黄褐毛忍冬提取物及其主要成分抗RNA病毒蛋白酶活性

目的研究黄褐毛忍冬抗HIV-1蛋白酶和组织蛋白酶L的活性。方法采用不同溶剂对黄褐毛忍冬进行提取,通过荧光法分析其提取物和主要成分抗RNA病毒活性。采用UPLC-HRMS法对黄褐毛忍冬化学成分进行定性分析。基于分子对接技术采用Surflex-Dock模块及Ligplot1.4.5软件分析黄褐毛忍冬主要成分与HIV-1蛋白酶和组织蛋白酶L结合情况及相互作用。结果黄褐毛忍冬水提物以及30%、60%、85%甲醇提物对HIV-1蛋白酶有较好的抑制作用,IC_(50)值为0.079~0.21 mg/mL,其中水提物作用最强。水提物和60%醇提物抑制组织蛋白酶L浓度分别为0.6、0.91 mg/mL。绿原酸、木犀草素、咖啡酸等与相关受体分子结合较好。结论黄褐毛忍冬具有较好抗RNA病毒蛋白酶的优势,尤其是对HIV蛋白酶的抑制作用,具有一定的开发价值。

论EB病毒蛋白Rta在鼻咽癌进展中的潜在研究价值

鼻咽癌在广西地区高发,发病部位隐蔽且发病早期没有明显症状,因此常常被误诊、漏诊等,近年来多项研究发现早期诊断可以使鼻咽癌生存率提高,因此早筛和早诊就成为了鼻咽癌治疗过程中的关键环节。EB病毒裂解早期,基因BRLF1的编码产物被称为Rta 蛋白,这是EB病毒从潜伏期转向裂解期的关键调控因子之一,能引起早期基因的裂解表达,最终引发EB病毒裂解继而感染。故在鼻咽癌的辅助诊断及相应的临床管理具有潜在研究价值。

植物病毒蛋白磷酸化的研究进展

磷酸化是真核细胞中常见的一种翻译后修饰方式,它对生物体内多种代谢活动和细胞信号转导过程起着调控作用。植物病毒蛋白通过磷酸化和去磷酸化修饰调节蛋白质的生物活性,从而影响细胞内的生物信号传递。磷酸化修饰的植物病毒蛋白参与调控病毒的侵染、病毒RNA的合成、病毒的RNA沉默以及调控宿主基因的表达。近年来,植物病毒蛋白磷酸化的分子机制得到了广泛和深入的研究。本文总结了植物病毒蛋白磷酸化修饰的位点、磷酸化鉴定方法及其生物学功能,为磷酸化在植物和病毒相互作用中的生物学功能提供了参考。

斑点型痘病毒蛋白对前列腺癌分层治疗的探讨

前列腺癌(prostate cancer,PCa)已经成为男性第二大常见癌症,并且随着人口老龄化的不断发展,PCa的发病率和死亡率也呈现上升的趋势,其发生发展的机制也较为复杂。雄激素受体(androgen receptor,AR)信号通路的过度激活不仅促进去势抵抗性前列腺癌(castration-resistance PCa,CRPC)的发生,还对耐药性的产生起了关键作用。目前的治疗手段较为有限且伴随较多的不良反应,因此随着精准靶向治疗的不断发展,需要寻找新的治疗方案来提高疗效。已有大量研究证明,E3泛素连接酶斑点型痘病毒蛋白(speckle-type POZ protein,SPOP)与AR存在密切的相互作用关系,从而对PCa的发生发展起重要作用。因此本文将结合近年的研究论文,阐述SPOP的基本结构与功能,总结SPOP突变对PCa的影响,并从SPOP出发探讨对PCa进行分层治疗的可能性。SPOP发生突变后,可显著影响AR信号相关的通路、DNA损伤应答、免疫应答等的正常生理功能,产生不同的病理状况;而在SPOP野生型的状况下,也会发生其他基因融合事件,致应激反应蛋白失衡等病理状况,进而诱导PCa的发生发展。因此,在治疗早期对PCa患者进行基因检测,根据分子分型确定不同的个性化分层治疗方案,这可能对改善PCa的预后状况产生有利影响。

杏鲍菇抗烟草花叶病毒蛋白的筛选

采用离子交换层析和凝胶层析方法 ,从杏鲍菇干样中分离得到多个蛋白组分 ,经枯斑寄主检测 ,发现多个蛋白组分都有抗烟草花叶病毒 (TMV)的活性 ,对TMV的抑制率均在 70 %以上 ,高者可达 99%。其中xb68Ab已得到了纯化 ,分子量约为 2 3 7kD ,在心叶烟和苋色藜上它对TMV侵染的抑制率分别达到 99 43%和 98 9%。

抗病毒蛋白抑制植物病毒的应用前景

探索应用外源性抗植物病毒蛋白进行植物病毒病的防治,已经取得了一定的成效;但不同来源的抗植物病毒蛋白,它们的作用机理是不完全一样的.根据近年的研究结果,对这类蛋白的抗病毒作用的机理进行了综述,并对抗病毒蛋白的应用前景进行了展望.

