黄沙鳖白底板病病原菌的分离鉴定及6种毒力基因检测

用常规方法从患典型白底板病黄沙鳖的心脏、肝脏等处进行细菌的接种分离,通过人工感染确定分离菌株的致病性,API 20NE、16S rRNA基因序列分析进行病原菌鉴定和确定其系统发育地位,K-B纸片扩散法进行药敏试验,PCR检测病原菌的6种毒力基因。试验结果,共分离到13株病原菌,其中嗜水气单胞菌9株,温和气单胞菌4株。在9株嗜水气单胞菌中,有5株与Aeromonas hydrophila ATCC 7966菌株亲源关系最近,4株与Aeromonas hydrophila北京株QDC01的亲源关系最近;而4株温和气单胞菌与Aeromonas sobria ATCC43979的亲源关系最近。药敏试验结果,仅头孢哌酮对13株病原菌都高度敏感,来源于不同养殖区域的病原菌药敏结果相差较大。6种毒力基因的阳性率,Aer、Act和ahp均为100%,hly和Alt为92.31%,ahal为76.92%;毒力基因型共有4种,嗜水气单胞菌主要为hly+Aer+Alt+Act+ahal+ahp+基因型,而温和气单胞菌主要为hly+Aer+Alt-Act+ahal+ahp+基因型,同时携带hly基因的菌株其致病力更强。

中华鳖白底板病病原的分析

从患白底板病的中华鳖(Trionyx sinensis)肾、肝、脾分离出致病力较强的细菌TS6-1和TS6-2。同时样品经超薄切片,电子显微镜观察,在脾、肝、肾组织细胞质中观察到直径为30 nm病毒样颗粒。经人工感染试验证实,分离菌株及患病鳖内脏组织过滤液均可导致中华鳖发病死亡,TS6-1和TS6-2的LD50分别为3.2×107CFU/mL和1.0×108CFU/mL。以患病鳖肝、脾组织的过滤液注射健康鳖后,3～5天内所有鳖全部死亡。通过对细菌形态、生理生化特性的测定,判定TS6-2属于嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。同时对TS6-1进行了16S rRNA分子鉴定,将测定的序列递交NCBI进行BLAST同源序列比对,与迟缓爱德华氏菌的16S rRNA基因具有较高的同源性(99%),该序列在GenBank上的登录号为DQ884466。结合细菌的生理生化特性,判定TS6-1属于迟缓爱德华氏菌(Edwardsiella tard)。由此认为中华鳖白底板病由病毒和嗜水气单胞菌、迟钝爱德华氏菌混合感染引起。药敏试验结果表明,TS6-1对先锋V、丁胺卡那敏感,TS6-2对卡那霉素、庆大霉素、丁胺卡那敏感。

中华鳖白底板病和红底板病细菌的分离鉴定及致病性

从患白底板病和红底板病的病鳖中分离出７株细菌，应用一般细菌分离鉴定的方法和美国生物－梅里埃（Ｂｉｏ Ｍｅｒｉｅｕｘ ＵＳＡ）公司ＶＩＴＥＫ全自动微生物鉴定系统进行鉴定，结果显示有３株嗜水气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ）、１株温和气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ ｓｏｂｒｉａ）、１株金黄色葡萄球菌（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓａｕｒｅｕｓ）、１株肺炎克雷伯氏菌（Ｋｌｅｂｓｉｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）和 １株美人鱼弧菌（Ｖｉｂｒｉｏ ｄａｍｓｅｌａ），其中金黄色葡萄球菌和美人鱼弧菌为在中华鳖中首次分离。生物毒性试验表明，７株细菌均可致死小白鼠，除肺炎克雷伯氏菌外，其它６株菌对中华鳖均有一定的致病性。

中华鳖白底板病和红底板病病毒及细菌的致病性

利用含类呼肠孤病毒和类腺病毒 的患白底板病和红底板病 病鳖组织匀浆过滤液及从病鳖中分离的致病性嗜水气单胞菌， 进行病毒和细菌的相继 人工感染试验， 复制出典型的鳖红底板病和白底板病病症。研究发现， 细菌是红底板病的主要病原， 病毒是白底板病的主要病原，而病毒的感染不致死鳖， 细菌的继发感染是鳖最终死亡的因素。

