甲状腺激素受体结合蛋白3基因在儿童急性淋巴细胞白血病中的表达及意义

目的研究甲状腺激素受体结合蛋白3(TRIP3)基因在急性淋巴细胞白血病(ALL)患儿中的表达,探讨其与儿童ALL缓解的关系。方法采集空腹静脉血2～4mL,依地酸(EDTA)抗疑,采用Ficoll密度梯度离心法收集单个核细胞,Trizol试剂一步法提取总RNA。采用反转录-聚合酶链反应法(RT-PCR)检测73例不同阶段ALL及20例健康儿童外周血单个核细胞TRIP3基因表达水平,并分析其与儿童ALL缓解的关系。结果1.TRIP3基因在ALL初治及复发组的表达水平均明显低于健康对照组(Pa<0.01);在完全缓解的ALL患儿中的表达水平明显高于健康对照组(P<0.01);2.TRIP3基因在初治组与复发组ALL中的表达水平无明显差异(P>0.05);在缓解组表达水平明显高于复发及初治组(Pa<0.01);3.在初治的ALL患儿中,TRIP3基因表达阴性者其治疗后完全缓解率明显低于TRIP3基因表达阳性者(缓解率分别为25.0%vs84.2%,P<0.05)。结论TRIP3基因与儿童ALL的缓解有一定关系,其表达水平可作为评价ALL患儿化疗效果及评估预后的指标之一。

血清β-人绒毛膜促性腺激素、视黄醇结合蛋白4在子宫内膜增生患者中的水平变化及检测意义

目的:探讨血清β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)、视黄醇结合蛋白4(RBP4)在子宫内膜增生患者中的水平变化及检测意义。方法:选取105例子宫内膜增生患者为研究组,65例体检健康者为对照组。比较研究组和对照组血清β-HCG、RBP4水平。比较不同病理类型以及内膜增生程度患者血清β-HCG、RBP4水平。测量患者子宫内膜厚度,采用Pearson法分析血清β-HCG、RBP4水平与患者子宫内膜厚度的相关性。绘制受试者特征工作(ROC)曲线分析血清β-HCG、RBP4对非典型子宫内膜增生的预测价值。结果:研究组血清β-HCG、RBP4水平高于对照组(均P<0.05)。非典型子宫内膜增生患者血清β-HCG、RBP4水平高于单纯及复杂性子宫内膜增生患者(均P<0.05)。内膜增生过长患者血清β-HCG、RBP4水平高于增生及分泌期患者(均P<0.05)。血清β-HCG、RBP4水平与患者子宫内膜厚度呈正相关(均P<0.05)。血清β-HCG、RBP4单独及联合预测非典型子宫内膜增生的AUC分别为0.758、0.660、0.926,且两者联合预测的AUC高于各指标单独预测AUC(均P<0.05)。结论:子宫内膜增生患者血清RBP4、β-HCG水平升高,两者与病理类型、内膜增生程度以及子宫内膜厚度有关,联合检测对非典型子宫内膜增生的预测价值较高。

基于决策曲线和剂量反应分析视黄醇结合蛋白4对子宫内膜增生症患者孕激素治疗效果的预测价值

目的基于决策曲线和剂量反应分析视黄醇结合蛋白4(RBP4)对子宫内膜增生症患者孕激素治疗效果的预测价值。方法回顾性选取2020年3月至2023年2月西北妇女儿童医院诊治的133例子宫内膜增生患者作为研究对象,根据患者治疗结果分为有效组(n=114)和无效组(n=19)。比较患者孕酮、雌二醇、黄体生成素、卵泡刺激素及RBP4水平;采用Logistic回归分析孕激素治疗效果的影响因素;采用决策曲线及剂量反应分析RBP4对子宫内膜增生症患者孕激素治疗效果的预测价值。结果与无效组比较,有效组孕酮、卵泡刺激素、雌二醇、黄体生成素、RBP4水平均显著降低(P<0.01)。经Logistic回归分析,孕酮、雌二醇、黄体生成素、卵泡刺激素、RBP4水平均为子宫内膜增生症患者孕激素治疗效果的危险因素(P<0.05)。经决策曲线分析,阈值在0.4~0.6时,RBP4在预测子宫内膜增生症患者孕激素治疗效果方面具有较高价值。RBP4与子宫内膜增生症患者孕激素治疗效果的关联强度呈线性剂量反应关系(P<0.05)。结论RBP4水平对子宫内膜增生症患者孕激素治疗效果具有一定预测价值,且其与患者治疗效果呈现一定的线性剂量反应关系。