乙型和丙型肝炎病毒蛋白对于细胞周期素A的调节研究

0引言细胞周期(cell cycle)是细胞分裂增生的经典概念,过去的研究主要集中在细胞周期的形态学描述上.随着细胞周期素(cyclin)和细胞周期素依赖性激酶(cyclin dependentkinase,CDK)的发现及其作用机制的研究进展,使得我们对于细胞周期调节有了分子生物学水平上的深入认识.细胞周期的分子生物学调节机制的研究,也促进了肿瘤形成的分子生物学机制的研究,同时对于肿瘤病毒(oncogenic virus)引起正常细胞的恶性转化机制的研究具有十分重要的促进作用.

蓝藻抗病毒蛋白N

蓝藻抗病毒蛋白N(cyanovirin N)是Boyd等 1997年在蓝藻中发现的一种抗病毒蛋白 ,其抗病毒机制是与病毒表面衣壳蛋白上的甘露寡糖结合 ,阻止病毒与宿主细胞表面的受体结合。由于近年不断发现它对各种严重的RNA逆转录病毒的抗病毒活性而倍受关注。

乙型和丙型肝炎病毒蛋白反式激活作用机制及其意义的研究进展

编者按乙型肝炎病毒(HBV)和丙肝炎病毒(HCV)感染不仅引起急性、慢性病毒性肝炎,而且与肝纤维化(LF)、肝细胞癌(HCC)的发生、发展密切相关.

乙型和丙型肝炎病毒蛋白对蛋白酪氨酸激酶信号转导的影响

0 引言生物细胞每时每刻都在接触着来自细胞内或者细胞外的各种各样信号。信号只是个诱因,生理反应是信号作用于细胞的最终结果。相同的信号作用于不同的细胞可以引发完全不同的生理反应;不同的信号作用于同一种细胞却可以引发出相同的生理反应。

乙型和丙型肝炎病毒蛋白对蛋白酪氨酸激酶信号转导的影响

0引言 生物的细胞每时每刻都在接触着来自细胞内或者细胞外的各种各样信号.信号只是个诱因,生理反应是信号作用于细胞的最终结果.相同的信号作用于不同的细胞可以引发完全不同的生理反应;不同的信号作用于同一种细胞却可以引发出相同的生理反应.细胞的一切生命活动都与信号有关,信号是细胞一切活动的始作俑者.因此,对信号转导的研究非常重要,非常有用.由于肝炎病毒可以影响细胞信号转导,引起细胞的病变及恶性转化[1],而蛋白酪氨酸激酶是重要的细胞信号转导激酶,因此深入研究二者的相互关系对肝炎病毒的发病机制会有进一步的了解.

中国商陆抗病毒蛋白基因的克隆及其转化辣椒

根据美洲商陆抗病毒蛋白基因序列设计引物,从中国商陆(Phytolacca acinosa)叶片基因组DNA扩增克隆缺失无毒型中国商陆抗病毒蛋白基因(PacPAP1),构建该基因植物表达载体,采用农杆菌介导的叶盘法转化辣椒,对转基因植株进行分子检测,TMV及CMV人工接种鉴定,25d后统计发病情况。结果表明:克隆得到缺失无毒型PAP基因PacPAP1,大小为714bp,与美洲商陆抗病毒蛋白基因(Pam-PAP)的同源性为99.7%;得到了PacPAP1整合入辣椒基因组中的阳性植株;接种TMV、CMV的阴性对照植株都明显发病,转PacPAP1植株未出现症状,说明转基因辣椒植株可获得抗TMV和CMV材料。

混合感染后杆状病毒间的增效作用──病毒蛋白及核酸的初步分析

AsNPV＋HasNPV、AsNPV＋HaNPV、AsNPV＋PsNPV分别感染烟青虫、棉铃虫和粘虫幼虫，对分离到的核型多角体病毒（AsNPV＋HasNPV）－Helicoverpaassulta、（AsNPV＋HaNPV）－H．armigera和（AsNPV＋PsNPV）－Pseudaletiaseparata，经电镜观察，多角体蛋白及病毒粒子蛋白SDS－PAGE电泳，病毒核酸的限制性内切酶酶解分析等研究，证明各病毒的多角体形态不规则，大小差异极大，病毒粒子为杆状，（AsNPV＋HasNPV）－H．assulta和（AsNPV＋HaNPV）－H．armigera病毒粒子有单粒和多拉包埋类型，（AsNPV＋PsNPV）－P．separata为多粒包理型。各病毒的多角体蛋白基本上只有一种多肽，分子量为25000道尔顿左右。（AsNPV＋HasNPV）－H.assulta、（AsNPV＋HaNPV）－H.armigera和（AsNPV＋PsNPV）－P．separata的病毒粒子分别有10、14、5条多肽，分子量大小在13500～98000，13000～88000，18500～52000道尔顿之间。病毒核酸经EcORI，HindIII，HindIII＋BamHI酶解，其DNA的酶切位点，大小及DNA的总分子量与AsNPV和原寄主的Has－NPV，HaNPV和PsNPVDNA的酶切图谱存在一定差异，混合病毒侵染昆虫后新复制的病毒核酸发生一定的变化，从而导致病毒蛋白和病毒形态的变化。混合感染后AsNPV对Has－NPV、HaNPV和PsNPV的侵染有明显?

