不同诱导物对白地霉中高级醇脱氢酶的影响

化学或物理因子作为诱导物,能够直接或间接影响菌体基因转录表达。为探索高级醇底物对白地霉的诱导效果,以分离自土壤的白地霉S12为对象,采用五种高级醇(正丙醇、正丁醇、异丁醇、正己醇和异戊醇)作为诱导物,研究不同高级醇的诱导剂量、诱导时间对菌体S12降解不同高级醇活性及脱氢酶活力的影响。结果表明,当正己醇和异丁醇分别作为诱导剂时,胞内酶活力较高。正丙醇、正丁醇、异丁醇和正己醇作为诱导剂时,最适诱导时间均为6 h;而以异戊醇为诱导剂时,最佳诱导时间为12 h。以正丙醇和正己醇为诱导剂时,最适的诱导浓度为1.5 g/L;以正丁醇、异丁醇和异戊醇为诱导剂时,最适诱导浓度分别为1.0、0.5和2.5 g/L。NativePAGE电泳结果表明,以五种高级醇为诱导剂均能使菌体合成分子量为223 kDa左右的脱氢酶。其中,以正己醇为诱导剂时所得菌体同时降解多种高级醇的能力最强,其降解产物均为其相应的酸类和酯类物质。

一株白地霉在低碳氮比废水中降氨氮新功能的研究

该文从垃圾渗滤液中筛选出一株低C/N营养条件下氨氮去除效果显著的菌株。ITS序列测序鉴定表明,该菌株为白地霉(Galactomyces candidum)。经不同pH、温度、C/N的培养条件下培养24 h,测定其生长密度及氨氮去除情况,结果发现,白地霉培养基最佳降氨氮条件为:pH 8.0,C/N 1.5,温度30℃,其最佳氨氮去除率可达93.1%。该文发现了白地霉在污水处理,尤其是低C/N污水处理中具有氨氮去除的新功能,为其在低C/N污水生化处理工业化应用提供了新的菌株资源和技术途径。

白地霉S13固态发酵白酒条件优化

为提高固态发酵法酿造白酒中的总酯含量和出酒率,本试验以前期研究保存的白地霉(Geotrichum candidum)S13及白酒曲为试验菌种,以总酯含量和出酒率为检测指标,采用单因素、响应面试验对固态发酵法酿造白酒发酵条件进行优化。结果表明,最优发酵条件为发酵时间26 d,初始pH值6.2,白地霉接种量14%、发酵温度28℃,白酒曲添加量0.5%。在此优化条件下,白酒澄清透明,无杂质沉淀,口感醇厚绵甜,香味协调,总酯含量为2.12 g/L,出酒率为20.42%,酒精度达到56%vol,感官评分为82.7分。

开菲尔粒中白地霉的分离鉴定及挥发性成分分析

从云南昆明地区的开菲尔粒中分离得到K2、Z7-1和Z8-4菌株,3株菌发酵产物可产生愉悦的花果香味。在基因组重测序基础上,分析菌株K2、Z7-1、Z8-4与白地霉(Geotrichum candidum)LMA-244基因组相似度,DNA杂交分析相似度分别为99.50%、99.40%、99.50%;平均核酸一致性分析,相似度分别为98.66%、98.65%、98.68%。结合形态特征和26S rDNA序列同源性分析,K2、Z7-1和Z8-43株菌均鉴定为白地霉。利用基因本体论、京都基因与基因组百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)、直系同源簇等数据库对白地霉K2进行基因功能注释,注释基因中40.74%与细胞组成相关,47.54%与生物过程相关,11.73%与分子功能相关。KEGG代谢途径分析发现萜类合成的相关基因,白地霉K2具有合成挥发性香味成分的遗传基础。采用气相色谱-质谱联用仪对白地霉K2菌株的发酵液挥发性成分进行检测分析,共检出50种挥发性成分,其中3-蒈烯、α-蒎烯和对伞花烃呈花香,L-α-松油醇呈松木香,4-萜烯醇、(-)-4-萜品醇呈丁香味,乙酸α-松油酯呈清甜香。推测白地霉是开菲尔酸奶香味物质的重要贡献菌株。本研究为白地霉K2用于发酵乳制品及其他发酵食品提供了理论基础。

酸菜汁中白地霉菌的分离纯化与鉴定

本实验将自然发酵的酸菜样品中分离得到的霉菌进行种属鉴定,先对菌株进行形态学观察鉴定,再应用26S rDNA序列同源性分析的方法对所分离菌株进行基因扩增与测序。将GenBank中该属内菌株的26S rDNA基因序列与测序结果进行同源性比较分析。26S rDNA序列同源性分析结果表明,分离株G.wang结合真菌鉴定手册得知为半知菌亚门-丝孢纲-丝孢目-从梗孢科-地霉属-白地霉种。

