四川省绵阳市规模种猪场病毒性腹泻横断面调查

为了解四川省绵阳市规模种猪场猪病毒性腹泻(PVD)病原流行情况,探寻场间传播的主要风险因素,按发现疫病的抽样策略,基于风险的采样方式,对绵阳市9个区县所有母猪存栏>100头的58个规模种猪场采集肛拭子样品1160份,利用荧光定量RT-PCR方法进行猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪轮状病毒(PoRV)和传染性胃肠炎病毒(TGEV)核酸检测,计算场群真实流行率;以问卷调查形式收集PVD病原场间传播风险因素,并对相关数据进行单因素和多因素Logistic回归分析。结果显示;绵阳市规模化种猪场PVD场群真实流行率为18.87%,感染场群主要分布于平原或丘陵地区,感染病原主要为PEDV和PoRV,未检出TGEV,存在隐性带毒及混合感染情况;风险因素中,“饲料来源为自配”(OR=5.208,95%CI;1.047~25.895)、“司机协助场内人员共同上下货”(OR=6.504,95%CI;1.037~40.781)、“未要求对不进入场区的近场车辆彻底洗消”(OR=6.818,95%CI;1.225~37.948)3个因素具有统计学意义(P<0.05)。结果表明;绵阳市规模种猪场PVD场群流行率较低,以PoRV和PEDV感染为主;“饲料来源为自配”“司机协助场内人员共同上货卸货”“未要求对不进入场区的近场车辆彻底洗消”3个因素是规模种猪场PVD病原场间传播的潜在风险因素。因此,规模种猪场应尽量减少自配饲料的使用,并加强对近场司机及车辆的生物安全管理,预防发生PVD。

西藏地区牛病毒性腹泻流行特点、临床症状及防控措施分析

西藏地区气候高原,自然环境条件特殊,使牛病毒性腹泻疫情有其特殊性。通过对西藏地区牛病毒性腹泻流行特点,临床症状和防控措施等方面进行分析,以揭示该病在本地流行规律以及对畜牧业造成的危害。研究显示,牛病毒性腹泻在西藏地区的扩散与当地气候,环境,养殖模式和免疫水平等因素有密切关系。临床症状以急性腹泻,发热和食欲减退为主要特征,严重者会引起母牛流产,死胎和育成牛生长缓慢。对该病的防治措施主要有疫苗接种,生物安全管理和加强监测与检测,但是高寒地区特殊情况下的防治仍然面临着巨大的挑战。

牛病毒性腹泻性黏膜病防控措施解析

探讨综合防控措施在牛病毒性腹泻性黏膜病(BVD-MD)治疗中的效果及临床意义。方法 选取2023年3月至2024年3月我院确诊的60例BVD-MD病例,随机分为观察组和对照组,各30例。对照组采用常规治疗,包括抗病毒药物及对症治疗;观察组在此基础上增加疫苗接种、免疫增强剂应用、优化饲养环境及健康监测等综合防控措施。比较两组的平均治疗时间、治疗成功率、不良事件发生率、疾病复发率等指标,采用统计学方法进行分析。结果 观察组平均治疗时间为12.5±3.1天,显著短于对照组的16.8±4.2天(P<0.05)。治疗成功率为93.3%,高于对照组的76.7%(P<0.05)。不良事件发生率和疾病复发率分别为6.7%和10.0%,均低于对照组的23.3%和26.7%(P<0.05)。观察组的总体有效率、症状缓解率、生活质量改善率和治疗依从率均显著高于对照组(P<0.05)。结论 综合防控措施能够显著提高BVD-MD的治疗效果,缩短病程,降低不良事件和疾病复发率,同时改善牛的生活质量,为临床防控提供了科学依据。

牛病毒性腹泻黏膜病的诊断及防治

牛病毒性腹泻黏膜病(BVD-MD)是由牛病毒性腹泻病毒(BVDV)引起的一种广泛流行的传染性疾病,该疾病影响着全球牛群的健康和养殖效益。在我国,牛肉和奶制品的需求日益增加,养殖业的发展面临着疾病防控的挑战。根据《中华人民共和国动物防疫法》及相关畜牧业条例,必须对传染病采取预防、控制和消除措施,以减少疫病对畜牧业的威胁。

