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艾灸神阙穴对移植瘤小鼠血清白细胞介素12及NK细胞活性的影响 被引量:15
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作者 邱幸生 陈凯 +4 位作者 佟丽 舒孝良 吕新志 温汉平 邓春华 《中医杂志》 CSCD 北大核心 2003年第3期186-187,共2页
目的:观察艾灸对H-22荷瘤小鼠血清白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素12(IL-12)水平、NK细胞活性及腹水瘤细胞活性的影响,探讨艾灸抗肿瘤的机制。方法:采用双抗体夹心ELISA法,测定小鼠血清IL-12、IL-2水平;采用MTT法测定小鼠NK细胞活性。结... 目的:观察艾灸对H-22荷瘤小鼠血清白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素12(IL-12)水平、NK细胞活性及腹水瘤细胞活性的影响,探讨艾灸抗肿瘤的机制。方法:采用双抗体夹心ELISA法,测定小鼠血清IL-12、IL-2水平;采用MTT法测定小鼠NK细胞活性。结果:艾灸能提高荷瘤小鼠血清IL-12、IL-2水平,与对照组比较差异有显著性(P<0.05);艾灸能提高荷瘤小鼠NK细胞杀伤率,与移植瘤对照组比较差异有显著性(P<0.05)。结论:艾灸有抑制肿瘤生长的作用,此作用与其提高血清IL-2、IL-12水平,增强NK细胞杀伤活性有关。 展开更多
关键词 肿瘤细胞 针灸效应 杀伤细胞 艾灸 神阙穴 移植瘤 白细胞介素12 NK细胞
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卵泡液中白细胞介素2、白细胞介素12、白细胞介素18与体外受精-胚胎移植妊娠结局的相关性 被引量:6
2
作者 王秀霞 王天任 +3 位作者 何丽霞 孔琳 徐小延 杨大磊 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期643-645,共3页
目的探讨卵泡液中细胞因子白细胞介素2(IL-2)、IL-12、IL-18与体外受精-胚胎移植妊娠结局的关系。方法接受体外受精-胚胎移植助孕治疗的妇女117例,其中妊娠妇女59例,未妊娠妇女58例,应用酶联免疫吸附试验检测卵泡液中IL-2、IL-12、IL-1... 目的探讨卵泡液中细胞因子白细胞介素2(IL-2)、IL-12、IL-18与体外受精-胚胎移植妊娠结局的关系。方法接受体外受精-胚胎移植助孕治疗的妇女117例,其中妊娠妇女59例,未妊娠妇女58例,应用酶联免疫吸附试验检测卵泡液中IL-2、IL-12、IL-18的浓度。结果妊娠组卵泡液中IL-2的浓度为(36.73±18.53)pg/ml、IL-12的浓度为(0.52±0.88)pg/ml、IL-18的浓度为(76.10±69.06)pg/ml;未妊娠组卵泡液中IL-2的浓度为(40.89±22.83)pg/ml、IL-12的浓度为(1.59±1.58)pg/ml、IL-18的浓度为(131.80±162.35)pg/ml。未妊娠组IL-12和IL-18浓度均明显高于妊娠组(P<0.05),未妊娠组IL-2浓度虽较妊娠组升高,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论 IL-12、IL-18在接受体外受精-胚胎移植助孕治疗的非妊娠妇女中明显升高,考虑与体外受精-胚胎移植妊娠结局负相关。 展开更多
关键词 体外受精-胚胎移植 妊娠 卵泡液 细胞因子 白细胞介素2 白细胞介素12 白细胞介素18
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局部注射小鼠白细胞介素12逆转录病毒包装细胞对大鼠肝癌的治疗 被引量:6
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作者 杨家和 钱其军 +6 位作者 薛惠斌 曹惠芳 崔贞福 石文芳 卫立辛 杨广顺 吴孟超 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 1999年第1期31-34,共4页
