乳化植物甾醇对福建白兔生长性能、肠道形态及盲肠菌群与代谢物的影响

本试验旨在研究乳化植物甾醇对福建白兔生长性能、肠道形态及盲肠菌群与代谢物的影响。选取健康、体重相近的40日龄福建白兔150只,随机分为5组,每组30只(公母各占/1/2),单笼饲养。对照组饲喂基础饲粮,试验组A在基础饲粮中添加20 mg/kg的普通植物甾醇,试验组B、C、D在基础饲粮中分别添加10、20和40 mg/kg的乳化植物甾醇,试验期为60 d。饲养试验结束后采样,测定各组的生长性能和肠道形态、盲肠菌群组成与代谢物组成及相对含量。结果显示:1)与对照组和试验组A相比,试验组B、C、D福建白兔的腹泻率和死亡率明显下降,平均日采食量、平均日增重、料重比等各项生长性能指标均有一定程度的改善,其中试验组C的平均日增重、料重比与其他各组的差异达到显著水平(P<0.05)。2)与对照组相比,试验组C的十二指肠绒毛长度与试验组B、C的空肠绒毛长度显著提高(P<0.05),试验组A、B、C、D十二指肠的隐窝深度与试验组B、C、D空肠的隐窝深度显著降低(P<0.05),试验组A、B、C、D十二指肠和空肠的绒毛长度与隐窝深度比值(V/C值)与试验组B、C、D回肠的V/C值显著增加(P<0.05);试验组A空肠、回肠的V/C值显著低于试验组B、C、D(P<0.05);试验组C十二指肠的绒毛长度、试验组C、D十二指肠的V/C值显著高于其他各组(P<0.05)。3)试验组B、C、D盲肠菌群组成与对照组和试验组A相差较大,试验组B、C、D在门水平上以厚壁菌门(Firmi-cutes)、拟杆菌门(Bacteroidota)为主,厚壁菌门/拟杆菌门随着乳化植物甾醇添加剂量的增加呈现先增加后略微下降的趋势;在属水平上,Muribaculaceae、瘤胃球菌科NK4A214组(Ruminococ-caceae_NK4A214_group)、阿克曼氏菌属(Akkermansia)、梭菌纲UCG014(Clostridia_UCG-014)、梭菌纲vadinBB60组(Clostridia_vadinBB60_group)为各组优势菌属。4)添加植物甾醇的各试验组盲肠中糖和醇、有机酸、氨基酸等代谢物的相对含量比对照组增加,部分脂类和类脂类的相对含量下降,类激素物质的相对含量增加。Spearman相关性分析表明,这些代谢物与产粪甾醇真杆菌属(Eubacterium_coprostanoligenes)和瘤胃球菌科V9D2013组(Ruminococcaceae_V9D2013_group)密切相关。综上所述,饲粮中添加乳化植物甾醇可降低福建白兔的腹泻率和死亡率,提高平均日采食量和平均日增重,降低料重比,有利于改善肠道形态和盲肠菌群组成,增加盲肠中代谢物的相对含量,特别是短链脂肪酸;乳化植物甾醇添加剂量为20 mg/kg时对福建白兔生长性能和肠道黏膜形态完整性的改善效果最好,此剂量为福建白兔饲粮中的乳化植物甾醇的最佳添加剂量。

