囊性肝包虫病包囊内一株鲍曼不动杆菌的分离鉴定及病原性分析

为探索囊性肝包虫病包囊自然退化而死亡的细菌感染机制。方法 在本次研究中,我们收集了囊性肝包虫病患者手术后的包囊样本,并对其进行了细菌的分离、纯化、生理和生化鉴定、耐药性的研究、16SrRNA基因序列的分析以及小鼠的致病性感染实验,并对其中一株菌株进行了体外药物敏感性试验。结果 包囊样本在BHI琼脂培养基中生成了多个菌落,挑取其中一株纯化精炼培养,通过革兰氏染色法检查确定其为阴性杆菌,综合16SrRNA Gene的测序事实,结合生理与生物化学实验结果,可明确此菌为鲍曼不动杆菌。且此菌株对小鼠的LD50(半数致死剂量)为9.60 x 108 cfu/ml。收集并分离失去生命体征小鼠病变部位的菌株,获得的菌株与原先分离的菌株一致。结果 兼表明,被分离的菌株对恩诺沙星、环丙沙星、氧氟沙星高度敏感。结论 这项研究首次从包囊内容物中分离出鲍曼不动杆菌,为阐释包囊自然退化提供了实验数据,具有重要临床意义。

老年呼吸道感染患者病原性细菌临床检验结果分析

目的调查分析老年呼吸道感染患者病原性细菌的分布及药敏试验结果。方法选取2021年1月—2023年3月徐州市中医院收治的200例老年呼吸道感染患者作为研究对象,严格按照操作流程留取患者的痰液标本,进行细菌分离培养,检测患者病原菌分布情况,并测定细菌耐药性。结果200例老年患者痰液标本经病原性细菌培养,共分离出120株(来自样本反复分离),其中24例患者伴双重或多重病原菌感染。其中革兰阴性杆菌检出率为85.00%,明显高于革兰阳性菌的检出率(12.50%)及真菌的检出率(2.50%),其中产超广谱β-内酰胺酶(Extended-spectrumβ-lactam,ESBLs)菌检出率为20.00%。氨苄西林、头孢曲松、头孢噻肟对肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌的耐药率均在50%以上;亚胺培南、美罗培南、哌拉西林/他唑巴坦对肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌的耐药率均低于30.00%;铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌的耐药率在20.00%以下的药物分别为头孢他啶环丙沙星、头孢吡肟以及左氧氟沙星。金黄色葡萄球菌对青霉素、红霉素的耐药率均为75.00%;对万古霉素、替考拉宁的耐药率为0;产ESBLs菌株对头孢类、左氧氟沙星、妥布霉素、氨苄西林等耐药率均超过50%,对亚胺培南的耐药率为0。结论老年呼吸道感染患者病原性细菌检出以革兰阴性杆菌为主,对常用抗生素有一定耐药性,其中产ESBLs菌株对亚胺培南的耐药率为0,可为临床治疗提供依据。

畜牧养殖中仔猪病原性腹泻病因与预防对策分析

仔猪病原性腹泻是一种急性胃肠道疾病,多发于断奶仔猪且死亡率较高。自2010年起,该病在国内大规模暴发,给养殖业造成了巨大的经济损失。本文系统分析出仔猪病原性腹泻的主要病因,包括病毒性、细菌性及环境与饲养因素,并详细探讨相应的治疗技术与管理策略。

羔羊病原性腹泻发生的原因与防治

1发病原因1.1病毒感染多种病毒可引起羔羊腹泻。病毒性腹泻具有传染速度快、病程短、死亡率高等特点。轮状病毒为引发羔羊腹泻的常见病毒,该病毒还可感染猪、牛等。一般40日龄以内的羔羊腹泻发病率最高,也最易感染轮状病毒。大多数羔羊感染轮状病毒后呈亚临床症状,若饲养环境中有大量病毒,羔羊免疫力下降时,则会出现临床症状。