游离甲状腺素 性激素结合蛋白 25-羟维生素D_(3)在特发性中枢性性早熟女童中的表达及疗效相关性分析

目的探究游离甲状腺素(free thyroxine,FT_(4))、性激素结合蛋白(sex hormone-binding globulin,SHBG)、25-羟维生素D_(3)[25-hydroxyvitamin D_(3),25-(OH)-D_(3)]在特发性中枢性性早熟(idiopathic central precocious puberty,ICPP)女童中的表达及与疗效的相关性。方法选取2021年6月—2023年6月赣南医科大学第一附属医院收治的76例ICPP女童作为研究对象,给予促性腺激素释放激素类似物(gonadotropin-releasing hormone agonist,Gn RHa)联合维生素D治疗。比较治疗前后女童生长发育情况、FT_(4)、SHBG、25-(OH)-D_(3)和激素水平,采用Pearson相关性分析研究FT_(4)、SHBG、25-(OH)-D_(3)与疗效的相关性。结果治疗后,观察组体质量、身高、骨龄(bone age,BA)、青春期身高突增(Predicting adult height,PAH)显著高于治疗前(P<0.05)。治疗后,观察组FT_(4)、促卵泡生成素(follicle stimulating hormone,FSH)、雌二醇(estradiol,E_(2))显著低于治疗前,SHBG、25-(OH)-D_(3)、黄体生成素(luteinizing hormone,LH)LH显著高于治疗前(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,FT_(4)与体质量、身高、BA、PAH指标呈显著负相关,与FSH、E_(2)、LH水平呈显著正相关(P<0.05);SHBG、25-(OH)-D_(3)与体质量、身高、BA、PAH指标呈显著正相关,与FSH、E_(2)、LH水平呈显著负相关(P<0.05)。结论FT_(4)、SHBG和25-(OH)-D_(3)可作为评估ICPP治疗效果的潜在生物标志物。

甲状腺乳头状癌患者组织中表皮生长因子受体、维生素D受体、溴结构域蛋白4表达水平及其临床意义

目的:探究甲状腺乳头状癌(PTC)患者组织中表皮生长因子受体(EGFR)、维生素D受体(VDR)、溴结构域蛋白4(BRD4)的表达水平和其临床意义。方法:选取2022年2月—2024年3月广州医科大学附属妇女儿童医疗中心增城院区收治的PTC患者54例作为研究对象,取患者的癌组织及癌旁正常组织,采用免疫组织化学技术检测组织中EGFR、VDR和BRD4蛋白表达水平,并分析EGFR、VDR、BRD4阳性表达与临床病理特征的关系。结果:PTC患者癌组织中EGFR、VDR及BRD4蛋白表达阳性率均高于癌旁正常组织,差异有统计学意义(P<0.001)。不同临床病理特征的EGFR阳性表达情况比较,差异无统计学意义(P>0.05);瘤体>1 cm、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期者VDR阳性率高于瘤体≤1 cm、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期者,差异有统计学意义(P<0.05);瘤体>1 cm、有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期者BRD4阳性率高于瘤体≤1 cm、无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期者,差异有统计学意义(P<0.05)。EGFR蛋白表达与VDR、BRD4蛋白表达呈正相关(r=0.462、0.513,P<0.001);VDR蛋白与BRD4蛋白表达呈正相关(r=0.407,P<0.001)。结论:EGFR、VDR和BRD4在PTC患者组织中呈显著高表达,与PTC的形成及临床病理特征有一定相关性,可作为治疗PTC的监测指标。