牛病毒性腹泻的治疗措施探究

近年来,随着养殖业的不断发展和养殖规模的扩大,牛病毒性腹泻的防治工作也日益受到社会各界的重视。牛病毒性腹泻是一种由病毒入体感染引起的疾病,传播性强,以肠道炎症为主,病牛会出现腹泻、水样稀便、粪便腥臭、体温升高等症状。本文探讨了牛病毒性腹泻的治疗措施,首先阐述了牛病毒性腹泻的流行特征;接着分析了其临床症状;随后探讨了牛病毒性腹泻的治疗措施及防控措施,旨在为牛病毒性腹泻的防治提供科学依据和实践指导。

牛病毒性腹泻的危害及科学有效防控措施分析

牛病毒性腹泻,亦称作牛病毒性腹泻黏膜病,是一种由牛病毒性腹泻病毒引起的传染性疾患。此病在牛只养殖密集区域广泛传播,已成为全球奶牛及肉牛产业中造成经济损失的关键因素,世界动物卫生组织将其列为需报告的动物疾病,并列入国际动物胚胎交流的病原名单,在我国该疾病也被归类为三类动物疫病,受到专门的监管。随着牛养殖业规模的不断扩大,引入外来品种的频率也随之上升。然而,在引进新品种的过程中,若缺乏严格的检疫和检验,将大大增加疾病传入的风险,对牛只健康构成威胁,特别是病毒性腹泻在牛群中的传播能力极强,一旦传入,往往会导致隐性带毒现象,使得该病在养殖场内周期性地扩散,所以需要养殖户认识到病毒性腹泻的危害,并完善相应的防控措施,做到早发现早处理。本次研究详细探讨了病毒性腹泻的流行病学临床症状病理学变化诊断方法和防治措施,旨在更加科学规范地开展疾病防治。

牛病毒性腹泻病毒E2蛋白的真核表达及间接ELISA抗体检测方法的建立

为建立检测牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)抗体的间接ELISA方法,利用昆虫细胞真核表达系统成功表达E2蛋白,将纯化后的E2蛋白作为包被抗原,用方阵滴定方法对影响ELISA的各个因素进行优化,并进行特异性、敏感性和重复性试验。结果表明,在昆虫细胞中表达了BVDV E2蛋白,Western blot证实目的蛋白可与BVDV阳性血清发生特异性反应。ELISA优化结果显示,E2蛋白最佳包被浓度为0.5μg/mL,最佳封闭液为1%明胶,最佳血清稀释度为1∶400,最佳血清作用方式为37℃作用30 min,酶标抗体的最佳作用方式为1∶2000稀释、37℃作用30 min,最佳底物作用时间为室温20 min,阳性临界值为OD 450≥0.423。与血清中和试验法进行比较,总符合率为97.8%,板内和板间重复性试验的变异系数均小于10%。该方法与牛常见病毒阳性血清均无交叉反应。说明建立的间接ELISA抗体检测方法特异性、敏感性和重复性良好,可用于大批量样本的临床检测和流行病学研究。

牛病毒性腹泻病毒E^(rns)-ELISA抗体检测试剂盒的制备

为建立快速检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的血清学方法,本试验以BVDV NADL毒株结构蛋白E^(rns)作为包被抗原,优化反应条件并组装BVDV酶联免疫吸附试验(ELISA)抗体检测试剂盒,通过重复性试验、灵敏性试验、符合率试验和保存期试验验证该试剂盒的准确性、灵敏性和稳定性。结果显示,抗原包被浓度为4μg/mL,1%酪蛋白溶液37℃封闭45 min,被检血清以1∶400稀释孵育30 min,兔抗牛HRP标记二抗以1∶20000稀释孵育30 min,TMB底物反应5 min时,ELISA的反应背景下降,区分度最好。优化后方法的批内重复性试验和批间重复性试验的变异系数均在10%以内,表明该试剂盒具有较好的稳定性;灵敏性试验结果显示,当阳性血清稀释度达到1∶6400时仍可以检测为阳性,说明该试剂盒灵敏度较高;该试剂盒与美国爱德士生物科技公司(IDEXX)BVDV总抗体检测试剂盒共同检测466份临床血清样品,两者总符合率为89.1%;保存期试验结果显示,第4个月时该试剂盒仍能检测到阳性血清,说明稳定性较好。综上表明,本试验利用E^(rns)蛋白建立的BVDV间接ELISA抗体检测试剂盒灵敏度高且重复性好,可为BVDV抗体检测和流行性调查提供新的方法。