新西兰白兔BMP 15基因的真核表达载体构建、表达模式及其在卵巢组织的表达

旨在获得新西兰白兔BMP 15基因序列及其组织表达规律,构建其真核表达载体,预测BMP15的生物学功能。本研究选择180日龄性成熟的健康新西兰白兔作为研究对象,采用RT-PCR技术扩增BMP 15基因CDS区序列,利用T4连接方法将目的片段连接至线性化的Pmcherry-N1和pCMV-Myc空载体,构建真核表达载体,利用生物信息学分析其编码蛋白的性质及结构。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术与Western blotting技术检测pCMV-Myc-BMP 15过表达情况。接下来,使用qRT-PCR检测BMP 15基因在不同组织中的表达水平。激光共聚焦方法检测BMP 15基因的亚细胞定位。利用免疫荧光技术检测内源BMP15在新西兰白兔卵巢组织定位情况。结果表明:克隆得到新西兰白兔BMP 15基因CDS区序列长1182 bp,PCR及测序结果表明pCMV-Myc-BMP 15和Pmcherry-N1-BMP 15真核表达载体构建成功。生物信息学分析显示,BMP 15基因编码393个氨基酸;BMP15蛋白不稳定系数为55.32,等电点大小为9.69,是一种稳定的碱性蛋白质。BMP15蛋白共有26个磷酸化位点,15个糖基化位点,存在信号肽,不存在跨膜结构域。系统进化树表明,新西兰白兔与猪亲缘关系最近,与鸡的亲缘关系最远。二级结构和三级结构分析结果表明,BMP15蛋白主要由α-螺旋(38.68%)、无规则卷曲(37.4%)、延伸链(15.52%)、β-转角(8.40%)组成,为混合型蛋白。蛋白互作关系预测发现,BMP15蛋白与FSHR、FIGLA、BMPR1B、AMHR2、NOBOX等卵巢生长发育的相关蛋白之间存在相互作用。不同组织表达分析显示,BMP 15基因在卵巢组织中特异性表达;激光共聚焦结果显示,BMP15主要存在于在细胞质中。将pCMV-Myc-BMP 15转染至HEK293T细胞内,BMP15的mRNA水平和蛋白水平均显著上调。卵巢组织免疫荧光检测结果显示,BMP15主要定位在卵巢颗粒细胞的细胞质中。本研究成功构建了BMP15的真核表达载体,对BMP 15基因及其编码的蛋白的理化性质和生物学特性进行了预测分析,在HEK293T细胞内成功过表达,并得到了该基因的亚细胞定位情况、组织表达情况及在卵巢组织的分布情况。为后续开展BMP 15基因在卵巢生长发育中的功能及机制研究提供了理论依据。

推拿滚法治疗白兔股四头肌损伤模型的效果观察

目的:分析应用推拿滚法干预股四头肌损伤白兔对其血清炎症因子表达水平的影响。方法:健康成年新西兰大白兔30只,雌雄各半,随机分为健康组、模型组、干预组,每组10只,健康组实验动物不做任何处理,作为正常对照;模型组和干预组实验动物用自制重力铅锤打击兔右后肢股四头肌肌腹中段,建立股四头肌损伤模型;干预组于造模后第8天开始,用推拿手法对白兔进行局部滚法治疗,模型组不进行后续操作。干预结束后取3组实验动物血清样本,用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清中白介素1β(IL-1β)、IL-6、IL-8、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、一氧化氮(NO)和C-反应蛋白(CRP)含量的统计学差异。结果:与健康组比较,模型组和干预组股四头肌损伤白兔血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、NO和CRP水平显著升高(P<0.05);推拿滚法干预结束后,与模型组相比,干预组的股四头肌损伤白兔血清IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、NO和CRP水平显著下降但仍较健康组升高(P<0.05)。结论:推拿滚法能通过调节IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α、NO和CRP炎性细胞因子的表达水平,减轻股四头肌炎症反应,改善受损股四头肌组织。

Vc-獭兔、日本大耳白兔与新西兰白兔血液蛋白多态性研究

为给加速 Vc-獭兔育种提供理论依据 ,利用垂直板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术对 Vc- 系、 系獭兔、日本大耳白兔和新西兰白兔血液中的红细胞酯酶 (Es-1、Es-2和 Es-3 )、血清前转铁蛋白 (Prt)、后白蛋白 (Po)等 5个蛋白位点的多态性进行了测定 ,结果表明 :在 4个群体中 ,Es-1、Es-2、Es-3和 Po各有 3种表型 ,分别受 2个共显性等位基因控制 ,Prt有 6种表型 ,受 3个共显性等位基因控制。计算表型频率及基因频率。并根据基因频率计算遗传距离和聚类分析 ,分析结果 :Vc- 系、Vc- 系獭兔的亲缘关系最近 ;Vc-獭兔与日本大耳白兔的亲缘关系较近 ,与新西兰白兔的亲缘关系较远 ,日本大耳白与新西兰白兔的亲缘关系最远。