目的:为观察携带小鼠白细胞介素12(mIL-12)逆转录病毒包装细胞株在肝癌局部注射后,对体内肝癌治疗效果.方法:构建携带mIL-12的逆转录病毒载体,将该载体转染包装细胞系PA317,应用该包装细胞对实验性原位肝癌大鼠分别在不同时间进行治疗,... 目的:为观察携带小鼠白细胞介素12(mIL-12)逆转录病毒包装细胞株在肝癌局部注射后,对体内肝癌治疗效果.方法:构建携带mIL-12的逆转录病毒载体,将该载体转染包装细胞系PA317,应用该包装细胞对实验性原位肝癌大鼠分别在不同时间进行治疗,观察其抗肿瘤作用,免疫功能变化,病理及毒性反应.结果:携带mIL-12逆转录病毒包装细胞(PA317-mIL-12)在原位肝癌局部注射后能明显抑制肝癌细胞生长,其早期治疗可使大鼠长期生存,中晚期治疗,大鼠虽然不能长期生存,但较空白对照组及携带空载体对照组的生存期明显延长,(P<0.01).其治疗组NK细胞及T细胞明显增加,其早期治疗效果优于中期治疗,另外,本研究对肝癌局部进行IL-12基因转染,可使另一叶肝癌消退,这表明IL-12可通过激活机体免疫细胞,杀灭未转染的肿瘤细胞,这对于临床应用IL-12基因治疗非常重要.同时,生存期超过2个月大鼠,再次接种相当数量的肝癌细胞,该大鼠不能再次形成肝癌.结论:肝癌局部注射IL-12基因能激发机体抗肿瘤免疫反应. 展开更多
关键词 白细胞介素12 肝癌 肝内注射 基因疗法
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白细胞介素12对急性放射病小鼠造血系统的影响 被引量:8
4
作者 王利 王碧薇 +3 位作者 赵红霞 左洪莉 赵月莹 余长林 《国际药学研究杂志》 CAS 2011年第4期312-316,共5页
目的研究重组鼠白细胞介素12(rmIL-12)对急性放射病小鼠造血系统的影响。方法 42只BALB/c小鼠均给予6.0 Gy 60Coγ射线全身照射,随机分为照射对照组、5和20μg/kg的rmIL-12治疗组,治疗组分别于照后1 h及此后每3 d一次分别腹腔注射5和20... 目的研究重组鼠白细胞介素12(rmIL-12)对急性放射病小鼠造血系统的影响。方法 42只BALB/c小鼠均给予6.0 Gy 60Coγ射线全身照射,随机分为照射对照组、5和20μg/kg的rmIL-12治疗组,治疗组分别于照后1 h及此后每3 d一次分别腹腔注射5和20μg/(kg.d)的rmIL-12,共5次,每日2次观察小鼠一般情况,3 d检测1次外周血细胞,分别于照射后14和28 d制备股骨病理切片观察组织形态学改变,收集骨髓细胞进行集落培养。结果 rmIL-12治疗组小鼠一般情况较对照组改善。5和20μg/kg rmIL-12治疗组小鼠外周血中血小板(PLT)数开始恢复时间较对照组均明显提前(分别为11 d和14 d),且PLT最低值均高于对照组(分别为15.9%vs 8.1%,15.1%vs 8.1%,P﹤0.05),28 d时rmIL-12 5和20μg/kg治疗组小鼠外周血PLT均升至照前值的85%,对照组为60%(P﹤0.05)。照射后14和28 d骨髓有核细胞集落培养结果提示rmIL-12治疗组CFU-GEMM均明显高于对照组(P﹤0.05)。结论 rmIL-12可明显促进急性放射病小鼠造血功能恢复。 展开更多
关键词 白细胞介素12 急性放射病 造血损伤
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慢病毒介导人白细胞介素12转染鼠骨髓间充质干细胞可抑制CT26瘤体的生长 被引量:1
5
作者 何杨 林晨 +2 位作者 高琴 宋京翔 涂小煌 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2018年第25期3944-3949,共6页
背景:白细胞介素12作为最具潜力的抑瘤因子一直是研究的热点,但其在结直肠癌方面的研究相对较少。目的:构建稳定表达人白细胞介素12的大鼠骨髓间充质干细胞株(h IL-12-BMSCs),观察其对大鼠结肠癌模型的影响。方法:设计并合成引物,PCR扩... 背景:白细胞介素12作为最具潜力的抑瘤因子一直是研究的热点,但其在结直肠癌方面的研究相对较少。目的:构建稳定表达人白细胞介素12的大鼠骨髓间充质干细胞株(h IL-12-BMSCs),观察其对大鼠结肠癌模型的影响。方法:设计并合成引物,PCR扩增并回收纯化后的p40和p35基因片段,行Overlap-ping PCR连接获得h IL-12的单链双亚基表达融合基因,与慢病毒包装系统共转染293T细胞,构建慢病毒过表达重组体,再转染大鼠骨髓间充质干细胞,药物筛选培育出稳转株。32只裸鼠皮下注射CT26细胞悬液造模成功后,随机分为4组:瘤周分别注射0.2 m L h IL-12-BMSCs(h IL-12-BMSCs组)、0.2 m L PBS溶液(PBS组)、0.2 m L骨髓间充质干细胞(骨髓间充质干细胞组)、0.2 m L表达IL-12的慢病毒液(LV-IL-12组),统计并分析各组瘤体生长情况。结果与结论:(1)观察期内PBS组与骨髓间充质干细胞组肿瘤体积差异无显著性意义(P>0.05),表明骨髓间充质干细胞本身对CT26瘤体生长无明显促进或抑制作用;(2)注射7 d后h IL-12-BMSCs组与PBS组、PBS组与LV-IL-12组间肿瘤体积差异均有显著性意义(P<0.01),表明白细胞介素12对CT26瘤体生长有明显抑制作用;(3)注射10 d后h IL-12-BMSCs组与LV-IL-12组间肿瘤体积差异有显著性意义(P<0.05),表明h IL-12-BMSCs抑制CT26生长优于LV-IL-12;(4)结果表明,h IL-12-BMSCs对裸鼠CT26移植瘤体生长有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 结直肠癌 白细胞介素12 鼠骨髓间充质干细胞 慢病毒载体 细胞 福建省自然科学基金 结直肠肿瘤 白细胞介素12 骨髓 间质干细胞 慢病毒感染 组织工程