河南省腹泻病死仔猪主要病毒性腹泻病原调查

为了解导致河南省仔猪病毒性腹泻的主要病原种类及分布特征,2022年在豫东、豫南、豫西、豫北、豫中等地区无害化处理厂采集临床腹泻病死仔猪的肠管及其内容物样品共计496份,采用三重荧光RT-PCR检测猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪轮状病毒(PoRV)、猪冠状病毒(PDCoV)及猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV),并分析不同季节、不同地区以及不同病毒混合感染情况。检测结果显示:496份腹泻病料样品中,PoRV、PDCoV阳性检出率(7.66%、8.27%)相对较高,SADS-CoV未被检出;不同季节统计结果显示,TGEV仅在春季检出,PEDV、PoRV在春、冬两季检出,PDCoV一年四季均有检出;不同区域检测结果显示,TGEV仅在豫东被检出,PEDV在豫北的阳性检出率最高,PoRV、PDCoV在豫西的阳性检出率(16.67%、26.67%)最高;病毒混合感染统计结果显示,以2种病毒混合感染为主,其中PEDV+PDCoV阳性检出率最高(1.81%)。结果表明,河南省仔猪病毒性腹泻主要发生在冬、春季节,PEDV、PoRV、PDCoV为主要病毒性病原,且存在混合感染情况,其感染存在一定的区域特征。本研究结果为河南省养猪场和畜牧兽医主管部门制定猪病毒性腹泻防控策略提供了数据支持。

河北省廊坊市牛主要病毒性腹泻病原感染状况检测及牛冠状病毒演化分析

牛病毒性腹泻病原严重危害畜牧业生产,BVDV、BoAstV、BCoV、MRV、BKoV、BoNeV、BNoV、BRV、BToV被认为是引起牛群腹泻的病原,不仅如此,BVDV、BCoV和BToV除了能引起消化道症状外还能引起呼吸道症状,BVDV不仅能引起消化道和呼吸道症状,还会导致母牛生殖功能异常,这些疾病对畜牧业造成巨大的经济损失。为了解牛主要病毒性腹泻病原流行情况,本次试验通过PCR检测方法对我国河北地区323份腹泻牛粪样品进行常见9种病毒性牛腹泻病原进行检测。结果显示,BVDV阳性检出率1.85%(6/323)、BCoV阳性检出率14.24%(46/323)、BRV阳性检出率57.89%(187/323)、BoAstV阳性检出率0.31%(1/323)、BoNeV阳性检出率10.84%(35/323)、BNoV阳性检出率4.33%(14/323)、MRV阳性检出率2.48%(8/323)、BToV阳性检出率4.64%(15/323)、BKoV阳性检出率11.76%(38/323)。混合感染共有76份,占比23.53%(76/323)。HBLF2302株的全基因序列、S、HE、N、M和E基因进行同源性和遗传进化分析发现,HBLF2302与BCoV/NMG1/2022基因同源性最高,为GIIb亚型。基于氨基酸序列比对和HBLF2302的S蛋白三级结构预测发现,在S蛋白中157号位突变为157T,854号位点突变为854I。318V为独特突变,改变了与侧链残基的作用力,与631C形成氢键连接。并发现中国株区别于其它地区的GⅡb亚型,位于ORF1a区域有三个独特位点。本研究丰富了牛腹泻病原的流行病学数据,为牛腹泻病的防控奠定基础。

猪病毒性腹泻有效防控——生猪产业无法回避的现实问题

猪病毒性腹泻并不是一种传染病,而是一大类感染消化道病毒病的统称,因其临床症状均导致腹泻而得来,其病源包括4种猪肠道冠状病毒和猪轮状病毒(PoRV)。猪肠道冠状病毒主要包括猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪德尔塔冠状病毒(PDCoV)和新发的猪急性腹泻综合征冠状病毒(SADS-CoV)。

一例牛病毒性腹泻病与大肠杆菌混合感染的诊治报告

在牛养殖中,病毒性腹泻病和大肠杆菌病均属于高发性疫病,分别由牛病毒性腹泻病毒和大肠杆菌引发,感染不分年龄和品种均可发生。一旦同时感染这两种病原,则可导致病牛消化道黏膜溃疡、糜烂、剧烈腹泻等,尤以犊牛病情较重,死亡率很高。通过临床症状和剖检变化易误诊,需进行实验室诊断。为明确掌握相关技术,提高防范风险的能力,降低感染发生率,笔者结合吉林省白城市通榆县一起肉牛病毒性腹泻病与大肠杆菌混合感染的报告,做以下阐述。