日本大耳白兔、新西兰白兔的遗传分化研究

应用平均基因杂合度、平均基因纯合度、等位基因有效数、基因均质度、Lewontin的Shannon信息测度 ,对日本大耳白兔、新西兰免两个群体存在的血液蛋白位点的基因频率进行遗传分析 ,研究表明 :日本大耳白兔的基因杂合度、等位基因有效数指标和Shannon信息测度值均高于新西兰白兔 。

福建白兔与新西兰白兔生长和生化指标比较

【目的】了解福建白兔的生长与生化特性及其与新西兰白兔的差异,为进一步开发利用福建白兔提供科学数据支持。【方法】测定福建白兔与新西兰白兔不同日龄的生长发育情况和90日龄的生化指标,并分别进行品种内性别比较和品种间比较。【结果】福建白兔公兔体重均大于同期母兔体重但差异不显著,35~90日龄日增重公兔显著高于母兔(P<0.05)。两个品种兔相比,90日龄福建白兔的体重、体长、胸围、耳长、耳宽、免疫球蛋白IgM、IgG、球蛋白、谷氨酰转肽酶、总胆固醇、低密度脂蛋白都低于新西兰白兔,且除低密度脂蛋白差异显著外(P<0.05),其他差异极显著(P<0.01);而福建白兔白蛋白、乳酸脱氢酶和总胆红素极显著高于新西兰白兔(P<0.01)。【结论】福建白兔与新西兰白兔相比,其体型小,生长速度慢,血液生化指标具有总胆固醇低、低密度脂蛋白低和白蛋白高等优点。

WHBE兔血气-电解质分析及与日本大耳白兔和新西兰白兔比较研究

目的探讨WHBE兔、日本大耳白兔和新西兰白兔血气、电解质指标的差异性。方法取WHBE兔、日本大耳白兔和新西兰白兔经耳中动脉取肝素抗凝血，在NOVA血气电解质分析仪上测定血气、电解质指标。结果与日本大耳白兔比较，WHBE兔pH值、PCO2、PO2、SO2、BE-ECF、BE-B、SBC、HCO3^-、TCO2、a／A和P02／FI11个指标均明显低于日本大耳白兔（P〈0．05，P〈0．01），而Osm、Na^＋和Mg^＋＋明显高于日本大耳白兔（P〈0．01）；与新西兰白兔比较，WHBE兔pH值明显低于新西兰白兔（P〈0．01）。而Mg^＋＋明显高于新西兰白兔（P〈0．01）。结论上述结果为WHBE兔标准化提供可靠的生物学数据，同时为WHBE兔在呼吸系统和心血管疾病中的应用提供了实验依据。

小白兔变绿了

大家好,我是一只快乐的小白兔。我很爱吃青菜,青菜是我最爱的食物。爸爸总想让我尝一尝其他食物。“不,谢谢。我想再也没有比青菜更美味的食物啦!”青菜啊青菜,可口又多汁,新鲜又翠绿,味道真好啊!当我的肚子里满满的都是青菜时,我就是一只快乐的小白兔。

馋嘴的小白兔

兔妈妈给小兔子们买了一些饮料和食品,它们的摆放是有规律的,馋嘴的小白兔很快就喝完了一瓶饮料,还吃完了一块蛋糕和一根雪糕。请你找到规律,并回答问题。

可爱的小白兔

“小白兔白又白,两只耳朵竖起来,爱吃萝卜爱吃菜……”一看到姥姥家的小白兔,我就会情不自禁地哼唱起来。它可爱极了,毛雪白雪白的,好像天边飘下来的一个云团。耳朵又细又长,白里透着粉,高高地竖着,随时聆听着周围的动静。眼睛红彤彤的,像两颗红宝石。