榆黄蘑中一种抗病毒蛋白的纯化及其抗TMV和HBV的活性

采用阴离子交换层析和凝胶层析方法从新鲜食用菌榆黄蘑 (Plearotuscitrinopileatus)中进行了抗病毒蛋白的纯化 ,结果获得了一个纯化蛋白YP4 6 4 6 ,经SDS PAGE可确定其分子量为 2 7.4kD。以半叶法在枯斑寄主心叶烟上检测该蛋白对烟草花叶病毒 (TMV)的抑制率 ,发现有较好的抗TMV活性 ,其抑制TMV的中浓度为 0 .2 4 μg/mL。同时以HepG2 .2 .2 .15细胞株为模型 ,对所获得的蛋白进行体外抗乙型肝炎病毒效果的评价。结果表明该蛋白对HBsAg的 5 0 %抑制时的浓度为 0 .0 8μg/mL 。

金针菇中一种抗病毒蛋白的纯化及其抗烟草花叶病毒特性

通过DEAE-SepharoseFF离子交换层析、Superdex75凝胶层析和高效液相色谱,从金针菇中获得抗烟草花叶病毒蛋白Zb,经SDS-PAGE确定该蛋白相对分子质量为30ku.采用半叶法在心叶烟上检测抗烟草花叶病毒活性,发现该蛋白抑制中质量浓度为4.4μg·mL-1.

美洲商陆抗病毒蛋白基因遗传转化甘蔗的研究

构建叶片特异表达启动子rbcs驱动的美洲商陆抗病毒蛋白基因PAP-c的植物表达载体PNRPL,冻融法转化农杆菌EHA105后,通过农杆菌介导法侵染甘蔗优良品种ROC22的胚性愈伤组织,经PPT抗性筛选以及PCR鉴定,共获得了24株转化植株,对其中的5株进行Southern杂交检测,有2株呈阳性,初步证明外源基因已整合到甘蔗基因组中;对其接种甘蔗花叶病毒,初步结果表明获得的转化植株对甘蔗花叶病毒具有一定的抗性。

从草鱼细胞分离到一种抗出血病病毒蛋白因子的研究

从人工诱变筛选的草鱼抗出血病病毒AHZC88细胞中检测到一种高效的抗病毒因子,经(NH_4)_2SO_4沉淀,PAGE洗脱和HPLC分离,得到纯化的抗病毒蛋白。该蛋白在出血病病毒的敏感细胞株ZC7901和CP80上表现出很强的抗病毒活性,平均滴度Log_4CPEI_(50)/0.1 ml在7.10±0.10(±S)以上。理化性质研究表明,该因子100000g离心不沉降,抗酸,不耐热,等电点为5.2。转译后分子量为29kD,经糖基化修饰成为38kD和36kD两种糖肽,未检出明显的磷酸化修饰,其沆病毒作用依赖于细胞内RNA和蛋白质的合成,并存在一定的细胞或病毒特异性。该因子在鱼体中有明显的抗病毒感染作用,能降低发病率,延缓发病时间。

蓝藻抗病毒蛋白N基因的原核表达及重组蛋白的纯化和复性

目的:构建蓝藻抗病毒蛋白(CV-N)基因原核表达载体,表达、纯化并复性其重组蛋白。方法:根据GenBank中CV-N的全基因序列,人工合成CV-N序列,进行PCR扩增。将扩增的PCR产物克隆至原核表达载体pET30a(+)上,构建重组表达载体pET30a-CV-N,测序鉴定后,转化E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达蛋白,SDS-PAGE和Westenblot鉴定表达产物,Ni Sepharose柱纯化目的蛋白,稀释法复性蛋白。结果:重组质粒pET30a-CV-N测序结果显示,插入片段为303 bp,与GenBank中的CV-N基因序列完全相同。经IPTG诱导的CV-N基因可在E.coli中高效表达;SDS-PAGE分析表明,相对分子质量11000处出现一条新条带,主要以包涵体形式存在,37℃诱导2、4、6、8 h后,表达蛋白分别占菌体蛋白的3.87%、19.10%、33.98%和31.58%。Western blot结果显示,重组蛋白能与抗His单抗特异性反应。将诱导6 h的菌体超声破碎后,Ni Sepharose柱纯化,相对分子质量11 000处显示出清晰的单一条带,且蛋白复性效果良好。结论:成功地构建了CV-N原核表达载体,表达并纯化出重组蛋白,为深入研究其抗病毒的活性奠定了基础。