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应用重组PCR技术构建人单链白细胞介素12融合基因 被引量:11
6
作者 张梅 司履生 王一理 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期22-26,共5页
目的构建人单链白细胞介素 12 (hsc IL- 12 )融合基因并在真核细胞中进行表达 ,为进一步研究 hsc IL- 12融合蛋白的生物学活性奠定基础。方法应用重组 PCR技术将 h IL - 12 p40和 p35亚单位两段编码序列的 c DNA通过一疏水性多肽接头 (G... 目的构建人单链白细胞介素 12 (hsc IL- 12 )融合基因并在真核细胞中进行表达 ,为进一步研究 hsc IL- 12融合蛋白的生物学活性奠定基础。方法应用重组 PCR技术将 h IL - 12 p40和 p35亚单位两段编码序列的 c DNA通过一疏水性多肽接头 (Gly4Ser) 3碱基序列进行前后拼接 (IL- 12 p40 -多肽接头 - p35 ) ,构建 hsc IL- 12融合基因 ,并进行核苷酸序列测定 ,进一步将 hsc IL - 12融合基因插入 pc DNA3.1真核表达载体中 ,转染 COS- 7细胞表达 hsc IL - 12融合蛋白 ,并行 Western blot分析。结果该融合基因经 DNA序列分析表明 :p40、p35、linker的连接顺序、方向及序列完全正确 ,融合基因可在 COS- 7细胞中表达hsc IL- 12融合蛋白。Western blot显示该融合蛋白分子量为 70 0 0 0 u,可与鼠抗人 IL- 12 p40 /p70单克隆抗体特异性结合。结论重组 PCR技术是十分有效。 展开更多
关键词 重组PCR 白细胞介素12 人单链白细胞介素 融合基因
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白细胞介素12基因修饰骨髓间充质干细胞对卵巢癌细胞生长的影响 被引量:6
7
作者 张霞 都治香 +1 位作者 王娜 孟亚丽 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2017年第9期1346-1351,共6页
背景:骨髓间充质干细胞具有来源广泛、免疫原性低等优点,尤其易于导入和表达外源基因,作为抗肿瘤基因治疗的载体具有明显优越性。目的:探讨骨髓间充质干细胞负载白细胞介素12重组腺病毒对卵巢癌细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。方... 背景:骨髓间充质干细胞具有来源广泛、免疫原性低等优点,尤其易于导入和表达外源基因,作为抗肿瘤基因治疗的载体具有明显优越性。目的:探讨骨髓间充质干细胞负载白细胞介素12重组腺病毒对卵巢癌细胞增殖、细胞周期和细胞凋亡的影响。方法:腺病毒介导白细胞介素12基因转染骨髓间充质干细胞,RT-PCR和Western Blotting测定骨髓间充质干细胞中白细胞介素12 m RNA和蛋白的表达,ELISA法测定细胞上清液中白细胞介素12水平。将SKOV3卵巢癌细胞与白细胞介素12重组腺病毒转染的骨髓间充质干细胞上清液共培养,对照组为SKOV3细胞与未转染骨髓间充质干细胞上清液共培养,MTT法测定SKOV3细胞增殖活性,流式细胞仪检测SKOV3细胞周期和细胞凋亡率。结果与结论:(1)腺病毒介导白细胞介素12基因成功转染到骨髓间充质干细胞中,转染后细胞有白细胞介素12 m RNA和蛋白的表达,空病毒载体组和空白对照组骨髓间充质干细胞未检测到白细胞介素12表达;(2)培养48 h,白细胞介素12组骨髓间充质干细胞上清液中白细胞介素12水平为(68.78±12.35)μg/L,空病毒载体组和空白对照组骨髓间充质干细胞上清液中未检测到白细胞介素12;(3)白细胞介素12转染组骨髓间充质干细胞上清液对SKOV3细胞增殖有抑制作用,细胞增殖抑制率随时间的延长而增加(P<0.05)。转染组SKOV3细胞G1期细胞比例高于对照组(P<0.05),G2期细胞比例低于对照组(P<0.05)。转染组SKOV3细胞凋亡率高于对照组(P<0.05);(4)结果表明,转染白细胞介素12基因的骨髓间充质干细胞能够表达白细胞介素12,其培养上清液能够抑制卵巢癌细胞增殖并诱导其凋亡。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 骨髓 间质干细胞 白细胞介素12 组织工程 细胞 骨髓干细胞 基因转染 骨髓间充质干细胞 卵巢癌 增殖 凋亡