白地霉的应用研究进展

白地霉在食品、香料、饲料、环境治理等领域具巨大的开发价值。主要概述了近年来白地霉在脂肪酶、香气化合物、奶酪制作、污水处理以及饲料蛋白生产等方面的应用研究进展。

白地霉Y162脂肪酶基因克隆及其在毕赤酵母中的高效表达

借助生物信息学,对已克隆的地霉属脂肪酶全长基因序列进行同源比对,根据保守序列设计引物,在基因组DNA和cDNA水平上,于国内首次克隆了Geotrichum candidum Y162脂肪酶基因。G.candidum Y162脂肪酶基因全长1692bp,不含内含子,编码包括19个氨基酸信号肽在内的563个氨基酸。与NCBI GenBank中已报道的地霉属脂肪酶氨基酸序列有86%的一致性。将该基因克隆到pPIC9K表达载体上,转化毕赤酵母GS115,摇瓶发酵96h后毕赤酵母分泌表达55 U/mL重组脂肪酶,实现了脂肪酶的高效表达。酶学性质研究表明,该重组脂肪酶对C9位顺式双键的甘油酯具有明显的底物特异性;对甲醇、甘油等有机溶剂呈现耐受性;最适温度和最适pH分别为50℃和8.0,在pH 6.0～10.0及60℃以下能保持60%以上的酶活力。底物特异性、有机溶剂、温度及pH耐受性赋予该重组酶良好工业应用潜力。

基于26S rDNAD1/D2区序列分析的15株白地霉分子分类学研究

采用26S rRNA基因D1/D2区系统发育分析的方法对CICC(中国工业微生物菌种保藏管理中心)保藏的15株白地霉(Geotrichum candidum)菌种进行复核鉴定。系统发育分析结果表明15株白地霉属于地霉属的成员,且形成两个系统发育分支,系统发育上最接近Galactomyces geotrichum NRRLY-17569T,与其同源性为96.3%～98.3%。15株白地霉26S rRNA基因D1/D2区序列显著不同于地霉属的模式种及其它种,可能代表地霉属的两个新种,但这一结论尚需进一步的实验去证实。

单因子-响应面法优化白地霉Y162产脂肪酶条件

对白地霉Y162液体发酵产脂肪酶的条件进行了优化。首先采用单因子实验筛选出最适碳源为橄榄油,氮源为黄豆粉和NH4Cl,无机盐为BaCl2和MgCl2。在此基础上,利用Plackett-Burman设计对影响产酶因素的效应进行评价,筛选出具有显著效应的橄榄油、BaCl2和NH4Cl三个最显著的因素。用最陡爬坡路径逼近最大产酶区域后,利用响应面中心组合设计对显著因素进行优化,得出橄榄油、BaCl2和NH4Cl最佳浓度分别为2.35%,0.36%,1.35%。优化后液体发酵液中脂肪酶活力提高到31.85U/ml,比初始酶活力14.16U/ml提高了2.25倍,表明单因子-响应面结合法可显著优化白地霉Y162液体发酵产脂肪酶条件。

原生质体紫外诱变选育白地霉GXU08脂肪酶高产菌株

目的:初步筛选脂肪酶高产菌株。方法:以白地霉GXU08为出发菌,对其进行原生质体紫外诱变选育。结果:筛选得到6株脂肪酶活力比出发菌株GXU08高的突变株,其中菌株4-39的酶活达14.2U,比GXU08提高了63.2%。突变株经9次传代,3次摇瓶复筛,其脂肪酶酶活性保持稳定,为今后进一步研究不同的育种方法进一步提高脂肪酶的产量打下基础。

白地霉Cryytococcus neoformans脂肪酶的双水相萃取

研究不同无机盐的双水相体系对白地霉脂肪酶的萃取分离效果,对PEG/(NH4)2SO4成相系统进行了系统的研究,通过考察体系PEG分子量、不同的无机盐、PEG浓度、(NH4)2SO4浓度、离子强度、pH及(NH4)2SO4浓度对反萃取的影响,并通过正交实验进一步优化实验条件,初步确定在PEG浓度15%,(NH4)2SO4浓度22.5%,pH8.0,不加NaCl的条件下进行双水相萃取,脂肪酶分离系数和纯化倍数分别为6.8和7.5,比活力达到40.3U/mg蛋白。

白地霉产漆酶条件优化及对偶氮染料的脱色

从印染废水中筛选出一株产漆酶的真菌,经鉴定为白地霉(Geotrichum candi-dum).对该白地霉M3产漆酶的条件和所得漆酶对偶氮染料的脱色能力进行研究.结果表明:葡萄糖、氯化铵为白地霉M3产漆酶的最佳碳源和氮源,产漆酶优化培养基包含2g/L的葡萄糖、1.5g/L的氯化铵、0.015 mmol/L的愈创木酚和0.05 mmol/L的硫酸铜.使用5 L机械搅拌式发酵罐和7L气升式发酵罐在优化培养基条件下培养白地霉M3,最高漆酶酶活分别达到23.8和36.9μmol/(s.L),气升式发酵罐更适合白地霉M3产漆酶.获取的粗漆酶液处理偶氮染料1.5h后,脱色率达到90.2%;可见-紫外光谱扫描分析表明白地霉M3所产漆酶能降解偶氮染料.