四川白兔和德国白兔繁殖配种能力及产前后生殖激素水平变化比较

分别观测成年四川白兔和德国白兔母兔发情配种行为、发情和产后外生殖器色泽、不同发情征状、配种效果及产前后生殖激素水平变化。结果表明：四川白兔发情盛期易配种，受胎率达９６％；发情后期也有一定的配种受胎能力，产后易血配，其受胎率为７８．９５％。德国白兔发情盛期受胎率为６６．６７％，发情后期受胎率为０，产后血配受胎率为３０．３０％；产前后孕酮水平明显由高降低，说明四川白兔具有易血配的特性。

豫丰黄兔与新西兰白兔、哈尔滨大白兔增重比较

对豫丰黄兔与新西兰白兔、哈尔滨大白兔进行增重对比试验,结果表明:豫丰黄兔在增重、饲料转换率方面都略高于新西兰白兔,而稍低于哈尔滨大白兔(P>0.05)。说明豫丰黄兔具有良好的生产能力和饲料转换能力。

德国白兔泌乳特性的观测

德国白兔是齐卡(ZIKA)配套品系(种)之一,主要用作生产母系兔,因此,繁殖性能作为其主要选择指标。1986年底引入我所后,除对其产仔数、21天窝重、断奶窝重等指标观测较多外,对其泌乳特性尚未进行细致研究。本试验就德国白兔哺乳特性和泌乳规律进行了测定,以便为有效利用德国白兔,提高其繁殖性能,制定合理的饲养管理措施提供依据,同时积累肉兔品种泌乳力和哺乳特性的资料。

发光二极管630nm红光和460nm蓝光照射对日本大耳白兔皮肤创面愈合的影响

目的观察发光二极管(LED)630 nm红光和460 nm蓝光照射对日本大耳白兔皮肤创面愈合的影响。方法采用日本大耳白兔8只,建立兔背部皮肤创伤模型,每只兔子3个伤口,分别给予红、蓝光距离15 cm垂直照射(15 min/次)和自然愈合处理。照射至创伤后第21天,观察各组创面愈合数目、愈合面积,计算创伤愈合面积百分比,比较两种光源的治疗作用;HE染色观察新生组织结构;Masson染色观察胶原纤维增生情况;免疫组织化学分析新生皮肤纤维细胞生长因子(FGF)、表皮生长因子(EGF)、内皮细胞生长因子(CD31)、增殖细胞核抗原(Ki-67)及炎性细胞因子(CD68)的表达情况。结果红光组、蓝光组和对照组的愈合率分别为50.0%(4/8)、25.0%(2/8)和12.5%(1/8)。自造模后第12天起,红光组伤口的愈合面积百分比均明显高于蓝光组及对照组(P<0.05或P<0.01)。建模后第21天,红光组新生皮肤厚度为(2.95±0.34)mm,明显高于对照组的(2.52±0.42)mm(F=3.182,P=0.016)。胶原纤维平均光密度为0.15±0.03,明显高于蓝光组的0.09±0.01(F=7.316,P=0.012)和对照组的0.07±0.01(F=7.316,P=0.003)。免疫组织化学检测结果显示,红光组的EGF、FGF、CD31抗原、Ki-67表达较蓝光组和对照组明显增多,CD68较蓝光组和对照组明显减少(P<0.05或P<0.01)。结论 LED红光照射可促进日本大耳白兔皮肤创面愈合,其可能是通过引起皮肤表皮细胞和血管内皮细胞生长及纤维组织增生来促成的。