胰岛素样生长因子结合蛋白-3与甲状腺激素受体α1的相互作用及其对甲状腺激素应答性基因转录的调节

目的探讨胰岛素样生长因子结合蛋白-3(IGFBP-3)与甲状腺激素受体α1(TRα1)之间的相互作用,及其对甲状腺激素应答性基因转录作用的调节。方法采用谷胱甘肽-S-转移酶拉下实验、免疫共沉淀以及荧光共振能量转移实验检测IGFBP-3与TRα1之间的相互作用;激光共聚焦显微镜观察两种蛋白在细胞中的分布;采用双萤光素酶实验检测过表达IGFBP-3对甲状腺素T3激活的生长激素启动子的影响。结果谷胱甘肽-S-转移酶拉下实验、免疫共沉淀以及荧光共振能量转移实验结果证明IGFBP-3与TRα1在体内和体外都可以相互作用,激光共聚焦显微镜观察IGFBP-3和TRα1可以共定位于HEK-293细胞的细胞核。通过双萤光素酶实验检测到过表达IGFBP-3可以抑制甲状腺激素对生长激素启动子的激活作用(P<0.01)。结论 IGFBP-3通过与TRα1相互作用抑制甲状腺激素应答性基因的转录,为IG-FBP-3在核内发挥胰岛素样生长因子非依赖的作用提供了新的实验依据。

甲状腺功能亢进症患者血清神经调节蛋白4水平及其临床意义

目的 探讨甲状腺功能亢进症(甲亢)患者血清神经调节蛋白4(NRG4)水平及其临床意义。方法 选取2019年8月至2021年8月该院收治的69例甲亢患者作为甲亢组,同期收治的57例亚临床甲亢患者作为亚临床甲亢组,同期健康体检者63例为健康对照组。对甲亢患者均给予硫酰胺类药物甲巯咪唑治疗3个月。比较3组促甲状腺激素(TSH)、游离三碘甲腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)水平;分析甲亢患者治疗前后的TSH、FT3、FT4、NRG4水平变化;评估治疗前血清NRG4辅助诊断甲亢的价值;分析治疗前血清NRG4水平与TSH、FT3、FT4水平的相关性。结果 甲亢组治疗前TSH水平[(0.14±0.03)mU/L]低于亚临床甲亢组[(0.25±0.04)mU/L]、健康对照组[(2.61±0.45)mU/L],甲亢组治疗前FT3、FT4、NRG4水平[(15.54±2.68)pmol/L、(41.36±10.02)pmol/L、(3.42±1.12)ng/mL]高于亚临床甲亢组[(6.25±0.27)pmol/L、(20.34±3.45)pmol/L、(2.61±0.52)ng/mL]、健康对照组[(3.74±0.39)pmol/L、(12.03±2.16)pmol/L、(1.89±0.49)ng/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。甲亢患者FT3、FT4、NRG4水平在治疗1个月[(12.04±2.41)pmol/L、(30.25±7.84)pmol/L、(2.84±0.87)ng/mL]、3个月[(7.65±2.23)pmol/L、(19.63±4.25)pmol/L、(2.37±0.61)ng/mL]时相比治疗前降低(P<0.05),TSH水平在治疗1个月[(0.87±0.21)mU/L]、3个月[(1.42±0.32)mU/L]相比治疗前升高(P<0.05)。受试者工作特征曲线分析结果显示:血清NRG4诊断甲亢的曲线下面积为0.859(95%CI=0.799~0.919,P<0.05),灵敏度为66.7%,特异度为88.9%,最佳临界值为2.39 ng/mL,约登指数为0.556。Pearson相关分析结果显示:NRG4水平与TSH水平呈负相关(r=-0.494,P<0.05),与FT3、FT4水平均呈正相关(r=0.502、0.644,P<0.05)。结论 甲亢患者血清NRG4呈相对高水平,硫酰胺类药物治疗后其水平下降;甲亢患者NRG4水平与甲状腺激素指标水平具有相关性,对甲亢的临床诊治具有辅助评估价值。