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白细胞介素12基因多态性与广西壮族人群骨关节结核易感性的关系 被引量:4
8
作者 陆潞 韦贵将 +4 位作者 谢克恭 王俊利 林佳杰 乔宁宁 唐毓金 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2016年第29期4290-4296,共7页
背景:研究提示白细胞介素12可能在骨关节结核发生中发挥免疫调节作用。目的:分析白细胞介素12A基因rs568408 G/A和白细胞介素12B基因rs3212227 A/C位点单核苷酸多态性与广西壮族人群骨关节结核易感相关性及其与骨关节结核患者血清白细... 背景:研究提示白细胞介素12可能在骨关节结核发生中发挥免疫调节作用。目的:分析白细胞介素12A基因rs568408 G/A和白细胞介素12B基因rs3212227 A/C位点单核苷酸多态性与广西壮族人群骨关节结核易感相关性及其与骨关节结核患者血清白细胞介素12水平的关系。方法:采用单碱基延伸的PCR技术和DNA测序方法对150例骨关节结核患者(病例组)及165例健康体检者(对照组)rs568408和rs3212227位点进行多态性检测,分析各基因型以及等位基因的分布频率,各基因型与骨关节结核易感性的关系。结合已检测的血清白细胞介素12水平,分析2位点基因型与骨关节结核患者血清白细胞介素12水平的关系。结果与结论:白细胞介素12A基因rs568408 G/A位点和白细胞介素12B基因rs3212227 A/C位点在对照组与骨关节结核组中的基因型及等位基因频率分布差异无显著性意义(P>0.05)。2个位点的4种单倍型在对照组和骨关节结核组中的分布差异亦无显著性意义(P>0.05)。病例组rs568408位点野生型GG和GA+AA突变型间血清白细胞介素12水平比较差异无显著性意义(P>0.05),rs3212227位点野生型AA和AC+CC突变型间血清白细胞介素12水平比较差异无显著性意义(P>0.05)。说明白细胞介素12A基因rs568408 G/A和白细胞介素12B基因rs3212227 A/C位点多态性可能与广西壮族人群骨关节结核易感性无关。 展开更多
关键词 组织构建 骨组织工程 骨关节结核 白细胞介素12 基因多态性 易感性 国家自然科学基金
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日本血吸虫SjCTPI-Hsp70 DNA疫苗与白细胞介素12对水牛的联合免疫保护作用研究 被引量:3
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作者 喻鑫玲 何永康 +9 位作者 熊铁 赵雅琴 石孟芝 周杰 刘宗传 罗新松 付晓 贺宏斌 DA HARN 李岳生 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期433-436,共4页
目的探讨中国大陆株日本血吸虫磷酸丙糖异构酶-热激蛋白(SjCTPI-Hsp70)DNA疫苗联合佐剂白细胞介素-12(IL-12)质粒DNA对水牛的免疫保护作用。方法实验采用双盲法,所用疫苗及制剂均在实验结束后解码。将购自非血吸虫病流行区45头8~10月... 目的探讨中国大陆株日本血吸虫磷酸丙糖异构酶-热激蛋白(SjCTPI-Hsp70)DNA疫苗联合佐剂白细胞介素-12(IL-12)质粒DNA对水牛的免疫保护作用。方法实验采用双盲法,所用疫苗及制剂均在实验结束后解码。将购自非血吸虫病流行区45头8~10月龄健康水牛随机分为A组(SjCTPI-Hsp70+IL-12,300μg)、B组(SjCTPI+IL-12,300μg)和C组(空质粒pVAX+IL-12,300μg)等3组(每组15头),每头牛分别经肩部肌肉注射免疫3次,每次间隔28d。末次免疫后28d,每头牛经大腿内侧皮肤感染日本血吸虫尾蚴1000条。解剖前2d及当天分别收集粪便1次,用定量法计数虫卵和毛蚴。攻击感染后56d解剖,用生理盐水经胸主动脉灌冲法收集、计数成虫,检测每克肝组织虫卵数。结果A、B组减虫率分别为51.2%和41.5%(χ2=1.89,P>0.05),减雌虫率分别为48.9%和44.7%(χ2=0.35,P>0.05),减粪卵率分别为52.1%和38.3%(χ2=3.84,P<0.05),减毛蚴率为52.1%和33.2%(χ2=7.30,P<0.01)及减肝卵率为61.5%和42.0%(χ2=7.61,P<0.01)。结论用SjCTPI-Hsp70+IL-12免疫水牛可获得一定的免疫保护性作用。 展开更多