鳖白底板病的显微和超微结构观察

对鳖白底板病的显微与超微结构病理学进行了研究 .结果表明 :肠上皮萎缩、微绒毛脱落、胞器减少 .肝脏病变最为严重 ,其实质细胞肿胀 ,胞核结构异常 ,进而呈脂肪变性、溶酶体大量增多 ,局部出现坏死病灶 ,肾近曲小管上皮细胞肿胀、颗粒变性、细胞自溶 .脾脏红髓缩小 ,多数细胞及核异形 ,严重者细胞破裂、解体 .心肌细胞透明样变、横纹横糊 ,胞核固缩 .病变组织中红血细胞数量锐减 ,炎性细胞增多 .病变细胞内多数线粒体和内质网扩张。

中华鳖白底板病及有白底板症状疾病的诊断和控制

系统总结了中华鳖白底板病的症状、病因、病理等,探讨了中华鳖白底板病与其他几种具有白底板症状的疾病的相关性,以期为中华鳖的健康养殖及白底板病与其他具有白底板症状疾病的临床诊断和控制提供参考。

中华鳖白底板病的病因和防治

系统阐述了导致养殖中华鳖白底板病的病因及发病症状,并结合多年的病害防治经验,提出了切实有效的预防和治疗方法。养殖中华鳖白底板病的病因主要是肝脏病或肠道寄生虫侵袭,而引起肝脏病的主要原因之一是饲料中使用了组胺含量和氧化值过高的原料。为预防该病的发生,应降低饲料中有毒有害物质的含量,主要措施包括:适度降低饲料中的蛋白质含量,尤其要降低动物蛋白原料的使用量,选用高品质的白鱼粉等原料;在养殖中避免使用腐败的动物内脏和冰鲜鱼等作饲料;对水体进行定期消毒;规范用药等。对肝脏型白底板病的治疗应以保肝药物为主,而对寄生虫侵袭型白底板病则采用驱虫药物。

中华鳖白底板病防治药物初探

近年来,中华鳖的养殖在浙江杭州、湖州、嘉兴等地兴起,已形成规模化的养殖格局.2003年由于水质、饲料的质量、养殖密度等多种因素,大规模地暴发白底板病.由于此病突发性强,死亡率高,造成严重的经济损失,使这一带的养鳖业蒙受巨大的阴影.找到合适的防治药物已成为当务之急.

鲜活饵料防治中华鳖亲本白底板病试验初探

在患白底板病的中华鳖亲本的试验池投喂纯鲜活饵料,结合常规水体消毒,连续15 d后,亲本死亡进入到一个低水平平稳期,次月死亡率降到0.8%;对照池投喂用鲜活商品鲢(去内脏)鱼糜与亲鳖料拌成的中、西药团状药饵,死亡率仍高达11.7%。2池的差异十分显著。对非药物防治中华鳖亲本白底板病进行了大胆尝试并取得了良好效果。

黄沙鳖白底板病病原菌的分离鉴定及其防治

黄沙鳖（Trionyx sinensis）是广西地方名优品种，其含肉率高、肉质好、营养价值高，在广西各地被广泛养殖。平南县是黄沙鳖的主要养殖区域之一，养殖规模和密度不断扩大。然而，近年来由于养殖规模的扩大、集约化程度的逐年提高和养殖环境的逐步恶化等因素，导致黄沙鳖存养殖过程中细菌性疾病的暴发流行呈加重趋势。

中华鳖白底板病病原体及组织病理研究

对中华鳖白底板病进行了病原菌的分离、培养、人工感染试验及生理生化性状鉴定；通过光镜和电镜观察鳖的肝、脾、肾脏的组织病理，并在肝、脾、肾的细胞质和肾细胞核里发现有病毒呈圆球形状，直径 20～ 30 nm和 40 nm。白底板病分离出毒力较强的细菌可确定为嗜水气单胞菌。患白底板病的肝、脾、肾脏均表现广泛、系统性的组织坏死，肝、肾组织更为严重。