肥胖患者血清视黄醇结合蛋白4水平变化及与性激素的相关性

目的探讨肥胖患者血清视黄醇结合蛋白4(RBP4)水平变化及与性激素水平的相关性。方法80名研究对象分为肥胖组和非肥胖组,测定人体测量参数、血压,检测生化指标、血清RBP4、空腹血浆胰岛素(FINS)、脂联素(APN)、高敏C反应蛋白CRP(hsCRP)、性激素及性激素结合蛋白(SHBG)等。计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)。结果肥胖组血清RBP4水平显著高于非肥胖组(P<0.01)。男性血清RBP4水平显著高于女性(P<0.05)。总体分析,血清RBP4水平与体质指数(BMI)、腰围(WC)、收缩压(SBP)、舒张压(DBP)、血浆总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、lnhsCRP、ln睾酮(T)呈显著正相关(P<0.01或P<0.05),与APN、性别、性激素结合蛋白(lnSHBG)呈显著负相关(P<0.01或P<0.05);多元逐步回归分析,性别、BMI、ln黄体生成素(LH)是血清RBP4水平的独立相关因素。不同性别组内,肥胖亚组血清RBP4水平均显著高于非肥胖亚组,lnT和lnE2呈与性别相反表达,且lnSHBG降低、lnLH及lnFSH增高;在男性,BMI、WHR、APN是影响血清RBP4水平的独立因素;在女性,BMI、lnLH是血清RBP4水平的独立相关因素。结论肥胖患者血清RBP4水平显著升高,血清RBP4水平存在性别特异性差异,与血浆性激素及SHBG水平密切相关。

雌激素受体和细胞增殖周期调控蛋白D1在分化型甲状腺癌中的表达及意义

目的:探讨雌激素受体(ER)和细胞增殖周期调控蛋白(cyclinD1)在分化型甲状腺癌(DTC)中的表达及意义。方法:用免疫组织化学SP法研究不同甲状腺组织中ER和cyclinD1的表达。DTC43例(乳头状癌39例,滤泡状癌4例),甲状腺良性腺瘤30例,腺瘤旁正常组织16例。结果:DTC组织中ER和cyclinD1蛋白阳性率分别为53.5%(23/43)、65.1%(28/43);甲状腺良性瘤中ER和cyclinD1蛋白阳性率分别为26.7%(8/30)、36.7%(11/30);正常甲状腺组织中ER阳性率为12.5%(2/16),而cyclinD1则不表达。DTC中ER的表达明显高于甲状腺良性腺瘤和正常甲状腺组织(P<0.05);DTC中cyclinD1的表达明显高于甲状腺良性腺瘤(P<0.05);且DTC中cyclinD1和ER表达存在正相关关系(P<0.05)。结论:雌激素在DTC的发生、发展中有促进细胞增殖的作用;DTC可能为雌激素依赖性肿瘤。

大汗腺中分泌物气味结合蛋白、雄激素受体表达水平及其与腋臭相关性研究

目的:对腋臭患者和正常人腋部大汗腺进行形态学观察,探讨大汗腺分泌活动的周期。对两种人群大汗腺组织中雄激素受体(androgen receptor,AR)和大汗腺分泌物气味结合蛋白(apocri ne secreti on odor-bi ndi ng protei n,ASOB)的表达进行检测,探讨二者的表达水平及其在腋臭发病中的作用。方法:对腋部皮肤组织进行HE染色,分析大汗腺不同分泌时期的形态和特点。利用免疫组织化学(i mmunohi stochemi stry)和免疫印迹法(eWstern bl otti ng)检测腋臭组与对照组大汗腺组织中AR和ASOB在大汗腺以及不同分泌时期中的表达情况,使用Image-Pro Pl us 5.0和Fl uorChemFC2分析系统对结果进行分析。结果:①大汗腺的分泌活动具有周期性,可分为活跃期和静息期;②腋臭组中AR和ASOB的表达明显高于对照组;③AR和ASOB在大汗腺不同分泌时期的表达差异有统计学意义;④AR和ASOB在两组人群相同分泌时期的表达差异有统计学意义;⑤AR和ASOB在腋臭大汗腺中的表达有正的直线相关关系。结论:AR和ASOB在腋臭患者大汗腺组织中的表达量同时增多,它们可能在腋臭发病的过程中起了重要作用。