关键词 日本血吸虫 磷酸丙糖异构酶-热激蛋白 DNA疫苗 白细胞介素12 联合免疫 水牛 免疫保护
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Ⅰ期尘肺患者血清白细胞介素12、白细胞介素12p70、白细胞介素10和白细胞介素18含量的变化 被引量:5
10
作者 袁宝军 王冬梅 +1 位作者 邹吉敏 赵建宏 《临床荟萃》 CAS 北大核心 2007年第18期1300-1303,共4页
目的探讨血清白细胞介素12(IL-12)、白细胞介素12p70(IL-12p70)、白细胞介素10(IL-10)和白细胞介素18(IL-18)水平在Ⅰ期尘肺发生发展中的作用。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测79例Ⅰ期尘肺患者(其中包括44例煤工尘肺... 目的探讨血清白细胞介素12(IL-12)、白细胞介素12p70(IL-12p70)、白细胞介素10(IL-10)和白细胞介素18(IL-18)水平在Ⅰ期尘肺发生发展中的作用。方法采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测79例Ⅰ期尘肺患者(其中包括44例煤工尘肺患者和35例矽肺患者)、42例具有相同接尘史但未患尘肺的井下煤矿工人(接尘对照)及41例井上健康查体人员(正常对照)的血清IL-12、IL-12p70、IL-10和IL-18的含量。结果矽肺组IL-12和IL-10水平明显高于两对照组,组间差异有统计学意义(均P<0.05);煤工尘肺组IL-12和IL-10水平虽高于两对照组,但差异均无统计学意义(P>0.05);煤工尘肺组和矽肺组IL-12p70水平较两对照组均明显增高,差异具有统计学意义(P<0.01);而IL-18水平在各组间无明显改变(P>0.05)。煤工尘肺Ⅰ期、矽肺Ⅰ期及其对应的Ⅰ期合并高血压、冠心病和Ⅰ期并发慢性阻塞性肺疾病中4项指标水平比较,其差异无统计学意义(均P>0.05);煤工尘肺Ⅰ期和矽肺Ⅰ期患者不同接尘年限间比较,4项指标水平均未发现明显改变(P>0.05)。Ⅰ期尘肺患者血清IL-12、IL-12p70及IL-10三者之间呈正相关,而与IL-18均无相关性。结论Ⅰ期尘肺患者体内细胞因子网络紊乱可能与尘肺发病机制有关。 展开更多
关键词 尘肺 白细胞介素12 白细胞介素10 白细胞介素18
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小鼠白细胞介素12双顺反子真核表达载体的构建及其在COS-7细胞中的表达 被引量:7
11
作者 唐展云 赖冠华 陈诗书 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 1999年第1期48-53,共6页
克隆小鼠白细胞介素12(IL-12)p40及p35cDNA,并构建同时含mIL-12p40和p35cDNA的双顺反子真核表达载体及其在哺乳动物细胞中的表达.白细胞介素12是由巨噬细胞,树突状细胞等抗原提呈细胞产生的一... 克隆小鼠白细胞介素12(IL-12)p40及p35cDNA,并构建同时含mIL-12p40和p35cDNA的双顺反子真核表达载体及其在哺乳动物细胞中的表达.白细胞介素12是由巨噬细胞,树突状细胞等抗原提呈细胞产生的一种异二聚体细胞因子,对机体的细胞免疫功能起着重要的调节作用.利用脂多糖(100pg/ml)和小鼠重组干扰素(IFN-γ500U/ml)体外联合刺激小鼠腹腔巨噬细胞,从中提取总RNA,经RT-PCR扩增出含信号肽的小鼠白细胞介素12(mIL-12)p40及p35全长cD-NA.PCR产物经酶切后,分别克隆至pBluescriptⅡSK载体中,序列测定结果与文献报道序列一致.然后利用脊髓灰质炎(Polio)病毒内核糖体进入位点(IRES)连接mIL-12p40及p35cDNA,亚克隆至pcDNA3载体中,构建成含mIL-12p40及p35cDNA双顺反子真核表达载体,即pcDNA3/mIL-12,p40及p35cDNA同时受pcDNA3中hCMV启动子驱动,将p40及p35转录至同一mR-NA上.通过LipofectAMINE将pcDNA3/mIL-12转染COS-7细胞,72h收集培养上清,测定m? 展开更多
关键词 白细胞介素12 PCDNA3 真核表达载体 COS-7细胞
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人白细胞介素12双亚基共表达载体的构建及表达 被引量:3
12