白地霉净化和资源化玉米淀粉工业废水的试验条件研究

玉米淀粉工业废水是高浓度有机废水.利用其培养白地霉不仅可以净化玉米淀粉废水,还可以收获有用的菌体蛋白.研究表明当白地霉净化和资源化玉米淀粉废水的最佳条件为:不经灭菌处理的废水中添加0.1%KH2PO4、24 h振荡培养白地霉时,玉米淀粉废水的COD去除率为90%以上,每吨玉米淀粉废水可收获干燥SCP 1.6 kg以上,净化后废水的pH值为7左右.

豆腐废水发酵生产白地霉的研究

利用豆腐废水从酸浆中分离筛选出的白地霉FL44菌株进行了摇瓶培养研究,通过正交试验确定了FL44生产单细胞蛋白的最适发酵条件,并对其发酵过程作了动态分析。结果表明:培养基组成、初始pH值、摇瓶装量与培养时间均对该菌株细胞生物量有影响。优化培养基组成为:废糖蜜5%,(NH4)2HPO41%;培养条件为:培养基初始pH5.5,摇瓶装量40mL/250mL,摇瓶转速为220rpm,30℃培养48h;菌体生物量可达到15.08g/L。

天然白地霉菌株发酵产品的毒理安全性评价

研究产香白地霉菌株发酵产品的食用安全性。采用小鼠急性毒性试验、骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验和30d喂养试验进行毒理学研究。急性毒性试验表明,白地霉发酵产品的小鼠LD50>100.g/kg体重,说明该受试物属于无毒级物质。骨髓细胞微核试验和小鼠精子畸形试验的结果为阴性,未显示出致突变性。30d喂养试验中各实验组(2.5、50.、10.0g/kg体重)小白鼠生长发育良好,体重、食物利用率,以及血常规、血液生化指标与对照组之间无显著差异,小白鼠组织解剖检查均未见病变。产香白地霉菌株发酵产品具有较好的饮用安全性,可作为饮料供消费者饮用。

酒精废水发酵生产白地霉

利用糖厂的酒精废水 ,进行了白地霉的摇瓶培养研究 ,在单因素试验基础上 ,得出了白地霉培养的适宜条件 ,即废水先稀释 0 2倍 ,添加 0 2 %硫酸铵、0 1%磷酸、0 1%硫酸镁 ,初始pH值调整为 4 5 ,接种量为 10 %,2 8℃～ 30℃ ,在此条件下 ,得到了 0 6 %～ 0

响应面法优化白地霉发酵麻疯树饼粕产蛋白质饲料工艺条件

本研究对白地霉发酵麻疯树饼粕的工艺条件进行了单因素试验,并利用Minitab15软件设计了Plackett-Burman筛选试验,筛选出温度、初始加水量及翻曲不翻曲3个显著性影响因素,经最陡爬坡试验,利用响应面中心组合设计对显著性影响因素进行优化,得出最适温度为30℃,最适初始加水量为100%,模型预测精度达到98.63%。

臭氧处理马铃薯淀粉加工废水的白地霉净化

采用白地霉净化臭氧预处理马铃薯淀粉加工废水,并回收菌体蛋白。结果表明,在单因素筛选基础上,通过正交试验,白地霉净化臭氧预处理马铃薯淀粉加工废水的最佳工艺参数为:废水添加(NH4)2HPO40.1%、接种量7.5%、pH5.0、葡萄糖0.3%;此条件下,白地霉培养40h,化学需氧量(COD)值为236.600mg/L达废水排放二级标准,同时获得菌体蛋白236.600mg/L,蛋白含量为25.67%。

白地霉和解淀粉芽孢杆菌对黄瓜枯萎病的防治效果

采用生物测定法,初步研究了解淀粉芽孢杆菌SYX-1和白地霉SYX-2对黄瓜枯萎病病原菌尖孢镰刀菌的拮抗作用。结果表明:两种生防菌在菌悬液浓度为106～107cfu/ml时黄瓜种子胚根的伸长拮抗率分别为71.3%和81.2%,而混合菌株菌悬液的胚根伸长拮抗率高达85.3%;盆栽试验表明,SYX-1和SYX-2生防菌菌悬液对黄瓜枯萎病的防效分别为43.3%和46.4%,其混合菌株菌悬液的防效达52.8%,两种生防菌对植株生长均有明显的促进作用。

白地霉G38生物转化制备抗忧郁药(R)-fluoxetine

从200株菌中筛选出具有双酮化合物还原活力较高的菌株7株,其中以白地霉(Geotrickum, sp. )G38活力最高,而且有较好的区域选择性和立体选择性。白地霉G38能对β-羰基苯丙酸乙酯进行不对称还原,生成(R)-β-羟基苯丙酸乙酯,用于制备抗忧郁药(R)-fluoxetine。用二甲基硅橡胶包埋白地霉菌体取代游离菌体进行生物转化,可以提高反应的立体选择性,对映体过量值从49％提高到81％。