G蛋白偶联雌激素受体1、表皮生长因子受体和趋化因子受体1在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的探讨G蛋白偶联雌激素受体1(G protein-coupled estrogen receptor1,GPER1)、表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)和趋化因子受体1(chemokine receptor1,CXCR1)在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)组织中的表达及意义。方法甲状腺乳头状癌68例、结节性甲状腺肿42例,采用免疫组织化学S-P法检测GPER1、EGFR和CXCR1的表达,分析其与患者临床病理特征的关系,以及三者间表达的相关性。结果在PTC组织中,GPER1、EGFR和CXCR1的表达阳性率分别为76.5%、66.2%、64.7%,明显高于结节性甲状腺肿组的21.4%、16.7%和11.9%(P<0.01);GPER1、EGFR和CXCR1在PTC中的表达与颈部淋巴结转移相关(P<0.05),而与其他临床病理特征(年龄、性别、肿瘤大小及TNM分期)无相关性(P>0.05);在PTC及PTC淋巴转移癌组织中,GPER1与EGFR的表达呈显著正相关(r=0.262,P=0.031;r=0.542,P=0.002)、GPER1与CXCR1的表达也呈显著正相关(r=0.276,P=0.025;r=0.483,P=0.006)。结论 GPER1、EGFR和CXCR1的两两共表达与PTC的发生、发展密切相关,三者间可能存在一种相互作用。

文蛤甲状腺激素受体MmTR互作蛋白筛选及其对Aroclor 1254胁迫的转录响应研究

环境中存在的甲状腺干扰物(thyroid disrupting chemicals,TDCs)可影响生物体内甲状腺激素(thyroid hormone,THs)的合成、分泌、转运、代谢和作用等过程,干扰THs稳态,引起THs水平失衡。甲状腺激素受体(thyroid hormone receptors,TRs)是一种存在于细胞核内的DNA结合转录因子,属于配体依赖型核激素受体超家族。TRs可与甲状腺激素响应元件(thyroid hormone response elements,TREs)结合,调控其转录表达。TDCs可作为生物体内TRs的配基,竞争性地与TRs结合,进而激活甲状腺信号通路,调控机体的整个甲状腺信号通路基因的转录表达。为探究TDCs对海洋无脊椎动物体内甲状腺激素是否具有干扰效应及其机制,本文通过构建文蛤消化盲囊组织酵母双杂交cDNA文库和文蛤甲状腺激素受体TR基因的诱饵载体pGBKT7-MmTR,在文库内进行MmTR的互作蛋白筛选和鉴定。结果表明,文蛤消化盲囊酵母双杂交cDNA文库中,cDNA片段大小在0.5~2 kb之间,库容约>2×10^(6) cfu。重组质粒pGBKT7-MmTR诱饵载体无毒性和自激活活性,可应用于酵母双杂交系统。经文库筛选共得到36个阳性克隆子,测序获得30个阳性克隆片段。随机选取BIRC2_3与MmTR基因进行点对点验证,结果为阳性,推测所有结果真实可靠。经比对分析,MmTR的29个潜在互作蛋白,功能涉及生长与发育过程、蛋白质代谢与免疫调控过程、应激响应过程和转录调控过程。不同浓度Aroclor 1254胁迫下幼体及成体文蛤体内MmTR基因潜在互作蛋白基因的转录响应分析发现,大多数潜在互作蛋白基因会对低浓度(10 ng·L^(-1)和20 ng·L^(-1))的Aroclor 1254短时间(1 d)暴露产生转录上调响应,且在成体阶段相关基因的转录响应更强烈;与成体阶段相比,文蛤幼体阶段暴露于高浓度(2000 ng·L^(-1))的Aroclor 1254中,生长与发育、蛋白质代谢与免疫调控过程相关的MmTR潜在互作蛋白基因RSPH9、N23、ferritin、BHMT、SCC4、PSMB5具有更明显的上调表达趋势;在成体文蛤体内,未知蛋白基因和位置功能蛋白基因的表达更易受到Aroclor 1254胁迫的影响。本研究结果为深入研究TDCs对无脊椎动物甲状腺激素的作用奠定基础,并且对海洋环境的保护有重要意义。