作者 羊东晔 卢放根 +3 位作者 汤熙翔 赵水平 吴小平 刘小伟 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期79-82,共4页
目的 :为了基因治疗研究的需要构建人白细胞介素 12 (hIL 12 )双亚基基因共表达质粒 [(P(+) IL 12 ) ],比较它与单个亚基基因表达质粒 [P(+) P4 0 和P(- ) P35]1∶1共同转染肝癌细胞HepG2后 4 8小时表达结果。方法 :分别克隆hIL 12P4... 目的 :为了基因治疗研究的需要构建人白细胞介素 12 (hIL 12 )双亚基基因共表达质粒 [(P(+) IL 12 ) ],比较它与单个亚基基因表达质粒 [P(+) P4 0 和P(- ) P35]1∶1共同转染肝癌细胞HepG2后 4 8小时表达结果。方法 :分别克隆hIL 12P4 0 、P35亚基cDNA全长至pcDNA3 1(± )中构建P(+) P4 0 和P(- ) P35,再将两者串联克隆至pcDNA3 1(+)中构建P(+) IL 12。脂质体转染 3种质粒至肝癌细胞HepG2 ,4 8小时后抽取细胞总RNA做半定量RT PCR ,同时取细胞上清做ELISA及Western杂交 ,结果进行比较分析。结果 :两种转染方式均可以表达hIL 12蛋白质且半定量RT PCR显示较未转染组hIL 12的mRNA水平均增加 ;转染后 4 8小时P(+) IL 12组细胞培养上清hIL 12表达量较 [P(+) P4 0 和P(- ) P35]按 1∶1比例共同转染组显著增高(P <0 0 5 )。结论 :人白细胞介素 12双亚基基因串联共表达质粒 [P(+) IL 12 ]能够转入HepG2并表达hIL 12蛋白质 ,并且转染后 4 8小时hIL 12表达量较单个亚基基因表达质粒 [P(+) P4 0 、P(- ) P35]1∶1共转染者显著高。 展开更多
关键词 白细胞介素12 真核表达载体pcDNA3.1(±) HEPG2细胞 表达
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杂色曲霉素对体外小鼠腹腔巨噬细胞白细胞介素12表达与分泌的影响 被引量:3
13
作者 邢凌霄 张祥宏 +4 位作者 尹桂然 李月红 王俊灵 严霞 王凤荣 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期205-208,共4页
目的 探讨杂色曲霉素(ST)对巨噬细胞免疫功能的影响。方法 分别采用半定量逆转录聚合酶链反应及酶联免疫吸附法,研究0 .12 5 ,0 .2 5 ,0 .5 ,1.0和2 .0mg·L- 1ST预处理对小鼠腹腔巨噬细胞白细胞介素(IL) 12mRNA表达及其蛋白分... 目的 探讨杂色曲霉素(ST)对巨噬细胞免疫功能的影响。方法 分别采用半定量逆转录聚合酶链反应及酶联免疫吸附法,研究0 .12 5 ,0 .2 5 ,0 .5 ,1.0和2 .0mg·L- 1ST预处理对小鼠腹腔巨噬细胞白细胞介素(IL) 12mRNA表达及其蛋白分泌的影响。结果 在0 .12 5~1.0mg·L- 1范围内,ST处理对小鼠腹腔巨噬细胞IL 12p4 0和IL 12p35mRNA的表达均有一定的抑制作用。但在蛋白水平,对IL 12分泌的影响不明显。当ST浓度达到2 .0mg·L- 1时,可明显抑制IL 12p4 0mRNA的表达及IL 12的分泌。结论 ST可抑制巨噬细胞IL 12的表达或分泌,提示ST可能在一定程度上对机体的细胞免疫功能产生不利影响。 展开更多
关键词 杂色曲霉素 白细胞介素12 巨噬细胞 腹膜 逆转录聚合酶链反应
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骨髓间充质干细胞对慢性哮喘小鼠血清白细胞介素12和白细胞介素4水平的影响 被引量:3
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作者 戈霞晖 白冲 +3 位作者 陈若华 胡珍丽 朱天怡 李强 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期1030-1034,共5页