头孢曲松治疗大白兔实验感染鼠疫疗效观察

目的观察不同剂量头孢曲松对鼠疫的治疗效果。方法将80只新西兰大白兔随机分为对照组和治疗组,治疗组按给不同剂量的头孢曲松(400、150、50mg/kg)分为3组。强毒鼠疫菌141株,37℃培养24 h,将培养物稀释成含菌20亿/ml,在大白兔鼠鼷部皮下接种,每只1 ml。24 h后治疗组按400、150、50 mg/kg静脉注射头孢曲松,每天分2次给药,连续给药9 d。观察4组动物精神状态、食量、饮水、被毛、并测量体温,死亡动物取腺、肝、脾、肺、心做鼠疫细菌学培养。存活动物于停药后第9天心脏采血并处死,进行鼠疫细菌学培养和间接血细胞凝集试验(IHA)。结果对照组动物全部死亡,各脏器细菌学培养均分离到鼠疫菌。治疗组大白兔死亡21只,头孢曲松400、150、50 mg/kg组的治愈率分别为45．16%、80．00%、93．30%,组间比较差异有统计学意义(X^2=17．395,P＜0．005)。存活的大白兔在停药后第9天全部处死,各脏器鼠疫细菌学培养阴性,IHA均为阳性,滴度介于1：40～1：20 480。结论头孢曲松可用于鼠疫的临床治疗,但要注意治疗剂量,剂量过高同样会降低治愈率,增加死亡率。

四川白兔的氨基酸组成分析及营养价值评价

分析了四川白兔不同日龄、不同部位的氨基酸组成,探讨其营养价值,以四川白兔的腿部肌、背最长肌、腹部肌为实验材料,采用盐酸水解法,使用日立L-8900全自动氨基酸分析仪进行测定。结果表明,四川白兔肌肉蛋白质至少由17种氨基酸组成,其中包含7种人体必需氨基酸。各个部位的氨基酸总量、必需氨基酸总量、必需氨基酸与总氨基酸的比值、呈味氨基酸总量总体均随着日龄的增加而增加,腿部肌和背最长肌的必需氨基酸占总氨基酸的比例优于联合国粮农组织(Food and Agriculture Organization,FAO)/世界卫生组织(World Health Organization,WHO)提出的推荐值,属于优质蛋白质。采用氨基酸评分(amino acid score,AAS)、化学评分(chemical sore,CS)、必需氨基酸指数(essential amino acid index,EAAI)对四川白兔肌肉蛋白质的营养价值进行了评价,发现多数必需氨基酸的含量高于FAO/WHO推荐的氨基酸模式含量,低于全鸡蛋模式中氨基酸的含量,但AAS和CS均显示,四川白兔的第一限制性氨基酸为蛋氨酸和胱氨酸,第二限制性氨基酸为缬氨酸。这些结果表明,四川白兔具有较高的营养价值。

福建白兔血液生理生化指标的测定

为给福建白兔的饲养管理、品种选育、肉质研究和临床诊疗提供依据,从血液理化特性方面研究该品种的种质特征,采用全自动血液分析仪和全自动生化仪对福建白兔的血液生理生化指标进行测定,并将雌雄福建白兔进行比较。结果表明,血液生理指标中只有红细胞分布宽度(SD)表现为雌雄差异显著(P<0.05),其他指标均无显著差异(P>0.05);雌雄福建白兔生化指标中,雄兔的总胆固醇(CHOL)、低密度脂蛋白(LDL)、氯(Cl)都低于雌兔且差异极显著(P<0.01),高密度脂蛋白(HDL)、肌酐(CREA)、谷丙转氨酶(ALT)、镁(Mg)、阴离子间隙(AG)差异显著(P<0.05),其他指标均差异不显著。经过统计分析,建立了福建白兔血液生理生化参考值,为福建白兔的疾病诊断、饲养管理、保种选育等临床和科研工作提供基础资料和数据。