乳腺癌组织中胰岛素样生长因子结合蛋白-2的表达及其与雌激素受体、孕激素受体相关性的研究

目的研究胰岛素样生长因子结合蛋白-2(IGFBP-2)在乳腺癌组织中的表达,探讨其与乳腺癌临床病理学特征的关系及与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的相关性。方法用免疫组织化学SP法检测42例乳腺癌患者肿瘤组织中IGFBP-2和ER、PR的表达水平。结果在不同大小原发灶、年龄和类型乳腺癌组织中IGFBP-2的表达率无显著差异(P>0.05);IGFBP-2在有淋巴结转移乳腺癌中的表达显著高于无淋巴结转移乳腺癌(P<0.05)。IGFBP-2与ER在乳腺癌中的表达呈中度正相关(P<0.01,rs=0.486);与PR在乳腺癌中表达无明显相关性(P>0.05,rs=0.271)。结论IGFBP-2的表达在乳腺癌的发展和侵袭转移可能起重要作用,并与ER在乳腺癌中的表达呈正相关,提示IGFBP-2的高表达可能是乳腺癌预后不良的指标之一,对乳腺癌的临床治疗有一定的指导作用。

丝裂原活化蛋白激酶激酶4和雌激素受体的表达在浸润性乳腺癌组织中的临床意义

目的探讨丝裂原活化蛋白激酶激酶4(MAP2K4)在乳腺癌组织中的表达情况,并分析其表达与乳腺癌病理特征和预后以及与雌激素受体表达的相关性。方法运用免疫组织化学SP法检测102例乳腺癌组织中MAP2K4的表达,MAP2K4在乳腺癌中的表达及其与临床病理参数之间的关系采用卡方检验。生存分析用Kaplan-Meier法和Log Rank统计检验进行分析;多因素生存分析采用Cox比例风险回归模型。MAP2K4和ER表达之间的相关性分析采用Spearman相关分析。结果 102例组织标本中MAP2K4低表达有57例(57/102,55.9%),高表达有45例(45/102,44.1%);MAP2K4的表达在乳腺癌中不同病理分级(P=0.011)中差异显著;Kaplan-Meier生存分析显示,MAP2K4高表达患者的生存时间低于低表达患者(P=0.002);COX回归分析提示,MAP2K4高表达是影响乳腺癌患者预后的独立因素(P=0.009);等级相关分析显示MAP2K4的表达与雌激素(r=-0.093)无明显相关性,但MAP2K4高表达与雌激素阴性患者展示了最差的生存预后。结论高表达MAP2K4促进了乳腺癌患者进展和不利的预后。MAP2K4高表达与雌激素阴性乳腺癌患者综合生存时间最短,提示联合检测MAP2K4和雌激素表达可以进一步精确监控乳腺癌患者预后。

