究在样品经乙腈提取后分别采用阳离子交换固相萃取柱萃取、乙腈饱和正己烷液液萃取和QuEChERS萃取3种不同的萃取净化方法对鸡蛋进行前处理,采用超高效液相色谱-串联质谱(Ultra Performance Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry,UPLC-MS/MS)对鸡蛋中甲氧苄啶残留量进行测定。研究表明3种不同萃取净化方法在0.5~50.0μg·L^(-1)甲氧苄啶均具有良好的线性关系,相关系数(R^(2))大于0.999,检出限为0.5μg·kg^(-1),定量限为1.0μg·kg^(-1),方法回收率均在60.3%~99.7%,相对标准偏差小于15%。3种前处理方法均适用于鸡蛋中甲氧苄啶的测定。