甘草锌联合布拉氏酵母菌散对轮状病毒性腹泻患儿心肌酶谱和免疫应答的影响

目的探讨甘草锌联合布拉氏酵母菌散对轮状病毒性腹泻患儿心肌酶谱和免疫应答的影响。方法选取2022年6月至2023年6月青海红十字医院收治的150例轮状病毒性腹泻患儿,根据随机数字表法分为对照组(n=75)、研究组(n=75)。对照组采用甘草锌联合双歧杆菌四联活菌片治疗,研究组采用甘草锌联合布拉氏酵母菌散治疗,比较两组的治疗总有效率、心肌酶谱、免疫应答指标。结果研究组治疗总有效率高于对照组(P<0.05);研究组治疗后的肌酸激酶、肌酸激酶同工酶、乳酸脱氢酶水平均低于对照组(P<0.05);研究组治疗后的CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平均高于对照组,CD8^(+)水平低于对照组(P<0.05)。结论甘草锌联合布拉氏酵母菌散治疗轮状病毒性腹泻患儿可改善心肌酶谱,调节免疫应答,值得推广。

牛病毒性腹泻诊断与防治研究进展

近年来,牛病毒性腹泻在世界范围内广泛流行,给养牛业造成了严重的经济损失。该病严重损害牛群的免疫机能和繁殖机能,传播速度快,死亡率高。本文主要从诊断方法、防治措施等方面对该病进行综述,以期为牛病毒性腹泻的防治提供参考。

奶牛病毒性腹泻的原因及中西医结合治疗

奶牛是重要的家畜资源,做好养殖工作对促进经济发展,满足市场需求具有重要意义。但现阶段存在奶牛病毒性腹泻疾病高发问题,对养殖业造成了严重的经济损失。针对该疾病,应重视奶牛病毒性腹泻的发病原因及治疗方法的探究。当前,中西医结合治疗的方法备受关注,通过发挥其技术优势能获得较好的应用效果。

基于重组牛病毒性腹泻病毒囊膜糖蛋白E2的间接ELISA检测方法建立

为建立一种检测牛病毒性腹泻病毒(BVDV)抗体的间接ELISA方法,本试验将纯化后的重组BVDVE2蛋白作为抗原包被96孔酶标板,采用方阵滴定法优化间接ELISA的各项反应参数初步建立检测方法,并进一步分析了该方法的特异性、敏感性和重复性。确定的最佳ELISA反应条件如下:抗原包被浓度为1.5μg/mL,1:100稀释待检血清于37℃孵育1 h,1:6 000稀释辣根过氧化物酶标记的兔抗牛IgG于37℃作用1 h,确定阴、阳性血清临界OD450 nm值分别为0.203和0.226。本研究建立的检测BVDV血清抗体的间接ELISA方法特异性强、敏感性高、重复性好,与商品化试剂盒的检测符合率达96%,该方法可以用于BVDV抗体的检测和试剂盒的进一步研制。

新疆某规模化肉牛场牛病毒性腹泻病毒分离与基因型鉴定

新疆许多规模化牛场存在牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的感染,且因病毒基因型具有多样性,给该病的防控、疫苗选择、净化带来了一定的困难,开展新疆地区规模化牛场BVDV基因分型鉴定,对BVDV防控具有重要的指导作用。采集BVDV胶体金抗原检测卡确定为阳性的犊牛抗凝血样品并分离淋巴细胞,在MDBK单层细胞上进行病毒分离,盲传5代,提取培养物RNA,以BVDV5′-UTR、N^_(pro)特异性引物进行逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测分析。结果显示,获得BL分离株1株,属于BVDV-1m亚型,研究结果丰富了新疆南疆地区规模牛场BVDV分子流行病学数据库。