背景:研究显示,骨髓间充质干细胞移植通过减轻炎症程度来改善急性肺损伤的病情,而骨髓间充质干细胞移植对哮喘疾病的研究甚少。目的:观察慢性哮喘小鼠移植同种异体骨髓间充质干细胞后,其血清白细胞介素12和白细胞介素4水平的变化。方法:... 背景:研究显示,骨髓间充质干细胞移植通过减轻炎症程度来改善急性肺损伤的病情,而骨髓间充质干细胞移植对哮喘疾病的研究甚少。目的:观察慢性哮喘小鼠移植同种异体骨髓间充质干细胞后,其血清白细胞介素12和白细胞介素4水平的变化。方法:取40只雌性BALB/c小鼠,随机分为4组,正常对照组和骨髓间充质干细胞对照组以PBS致敏及激发小鼠,于第21天激发前气管内注射PBS或骨髓间充质干细胞30μL。哮喘模型组和骨髓间充质干细胞治疗组用鸡卵白蛋白制备慢性哮喘模型,于第21天激发前气管内注射PBS或骨髓间充质干细胞30μL。采用ELISA法检测各组小鼠血清炎症因子水平。结果与结论:病理提示哮喘模型组支气管上皮黏膜脱落,同时上皮黏膜有杯状细胞增生,部分管腔内大量黏液栓塞;气道、血管旁有大量炎性细胞浸润以及气道平滑肌细胞增生和肥大。正常对照组及骨髓间充质干细胞对照组无气道炎症及气道重塑的表现,而骨髓间充质干细胞治疗组气道炎症及气道重塑明显减轻。对比骨髓间充质干细胞对照组及正常对照组,哮喘模型组白细胞介素12明显减低,白细胞介素13和白细胞介素4明显增高;而骨髓间充质干细胞治疗组较哮喘模型组白细胞介素12明显升高,白细胞介素4明显降低。结果表明骨髓间充质干细胞治疗哮喘可能通过降低白细胞介素4水平,提高体内白细胞介素12水平,从而改善气道炎症及气道重塑的程度。 展开更多
关键词 哮喘 骨髓间充质干细胞 白细胞介素12 白细胞介素4 气道局部移植
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白细胞介素12在病毒感染中作用的研究进展 被引量:5
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作者 范怀艳 韦嘉 《医学综述》 2014年第11期1940-1942,共3页
白细胞介素12(IL-12)是一种具有多种生物学活性的细胞因子,对机体免疫应答的诱导和调节作用强大而广泛,不仅在抗肿瘤、抗寄生虫等免疫应答方面起着不可忽视的作用,而且在抗病毒免疫应答方面有重要的作用,对IL-12的研究将可能为病毒感染... 白细胞介素12(IL-12)是一种具有多种生物学活性的细胞因子,对机体免疫应答的诱导和调节作用强大而广泛,不仅在抗肿瘤、抗寄生虫等免疫应答方面起着不可忽视的作用,而且在抗病毒免疫应答方面有重要的作用,对IL-12的研究将可能为病毒感染的预防和治疗提供一个新颖有效的方法。该文就IL-12的结构、受体、生物学活性及其在病毒感染中的作用予以综述。 展开更多
关键词 白细胞介素12 病毒感染 白细胞介素12受体 应用前景
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结核分枝杆菌Mtb8.4基因疫苗与人白细胞介素12表达质粒联合免疫的细胞免疫应答观察 被引量:2
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作者 李晖 李强 +2 位作者 钟森 任红 邓存良 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期229-230,244,共3页
目的观察结核分枝杆菌Mtb8.4基因疫苗与人白细胞介素12(hIL-12)联合免疫小鼠所诱导的细胞免疫应答。方法15只C57BL/6N小鼠随机分为Mtb8.4基因疫苗+hIL-12质粒组(联合免疫组)、Mtb8.4基因疫苗组、卡介苗(BCG)组、空载体组和PBS组,基因疫... 目的观察结核分枝杆菌Mtb8.4基因疫苗与人白细胞介素12(hIL-12)联合免疫小鼠所诱导的细胞免疫应答。方法15只C57BL/6N小鼠随机分为Mtb8.4基因疫苗+hIL-12质粒组(联合免疫组)、Mtb8.4基因疫苗组、卡介苗(BCG)组、空载体组和PBS组,基因疫苗、空载体和PBS经肌内注射法免疫各组小鼠,每隔3周免疫1次,共免疫3次,BCG组经尾部皮下注射1×106CFUBCG免疫1次。ELISA法检测小鼠脾细胞培养上清中细胞因子水平;乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测免疫小鼠特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)杀伤活性。结果联合免疫组能诱导较强的抗原特异性Th1型细胞免疫应答,免疫小鼠脾细胞培养上清液IFN-γ和IL-2水平(分别为1493.340±8.128pg/ml、747.489±48.676pg/ml)显著高于Mtb8.4基因疫苗组,与BCG组相当,IL-4分泌减少,特异性CTL杀伤活性增强。结论hIL-12表达质粒能够增强Mtb8.4基因疫苗所诱导的细胞免疫应答。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 基因 MTB8.4 白细胞介素12 联合免疫
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白细胞介素12及白细胞介素2对大鼠肝癌的联合基因治疗研究 被引量:2