病原性海洋弧菌快速检测方法的研究进展

病原性海洋弧菌检测在海水养殖病害发现、防治、无公害水产品生产及卫生质量检验中均具有重要意义。本文综述了目前国内外关于海洋弧菌的各种检测方法、原理、应用及其研究进展,重点介绍了免疫学和分子生物学检测技术,因为其具有快速、准确等特点而被经常使用,尤其是ELISA和PCR检测技术已由实验室研究阶段步入了商品化的应用阶段。

16SrRNA基因序列分析用于诊断病原性细菌感染初步研究

目的建立一种可适用于多种病原菌检测的方法,以提高病原学诊断率,有利于传染病的病原学监测。方法细菌16SrRNA基因通用引物对直接从血液、尿液、脑脊液标本中提取的细菌DNA进行PCR扩增,并对16SrRNA基因扩增产物进行克隆和序列分析。结果检测了28份临床标本,16SrRNA基因序列分析与尿液细菌培养结果不完全吻合;血液和脑脊液的16SrRNA的检出率均高于细菌培养。结论16SrRNA基因检测分析和细菌培养均具有良好的诊断效果,而针对16SrRNA基因的PCR直接扩增核酸并进行序列分析可对分离培养阴性的标本进行有效的补充诊断,可检测到多种病原菌如肠球菌,大肠杆菌,表皮葡萄球菌,牛链球菌,猪链球菌,布鲁氏菌,表皮葡萄球菌和脑膜炎球菌等,为疾病的诊断提供良好的线索。

细菌QJ2对对虾病原性哈维氏弧菌的拮抗作用

对气味黄杆菌（Ｆｌａｖｏｂａｃｔｅｒｉａ ｏｒｄｏｒａｔｕｍ） ＱＪ２及其去细胞上清液（ＣＦＳ）对对虾病原性哈维氏弧菌（Ｖｉｂｒｉｏｈａｒｖｅｙｉ）Ｚ３Ｇ２ Ｅ０２２的拮抗作用进行了研究。ＱＪ２的ＣＦＳ对病原菌表现显著的拮抗性能，在６ｈ内使数量为１０５－１０６ｃｆｕ·ｍＬ的病原菌（Ｚ３、Ｅ０２２均降为０。经热、酸碱、蛋白酶处理的ＣＦＳ，抑菌活性均有不同程度下降，结果为；经６０℃处理以６０ｍｉｎ的ＣＦＳ，经６ｈ使Ｚ３Ｇ２细菌数降为０，经１５ｍｉｎ使Ｅ０２２数量降为最低，为初始菌数的６３．０％：经１００℃处理１０ｍｉｎ，ＣＦＳ使Ｚ３Ｇ２和Ｅ０２２数量分别在１ｈ和１５ｍｉｎ降为最低，各为初始菌数的２３．７％和７２．１％；经ｐＨ４时作用３０ｍｉｎ，ＣＦＳ使Ｚ３Ｇ２和Ｅ０２２数量分别在１５ｍｉｎ和１ｈ降为最低，各为初始菌数的８８．３％和１５．９％，而经ｐＨ１２处理３０ｍｉｎ后，ＣＦＳ没有使病原菌数下降，但使病原菌以比对照组细菌低的速率缓慢上升；经蛋白酶Ｋ于３７℃作用６０ｍｉｎ后，ＣＦＳ在１５ｍｉｎ时使Ｚ３Ｇ２和Ｈ０２２数量降为最低，各为初始菌数的１５．０％和６６．１％。在人工水体中，ＱＪ２活菌对病原菌也具有显著的拮抗?

传染性支气管炎病毒我国地方分离株病原性和基因分型的比较研究

对来自国内部分地区的６个分离株及３个参考株，以蛋白酶Ｋ－ＳＤＳ法提取其基因组ＲＮＡ，经反转录－聚合酶链式反应（ＲＴ－ＰＣＲ）扩增了预期的１．７ｋｂ纤突糖蛋白Ｓ１基因ｃＤＮＡ。用ＨａｅⅢ裂解Ｓ１基因ｃＤＮＡ，限制性酶切片段长度多态性（ＲＦＬＰ）表现为３种不同的带型。以部分毒株分别感染ＳＰＦ鸡，于感染后第５，９，１３，１６和２０ｄ观察气管和肾脏病理学变化，显示在病原性和组织嗜性上存在两大倾向。一类可导致严重的、持续时间较长的呼吸道损伤，伴有相对较轻的肾脏损伤；另一类以肾脏损伤较严重且持续时间较长而呼吸道损伤相对较温和为特征。结果表明我国部分地区同时存在着Ｍａｓ基因型的所谓“呼吸型”和Ｔ基因型或可能的变异株“肾病型”ＩＢＶ的流行，且后二者是引起“肾病型”ＩＢ广泛流行的主要病原。