老年乳腺癌组织雌激素受体、孕激素受体与富集AT序列的特异性结合蛋白1及人表皮生长因子受体-2表达的相关性

目的探讨老年乳腺癌组织中雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)与富集AT序列的特异性结合蛋白(SATB)1及人表皮生长因子受体(Cerb B)2表达的相关性。方法回顾性分析原发性乳腺癌患者172例的临床资料。以距肿瘤组织超过5 cm外的癌旁组织为对照,用免疫组化方法检测乳腺癌组织中SATB1、CerbB2表达及其与临床病理特征、ER、PR的关系。结果 SATB1、CerbB2在乳腺癌组织中表达的阳性率显著高于癌旁组织(P<0.05)。组织学分级Ⅲ级的乳腺癌组织中SATB1、CerbB2表达阳性率最高,其次为Ⅱ级、Ⅰ级,差异有统计学意义(P<0.05);临床分期为Ⅲ期的乳腺癌组织中SATB1、CerbB2表达阳性率显著高于Ⅰ+Ⅱ期(P<0.05);有淋巴结转移的乳腺癌组织中SATB1、CerbB2表达阳性率显著高于无淋巴结转移者(P<0.05)。SATB1、CerbB2在乳腺癌组织中的表达与ER、PR表达呈显著负相关(r_(ER)=-0.387,-0.372,r_(PR)=-0.296,-0.329,均P<0.05)。结论 SATB1、CerbB2在老年乳腺癌组织中呈高表达,且与ER及PR表达呈显著负相关。

脂多糖结合蛋白多抗对大鼠肺泡巨噬细胞内毒素耐受性及Toll样受体4表达的影响

目的观察脂多糖结合蛋白(lipopolysaccharidebindingprotein,LBP)多抗对大鼠肺泡巨噬细胞(alveolarmac-rophage,ΦAM)内毒素(lipopolysaccharide,LPS)耐受性与Toll样受体4(Toll-likereceptor4,TLR4)表达的影响,研究二者之间的联系。方法将从32只Wistar雄性大鼠分离所得ΦAM,按随机数字法等分为正常对照组(A)、LPS单次刺激组(B)、LPS二次重复刺激组(C)和LPS二次重复刺激+LBP多抗组。运用ELISA和RT-PCR方法分别检测各组大鼠ΦAM分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及TLR4mRNA表达的变化,Westernblot检测TLR4蛋白表达的变化。结果大鼠ΦAMTNF-α分泌和TLR4mRNA表达及TLR4的蛋白表达水平,A组分别为:(0·45±0·01),(0·77±0·06),(51·03±1·19)μg/L,B组分别为:(0·76±0·03),(1·55±0·25),(122·72±1·75)μg/L,B组与A组比较显著增加,P<0·01;C组分别为:(0·49±0·05),(1·13±0·07),(85·35±0·68)μg/L,C组与B组比较,明显减少,P<0·05。D组分别为:(0·28±0·07),(0·78±0·17),(61·06±1·36)μg/L,D组与C、B组比较,明显减少(P<0·05,P<0·01)。结论LPS重复刺激可使大鼠ΦAM对LPS产生耐受性;LPS耐受性的产生与TLR4表达下降相关;LBP多抗通过降低TLR4表达,提高大鼠ΦAM对LPS耐受性,此乃LBP抗体可用于治疗LPS所致急性肺损伤的部分分子生物学理论基础。

有自杀意念的抑郁症患者视黄醇结合蛋白4与甲状腺激素的相关性

目的:研究有自杀意念抑郁症患者血清视黄醇结合蛋白4(RPB4)及甲状腺激素水平变化,并分析其相关性。方法:收集2020-01-2022-05驻马店市第二人民医院首次确诊为重度抑郁症(MDD)患者159例,其中有自杀意念者82例(有自杀意念组),无自杀意念者77例(无自杀意念组)。检测所有MMD患者血清RPB4甲状腺激素和血脂水平。分析RPB4与甲状腺激素的相关性,分析RPB4、甲状腺激素与自杀意念的关系。结果:有自杀意念组患者血清RPB4、促甲状腺激素(TSH)及甘油三酯(TG)均显著低于无自杀意念组(P均<0.05)。多元线性回归分析显示,血清RPB4与TSH水平均呈正相关(β=2.336,P<0.01)。血清RPB4水平及TSH水平与SSI评分均呈负相关(β=-0.260,-1.391,P均<0.01)。结论:MDD患者血清RPB4水平与TSH水平密切相关,且两者均与患者自杀意念严重程度有关。