WHBE兔与日本大耳白兔腹泻型肠易激综合征模型的肠道菌群研究

目的比较分析WHBE兔和日本大耳白(Japanese white rabbit,JW)兔腹泻型肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)模型肠道菌群的差异性。方法 WHBE兔和JW兔各16只,按品系随机分为两组,即正常对照(NC)组和IBS模型组,每组8只。采用湿热应激复合番泻叶方法建立腹泻型IBS兔模型,观察实验兔的腹围指数、粪便含水量、结肠转运功能,处死后分别取结肠组织和结肠内容物进行病理组织学观察和肠道菌群多样性分析。结果与NC组比,IBS模型兔均出现腹围指数和粪便含水量增加,结肠转运时间缩短,但结肠组织未见病理性改变;同时IBS模型兔Shannon指数和Chao1指数均显著下降(P<0.05)。根据OTU分类分析的结果,厚壁菌门和拟杆菌门为兔肠道菌群的绝对优势菌群。与NC组比较,WHBE兔IBS模型组厚壁菌门、疣微菌门、绿弯菌门、Akk菌属、链球菌属均明显下降(P<0.05,P<0.01),拟杆菌门和rc4-4菌属丰度显著上升(P<0.05,P<0.01);而JW兔IBS模型组优杆菌属和罕见小球菌属均显著上升(P<0.05),乳酸杆菌属、粪杆菌属、韦荣球菌属和链球菌属均显著下降(P<0.05)。与JW兔NC组比,WHBE兔NC组厚壁菌门、Odoribacter菌属、韦荣球菌属、链球菌属、颤螺旋菌属、Pseudoflavonifractor菌属较低(P<0.05,P<0.01),拟杆菌门、疣微菌门、优杆菌属、粪杆菌属、Akk菌属较高(P<0.05,P<0.01)。与JW兔IBS模型组比,WHBE兔IBS模型rc4-4菌属、粪杆菌属、梭菌属的丰度较高(P<0.05,P<0.01),而厚壁菌门、多尔氏菌属、粪球菌属和罕见小球菌属的丰度则较低(P<0.05,P<0.01)。结论 IBS模型兔存在肠道菌群失调,导致菌群多样性降低;WHBE兔和JW兔IBS模型肠道菌群变化均具有其自身的特点,且具有明显的差异性。

螺旋CT对日本大耳白兔气道的测量研究

目的探讨日本大耳白兔气管和主支气管各解剖径线的长度、角度及相关性,为进行气道疾病内支架介入治疗的动物实验研究奠定基础。方法用多层螺旋CT扫描30只成年健康日本大耳白兔的颈胸部,测量和测算气管各段前后径、左右径,声门水平到隆突的气管长度,左右主支气管和中间支气管内径与长度,以及左、右主支气管长轴与矢状面的夹角。结果气管各段直径、左右上肺尖叶支气管开口内径无差异,右主支气管长度、右主支气管长轴与矢状面夹角小于左侧,右主支气管内径大于左侧并有相关性。结论多层螺旋CT测定的日本大耳白兔气管、左和右主支气管径线值,获得左、右主支气管内径值、长度、嵴下角之间的回归方程,有助于为兔实验提供相关气管和支气管的解剖参数。

福建白兔Myostatin(MSTN)基因的克隆及序列分析

为掌握福建白兔负向调控骨骼肌生长发育的肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因分子基础,应用RT-PCR和RACE技术从肌肉组织总RNA中克隆出福建白兔MSTN基因的cDNA序列并进行分析。结果表明,该基因序列全长1 551bp(GenBank登录号:KX084386),其中5′非翻译区136bp,3′非翻译区287bp,1128bp的开放阅读框,编码375个氨基酸,MSTN蛋白在第97~768核苷酸处编码的氨基酸存在1个TGF-β前肽超家族结构域,在第841~1 125核苷酸处编码的氨基酸存在1个TGF-β家族结构域。序列分析表明:福建白兔与穴兔、人、猪、家鼠、马、牛、绵羊、鹿、狒狒、猩猩、猴的MSTN核苷酸序列同源性分别为99.9%、92.8%、94.4%、86.9%、95.2%、89.1%、91.0%、90.3%、95.9%、96.4%、95.9%。研究结果为进一步开展福建白兔MSTN基因的结构、表达以及分子育种等相关研究提供了基础数据。