牙鲆淋巴囊肿病毒的病原性与免疫原性

用病牙鲆体表肿瘤纯化的病毒 ,对健康牙鲆进行人工感染实验。感染 6 0天后 ,供试牙鲆再现了自然发病鱼的症状。该结果证明 ,从病鱼囊肿物中纯化的病毒 ,确系引发淋巴囊肿病的病原。免疫学实验显示 ,淋巴囊肿病毒使被感染鱼产生了抗体IgM。在实验期间内 ,IgM随着时间的延长而增加。

吉林省动物病原性大肠杆菌的耐药性监测试验

从吉林省 5个地区分离出动物病原性大肠杆菌 132株 ,采用药敏纸片法对 2 2种抗生素进行了耐药性监测试验。结果表明 :受检菌株全部对 1种或多种抗生素耐药 ,无一全部敏感株。对 13～ 15种抗生素耐药的菌株数较多。其中对氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星、氯霉素、庆大霉素、卡那霉素、呋喃妥因同时耐药的菌株已达半数。采用平皿二倍稀释法测定随机挑选的 4 0株大肠杆菌对 6种抗生素最低抑菌浓度的结果为耐药水平很高。因而 ,采取有效的方法抑制大肠杆菌对多种抗生素的耐药已是当务之急。

选择性捕获禽病原性大肠杆菌体内转录序列

采用选择性捕获转录序列(SCOTS)方法鉴定禽病原性大肠杆菌E037株(血清型O78)在感染SPF鸡过程中的转录表达基因。通过总RNA分离、cDNAs合成、PCR扩增和SCOTS对cDNAs选择和致病性特异转录序列的富集,致病性特异的cDNAs被分离鉴定,共获得31个转录序列(命名为aec),其中分别有2、1、4、14、2和8个aec序列与黏附素、LPS的合成、铁的摄取系统、质粒编码基因、噬菌体编码基因和一些其它功能基因相关;从气囊中分离到16个aec序列,心包膜中分离到15个aec序列;有3种与质粒编码基因相关序列在气囊和心包膜中都被分离到。结果显示APEC致病性特异序列包括黏附素、LPS的合成、铁的转运、质粒编码基因、噬菌体编码基因和一些其它功能基因等。通过SCOTS方法建立了一种体内表达致病性特异基因的方法和APEC在自然宿主感染模型中致病性相关基因的表达谱的筛选方法。

鲟病原性疾病研究现状概述

鲟是地球上最古老的物种之一。我国自1991年后开始鲟类的商业化养殖,主要品种有引进的匙吻鲟、杂交鲟、小体鲟、俄罗斯鲟和西伯利亚鲟,黑龙江流域出产的施氏鲟、达乌尔鳇,以及施氏鲟和达乌尔鳇的杂交种等。随着养殖业的发展,鲟疾病不断增多,严重制约了养殖产业的健康发展。目前发现的鲟致病性病原有病毒、细菌、真菌和寄生虫等。概述了目前国内外鲟病原性疾病的研究进展,包括感染种群、致死率、临床症状、病原分离鉴定和药物控制等方面。目前对鲟病害的研究,在发病机制、免疫防治以及结合环境和营养因素的综合防控技术等方面还十分缺乏,应系统开展鲟疾病的流行病学、病原学、诊断技术以及防控技术研究。