eIF4E与磷酸化eIF4E结合蛋白1在甲状腺乳头状癌中的表达及意义

目的观察真核细胞翻译起始因子4E(eIF4E)及磷酸化eIF4E结合蛋白1(p-4EBP1)在甲状腺乳头状癌组织中的表达,并探讨其与甲状腺乳头状癌的侵袭、转移等临床病理特征间的关系。方法采用免疫组化EnVinsion法检测66例乳头状癌(经典型乳头状癌37例,滤泡型乳头状癌29例)、20例结节性甲状腺肿伴乳头状增生及上述病例的肿瘤旁正常甲状腺组织中eIF4E与p-4EBP1的表达。结果在肿瘤旁正常甲状腺组织、甲状腺肿伴乳头状增生及乳头状癌中,eIF4E的阳性率分别为11.6%(10/86)、50.0%(10/20)和84.8%(56/66)(P<0.01);p-4EBP1的阳性率分别为8.1%(7/86)、40.0%(8/20)和66.7%(44/66)(P<0.01),并且p-4EBP1在滤泡型乳头状癌中的表达显著高于其在经典型乳头状癌中的表达(P<0.01)。eIF4E在有腺外侵袭和淋巴结转移的病例中的阳性率分别为96.7%(29/30)和100.0%(29/29),分别高于无腺外侵袭和无淋巴结转移的病例,后者阳性率分别为75.0%(27/36)和73.0%(27/37)(P<0.05)。而p-4EBP1在这两组病例中的表达差异则无显著性意义(P>0.05)。结论和正常甲状腺及甲状腺良性病变相比,eIF4E和p-4EBP1在乳头状癌中存在过表达;eIF4E的过表达与乳头状癌的侵袭与转移关系密切,在乳头状癌的进展中可能发挥了重要作用。

甲状腺激素受体与Drosha蛋白互作鉴定分析

为了证明甲状腺激素受体(THR)与Drosha蛋白之间的相互作用,以HEK293细胞为材料,利用免疫共沉淀的方法获得蛋白免疫复合物,再经Western blot检测和质谱分析。结果表明,用THR抗体Western blot检测出有THR蛋白的存在,反之Drosha抗体Western blot检测有Drosha蛋白的存在;同时,THR抗体免疫沉淀后的质谱鉴定存在Drosha蛋白,Drosha抗体免疫沉淀后的质谱鉴定也存在THR蛋白,由此说明甲状腺激素受体与Drosha蛋白之间确实存在相互作用。并且,初步筛选出与两者共同作用的54个蛋白,经Go聚类分析揭示鉴定蛋白主要是细胞膜和细胞核中成分,参与细胞迁移、细胞凋亡、蛋白代谢、免疫应答、信号通路调节及转录调控等生物途径,具有核酸结合、细胞骨架结合等分子功能。

钠/碘转运蛋白和促甲状腺激素受体在甲状腺癌中的表达及相关性

目的研究钠/碘转运蛋白(NIS)和促甲状腺激素受体(TSHR)在甲状腺癌中的表达特征,探讨二者表达的相关性。方法收集正常甲状腺组织18例、结节性甲状腺肿标本27例和甲状腺癌标本23例,通过荧光定量分析和免疫组化法研究NIS和TSHR的表达。结果甲状腺癌NIS和TSHR mRNA的表达显著低于正常甲状腺组织和结节性甲状腺肿(P<0.005)。在正常甲状腺组织、结节性甲状腺肿中,NIS和TSHR的表达呈显著正相关(r分别为0.667和0.551,P<0.005),而在甲状腺癌中无相关性。免疫组化结果表明在甲状腺癌中NIS阳性产物主要定位于细胞质,并显著高于正常甲状腺组织和结节性甲状腺肿(P<0.05);TSHR蛋白表达阳性产物主要定位于细胞质和细胞膜,显著高于正常甲状腺组织(P<0.001),但与结节性甲状腺肿无显著性差异。同正常甲状腺组织相比,甲状腺癌NIS mRNA表达下降的同时伴有细胞质NIS蛋白表达升高的比例显著高于结节性甲状腺肿(x^2=4.428,P=0.035)。结论甲状腺癌NIS mRNA及TSHR mRNA的表达下降,且二者表达无相关性。