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作者 杨家和 范瑞芳 +5 位作者 钱其军 尤天庚 薛惠斌 苏长青 曹惠芳 吴孟超 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2002年第4期233-236,共4页
目的:研究利用小鼠白细胞介素12(mIL-12)和人白细胞介素2(hIL-2)基因对大鼠肝癌进行联合基因治疗的可行性和疗效。方法:构建携带mIL-12和hIL-2基因的逆转录病毒载体,转染包装细胞后对实验性肝癌大鼠进行肝癌局部注射,观察对肝癌细胞的... 目的:研究利用小鼠白细胞介素12(mIL-12)和人白细胞介素2(hIL-2)基因对大鼠肝癌进行联合基因治疗的可行性和疗效。方法:构建携带mIL-12和hIL-2基因的逆转录病毒载体,转染包装细胞后对实验性肝癌大鼠进行肝癌局部注射,观察对肝癌细胞的生长抑制作用及其对大鼠的免疫功能变化、毒性反应。结果:携带mIL-12/hIL-2基因的重组逆转录病毒在肿瘤内局部注射明显抑制了肝肿瘤的生长。肝癌接种后第1,3,5,7天治疗组大鼠35d生存率分别为100%,100%,30%,10%。IL-12+IL-2治疗组平均生存时间明显高于生理盐水对照组(P<0.01)、逆转录病毒空载体对照组(P<0.01)、IL-2治疗组(P<0.01)和IL-12治疗组(P<0.05)。治疗后肝癌组织中浸润的淋巴细胞明显增多。结论:肝癌局部注射携带mIL-12和hIL-2基因的逆转录包装细胞株可明显抑制肝癌细胞的生长,早期治疗优于晚期治疗。 展开更多
关键词 白细胞介素12 白细胞介素2 肝肿瘤 基因治疗 肝内注射 动物实验
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白细胞介素12辐射防护作用研究进展 被引量:3
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作者 申星 邢爽 +1 位作者 熊国林 罗庆良 《国际药学研究杂志》 CAS CSCD 2013年第3期299-303,共5页
白细胞介素12(IL-12)因具有免疫调节活性,目前主要用于抗肿瘤的辅助治疗。近年来研究发现,小剂量IL-12能够通过刺激骨髓造血、保护造血微环境而发挥辐射防护作用。本文简要综述了IL-12的生物学活性及其辐射防护作用的研究进展。
关键词 白细胞介素12 辐射防护剂 辐射损伤 急性放射病
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白细胞介素12提高HBV基因疫苗的免疫应答 被引量:2
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作者 杜德伟 周永兴 +4 位作者 焦成松 冯志华 李谨革 连建奇 姚志强 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期183-185,共3页
目的 :观察编码IL 12的真核表达载体对HBV基因疫苗诱导Babl c小鼠免疫应答的影响。方法 :肌肉注射基因疫苗pCR3.1 S及IL 12的真核表达载体pWRG316 9,ELISA法检测小鼠血清抗HBs ,4h5 1 Cr释放法检测小鼠脾细胞CTL杀伤活性。结果 :免疫 8w... 目的 :观察编码IL 12的真核表达载体对HBV基因疫苗诱导Babl c小鼠免疫应答的影响。方法 :肌肉注射基因疫苗pCR3.1 S及IL 12的真核表达载体pWRG316 9,ELISA法检测小鼠血清抗HBs ,4h5 1 Cr释放法检测小鼠脾细胞CTL杀伤活性。结果 :免疫 8w后 ,pCR3 1 S及共注射IL 12真核表达载体组血清 45 0nmA值分别为 0 87± 0 1及 1 6 7± 0 15。CTL细胞杀伤活性分别为 5 0 5 %± 6 4%及 73 3%± 8 8% ,两组差异显著 ,CTL细胞杀伤活性在抗CD4单克隆抗体处理脾细胞悬液后无明显改变 ,抗CD8单克隆抗体处理后明显降低。结论 :IL 12的真核表达载体能提高小鼠对DNA疫苗的免疫应答 ,CTL细胞杀伤活性主要由CD8+ 执行。基因疫苗可能用于预防及治疗HBV感染。 展开更多
关键词 基因疫苗 乙型肝炎表达抗原 IL-12 真核表达载体 白细胞介素12 免疫应答
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白细胞介素12研究新进展 被引量:12
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作者 陈月 陈政良 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期261-263,共3页
关键词 白细胞介素12 天然免疫 获得性免疫
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