城市污水中病原性大肠埃希氏菌毒力基因eaeA和rfbE的实时荧光定量PCR检测

针对病原性大肠埃希氏菌EHEC和EPEC的毒力基因eaeA和rfbE,选用特异性引物,建立了实时荧光定量PCR检测方法.利用从污水中分离出的目的核酸片段构建重组质粒,通过测序和BLAST比对分析,确定了PCR扩增的特异性.将重组质粒作为模板,分别测定标准曲线,在eaeA基因模板量8.77～8.77×105copy,rfbE基因模板量4.98～4.98×105copy的范围内,Ct(循环阈值)与模板量的对数值具有良好的线性关系〔R2为0.997(eaeA)和1.000(rfbE)〕.结合膜吸附洗脱浓缩方法,对于实际水样,eaeA和rfbE基因的检测限分别为1.75×102和9.96×101copy/100 mL.利用该方法对城市污水处理厂进、出水进行检测的结果显示,污水二级处理工艺对这2种毒力基因的去除效果明显.

桑尺蠖和丝棉木金星尺蠖的微孢子虫对家蚕病原性和胚种传染性研究

从桑尺蠖（ＨｅｍｅｒｏｐｈｉｌａａｔｒｉｌｉｎｅａｔａＢｕｔｌｅｒ）中分离的微孢子虫（简称桑尺蠖微孢子虫），形态为长卵圆形，大小为３．５～４．１×１．６～１．９μｍ。从丝棉木金星尺蠖（ＣａｌｏｓｐｉｌｏｓｓｕｓｐｅｃｔａＷａｒｒｅｎ）中分离的微孢子虫（简称丝棉木金星尺蠖微孢子虫），形状为卵圆形，大小为３．２～３．７×１．６～２．１μｍ。两种微孢子虫均能感染寄生家蚕的主要组织器官，引起蚕儿发病，但致病力要比家蚕微孢子虫（Ｎｏｓｅｍａｂｏｍｂｙｃｉｓ）弱，且能经卵传染给下一代，其胚种传染率要比家蚕微孢子虫低。

禽病原性大肠杆菌1型菌毛主要亚单位结构基因的克隆、测序与表达

从禽源大肠杆菌037(O78)、166(O78)、120(O18)分离株和猪源大肠杆菌107/86分离株分别提取基因组DNA,并以此为聚合酶链反应(Polymerasechainreaction,PCR)的模板,扩增上述分离株的1型菌毛主要亚单位结构基因pilA,通过其编码的主要菌毛亚单位FimA蛋白氨基酸的序列比较发现:3个禽源株间FimA的同源性为94 3%至99 0%;禽源株和猪源株间FimA的同源性为89 6%至91 1%。通过对重组大肠杆菌的菌体裂解物的SDS PAGE电泳分析及Westernblot分析,禽源大肠杆菌O78037株、O18120株出现了一致的强反应,O78166株反应较弱,而猪源大肠杆菌107/86株反应最弱。这些结果表明:禽源大肠杆菌与猪源大肠杆菌1型菌毛间存在抗原多样性,这种多样性甚至出现在禽病原性大肠杆菌同一血清型的2个不同分离株之间,如O78037株O78166株之间,尽管其FimA氨基酸的同源性很高,为99 0%。

我国部分地区105个禽病原性大肠杆菌的药敏试验

测定了来自国内部分地区１０５个禽病原性大肠杆菌分离株对１３种药物的敏感性。结果表明，丁胺卡那霉素、环丙沙星、氟哌酸的抑菌作用最强，高敏菌株占７７％以上，痢特灵、庆大霉素、卡那霉素、恩诺沙星、氯霉素敏感性居中，高敏菌株为４９％～６５％之间；增效磺胺、痢菌净、氨苄青霉素、强力霉素、青霉素的抑菌作用最弱，高敏菌株低于２０％。

山东省病原性家蚕微孢子虫的初步研究

从山东省境内家蚕成虫体内分离到 4种病原性家蚕微孢子虫 ,与N .b比较研究结果表明 ,4种微孢子虫的大小、形态、极丝圈数及倾斜角与N .b相比均存在差异 ,但血清学反应及在蚕体内的发育过程与N .b相同。初步认为该 4种病原性微孢子虫为N .b的同属微孢子虫。这 4种微孢子虫对家蚕具有极强的食下感染率和胚种传染力。