山东地区1株牛病毒性腹泻病毒的分离鉴定及遗传进化分析

【目的】了解并掌握山东地区牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)流行毒株的生物学特性和遗传变异情况,为BVDV防控提供理论依据和技术支持。【方法】采集养牛场疑似BVDV感染样品制备组织上清液,利用RT-PCR方法进行病原鉴定,接种MDBK细胞进行病毒分离培养,采用间接免疫荧光试验(IFA)和电镜观察对分离毒株进行鉴定,对分离毒株全基因组进行分段扩增、克隆和测序,并采用Lasergene等软件分别对全基因组序列、N^(pro)和E2基因进行比对和遗传演化分析。【结果】病料样品BVDV特异性引物RT-PCR扩增得到大小约504 bp的目的条带,与预期大小一致。IFA结果显示特异性绿色荧光;电镜下可见直径约50 nm的病毒粒子,表明分离到1株非致细胞病变型BVDV毒株,命名为SDNF9株。分离株基因组全长为12232 nt,与BVDV参考毒株的全基因组核苷酸相似性为79.1%~93.8%,其中,与中国分离毒株22AH-1和澳大利亚毒株Bega-like的相似性最高,为93.8%;N^(pro)和E2蛋白氨基酸存在多个位点变异;SDNF9分离毒株与BVDV2型毒株和BVDV3型毒株处于遗传演化的不同分支,而与BVDV 1型毒株处于同一分支,属于BVDV 1c基因型。【结论】本研究成功分离到1株BVDV 1c流行毒株,并进行基因组和遗传演化分析,与中国分离毒株22AH-1亲缘关系最近,为山东地区牛病毒性腹泻的防控和疫苗研制提供数据和材料支持。

不同基因型牛病毒性腹泻病毒对BALB/c小鼠致病性研究

牛病毒性腹泻病毒(BVDV)是危害养牛业的重要病原。2021年本实验室从患有肺炎的牛肺中分离出1株BVDV(毒株编号为JS2201),经鉴定为1b亚型。为了评价该分离株的毒力与致病性,分别建立了分离株与参考株BVDV-1型Oregon C24V株、BVDV-2型C1602株BVDV感染BALB/c小鼠模型,通过检测攻毒后小鼠临床症状、体重变化、病毒血症情况、血液中白细胞与淋巴细胞的变化、组织器官的病理组织学变化及病毒载量,比较了分离株JS2201与1型和2型参考株的致病性差异。结果显示:BVDV分离株JS2201与参考株均能够成功感染BALB/c小鼠,攻毒BALB/c小鼠均形成病毒血症,导致血液中白细胞数量、淋巴细胞数量以及淋巴细胞百分比短暂下降;BVDV分离株JS2201株攻毒组小鼠肝脏、肾脏、肺脏、脾脏中BVDV载量要高于C24V、C1602株攻毒组;攻毒组小鼠均表现为间质性肺炎病变,JS2201株攻毒组与1型参考株C24V株攻毒组小鼠肺脏病理组织学变化相似,BVDV-2型参考株C1602株攻毒组小鼠肺脏病变更为严重。综上,本研究成功建立了不同亚型BVDV急性感染BALB/c小鼠的模型,且比较分析了分离株与参考株之间的致病性差异,为BVDV疫苗的研制以及致病机制的研究奠定了基础。

牛病毒性腹泻病毒诱导铁死亡对其复制水平的影响

本研究旨在探究牛病毒性腹泻病毒(BVDV)感染对牛肾细胞(Madin-Darby Bovine Kidney cells,MDBK)铁死亡的调控作用及其对病毒复制的影响。本研究通过激光共聚焦、Western blot、qPCR和电镜技术等技术检测BVDV感染MDBK细胞铁死亡发生与病毒复制水平,另外,使用铁死亡抑制剂Fer-1研究铁死亡对病毒复制和细胞炎性因子表达的影响。结果表明:BVDV(MOI=5)感染细胞较正常对照组细胞死亡率显著增加(P<0.05),感染细胞内Fe^(2+)和脂质过氧化水平较正常细胞显著升高(P<0.05),透射电镜检测可见线粒体表面积变小、嵴减少以及膜密度增加等铁死亡发生特征;将铁死亡抑制剂Fer-1预处理MDBK细胞后,可显著抑制BVDV感染病毒复制水平(P<0.05);此外,BVDV感染诱导铁死亡对MDBK细胞中IL-1β、IL-18以及IFN-β等炎性因子呈正调控效应。以上结果提示,BVDV感染可引起宿主细胞铁死亡,且铁死亡发生可显著促进病毒复制水平以及宿主细胞炎性因子表达。