腹泻仔猪病原性大肠埃希菌毒力因子分布与耐药性分析

为了探索仔猪大肠埃希菌性腹泻的发病机制、大肠埃希菌毒力因子变迁以及与耐药性可能存在的关系,在直肠棉拭采集浙江省规模猪场腹泻仔猪病料,经细菌分离纯化、形态学结合PCR鉴定以及小鼠致病性试验得到124株病原性大肠埃希菌基础上,应用PCR分析其毒力因子,采用K-B法及耐药性专用软件Whonet测定并分析其对抗菌药物的耐药性,最后,通过Logistic分析分离株毒力因子与耐药性的相关性。结果表明:菌毛阳性分离株(F4+和F41+)占总菌株数的7.26%(9/124),首次检测到毒力因子EAST1、PAA和AIDA-I,其中EAST1检出率高达19.68%(24/124),而PAA和AIDA-I阳性率较低,分别为4.84%(6/124)和2.42%(3/124);分离株对苯唑西林(100%)、复方新诺明(97.6%)、利福平(97.6%)、多西环素(96%)、羧苄西林(93.5%)、氨苄西林(93.5%)、阿莫西林(93.5%)耐药严重;链霉素与氨苄西林(75.45%)、恩诺沙星(65.45%)、复方新诺明(78.18%)、庆大霉素(63.64%)、多西环素(96%)、氟苯尼考(50.91%)间交叉耐药明显。分离菌株100%呈多重耐药,其中以14～16耐药最多(43.31%);阿莫西林/克拉维酸(P=0.046)和多西环素的耐药性(P=0.020)与大肠埃希菌黏附与脱落病变eae(E.coli attaching and effacing)基因显著相关,多黏菌素B(P=0.004)和氯霉素的耐药性(P=0.013)与EAST1显著相关。结合以往资料,我们认为大肠埃希菌毒力因子已发生明显改变,耐药性更趋严重,且二者之间存在相关性,需深入研究以更好制订大肠埃希菌病有效防控措施。

禽病原性大肠杆菌tsh突变株的构建及分离株tsh基因的检测

运用基因重组方法将庆大霉素（Gentamycin,GM）抗性基因连接到PCR扩增的tsh两端区域产生的2个目的基因片段之间,并共同插入到pUC18载体的多克隆位点中,构建出带GM标志的载体pUC18-tshFRGM,从中切下此tshF-GM-tshR片段,再将之克隆到pMEG-375自杀性载体中,构建出自杀性载体pMEG375-tshFRGM,将突变载体转化到含tsh基因的受体APEC E037株中,根据同源重组原理,筛选出tsh基因缺失的E037突变株,命名为E037（Δtsh）。E037和E037（Δtsh）株对1日龄鸡的LD50分别为105.6CFU和109.0CFU,动物感染性试验表明E037（Δtsh）株在内脏器官和血液中的感染能力和大肠杆菌病变程度均有明显下降。在243株禽源分离株中,有167株为tsh＋菌株,其中高致病株、中等致病株和低致病株分别为87.4%（146/167）、12.6%（21/167）和0%（0/167）;O1、O2和O78血清型的高致病株占所在血清型分离株的89.5%-100%,而其它血清型的高致病株仅占其它分离株的53.3%,差异极显著（P〈0.01）。结果显示tsh＋株大多数为高致病性菌株,且其致病性与血清型的种类有一定的相关性,温度敏感性血凝素为APEC重要的致病因子。

甲鱼病原性豚鼠气单胞菌的分离鉴定

自杭州市郊某甲鱼场送检的病死甲鱼中分离到２２株细菌，在与嗜水气单胞菌抗血清不产生凝集的多株细菌中挑选３株作进一步鉴定，生理生化特性显示它们均属豚鼠气单胞菌。小鼠试验显示有毒力，用其中１株回归本动物发病死亡，并出现与自然病例类似症状。用１株分离菌制备的抗血清与其他２１株分离菌株进行玻板凝集试验，其中１１株有毒力菌株都出现凝集反应，显示豚鼠气单胞菌为本病的主要病原。